鄰氨基苯甲酰胺化合物及其制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明屬藥物合成領(lǐng)域，涉及新型鄰氨基苯甲酰胺化合物，制備方法和應(yīng)用。具體 涉及一種含哌啶或哌嗪的鄰氨基苯甲酰胺化合物和吡啶類似物，及其制備方法和在醫(yī)學(xué)上 的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 報(bào)道顯示，惡性腫瘤已成為嚴(yán)重危害人民生命健康的常見病。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全世 界每年約有2000萬的新發(fā)病例；我國每年的新發(fā)病例約為160-200萬，死亡130萬。研究 顯示，由于腫瘤早期具有轉(zhuǎn)移的能力，臨床診斷原發(fā)腫瘤中約50%的患者已產(chǎn)生遠(yuǎn)位轉(zhuǎn)移， 腫瘤細(xì)胞増長快、易變異，從而產(chǎn)生多藥耐藥，導(dǎo)致化療失敗，據(jù)有關(guān)統(tǒng)計(jì)，其中90%以上與 腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥相關(guān)，目前臨床上應(yīng)用的抗腫瘤藥物遠(yuǎn)不能滿足治療的要求。
[0003] 分子靶向抗腫瘤藥物的研究是當(dāng)前抗腫瘤藥物研究領(lǐng)域的主要潮流和趨勢。近年 來，革E向Hedgehog(Hh)信號通路的抗腫瘤藥物成為這一領(lǐng)域新的研究熱點(diǎn)。Hedgehog(Hh) 信號通路在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用，與人類約1/3的腫瘤有著密切的聯(lián)系。 有研究報(bào)道，異常激活Hh信號傳導(dǎo)，將導(dǎo)致髓母細(xì)胞瘤、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、結(jié)腸癌、 膀胱癌、卵巢癌等多種腫瘤的發(fā)生。Hedgehog是在研究果蠅的發(fā)育過程中發(fā)現(xiàn)的一種分節(jié) 性基因，Hh信號主要是通過跨膜蛋白Ptch和Smo介導(dǎo)向胞內(nèi)傳遞。無 Hh信號時(shí)，Ptch與 Smo結(jié)合，抑制Smo的作用，導(dǎo)致其下游轉(zhuǎn)錄因子Gli轉(zhuǎn)錄活性的抑制。當(dāng)有Hh信號時(shí)，Hh 與Ptch結(jié)合，解除Ptch對Smo的抑制作用，恢復(fù)活性的Smo通過級次信號轉(zhuǎn)遞，激活Gli 轉(zhuǎn)錄活性，啟動(dòng)Hh靶基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。
[0004] 目前在靶向Hh信號通路的抗腫瘤藥物研究中，已有多個(gè)藥物上市或進(jìn)入臨床研 究,如美國Genentech公司的Vismodegid (⑶C-0449)于2012年已被FDA批準(zhǔn)上市，用于皮 膚癌的治療。另外，Erismodegid(LDE225,瑞士 Norvatis 公司）、LEQ_506(瑞士 Norvatis 公司）和LY-2940680 (美國Lilly公司）等正在進(jìn)行臨床II期及III期，臨床研究顯示對 皮膚癌、腦癌、髓母細(xì)胞瘤和其他實(shí)體瘤療效顯著。
[0005] 更為有意義的是，Hedgehog信號通路抑制劑在治療對釀氨酸激酶抑制劑伊馬替尼 產(chǎn)生耐藥的非小細(xì)胞肺癌（CML)患者過程中，不僅能減少CML細(xì)胞的數(shù)量，還能減少耐伊馬 替尼CML細(xì)胞的生長，而目前已有抗腫瘤藥物耐藥性的問題是腫瘤臨床治療面臨的重要難 題。因此，研發(fā)具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的靶向Hh信號通路的抗腫瘤藥物，對改善我國腫瘤 患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，提高腫瘤臨床治療效果，具有重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供具有良好Hedgehog信號通路抑制作用的新型鄰氨基苯甲酰 胺化合物，具體涉及一種含哌啶或哌嗪的鄰氨基苯甲酰胺化合物及其吡啶類似物。
[0007] 本發(fā)明的另一目的是提供上述鄰氨基苯甲酰胺化合物的制備方法，尤其涉及制備 含哌啶或哌嗪的鄰氨基苯甲酰胺化合物及其吡啶類似物的方法。
[0008] 本發(fā)明的鄰氨基苯甲酰胺化合物具有下述通式（I )的結(jié)構(gòu)：
[0014] R2 = H或或芐基
[0015] R3 = H或F或CF3或2-羥基-2-異丙基或3-羥基-3-異戊基或酯基
[0016] 本發(fā)明中，優(yōu)選的化合物具有下述化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9的結(jié)構(gòu)：
[0017]
[0018]

