一種從大黃中分離純化蒽醌類化合物和苯乙烯酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于化工與制藥領(lǐng)域，具體是涉及一種從大黃提取物中分離純化蒽醌類化 合物和苯乙烯酸的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 大黃為常用中藥，具有瀉下、抗菌、抗病毒、導(dǎo)滯通便、利水通淋、舒肝利膽、積滯腹 痛、抗腫瘤、消炎、止血、止吐、止痛等多種作用，臨床上廣泛應(yīng)用于慢性腎功能衰竭、上消化 道出血、急性胰腺炎、急性腸梗阻、重癥肝炎、尿毒癥、痢疾、肺癌、白血病及糖尿病等多種疾 病的治療。其主要活性成分為蒽醌衍生物，包括大黃酸、大黃素、大黃酚、蘆薈大黃素和大黃 素甲醚。
[0003] 大黃中有效成分的傳統(tǒng)分離純方法，多采用有機(jī)溶劑提取-薄層色譜法、高效液 相色譜法等。雖然薄層色譜法具有操作方便、設(shè)備簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，但其分離度不高，且分離度 容易受相對(duì)濕度和溫度的影響。高效液相色譜法分離度高，應(yīng)用范圍廣，但其分離成本高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種操作簡(jiǎn)便、分離量大、綜合成本 低、綠色環(huán)保的從大黃中快速純化制備蒽醌類化合物和苯乙烯酸的方法，通過(guò)一步分離純 化即可從大黃提取物中得到高純度蒽醌類化合物和苯乙烯酸單體化合物。
[0005] 本發(fā)明的方案如下： 一種從大黃提取物中分離純化蒽醌類化合物和苯乙烯酸的方法，步驟為： 步驟1:大黃藥材粉碎，加入苯-硫酸混合液，加熱回流提取，將提取液過(guò)濾、減壓濃縮 得大黃浸膏。
[0006] 步驟2 :將大黃浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過(guò)濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為 二醇基色譜柱，流動(dòng)相為超臨界流體，改進(jìn)劑為甲醇。分離過(guò)程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)檢 測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分。
[0007] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟1中的硫酸濃度為10-40%，最優(yōu)為20% ;苯與 硫酸的體積比例為10 :1~2 :1，最優(yōu)為5:1 ;苯-硫酸混合液與藥材的比例是3 :1~10 : 1，最優(yōu)為6 :1 ;提取的次數(shù)為3次，每次回流時(shí)間為0. 5-5小時(shí)，最優(yōu)為1. 5小時(shí)。
[0008] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中過(guò)濾所用濾膜為0. 45 μ m濾膜。
[0009] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中超臨界流體為超臨界二氧化碳，超臨界 二氧化碳的壓力為9~20MPa，最優(yōu)為13 MPa ;超臨界二氧化碳的流速為1-10倍柱體積/分 鐘，最優(yōu)為4倍柱體積/分鐘。
[0010] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中色譜柱溫度為35~55 ° C，最優(yōu)為45 ° Co
[0011] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中改進(jìn)劑甲醇的比例為0%~10%，最優(yōu)為 4% 〇
[0012] 本發(fā)明一種從大黃中分離純化蒽醌類化合物和苯乙烯酸的方法，具有如下優(yōu)勢(shì)： (1)所得到的大黃提取物中有效成分含量高(從圖1可以看出）。
[0013] (2)不需要像已有技術(shù)一樣對(duì)樣品進(jìn)行多次分離純化，只需要一個(gè)分離步驟即可 得到高純度蒽醌類化合物和苯乙烯酸，經(jīng)過(guò)一步分離純化就可以得到5種蒽醌類化合物和 苯乙烯酸。
[0014] (3)純化過(guò)程中使用超臨界二氧化碳，不使用對(duì)環(huán)境有危害的有機(jī)溶劑，生產(chǎn)過(guò)程 綠色環(huán)保，所得產(chǎn)品無(wú)有害物質(zhì)殘留。
[0015] (4)二氧化碳回收利用容易，能耗低，生產(chǎn)成本低。
[0016] ( 5 )方法操作簡(jiǎn)單，易于自動(dòng)化控制，效率高，工藝周期短。
【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1是實(shí)施例1超臨界流體色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合實(shí)施例和附圖詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，但保護(hù)范圍不被此限制。實(shí) 施例中所用設(shè)備或原材料皆可從市場(chǎng)獲得。所用試劑均為分析純，購(gòu)自天津試劑四廠，所用 二氧化碳為高純二氧化碳。
[0019] 實(shí)施例1 稱取大黃100 g，用粉碎機(jī)粉碎，放入玻璃容器中，加入600 ml苯-20%硫酸（5:1，V/V) 混合液，加熱回流提取3次，每次1. 5小時(shí)，合并提取液，過(guò)濾、減壓濃縮得大黃浸膏。
[0020] 將大黃浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過(guò)濾(所用濾膜為0. 45 μπι濾膜)后，進(jìn)行超臨界流體色 譜分離，色譜柱為二醇基色譜柱，色譜柱溫度為45 ° C。流動(dòng)相為超臨界二氧化碳，流速為 4倍柱體積/分鐘，壓力為13 MPa。改進(jìn)劑為甲醇，其比例為4%。分離過(guò)程由紫外檢測(cè)器檢 測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，根據(jù)檢測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分，分別得到5種蒽醌類化合物和苯 乙烯酸。
[0021] 圖1是實(shí)施例1超臨界流體色譜圖。所得各個(gè)組分的純度很高，均在98%以上。
