加10%穩(wěn)定劑，減壓至0.9大氣壓下，進(jìn)行噴霧干燥，獲得含900AT-U/g的高活性抗凝血酶活性水蛭素干粉。
[0029]優(yōu)選的，所述的步驟A中補(bǔ)喂采用的飼料為經(jīng)冷藏并加入抗凝血劑的動物血液或者新鮮的動物血液。
[0030]優(yōu)選的，所述的步驟A中正常飼喂是每周飼喂2次。
[0031]優(yōu)選的，所述的步驟B中電解質(zhì)液為0.9%的氯化鈉溶液。
[0032]優(yōu)選的，所述的步驟B中電流采用直電流為8mA，通電時間為10分鐘。
[0033]優(yōu)選的，所述的步驟C中的穩(wěn)定劑為醫(yī)用淀粉。
[0034]優(yōu)選的，所述的步驟C中噴霧干燥的進(jìn)口溫度為200°C，出口溫度為80°C。
[0035]實(shí)施例3
本發(fā)明的提高水蛭素提取收率的方法，包括以下步驟:
A、補(bǔ)喂:在捕撈前的36小時，補(bǔ)喂一次飼料；或者是在正常飼喂飼料36小時后進(jìn)行捕攜;
B、捕撈及電刺激:在室溫下先將活體水蛭從飼養(yǎng)槽中提取至貯藏槽，用去離子水漂洗除其表面雜質(zhì)，濾出水分，再浸入生理鹽水漂洗，添加電解質(zhì)液層覆蓋，通入直流電進(jìn)行刺激，同時確保合適的電流強(qiáng)度，避免水蛭死亡，收集水蛭分泌的液體，后將活體水蛭從濾槽中放回飼養(yǎng)槽；
C、后續(xù)處理:將收集的分泌物經(jīng)過800μ m納濾膜處理150分鐘，除去90%的水份，添加12%穩(wěn)定劑，減壓至0.9大氣壓下，進(jìn)行噴霧干燥，獲得含1000AT-U/g的高活性抗凝血酶活性水蛭素干粉。
[0036]優(yōu)選的，所述的步驟A中補(bǔ)喂采用的飼料為經(jīng)冷藏并加入抗凝血劑的動物血液或者新鮮的動物血液。
[0037]優(yōu)選的，所述的步驟A中正常飼喂是每周飼喂I次。
[0038]優(yōu)選的，所述的步驟B中電解質(zhì)液為0.9%的氯化鈉溶液。
[0039]優(yōu)選的，所述的步驟B中電流采用直電流為10mA，通電時間為15分鐘。
[0040]優(yōu)選的，所述的步驟C中的穩(wěn)定劑為0.05%海藻糖、0.02%乙酰半胱氨酸和0.05%枸杞酸鈉配的組合。
[0041]優(yōu)選的，所述的步驟C中噴霧干燥的進(jìn)口溫度為220°C，出口溫度為85°C。
[0042]實(shí)施例4
本發(fā)明的提高水蛭素提取收率的方法，包括以下步驟:
A、補(bǔ)喂:在捕撈前的54小時，補(bǔ)喂一次飼料；或者是在正常飼喂飼料54小時后進(jìn)行捕攜;
B、捕撈及電刺激:在室溫下先將活體水蛭從飼養(yǎng)槽中提取至貯藏槽，用去離子水漂洗除其表面雜質(zhì)，濾出水分，再浸入生理鹽水漂洗，添加電解質(zhì)液層覆蓋，通入直流電進(jìn)行刺激，同時確保合適的電流強(qiáng)度，避免水蛭死亡，收集水蛭分泌的液體，后將活體水蛭從濾槽中放回飼養(yǎng)槽；
C、后續(xù)處理:將收集的分泌物經(jīng)過800μπι納濾膜后續(xù)處理180分鐘，除去90%的水份，添加15%穩(wěn)定劑，減壓至0.9大氣壓下，進(jìn)行噴霧干燥，獲得含1000AT-U/g的高活性抗凝血酶活性水蛭素干粉。
[0043]優(yōu)選的，所述的步驟A中補(bǔ)喂采用的飼料為經(jīng)冷藏并加入抗凝血劑的動物血液或者新鮮的動物血液。
[0044]優(yōu)選的，所述的步驟A中正常飼喂是每周飼喂2次。
[0045]優(yōu)選的，所述的步驟B中電解質(zhì)液為0.9%的氯化鈉溶液。
[0046]優(yōu)選的，所述的步驟B中電流采用直電流為12mA，通電時間為20分鐘。
[0047]優(yōu)選的，所述的步驟C中的穩(wěn)定劑為醫(yī)用淀粉或者0.05%海藻糖、0.02%乙酰半胱氨酸和0.05%枸杞酸鈉配的組合。
