一種阿維菌素B1a結(jié)晶母液中二次結(jié)晶制備阿維菌素B1a精粉的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及一種生物農(nóng)藥的制備方法，具體涉及一種阿維菌素 Bla結(jié)晶母液中二 次結(jié)晶制備阿維菌素 Bla精粉的方法，屬于農(nóng)藥制備技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】：
[0002] 阿維菌素是由鏈霉菌中發(fā)酵產(chǎn)物分離提取得到的一組結(jié)構(gòu)類似的十六元大環(huán)內(nèi) 酯類抗生素，由一組結(jié)構(gòu)相近的8個同系物組成，Bl和B2是該同系物中的兩大組分。阿維 菌素是一種新型生物農(nóng)藥，具有廣譜、高效、低毒的特性用于防治十字花科小菜蛾、棉花紅 蜘蛛、柑橘潛葉蛾銹壁虱、棉花棉鈴蟲、二斑葉螨和菜青蟲等；殺蟲機理獨特，能阻斷無脊椎 動物的神經(jīng)傳導，持續(xù)時間長；在水和土壤中易分解，不會污染環(huán)境。是一種極具發(fā)展?jié)摿?的生物類農(nóng)藥。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)在阿維菌素提取過程中，最終產(chǎn)品分為兩種。一種為阿維菌素原藥，一種 為阿維菌素油膏。
[0004] 阿維菌素油膏為阿維菌素精粉生產(chǎn)過程中的附產(chǎn)物。阿維菌素精粉生產(chǎn)過程中， 各個廠家根據(jù)工藝的不同會有10% - 20%的結(jié)晶母液產(chǎn)生，母液經(jīng)過濃縮，用甲苯或丁酯 進行溶解后制成阿維菌素油膏。阿維菌素油膏（結(jié)晶母液）是阿維菌素生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的 廢液，含有大量不明雜質(zhì)。廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥領(lǐng)域，勢必對環(huán)境造成影響。2012年國家質(zhì)檢總 局將"副產(chǎn)物油膏替代阿維菌素原藥"列入重要案件督辦。近年來在國家政策和市場的作 用下，阿維菌素原藥供不應(yīng)求，而阿維菌素油膏沒有銷路。如何改進阿維菌素生產(chǎn)工藝，將 有效成分全部提取為阿維菌素原藥，不在生產(chǎn)阿維菌素油膏。是各生產(chǎn)廠家亟需解決的問 題。
[0005] 中國專利文獻CN103030676A公開一種利用結(jié)晶法分步提取阿維菌素 Bl組分和B2 組分的工藝，包括如下步驟：使用乙醇充分浸取阿維菌素菌絲體；浸取液初步濃縮后使用 活性炭脫色；脫色完成后過濾，繼續(xù)濃縮濾液，然后靜置結(jié)晶，得到阿維菌素 Bl晶體，即Bla 和Blb的混合物；結(jié)晶母液蒸發(fā)除去溶劑得油膏，加入甲苯，水洗除雜；洗滌完畢，濃縮甲苯 相后降溫結(jié)晶，晶體為阿維菌素 B2晶體，即B2a和B2b的混合物。該方法采用致癌物質(zhì)甲苯 作為結(jié)晶溶劑，生產(chǎn)操作過程中對現(xiàn)場員工身體造成危害性較大，且對環(huán)境也會造成污染。
[0006] 中國專利文獻CN 103030675A -種利用結(jié)晶法分步提取阿維菌素 Bl組分和B2組 分的工藝，其步驟為：使用乙醇（或甲醇）浸取阿維菌素菌絲體；浸取液初步濃縮后加入活 性炭脫色；脫色完成后，轉(zhuǎn)換溶劑為甲苯；降溫結(jié)晶得到阿維菌素 Bl組分和B2組分的混合 物；結(jié)晶母液轉(zhuǎn)換溶劑為甲醇，降溫結(jié)晶，晶體為阿維菌素 Bl組分。第一次結(jié)晶得到的Bl 組分與B2組分的混合物，使用甲醇進行結(jié)晶，得到Bl組分；母液轉(zhuǎn)換溶劑為甲苯，結(jié)晶得到 B2組分。本發(fā)明在不增加發(fā)酵成本的前提下，分步從菌絲體中提取Bl組分和B2組分。