[0022] 實(shí)施例2 稱取大黃100 g，用粉碎機(jī)粉碎，放入玻璃容器中，加入800 ml苯-15%硫酸（5:1，V/V) 混合液，加熱回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，過(guò)濾、減壓濃縮得大黃浸膏。
[0023] 將大黃浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過(guò)濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為二醇基色 譜柱，色譜柱溫度為40 ° C。流動(dòng)相為超臨界二氧化碳，流速為3.5倍柱體積/分鐘，壓力 為12 MPa。改進(jìn)劑為甲醇，其比例為3%。分離過(guò)程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm， 根據(jù)檢測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分，分別得到5種蒽醌類化合物和苯乙烯酸。
[0024] 實(shí)施例3 稱取大黃100 g，用粉碎機(jī)粉碎，放入玻璃容器中，加入500 ml苯-25%硫酸（6:1，V/V) 混合液，加熱回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，過(guò)濾、減壓濃縮得大黃浸膏。
[0025] 將大黃浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過(guò)濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為二醇基色 譜柱，色譜柱溫度為35 ° C。流動(dòng)相為超臨界二氧化碳，流速為3倍柱體積/分鐘，壓力為 11 MPa。改進(jìn)劑為甲醇，其比例為2%。分離過(guò)程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，根 據(jù)檢測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分，分別得到5種蒽醌類化合物和苯乙烯酸。
[0026] 經(jīng)HPLC面積歸一化法分析測(cè)試，實(shí)施例1-3所得到的各個(gè)組分的純度很高，均在 98%以上。
[0027] 經(jīng)NMR、MS鑒定，圖1中八、8、(：、04、？分別代表大黃酚、大黃素甲醚、苯乙烯酸、大 黃素、蘆薈大黃素、大黃酸，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種從大黃提取物中分離純化蒽醌類化合物和苯乙烯酸的方法，其特征是，步驟 為： 步驟1:大黃藥材粉碎，加入苯-硫酸混合液，加熱回流提取，將提取液過(guò)濾、減壓濃縮 得大黃浸膏； 步驟2 :將大黃浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過(guò)濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為二醇 基色譜柱，流動(dòng)相為超臨界流體，改進(jìn)劑為甲醇，分離過(guò)程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)檢測(cè)信 號(hào)收集目標(biāo)組分餾分。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟1中的硫酸濃度為10-40%，最優(yōu)為20%。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟1中苯與硫酸的體積比例為10 :1~2 : 1，最優(yōu)為5:1。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟1中苯-硫酸混合液與藥材的比例是 3 :1~10 :1，最優(yōu)為6 :1。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟1中提取的次數(shù)為3次，每次回流時(shí)間 為0. 5-5小時(shí)，最優(yōu)為1. 5小時(shí)。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中過(guò)濾所用濾膜為0. 45ym濾膜。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中超臨界流體為超臨界二氧化碳，超 臨界二氧化碳的壓力為9~20MPa，最優(yōu)為13MPa。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征是，超臨界二氧化碳的流速為1-10倍柱體積/ 分鐘，最優(yōu)為4倍柱體積/分鐘。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中色譜柱溫度為35~55 °C，最優(yōu)為 45 °C010. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中改進(jìn)劑甲醇的比例為(FdO%，最 優(yōu)為4%。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種從大黃提取物中分離純化蒽醌類化合物和苯乙烯酸的方法。大黃藥材粉碎，加入苯-硫酸混合液加熱回流提取，將提取液過(guò)濾、減壓濃縮得大黃浸膏；將大黃浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過(guò)濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為二醇基色譜柱，流動(dòng)相為超臨界流體，改進(jìn)劑為甲醇。本發(fā)明不使用對(duì)環(huán)境有危害的有機(jī)溶劑，生產(chǎn)過(guò)程綠色環(huán)保，所得產(chǎn)品無(wú)有害物質(zhì)殘留；二氧化碳回收利用容易，能耗低，生產(chǎn)成本低。
【IPC分類】C07C51/42, C07C66/02, C07C57/42, C07C46/10, C07C50/34
【公開(kāi)號(hào)】CN104909999
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510179428
【發(fā)明人】孫愛(ài)玲, 于琳琳, 李愛(ài)峰, 亢靜靜, 柳仁民
【申請(qǐng)人】聊城大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年9月16日
【申請(qǐng)日】2015年4月16日