一種海底沉降石油降解菌劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及海洋環(huán)境治理領(lǐng)域，尤其是設(shè)及石油污染后引起的海底沉降石油污染 的生物治理領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來隨著海洋石油的運輸、開采、裝卸、加工和使用，海洋石油泄漏事件時有發(fā) 生，海洋石油污染日益加劇。石油對生物多樣性的破壞嚴(yán)重，包括人們常見的各種魚類、 鳥類W及其它生物都受到了嚴(yán)重影響，石油可沾附在魚觸上，使魚窒息，抑制水鳥產(chǎn)卵和解 化，破壞其羽毛的不透水性，降低水產(chǎn)品質(zhì)量；同時，泄露的石油可形成油膜，阻礙水體的復(fù) 氧作用，影響海洋浮游生物生長，破壞海洋生態(tài)平衡；此外還可破壞海濱風(fēng)景，影響海濱美 學(xué)價值。
[0003] 目前，針對于石油污染，尤其是大面積石油泄漏，通常采用的應(yīng)急措施除了采油人 工打撰等物理方法，還采用加入消油劑使石油乳化，迅速沉降的方法W恢復(fù)海面暫時的清 潔，雖然該一方法短時看似起到了治理的效果，但背后卻隱藏著危機，其會造成二次化學(xué)污 染，而且會促使大量原油沉降海底，繼而引起海底荒漠化。
[0004] 該是因為加入化學(xué)消油劑多由表面活性劑和強滲透性的溶劑組成，如烷基酪聚氧 己締離類、聚己二醇油酸醋、聚氧己締山梨醇酢油酸醋等，其對高黏稠油（如高黏度重油、 高蠟質(zhì)油等）W及在低溫（10°CW下）下使用時，還存在著乳化率低甚至無效的弱點，且消 油劑的用量非常大，起碼為溢油量的20%W上，多W30% -40%為好，甚至有時在處理粘度 小或薄油層時耗量更可達到溢油量的100%。因此產(chǎn)生了二次化學(xué)污染，而且促使大量原 油沉降海底，由于海底黑暗、低溫、寡養(yǎng)、缺氧的極端條件，使其中的消油劑及原油混合物更 加難W降解，而使海底成為荒漠，最終導(dǎo)致海洋生態(tài)平衡遭到嚴(yán)重破壞，引發(fā)全球環(huán)境的惡 化。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了解決石油污染后引起的海底沉降石油污染及繼而引發(fā)的海底荒漠化問題，本 發(fā)明提供一種海底石油降解菌劑及其制備方法。
[0006] 發(fā)明人的技術(shù)構(gòu)思為：研發(fā)一種石油降解微生物的載體，不僅能夠為石油降解微 生物提供寄居的空間，同時該載體可為微生物提供緩釋營養(yǎng)并且具備沉降特性。
[0007] 本發(fā)明的目的通過下述方案實現(xiàn)：
[000引一種海底沉降石油降解菌劑，是將適于石油降解的菌種的發(fā)酵料與石油降解微生 物載體的制備原料按照1: 5-15的質(zhì)量比，優(yōu)選1:10的質(zhì)量比混合后造粒烘干而得；進一步 的，使最終的菌劑濃度為l(Tc化/mlW上為佳；所述的石油降解微生物載體的制備原料及 其配比包括：
[0009]
【主權(quán)項】
1. 一種海底沉降石油降解菌劑，是將適于石油降解的菌種的發(fā)酵料與石油降解微生物 載體的制備原料按照1:5-15的質(zhì)量比，優(yōu)選1:10的質(zhì)量比混合后造粒烘干而得； 所述的石油降解微生物載體的制備原料及其配比包括：
〇
2. 如權(quán)利要求1所述的海底沉降石油降解菌劑，其特征在于：所述的適于石油降解的 菌種的發(fā)酵料是將活化好的的適于石油降解的菌種培養(yǎng)料與繁殖培養(yǎng)基按照1:5-10質(zhì)量 比，優(yōu)選1:10的質(zhì)量比混合；于20~50 °C、優(yōu)選37 °C下固體發(fā)酵3~7天，優(yōu)選發(fā)酵5天 而得的菌種的發(fā)酵料； 所述的活化好的的菌種培養(yǎng)料是在LB斜面挑取待活化適于石油降解的菌株接入活 化液體LB培養(yǎng)基中25-50°C下、優(yōu)選37°C進行活化而得；從而得到活化后菌體濃度為 101(lCfu/ml的的培養(yǎng)料；所述活化液體LB培養(yǎng)基為：蛋白胨10g/L，NaCl10g/L，酵母膏5g/ L，pH7. 0 ~7. 5 ;121°C，30min滅菌； 所述的繁殖培養(yǎng)基固態(tài)原料及配比：
繁殖培養(yǎng)基成品的濕度優(yōu)選55 % ; 優(yōu)選的，所述繁殖培養(yǎng)基的制備原料均為20目以下的細粉。
