一種大菱鲆魚(yú)皮膠原蛋白的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種膠原蛋白的制備方法，具體設(shè)及一種從大菱解魚(yú)皮中制備膠原蛋 白的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來(lái)，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模的日益擴(kuò)大和養(yǎng)殖技術(shù)的不斷完善，養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)的產(chǎn)量 提高很快。我國(guó)水產(chǎn)品產(chǎn)量一直保持著高速增長(zhǎng)勢(shì)頭，2007年達(dá)4747. 5萬(wàn)t，約占世界水產(chǎn) 品產(chǎn)量的35%，位居世界第一位。但我國(guó)水產(chǎn)品的加工和綜合利用方面仍與世界水平差距較 大，我國(guó)的水產(chǎn)品加工率不足30%，而發(fā)達(dá)國(guó)家水產(chǎn)品的加工率在80%W上。在魚(yú)類(lèi)的分割 加工過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生出大量下腳料，其質(zhì)量占魚(yú)體總重的30%~50%，其中約10%是魚(yú)皮。目 前，該些魚(yú)皮并沒(méi)有被充分利用，大部分作為廢棄物被丟棄，造成資源浪費(fèi)的同時(shí)還會(huì)嚴(yán)重 污染環(huán)境。魚(yú)皮中的主要成分為膠原蛋白（占總質(zhì)量80%W上)，對(duì)魚(yú)皮膠原進(jìn)行局部水解， 將其中的膠原蛋白提取出來(lái)，可作為一種高檔材料廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品及化妝品領(lǐng)域。因 此，有效利用水產(chǎn)加工過(guò)程中產(chǎn)生的魚(yú)皮廢棄物提取膠原蛋白，不僅可W變廢為寶，而且可 作為一種新型安全的膠原蛋白資源，用W彌補(bǔ)豬、牛等哺乳動(dòng)物膠原蛋白資源的不足。對(duì)進(jìn) 一步促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展、提高水產(chǎn)養(yǎng)殖加工業(yè)的附加值具有重大的現(xiàn)實(shí)意義。
[0003] 現(xiàn)有的魚(yú)皮膠原蛋白的提取、純化采用的方法主要是超聲波和酶解法，步驟包括： 魚(yú)皮預(yù)處理、粉碎、超聲波處理、酶解、過(guò)濾、濃縮、干燥。該種方法的缺點(diǎn)是：生產(chǎn)周期長(zhǎng)、能 耗高，魚(yú)皮經(jīng)超聲波和酶解后，膠原蛋白的天然構(gòu)造遭到破壞，產(chǎn)品黏度小，容易出現(xiàn)苦味。 目前已有很多利用健魚(yú)皮、銳魚(yú)皮、馨魚(yú)皮、厳練魚(yú)皮等來(lái)制備膠原蛋白的文獻(xiàn)報(bào)道，但還 沒(méi)有利用大菱解魚(yú)皮來(lái)制備膠原蛋白的研究報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明為了克服上述膠原蛋白制法中生產(chǎn)周期長(zhǎng)、粘度小、出現(xiàn)苦味的不足，提供 了一種從大菱解魚(yú)皮膠原蛋白的制備方法，本方法縮短了生產(chǎn)周期，降低了能耗，保證了產(chǎn) 品的黏度，避免了苦味的出現(xiàn)。
[0005] 本發(fā)明采用W下技術(shù)方案： 一種大菱解魚(yú)皮膠原蛋白的制備方法，其特征在于，它包括W下步驟： (1) 清洗魚(yú)皮；用水沖洗魚(yú)皮，去除碎肉、魚(yú)刺等雜質(zhì)，漸干水后稱(chēng)重； (2) 堿處理：用魚(yú)皮重量3~20倍的化0H溶液浸泡魚(yú)皮3~20小時(shí)； (3) 純化水清洗；用純化水反復(fù)清洗堿處理過(guò)的魚(yú)皮，清洗至抑為5~8 ; (4) 粉碎；將步驟（3)處理后的魚(yú)皮粉碎至3X3mm的小塊； (5) 抽提；向步驟（4)制得的魚(yú)皮中加入魚(yú)皮重量3~20倍的純化水，在60°C~90°C 下保溫3~10小時(shí)后得抽提液； (6) 抽濾；將步驟（5)所得抽提液經(jīng)抽濾裝置進(jìn)行抽濾，棄廢渣后收集濾液； (7) 沉淀；向?yàn)V液中加酒精使得酒精在濾液中的最終濃度為60%~80%，然后靜置過(guò) 夜； (8)離屯、干燥；將步驟（7)處理后的濾液去上層廢酒精，下層沉淀進(jìn)行離屯、，離屯、后所 得沉淀干燥后即得產(chǎn)品。
