用于預(yù)防或治療心血管疾病的、包含對(duì)血管緊張素-i轉(zhuǎn)換酶表現(xiàn)出抑制活性的肽作為活 ...的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種分離自牡嫩酶水解物流分（the fraction of the oyster enzyme hydrate)的肽，所述肽顯示出抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE)的能力；本發(fā)明還涉及用于預(yù) 防和治療心血管疾病的藥物組合物，所述藥物組合物包含所述肽作為活性成分。
【背景技術(shù)】
[0002] 由于經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，疾病的模式和方面也已發(fā)生改變，因此，心血管疾病顯著增 加，例如，動(dòng)脈硬化、高血壓、心絞痛、心肌梗塞、缺血性心臟病、心力衰竭、腔內(nèi)冠狀血管成 形術(shù)引起的并發(fā)癥、腦梗塞、腦出血和中風(fēng)均有增加。根據(jù)韓國統(tǒng)計(jì)局在2010年報(bào)道的死 因排行，心血管疾病被列為韓國第二高的死因，僅次于惡性腫瘤。特別是，心血管疾病的死 亡率在超過55歲的男性和超過65歲的女性中顯著增加。
[0003] 最有代表性的心血管疾病，高血壓，占總成年人發(fā)病的15~20%，使其成為世界 范圍的健康問題。即使高血壓患者中未顯出具體癥狀，其也是高度需要控制和治療的疾病， 這是因?yàn)樵谄渌难芗膊。ㄈ鐒?dòng)脈硬化、中風(fēng)、心肌梗塞和終末期腎臟疾?。┲酗@示出的 同一并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)仍然較高。高血壓是一種慢性疾病，需要終身治療，表明其造成巨大 的社會(huì)損失和經(jīng)濟(jì)損失。
[0004] 高血壓的病因目前尚不清楚，但推測(cè)是由遺傳因素（如家族病史、種族、鹽攝入 量、胰島素耐受性和肥胖癥）和/或環(huán)境因素（如過度飲酒和衰老）等引發(fā)的。在涉及血 壓升高的許多因素中，已知腎素-血管緊張素-醛固酮循環(huán)在調(diào)節(jié)體內(nèi)血壓和體液水平中 起到重要作用（Weiss，D.等（2001) ,Circulation 103:448-454)0
[0005] 特別地，已知腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS)在原發(fā)性高血壓發(fā)病中起重要作 用，而原發(fā)性高血壓占總高血壓病例的80%。通常，當(dāng)腎臟中血液流速或鈉水平下降時(shí)、 或當(dāng)交感神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)增加時(shí)，腎素-血管緊張素系統(tǒng)激活。腎動(dòng)脈中的腎球旁細(xì)胞 (juxtaglomerular cells)分泌的腎素將血管緊張素分解為血管緊張素 I，然后由血管緊張 素轉(zhuǎn)換酶（ACE)使血管緊張素 I轉(zhuǎn)換成血管緊張素 II，誘發(fā)血管收縮。其結(jié)果是，血管緊張 素 II通過增加醛固酮合成并通過神經(jīng)調(diào)節(jié)來對(duì)血壓進(jìn)行調(diào)節(jié)。ACE還分解具有血管舒張活 性的血管舒緩激肽，從而使血管舒緩激肽失活。
[0006] 因此，預(yù)期血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACE抑制劑）能夠治療或預(yù)防心血管疾病 (如高血壓、心臟病、動(dòng)脈硬化或腦出血），考慮到ACE對(duì)血壓上升有很大影響，因此一直對(duì) 其進(jìn)行重點(diǎn)研宄。具體來說，已經(jīng)進(jìn)行了各種臨床嘗試，以確認(rèn)該ACE抑制劑是否能夠?qū)崿F(xiàn) 慢性腎病、動(dòng)脈硬化和心臟病發(fā)作的病例甚至死亡率的降低，并且已報(bào)道了相應(yīng)結(jié)果。
[0007] 根據(jù)上述報(bào)道，化學(xué)合成的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（例如雷米普利、卡托普利、 依那普利（enarapil)、賴諾普利（risinopril)、福辛普利（fosinoril)和螺普利）已得以 商業(yè)化，并被用作高血壓治療劑。然而，這些化合物在藥物給藥形式中很容易分解，這意味 著其穩(wěn)定性低，并且，這些化合物還通過影響其它細(xì)胞引起副作用，包括全身虛弱、嘔吐、 咳嗽、頭痛、食欲不振和味覺障礙等（Lim SD.等（2008)，韓國J.Food Sci.Ani.Resour， 28(5) :587-595)。因此，需要開發(fā)一種天然的ACE抑制劑，其具有增加的穩(wěn)定性，但在體內(nèi) 具有較少的副作用。
[0008] 牡蠣的綽號(hào)為"來自海洋的牛奶"，一直被認(rèn)為是優(yōu)秀的保健食品。甚至在食用活 海鮮不如亞洲國家頻繁的西方國家，也食用活牡蠣。作為營養(yǎng)因子，牡蠣包含糖原、?；撬?、 蛋白質(zhì)、維生素和多種礦物質(zhì)，使得其成為用于保健食品的優(yōu)異物質(zhì)。牡蠣在加強(qiáng)心臟和肝 臟的功能、治療高血壓和動(dòng)脈硬化以及預(yù)防心臟病方面同樣有效。由于牡蠣中含有大量的 硒元素，其不僅具有重金屬解毒活性，還被稱為增強(qiáng)心臟、肝臟、胰腺和其它器官的功能的 滋補(bǔ)活力食品。