3. 如權(quán)利要求1所述的海底沉降石油降解菌劑，其特征在于：所述的造粒烘干是將混 合料加入攪拌機中并加入粘結(jié)劑攪拌，加水充分混合使含水量低于25wt%，擠壓造粒，80°C 以下順流烘干lOmin以下；冷卻后即得菌劑顆粒，保證菌劑顆粒中活菌數(shù)達到109cfu/ml。
4. 如權(quán)利要求3所述的海底沉降石油降解菌劑，其特征在于：所述的順流烘干是將濕 顆粒通過烘干機前部的中間倉進入烘干筒內(nèi)，與此同時熱風(fēng)以順流方式進入烘干筒，在旋 轉(zhuǎn)筒體的內(nèi)抄板帶動下，物料被抄起，形成分撒均勻的較密集的料幕。
5. 如權(quán)利要求1所述的海底沉降石油降解菌劑，其特征在于：所述的石油降解微生物 載體的制備原料均為20目以下的細粉。
6. -種海底沉降石油降解菌劑的制備方法，是將適于石油降解的菌種的發(fā)酵料與石油 降解微生物載體的制備原料按照1:5-15的質(zhì)量比，優(yōu)選1:10的質(zhì)量比混合，然后經(jīng)過造粒 烘干而成菌劑顆粒；其包括以下步驟： (1) 制備石油降解菌菌種活化培養(yǎng)料； (2) 配制繁殖培養(yǎng)基； (3) 配制石油降解微生物載體的制備原料； (4) 菌種擴培制適于石油降解的菌種的發(fā)酵料； (5) 將適于石油降解的菌種的發(fā)酵料與石油降解微生物載體的制備原料混合造粒，得 囷劑顆粒； 所述步驟（3)具體為將石油降解微生物載體的制備原料按配比混合，優(yōu)選的，將原料 逐個粉碎成20目的細粉； 石油降解微生物載體的制備原料及配比為：
〇
7. 如權(quán)利要求6所述的一種海底沉降石油降解菌劑的制備方法，其特征在于所述的 步驟（1)具體為在LB斜面挑取待活化適于石油降解的菌株接入活化液體LB培養(yǎng)基中 于25-50°C下、優(yōu)選37°C進行活化而得；從而得到活化后菌體濃度為101(lCfu/ml的培養(yǎng) 料；所述活化液體LB培養(yǎng)基為：蛋白胨10g/L，NaCl10g/L，酵母膏5g/L，pH7. 0~7. 5 ; 121°C，30min滅菌。
8. 如權(quán)利要求6所述的一種海底沉降石油降解菌劑的制備方法，其特征在于所述的步 驟（2)具體為將繁殖培養(yǎng)基固態(tài)原料按配比混合，優(yōu)選的，所述原料逐個粉碎成20目的細 粉； 繁殖培養(yǎng)基固態(tài)原料及配比為:_
繁殖培養(yǎng)基成品的濕度優(yōu)選55 %。
9. 如權(quán)利要求6所述的一種海底沉降石油降解菌劑的制備方法，其特征在于所述的步 驟（4)具體是將步驟（1)制備的石油降解菌菌種活化培養(yǎng)料和步驟（2)配制的繁殖培養(yǎng)基 按照1:5-10,優(yōu)選1:10的質(zhì)量比混合；于20~50°C、優(yōu)選37°C下固體發(fā)酵3~7天，優(yōu)選 發(fā)酵5天，得菌種的發(fā)酵料。
10. 如權(quán)利要求6所述的一種海底沉降石油降解菌劑的制備方法，其特征在于所述的 步驟（5)混合造粒具體是將步驟（4)制得的菌種發(fā)酵料與步驟（3)所述的菌劑載體制備原 料，按照1:10的質(zhì)量比混合均勻后，將混合料加入攪拌機中并加入粘結(jié)劑攪拌，加水充分 混合使含水量低于25wt%，擠壓造粒，80°C順流烘干lOmin;冷卻后即得菌劑顆粒，所述的 順流烘干具體是將濕顆粒通過烘干機前部的中間倉進入烘干筒內(nèi)，與此同時熱風(fēng)以順流方 式進入烘干筒，在旋轉(zhuǎn)筒體的內(nèi)抄板帶動下，物料被抄起，形成分撒均勻的較密集的料幕。
【專利摘要】一種海底沉降石油降解菌劑及其制備方法，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，發(fā)明人提供菌劑顆粒按照以下步驟獲得活化培養(yǎng)料、制繁殖培養(yǎng)基；菌種擴培制適于石油降解的菌種的發(fā)酵料；混合造粒，得菌劑顆粒；不僅使石油降解微生物擁有寄居的空間，同時微生物可獲得緩釋的營養(yǎng)；該降解菌劑具備沉降特性，解決了石油污染后引起的海底沉降石油污染及繼而引發(fā)的海底荒漠化問題。CGMCC NO. 1034920150113GMCC NO. 1035120150113GMCC NO. 1035220150113GMCC NO. 1035420150113
【IPC分類】C02F3-34, C02F101-32, C12N11-02, C12N11-14
【公開號】CN104774832
【申請?zhí)枴緾N201510220748
【發(fā)明人】劉秋, 于基成, 潘俊華, 劉長建
【申請人】大連民族學(xué)院
【公開日】2015年7月15日
【申請日】2015年4月30日