[0007] 中國專利文獻CN1824669公開一種阿維菌素 BIa的結(jié)晶方法，包括：用結(jié)晶溶劑正 丁醇將阿維菌素 Bla的一次粗粉在75~100°C時攪拌溶解至飽和，趁熱過濾，得到澄清的熱 飽和溶液；將此溶液緩慢冷卻至過飽和度為1~3時，投入晶種，恒溫攪拌20~60min ;以 120~300r/min的速度攪拌，并按先慢后快的方式降溫結(jié)晶，降溫至室溫后，攪拌養(yǎng)晶；將 所得的晶漿過濾或離心分離，洗滌晶體，干燥后得到阿維菌素 Bla。
[0008] 以上兩種方法均是在低溫下進行結(jié)晶，結(jié)晶得到的阿維菌素 Bla產(chǎn)品純度及收率 均不尚。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0009] 針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種阿維菌素 Bla結(jié)晶母液中二次結(jié)晶制備阿 維菌素 Bla精粉的方法。
[0010] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0011] 一種阿維菌素 Bla結(jié)晶母液中二次結(jié)晶制備阿維菌素 Bla精粉的方法，包括步驟 如下：
[0012] (1)將阿維菌素 Bla結(jié)晶母液于真空條件下濃縮至無餾分，得油膏稠料；
[0013] (2)向步驟⑴所得的油膏稠料中加入乙酸仲丁酯進行萃取，得到萃取液，然后采 用飽和食鹽水洗滌萃取液2~3次，去除水相后得到乙酸仲丁酯溶液；
[0014] (3)將得到的乙酸仲丁酯溶液升溫至90~98°C，調(diào)節(jié)攪拌速度至10~20r/min， 保溫1~3小時進行養(yǎng)晶，抽濾得阿維菌素 Bla結(jié)晶，阿維菌素 Bla結(jié)晶干燥、混粉得到阿 維菌素 Bla精粉。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，阿維菌素 Bla結(jié)晶母液為阿維菌素 Bla生產(chǎn)過程中結(jié)晶分離 阿維菌素 Bla后剩余的液體，阿維菌素 Bla生產(chǎn)過程包括如下步驟：
[0016] a、阿維菌素發(fā)酵液經(jīng)壓濾、烘干后制成干菌絲體；b、干菌絲體與甲醇按照質(zhì)量比 為1:8~9的比例加入甲醇進行浸提、過濾，得浸提液；c、將浸提液濃縮至膏狀，水洗后，補 入油膏質(zhì)量0.6~0.8倍的甲醇進行升溫溶解，降溫至常溫后，經(jīng)抽濾、干燥，得到的固體即 為阿維菌素 Bla精粉，濾液即為阿維菌素 Bla結(jié)晶母液，阿維菌素 Bla結(jié)晶母液中阿維菌素 Bla和阿維菌素 B2a純度分別為25 %~30 %和55 %~60%。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，步驟（3)養(yǎng)晶溫度為90~95 °C，養(yǎng)晶時間為1~2小時，養(yǎng)晶 攪拌速度15~18r/min。優(yōu)選的，養(yǎng)晶溫度為92~95°C。
[0018] 根據(jù)本發(fā)明最為優(yōu)選的，養(yǎng)晶溫度為95°C，養(yǎng)晶時間為2小時。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，以蒸汽或水浴形式升溫至養(yǎng)晶溫度，升溫速率為5-15°C / min〇
[0020] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，步驟（1)中阿維菌素 Bla結(jié)晶母液的濃縮為將阿維菌素 Bla 結(jié)晶母液升溫至60~80°C，保持該溫度蒸餾出絕大部餾分，直至得到油膏狀物料，濃縮時 的真空度為-0. 05~-0. 07MPa。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，步驟（2)中的萃取為向油膏稠料中加入乙酸仲丁酯，升溫至 60~70°C，攪拌0. 5~1小時至油膏稠料完全溶解，乙酸仲丁酯的體積與油膏稠料的質(zhì)量 比為（2~2. 5) :1，單位：mL/g。