[0009] 對(duì)于目前已知的天然ACE抑制劑，韓國專利公開No. 10-2012-0092735描述了用于 抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶、或具有抗高血壓或抗糖尿病性質(zhì)的組合物，所述組合物包含由酶 處理的黃褐盒管藻（Capsosiphon fulvescens)提取物。韓國專利No. 10-1275766描述了 用于抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶、或具有抗高血壓或抗肥胖（antiobese)性質(zhì)的組合物，所述 組合物包含鮑魚腸的蛋白提取物。
[0010] 已從天然物質(zhì)的酶水解物中鑒定出具有ACE抑制活性的肽。其中，纈氨酸-酪 氨酸（一種源自沙丁魚蛋白的肽）已被證實(shí)具有使輕度高血壓患者的血壓降低的活性 611加匕11肩(1994)肩6113〇1111^，9月18日），因此其已被批準(zhǔn)為韓國首個(gè)個(gè)案授權(quán)的保健食 品。韓國專利No. 10-1106303描述了從牡蠣中制備的肽的ACE抑制活性。然而，對(duì)天然物 質(zhì)衍生的功能肽的開發(fā)需求仍不斷增加。
[0011] 因此，本發(fā)明人試圖從天然物質(zhì)的酶水解物中鑒定出具有ACE抑制活性的肽。作 為結(jié)果，通過從牡蠣酶水解物中提取、分離和純化肽，本發(fā)明人獲得了一種具有ACE抑制活 性的新型肽。此后，本發(fā)明人通過確認(rèn)發(fā)明人所鑒定出的新型肽具有調(diào)節(jié)血壓和預(yù)防高血 壓的作用，使得可有效地將該從牡蠣酶水解物分離出的肽用作用于預(yù)防或治療心血管疾病 的藥物組合物的活性成分，從而完成了本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE)抑制活性的肽，所述 肽包含由SEQ. ID. NO: 1~SEQ. ID. NO: 12所表示的氨基酸序列之一。
[0013] 本發(fā)明的另一目的是提供一種用于預(yù)防和治療心血管疾病的藥物組合物，所述藥 物組合物包含含有所述肽的牡蠣酶水解物流分作為活性成分。
[0014] 本發(fā)明的另一目的是提供一種用于預(yù)防或治療心血管疾病的藥物組合物，所述藥 物組合物包含所述肽中的至少一種作為活性成分。
[0015] 本發(fā)明的再一目的是提供一種用于預(yù)防或改善心血管疾病的保健食品，所述保健 食品包含含有所述肽的牡蠣酶水解物流分作為活性成分。
[0016] 本發(fā)明的另一目的是提供一種用于預(yù)防或改善心血管疾病的保健食品，所述保健 食品包含所述肽中的至少一種作為活性成分。
[0017] 本發(fā)明的另一目的是提供一種治療心血管疾病的方法，所述方法包含向患有心血 管疾病的受試者給予牡蠣酶水解物流分的步驟，所述牡蠣酶水解物流分包含所述肽。
[0018] 本發(fā)明的另一目的是提供一種治療心血管疾病的方法，所述方法包含向患有心血 管疾病的受試者給予所述肽中的至少一種的步驟。
[0019] 本發(fā)明的另一目的是提供一種預(yù)防心血管疾病的方法，所述方法包含向受試者給 予牡蠣酶水解物流分的步驟，所述牡蠣酶水解物流分包含所述肽。
[0020] 本發(fā)明的另一目的是提供一種預(yù)防心血管疾病的方法，所述方法包含向受試者給 予所述肽中的至少一種的步驟。
[0021] 本發(fā)明的另一目的是提供牡蠣酶水解物流分作為用于預(yù)防或治療心血管疾病的 藥物組合物的用途，所述牡蠣酶水解物流分包含所述肽。
[0022] 本發(fā)明的另一目的是提供所述肽中的至少一種作為用于預(yù)防或治療心血管疾病 的藥物組合物的用途。
[0023] 本發(fā)明的另一目的是提供牡蠣酶水解物流分作為用于預(yù)防或改善心血管疾病的 保健食品的用途，所述牡蠣酶水解物流分包含所述肽。
[0024] 本發(fā)明的另一目的是提供所述肽中的至少一種作為用于預(yù)防或改善心血管疾病 的保健食品的用途。
[0025] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE)抑制活性的 肽，所述肽包含由SEQ. ID. NO: 1~SEQ. ID. NO: 12所表示的氨基酸序列之一。
[0026] 本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防和治療心血管疾病的藥物組合物，所述藥物組合物 包含含有所述肽的牡蠣酶水解物流分作為活性成分。
[0027] 本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防或治療心血管疾病的藥物組合物，所述藥物組合物 包含所述肽中的至少一種作為活性成分。
[0028] 本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防或改善心血管疾病的保健食品，所述保健食品包含 含有所述肽的牡蠣酶水解物流分作為活性成分。
[0029] 本發(fā)明還提供了一種用于預(yù)防或改善心血管疾病的保健食品，所述保健食品包含 所述肽中的至少一種作為活性成分。
[0030] 本發(fā)明還提供了一種治療心血管疾病的方法，所述方法包含向患有心血管疾病的 受試者給予牡蠣酶水解物流分的步驟，所述牡蠣酶水解物流分包含所述肽。
[0031] 本發(fā)明還提供了一種治療心血管疾病的方法，所述方法包含向患有心血管疾病的 受試者給予所述肽中