[0006] 所述步驟（2 )中化0H溶液濃度為0. 05M~0. 5M。
[0007] 所述步驟（7)中酒精的濃度為95%。
[0008] 所述步驟（8 )中離屯、轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為30min。
[0009] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是；采用酒精進(jìn)行沉淀，無(wú)超聲和酶解過(guò)程， 能耗低，膠原蛋白結(jié)構(gòu)完整，產(chǎn)品粘度高、無(wú)苦味；工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)周期短，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的內(nèi)容做進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。
[0011] 對(duì)比例 將新鮮的大菱解魚(yú)皮用水沖洗，去除碎肉、魚(yú)刺等雜質(zhì)，漸干水，稱(chēng)取200g，加入2000ml的0.Imol/L的化0H溶液浸泡2化脫除雜蛋白，隨后用去離子水充分洗漆至抑為 7,之后用10%的正了醇溶劑浸泡脫脂2化。脫脂魚(yú)皮用去離子水反復(fù)洗漆、漸干后用含有 2%胃蛋白酶的0.5mol/L己酸溶液（1:40,m/V)提取，重復(fù)提取2次，每次2化，過(guò)濾并合并 上清液，得到膠原蛋白粗提液。向粗提液中添加化C1至鹽濃度為0.9mol/l，靜置鹽析2化 后過(guò)濾，濾得的膠原沉淀用0.5mol/L的己酸溶液復(fù)溶并依次對(duì)0.Imol/L的己酸和蒸饋水 透析，最后冷凍干燥得到36. 7g大菱解魚(yú)皮膠原蛋白。
[001引 實(shí)施例1 新鮮的大菱解魚(yú)皮用水沖洗，去除碎肉、魚(yú)刺等雜質(zhì)，漸干水，稱(chēng)取200g，加入1800ml0. 1M化OH溶液浸泡魚(yú)皮10小時(shí)，用純化水反復(fù)清洗魚(yú)皮，清洗至抑為8,處理后的魚(yú)皮粉 碎至3X3mm的小塊；向經(jīng)粉碎后的魚(yú)皮中加入1800ml純化水，80°C保溫4小時(shí)后抽濾，棄 廢渣，收集濾液，向?yàn)V液中加入95%的酒精，使得濾液中酒精最終濃度為60%后靜置過(guò)夜，去 上層廢酒精，下層沉淀進(jìn)行離屯、，離屯、轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為30min，所得沉淀干燥后即得 39. 8g無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白。
[001引實(shí)施例2 新鮮的大菱解魚(yú)皮用水沖洗，去除碎肉、魚(yú)刺等雜質(zhì)，漸干水，稱(chēng)取200g，加入600ml0. 5M化OH溶液浸泡魚(yú)皮3小時(shí)，用純化水反復(fù)清洗魚(yú)皮，清洗至抑為8,處理后的魚(yú)皮粉 碎至3X3mm的小塊；向經(jīng)粉碎后的魚(yú)皮中加入4000ml純化水，90°C保溫3小時(shí)，抽濾，棄 廢渣，收集濾液，向?yàn)V液中加入95%的酒精，使得濾液中酒精最終濃度為80%后靜置過(guò)夜，去 上層廢酒精，下層沉淀進(jìn)行離屯、，離屯、轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為30min，所得沉淀干燥后即得 42. 6g無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白。
[0014] 實(shí)施例3 新鮮的大菱解魚(yú)皮用水沖洗，去除碎肉、魚(yú)刺等雜質(zhì)，漸干水，稱(chēng)取200g，加入4000ml0. 05M化OH溶液浸泡魚(yú)皮20小時(shí)，用純化水反復(fù)清洗魚(yú)皮，清洗至抑為5,處理后的魚(yú)皮 粉碎至3X3mm的小塊；向經(jīng)粉碎后的魚(yú)皮中加入600ml純化水，60°C保溫10小時(shí)，抽濾，棄 廢渣，收集濾液，向?yàn)V液中加入95%的酒精，使得濾液中酒精最終濃度為60%后靜置過(guò)夜，去 上層廢酒精，下層沉淀進(jìn)行離屯、，離屯、轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為30min，所得沉淀干燥后即得 36. 3g無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白。