[0022] 進一步優(yōu)選的，乙酸仲丁醋的體積與油膏稠料的質(zhì)量比為2. 5 :1，單位：mL/g。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，步驟（2)中的洗滌為加入萃取液質(zhì)量20~30%的飽和食鹽 水，在80~90°C攪拌1~2小時，然后靜置20~40分鐘進行分層，去除水相，得乙酸仲丁 酯溶液。
[0024] 本發(fā)明優(yōu)選的一個技術(shù)方案，阿維菌素 Bla結(jié)晶母液中二次結(jié)晶制備阿維菌素 Bla精粉的方法，包括步驟如下：
[0025] (1)將阿維菌素 Bla結(jié)晶母液升溫至60~80°C，保持該溫度真空蒸餾，直至得到 油膏狀物料，濃縮時的真空度為-〇. 05~-0. 07MPa，
[0026] (2)向步驟⑴所得的油膏稠料中加入乙酸仲丁醋，升溫至60~70°C攪拌0. 5~ 1小時至油膏完全溶解，然后加入萃取液質(zhì)量20~30%的飽和食鹽水洗滌萃取液2~3次， 在80~90°C攪拌1~2小時，然后靜置20~40分鐘進行分層，去除水相得到乙酸仲丁酯 溶液，其中，乙酸仲丁酯的體積與油膏稠料的質(zhì)量比為（2~2. 5) :1，單位：mL/g ;
[0027] (3)將乙酸仲丁酯溶液升溫至95°C，然后調(diào)整攪拌速度至10~20r/min，保溫1~ 2小時進行養(yǎng)晶，抽濾得阿維菌素 Bla結(jié)晶，阿維菌素 Bla結(jié)晶干燥、混粉得到阿維菌素 Bla 精粉。
[0028] 本發(fā)明人意外發(fā)現(xiàn)，采用乙酸仲丁酯為萃取劑，升溫至90~98°C，攪拌速度為 10~20r/min進行養(yǎng)晶，可以獲得大量的阿維菌素 Bla，提高了阿維菌素 Bla結(jié)晶母液中阿 維菌素 Bla的收率。
[0029] 本發(fā)明的有益效果：
[0030] 1、本發(fā)明得到一種阿維菌素 Bla結(jié)晶產(chǎn)品。這是因為乙酸仲丁酯在高溫條件下， 對Bla溶解度低，在低溫條件下對一次結(jié)晶母液中Bla能夠?qū)崿F(xiàn)全部溶解。利用阿維菌素 Bla在乙酸仲丁酯中溶解度的差異，來提取阿維菌素結(jié)晶母液中的阿維菌素 Bla結(jié)晶。
[0031] 2、本發(fā)明降低生產(chǎn)成本。此阿維菌素 Bla結(jié)晶的生產(chǎn)成本遠低于阿維菌素油膏生 產(chǎn)成本。阿維菌素油膏生產(chǎn)過程中乙酸仲丁酯的單耗是該Bla結(jié)晶的4~5倍。
[0032] 3、本發(fā)明解決了困擾各個生產(chǎn)廠家多年的問題，阿維菌素油膏的銷路問題。此阿 維菌素 Bla結(jié)晶很好的替代了阿維菌素油膏產(chǎn)品。
【附圖說明】
[0033] 圖1為實施例1制得的阿維菌素 Bla組分的氣相色譜圖。
[0034] 圖2為實施例1、2制得的阿維菌素 Bla組分的氣相色譜圖。
【具體實施方式】：
[0035] 下面通過具體實施例對本發(fā)明做進一步說明，但不限于此。
[0036] 實施例所用的設(shè)備均為常規(guī)現(xiàn)有設(shè)備。
[0037] 實施例中阿維菌素 Bla結(jié)晶母液為阿維菌素 Bla生產(chǎn)過程中結(jié)晶分離阿維菌素 Bla后剩余的液體，阿維菌素 Bla生產(chǎn)過程包括如下步驟：
[0038] a、阿維菌素發(fā)酵液經(jīng)壓濾、烘干后制成干菌絲體；b、干菌絲體與甲醇按照質(zhì)量比 為1:8的比例加入甲醇進行浸提、過濾，得浸提液；c、將浸提液濃縮至膏狀，水洗后，補入油 膏質(zhì)量〇. 7倍的甲醇進行升溫溶解，降溫至常溫后，經(jīng)