一種等離子體滅菌活性物質(zhì)作用因子的定性分析方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明屬于消毒技術(shù)領域，特別是提供了一種等離子體滅菌活性物質(zhì)作用因子的定性分析方法。
【背景技術(shù)】
[0002]放電等離子體產(chǎn)生的活性物質(zhì)通常包括原子氧(O)，羥基自由基(OH)，過氧化物陰離子(H2O2O和臭氧(O3)等活性基團，在等離子體殺菌過程主要是這些活性基團使微生物細胞膜的不飽和脂肪酸和蛋白質(zhì)分子過氧化，改變了細胞通透性，而使細胞破裂死亡。但目前國內(nèi)外對等離子體產(chǎn)生的活性物質(zhì)作用因子的定性研宄甚少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為解決上述問題，本發(fā)明提出一種等離子體滅菌活性物質(zhì)作用因子的定性分析方法。
[0004]本發(fā)明為達到以上目的，是通過以下的技術(shù)方案來實現(xiàn)的:
[0005]包括的步驟如下:(I)、取制備好的原始菌液0.1ml均勻涂布在培養(yǎng)皿中的LB瓊脂培養(yǎng)基上，其中LB瓊脂的厚度是培養(yǎng)皿壁高度的1/3，然后將制備好的平板靜置1min讓其充分吸收；(2)、將彎曲尼龍導管一頭接到等離子體消毒器噴嘴處，將導電性能良好的鐵絲篩網(wǎng)覆蓋在去蓋的培養(yǎng)皿上，保證等離子體流不是直射培養(yǎng)基，從而屏蔽掉帶電粒子和紫外線，管的另一頭置于培養(yǎng)皿中心上方，進行等離子體處理，蓋上培養(yǎng)皿標記；(3)、將處理后的培養(yǎng)皿倒置于37°C的培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24h后計數(shù)，觀察培養(yǎng)基上的抑菌圈大小，通過與未屏蔽掉帶電粒子和紫外線的等離子體處理效果比較可得到等離子產(chǎn)生的活性物質(zhì)滅菌效果。
【附圖說明】
[0006]圖1為本發(fā)明方法的活性物質(zhì)分離示意圖。
[0007]圖中:1等離子體消毒器、2等離子體射流、3尼龍管、4鐵絲篩網(wǎng)、5培養(yǎng)皿。
[0008]圖2為活性物質(zhì)定性分析圖(a未處理，b等離子體處理120s，c屏蔽掉帶電粒子和紫外線的等離子體處理120s)。
【具體實施方式】
[0009]實施例
[0010]在超凈工作臺中，制備含有大腸桿菌菌種(編號:ATTC25922)的原始菌液，然后進行定性分析，如附圖1，包括的步驟如下:(I)、取制備好的原始菌液0.1ml均勻涂布在培養(yǎng)皿中的LB瓊脂培養(yǎng)基上，其中LB瓊脂的厚度是培養(yǎng)皿壁高度的1/3，然后將制備好的平板靜置1min讓其充分吸收；(2)、將4cm長的彎曲尼龍導管3 —頭接到等離子體消毒器I噴嘴處，將導電性能良好的500目鐵絲篩網(wǎng)4覆蓋在去蓋的培養(yǎng)皿5 (直徑約為9cm，高約為1.7cm)上，從而屏蔽掉帶電粒子和紫外線，尼龍管3的另一頭置于培養(yǎng)皿5中心上方，保證噴嘴距離皿中心2cm，將氣體流量調(diào)為5L/min進行滅菌，等離子體射流2處理時間分別取120s，蓋上培養(yǎng)皿標記；(3)、將處理后的培養(yǎng)皿倒置于37°C的培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24h后計數(shù)，觀察培養(yǎng)基上的抑菌圈大小，如附圖2，通過與未屏蔽掉帶電粒子和紫外線的等離子體處理效果比較發(fā)現(xiàn)，屏蔽掉帶電粒子和紫外線之后的等離子體處理殺菌能力仍然非常強，證明了等離子體射流中的活性物質(zhì)是主要殺菌作用因子。
【主權(quán)項】
1.一種等離子體滅菌活性物質(zhì)作用因子的定性分析方法，其特征在于該方法的步驟如下:(I)、取制備好的原始菌液0.1ml均勻涂布在培養(yǎng)皿中的LB瓊脂培養(yǎng)基上，其中LB瓊脂的厚度是培養(yǎng)皿壁高度的1/3，然后將制備好的平板靜置1min讓其充分吸收；(2)、將彎曲尼龍導管一頭接到等離子體消毒器噴嘴處，將導電性能良好的鐵絲篩網(wǎng)覆蓋在去蓋的培養(yǎng)皿上，保證等離子體流不是直射培養(yǎng)基，從而屏蔽掉帶電粒子和紫外線，管的另一頭置于培養(yǎng)皿中心上方，進行等離子體處理，蓋上培養(yǎng)皿標記；(3)、將處理后的培養(yǎng)皿倒置于37°C的培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24h后計數(shù)，觀察培養(yǎng)基上的抑菌圈大小，通過與未屏蔽掉帶電粒子和紫外線的等離子體處理效果比較可得到等離子產(chǎn)生的活性物質(zhì)滅菌效果。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種等離子體滅菌活性物質(zhì)作用因子的定性分析方法，其步驟如下：首先準備原始菌液，并制備培養(yǎng)皿滅菌樣品；然后將彎曲尼龍導管一頭接到等離子體消毒器噴嘴處，將導電性能良好的鐵絲篩網(wǎng)覆蓋在去蓋的培養(yǎng)皿上，保證等離子體流不是直射培養(yǎng)基，從而屏蔽掉帶電粒子和紫外線，管的另一頭置于培養(yǎng)皿中心上方，進行等離子體處理；接著將處理后的培養(yǎng)皿進行培養(yǎng)和觀察，通過與未屏蔽掉帶電粒子和紫外線的等離子體處理效果比較可得到等離子產(chǎn)生的活性物質(zhì)滅菌效果。這種方法通過尼龍管和鐵絲篩網(wǎng)屏蔽掉帶電粒子和紫外線，較好的實現(xiàn)了等離子體產(chǎn)生的活性物質(zhì)定性分析。
【IPC分類】C12R1-19, C12Q1-02
【公開號】CN104805175
【申請?zhí)枴緾N201510217970
【發(fā)明人】杜長明, 馬丹燕, 邱培培
【申請人】中山大學
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年4月24日