[0048]優(yōu)選的，所述的步驟C中噴霧干燥的進(jìn)口溫度為230°C，出口溫度為90°C。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種提高水蛭素提取收率的方法，其特征在于，包括以下步驟: A、補(bǔ)喂:在捕撈前的12?54小時，補(bǔ)喂一次飼料；或者是在正常飼喂飼料12?54小時后進(jìn)行捕攜； B、捕撈及電刺激:在室溫下先將活體水蛭從飼養(yǎng)槽中提取至貯藏槽，用去離子水漂洗除其表面雜質(zhì)，濾出水分，再浸入生理鹽水漂洗，添加電解質(zhì)液層覆蓋，通入直流電進(jìn)行刺激，收集水蛭分泌的液體，后將活體水蛭從濾槽中放回飼養(yǎng)槽； C、后續(xù)處理:將收集的分泌物經(jīng)過800μπι納濾膜后續(xù)處理30?180分鐘，除去80?90%的水份，添加8?15%穩(wěn)定劑，減壓至0.9大氣壓下，進(jìn)行噴霧干燥，獲得含800-1000AT-U/g的高活性抗凝血酶活性水蛭素干粉。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高水蛭素提取收率的方法，其特征在于:所述的步驟A中補(bǔ)喂采用的飼料為經(jīng)冷藏并加入抗凝血劑的動物血液或者新鮮的動物血液。3.根據(jù)權(quán)利要求1任一項(xiàng)所述的提高水蛭素提取收率的方法，其特征在于:所述的步驟A中正常飼喂是每周飼喂I或2次。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高水蛭素提取收率的方法，其特征在于:所述的步驟B中電解質(zhì)液為0.9%的氯化鈉溶液。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高水蛭素提取收率的方法，其特征在于:所述的步驟B中電流采用直電流為3?12mA，通電時間為5?20分鐘。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高水蛭素提取收率的方法，其特征在于:所述的步驟C中的穩(wěn)定劑為醫(yī)用淀粉或者0.05%海藻糖、0.02%乙酰半胱氨酸和0.05%枸杞酸鈉配的組合。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高水蛭素提取收率的方法，其特征在于:所述的步驟C中噴霧干燥的進(jìn)口溫度為180?230°C，出口溫度為75?90°C。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種提高水蛭素提取收率的方法，包括以下步驟：在捕撈前的12～54小時，補(bǔ)喂一次飼料；或在正常飼喂飼料12～54小時后進(jìn)行捕撈；在室溫下先將活體水蛭提取至貯藏槽，用去離子水漂洗，濾出水分，浸入生理鹽水漂洗，添加電解質(zhì)液層覆蓋，通入直流電進(jìn)行刺激，收集水蛭分泌的液體，后將活體水蛭從濾槽中放回飼養(yǎng)槽；將收集的分泌物經(jīng)過800μm納濾膜后續(xù)處理除去部分的水份，添加穩(wěn)定劑，進(jìn)行噴霧干燥，獲得高活性抗凝血酶活性水蛭素干粉。本發(fā)明通過調(diào)整水蛭的攝食時間，用以改善水蛭體內(nèi)水蛭素含量，并用電刺激活體水蛭提取水蛭素的方法，簡化水蛭素的生產(chǎn)工藝，同時保持水蛭的活體，多次提取高純度水蛭素。
【IPC分類】C07K14/815, A61N1/18, A01K67/033, C07K1/34
【公開號】CN104892752
【申請?zhí)枴緾N201510345287
【發(fā)明人】謝海林
【申請人】廣西復(fù)鑫益生物科技有限公司平南分公司
【公開日】2015年9月9日
【申請日】2015年6月23日