[0015] 實(shí)施例4 新鮮的大菱解魚(yú)皮用水沖洗，去除碎肉、魚(yú)刺等雜質(zhì)，漸干水，稱(chēng)取200g，加入1000ml0. 2M化OH溶液浸泡魚(yú)皮6小時(shí)，用純化水反復(fù)清洗魚(yú)皮，清洗至抑為7,處理后的魚(yú)皮粉 碎至3X3mm的小塊；向經(jīng)粉碎后的魚(yú)皮中加入3000ml純化水，75°C保溫5小時(shí)，抽濾，棄 廢渣，收集濾液，向?yàn)V液中加入95%的酒精，使得濾液中酒精最終濃度為70%后靜置過(guò)夜，去 上層廢酒精，下層沉淀進(jìn)行離屯、，離屯、轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為30min，所得沉淀干燥后即得 38.Ig無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白。
[0016] 將上述對(duì)比例和實(shí)施例1-4制得的大菱解魚(yú)皮膠原蛋白W0. 03% (w/v)的料液比 溶于0. 1M的醋酸溶液中，于4°C下輕輕攬拌兩天。用旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)的1號(hào)轉(zhuǎn)子來(lái)測(cè)定在20°C 時(shí)各膠原樣品溶液的粘度值，測(cè)定時(shí)，轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速為l(K)rpm。測(cè)定結(jié)果如下表1所示。 表1粘度測(cè)定結(jié)果
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種大菱鲆魚(yú)皮膠原蛋白的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟： (1) 清洗魚(yú)皮：用水沖洗魚(yú)皮，去除碎肉、魚(yú)刺等雜質(zhì)，瀝干水后稱(chēng)重； (2) 堿處理：用魚(yú)皮重量3~20倍的NaOH溶液浸泡魚(yú)皮3~20小時(shí)； (3) 純化水清洗：用純化水反復(fù)清洗堿處理過(guò)的魚(yú)皮，清洗至pH為5~8 ; (4) 粉碎：將步驟（3)處理后的魚(yú)皮粉碎至3X3mm的小塊； (5) 抽提：向步驟（4)制得的魚(yú)皮中加入魚(yú)皮重量3~20倍的純化水，在60°C~90°C 下保溫3~10小時(shí)后得抽提液； (6) 抽濾：將步驟（5)所得抽提液經(jīng)抽濾裝置進(jìn)行抽濾，棄廢渣后收集濾液； (7) 沉淀：向?yàn)V液中加酒精使得酒精在濾液中的最終濃度為60%~80%，然后靜置過(guò) 夜； (8) 離心干燥：將步驟（7)處理后的濾液去上層廢酒精，下層沉淀進(jìn)行離心，離心后所 得固體干燥后即得產(chǎn)品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述大菱鲆魚(yú)皮膠原蛋白的制備方法，其特征在于，所述步驟（2)中 NaOH溶液濃度為0. 05M~0. 5M。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述大菱鲆魚(yú)皮膠原蛋白的制備方法，其特征在于，所述步驟（7)中 酒精的濃度為95%。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述大菱鲆魚(yú)皮膠原蛋白的制備方法，其特征在于，所述步驟（8)中 離心轉(zhuǎn)速為4000rpm，時(shí)間為30min。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種膠原蛋白的制備方法，具體涉及一種從大菱鲆魚(yú)皮中制備膠原蛋白的方法。該方法包括以下步驟：（1）清洗魚(yú)皮、（2）堿處理、（3）純化水清洗、（4）粉碎、（5）抽提、（6）抽濾、（7）沉淀、（8）離心干燥后即得產(chǎn)品。本方法縮短了生產(chǎn)周期，降低了能耗，保證了產(chǎn)品的黏度，避免了苦味的出現(xiàn)，提高了膠原蛋白的應(yīng)用范圍和價(jià)值。
【IPC分類(lèi)】C07K1-36, C07K14-78, C07K1-30, C07K1-34
【公開(kāi)號(hào)】CN104774258
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510200404
【發(fā)明人】焦安政, 彭英海, 申照華, 郭曉華, 丁海, 張永勤, 孫愛(ài)華
【申請(qǐng)人】山東美佳集團(tuán)有限公司
【公開(kāi)日】2015年7月15日
【申請(qǐng)日】2015年4月27日