一種黃酮類化合物及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種源于云南地方晾曬煙中黃酮類化合 物及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 云南地方晾曬煙是煙草的云南特有變種，煙草從明萬(wàn)歷末年進(jìn)入云南，至清乾隆 年間成為當(dāng)?shù)爻Ｒ?jiàn)的農(nóng)作物。云南自然條件好，溫暖的河谷，冷涼的半山區(qū)、山區(qū)都適應(yīng)煙 草的生長(zhǎng)。而且云南多樣的氣候、地理環(huán)境，煙草在多年的栽培過(guò)程中形成了很多個(gè)具有地 方特色的晾曬煙品種，其中著名的有：羅平八大河煙、師宗五洛河煙、會(huì)澤樂(lè)業(yè)煙、蒙自新安 所煙、富源大河煙、大姚趙戶沖煙、云龍?zhí)斓菬?、賓川白塔煙、巍山南門煙、南澗樂(lè)居煙、騰沖 綺羅生煙等。這些晾曬煙在當(dāng)?shù)爻Ｊa(chǎn)不衰；但其次生代謝產(chǎn)物的研宄還從未見(jiàn)報(bào)道過(guò)。
[0003] 黃酮（flavone)，是黃酮類化合物的總稱，泛指兩個(gè)具有酚羥基的苯環(huán)（A-與 B-環(huán)）通過(guò)中央三碳原子相互連結(jié)而成的一系列化合物。研宄表明，黃酮類化合物具有心 血管系統(tǒng)活性、抗菌及抗病毒活性、抗腫瘤活性、抗氧化自由基活性、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗變態(tài)等 多種藥理活性。同時(shí)已有研宄證實(shí)，其藥理作用與化學(xué)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，為了研宄這類化合物 的構(gòu)效關(guān)系，可進(jìn)一步研宄和開(kāi)發(fā)更多的黃酮類化合物，從中尋找有效的先導(dǎo)化合物和活 性基團(tuán)。本發(fā)明從云南地方晾曬煙中分離得到了一種新的黃酮類化合物，該化合物至今尚 未見(jiàn)到相關(guān)報(bào)道，值得一提的是該化合物具有顯著的抗輪轉(zhuǎn)病毒活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種結(jié)構(gòu)新穎的黃酮類化合物；第二目的在于提供所 述黃酮類化合物的制備方法；第三目的在于提供所述黃酮類化合物在制備抗輪狀病毒藥物 中的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的第一目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，所述黃酮類化合物從云南地方晾曬煙中分離得 到，其分子式為C19H1605，具有下述結(jié)構(gòu)：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種黃酮類化合物，其特征在于所述黃酮類化合物是從云南地方晾曬煙中分離得 到，其分子式為C 19H16O5，具有下述結(jié)構(gòu)：
該化合物命名為8-乙?；?4' -羥基-7-甲氧基-6-甲基黃酮（8_acetyl_4' -hydrox y-7-methoxy-6-methylflavone)〇
2. -種權(quán)利要求1所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于以云南地方晾曬煙為 原料，經(jīng)浸膏提取、硅膠柱層析、高壓液相色譜分離步驟，具體為： A. 浸膏提?。阂詿煵萑~片為原料，將其粉碎至20~40目，用60~100%的有機(jī)溶劑浸泡并 提取2~4次，每次12 h~72 h，合并提取液、過(guò)濾，減壓濃縮成浸膏； B. 硅膠柱層析：浸膏用有機(jī)溶劑溶解后，用浸膏重量比1~1. 6倍量的60~120目硅膠 拌樣，再用浸膏重量比2~5倍量的160~300目硅膠干法裝柱進(jìn)行硅膠柱層析；以體積配比 10:〇~5:5的氯仿-甲醇溶液進(jìn)行梯度洗脫，洗脫液的9:1部分用硅膠層析柱繼續(xù)分離，用 體積配比15:1-2:1的氯仿-丙酮溶液進(jìn)行梯度洗脫，將其先后劃分成6個(gè)部分，收集各部 分洗脫液并濃縮； C. 高壓液相色譜分離：B步驟洗脫液的7:3部分進(jìn)一步用高壓液相色譜分離純化即得 所述的黃酮類化合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述A步驟的有機(jī)溶 劑是乙醇、甲醇或丙酮與水的混合物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述A步驟中有機(jī)溶 劑與煙草的重量比是1.5~4:1。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述B步驟的有機(jī)溶 劑是純甲醇、純乙醇或純丙酮。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述B步驟中的氯 仿-甲醇溶液體積配比為1〇:〇、9:1、8:2、7 :3、6:4和5:5。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述C步驟中高壓液 相色譜分離純化是采用21. 2 mm X 250 mm，5 的C18色譜柱，流動(dòng)相為48 wt%的甲醇 水溶液，流動(dòng)相流速為12 mL/min，紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為364 nm，每次進(jìn)樣60~150 #L， 收集25. 6 min的色譜峰，多次累加后蒸干。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述C步驟中高壓液 相色譜是指使用時(shí)壓力在5-15 MPa的反相制備色譜。
9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述C步驟中高壓液 相色譜分離純物后的物質(zhì)再次用甲醇溶解，再以甲醇溶液為流動(dòng)相，用凝膠柱層析分離，以 進(jìn)一步分離純化。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃酮類化合物在制備抗輪狀病毒藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種黃酮類化合物及其制備方法與應(yīng)用，所述黃酮類化合物從云南地方晾曬煙中分離得到，該化合物命名為8-乙?；?4'-羥基-7-甲氧基-6-甲基黃酮 (8-acetyl-4'-hydroxy-7-methoxy-6-methylflavone)，其分子式為C19H16O5，具有下述結(jié)構(gòu)：所述黃酮類化合物的制備方法包括提取浸膏提取、硅膠柱層析、高壓液相色譜分離步驟，具體為：將樣品粉碎、提取、過(guò)濾、濃縮，層析，洗脫，洗脫液的7:3部分用高壓液相色譜分離純化即得所述的黃酮類化合物。本發(fā)明經(jīng)試驗(yàn)證明，對(duì)輪狀病毒具有很好的抑制作用。本發(fā)明化合物結(jié)構(gòu)新穎，抗毒活性較好，可作為抗輪狀病毒的先導(dǎo)化合物。
【IPC分類】C07D311-40, A61P31-14, C07D311-30
【公開(kāi)號(hào)】CN104761525
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510167519
【發(fā)明人】胡秋芬, 高雪梅, 周敏, 葉艷清, 楊光宇, 江智勇, 杜剛, 楊海英
【申請(qǐng)人】云南民族大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年7月8日
【申請(qǐng)日】2015年4月10日