[0021] 本發(fā)明所述的化合物通過體外Hedgehog信號通路抑制活性測試，結(jié)果顯示，所述 的化合物具有良好的Hedgehog信號通路抑制活性，可進(jìn)一步研制開發(fā)為新型的Hedgehog 信號通路抑制劑和抗腫瘤藥物。
[0022] 本發(fā)明對體外Hedgehog信號通路抑制活性測試，結(jié)果顯示，本發(fā)明中化合物顯示 出較好的Hedgehog信號通路抑制活性，其中化合物4和8對于Hh信號通路中的靶基因 Gli 抑制活性IC5。值小于0. 1 μ M。本發(fā)明的化合物可以進(jìn)一步制備Hedgehog信號通路抑制劑。
[0023] 本發(fā)明中，所采用的藥效學(xué)試驗(yàn)方法，是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的方法；
[0024] 本發(fā)明中，所采用的NIH3T3細(xì)胞和雙熒光素酶報(bào)告檢測試劑盒是本領(lǐng)域技術(shù)人 員可通過市購的途徑所獲得的。
[0025] 本發(fā)明的含哌嗪或哌啶的鄰氨基苯甲酰胺化合物和吡啶類似物尤其可制備 Hedgehog信號通路抑制劑和抗腫瘤藥物。鑒于異常激活Hh信號傳導(dǎo)，將導(dǎo)致髓母細(xì)胞瘤、 乳腺癌、前列腺癌、肺癌、結(jié)腸癌、膀胱癌、卵巢癌等多種腫瘤的發(fā)生。本發(fā)明所述的惡性腫 瘤包括Hedgehog信號通路異常激活所致的相關(guān)腫瘤，包括髓母細(xì)胞瘤、乳腺癌、前列腺癌、 肺癌、結(jié)腸癌、膀胱癌、卵巢癌、皮膚癌。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 實(shí)施例1 :合成化合物1，6-[4-[2_(二芐基胺基）苯甲?；鵠哌嗪-1-基]-煙酸 乙酯
[0027] 1)合成6-哌嗪基煙酸乙酯
[0028] 6_ 氯煙酸乙酯（12g, 0· 06mol, 1.0 Oequiv)、哌嗪（8. 35g, 0· IOmol, I. 50equiv)溶 解于乙腈（100mL)中。加入碳酸鉀（17.878,0.13111〇1，2.0(^1^)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，1001：下回 流12h。TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，抽濾，蒸干濾液。加入乙酸乙酯、水分液，少量水洗兩次，合并有 機(jī)層，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，靜置。濾液旋干，即得產(chǎn)品11. 63g (乳白色固體）產(chǎn) 率：86· 6 %。MS (ESI) m/z ([M+H]+) : 236. 1。
[0029] 2)合成N，N-二芐基-2-胺基苯甲酸
[0030] 鄰氨基苯甲酸（10.0 g)、芐氯（15. 4g)加入到水（200ml)中，加入碳酸鉀（40. 2g)， 加熱回流12h，冷卻，得到的堿性溶液用DCM(200ml X 3)萃取除去多余的氯芐，水層冰浴下 用濃鹽酸調(diào)PH至約等于4,乙酸乙酯（200ml X 3)萃取，合并有機(jī)層，飽和氯化鈉洗，無水硫 酸鈉干燥，減壓蒸去溶劑得產(chǎn)品18. 2g，產(chǎn)率79%。MS(ESI)m/z([M+H]+):316. 1。
[0031] 3)合成6-[4-[2_(二芐基胺基）苯甲酰基]哌嗪-1-基]-煙酸乙酯。
[0032] N，N-二芐基-2-胺基苯甲酸2. 0g，EDC/HC1 (2. 4g)加入到THF (50ml)中，室溫?cái)嚢?30min，加入6-哌嗪基煙酸乙酯I. 5g，氬氣保護(hù)，室溫?cái)嚢?h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，減壓蒸去 THF，加入乙酸乙酯和飽和食鹽水各50ml震搖分層，水層EA (50ml X 3)萃取，合并有機(jī)層，飽 和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸去溶劑，乙醇重結(jié)晶得純化的產(chǎn)物I. 8g，產(chǎn)率55 %。 MS(ESI)m/z([M+H]+):535.1。1HnmrgoomHz1CDCIS) S8.80(d，J = 1.8Hz，lH)，8.05(dd，J =9. 0, 2. 3Hz, 1H) , 7. 32 - 7. 14 (m, 12H) , 7. 04 (t, J = 7. 2Hz, 2Η) , 6. 54 (d, J =9. 0Hz, 1Η) , 4. 34 (q, J = 7. IHz , 2Η) , 4. 24 (m, 5Η) , 3. 97 (m, 1 Η) , 3. 80 - 3. 69 (m, 1Η), 3. 50 (m, 2Η), 3. 31 - 3. 19 (m, 2Η) ,3.18- 3. 09 (m, 1Η), 1. 37 (t, J = 7. ΙΗζ, 3Η). 〇
[0033] 實(shí)施例2:合成化合物2, [1-[2_(芐基胺基）苯甲?；鵠-4-[5_(2-羥基丙 烷-2-基）-吡啶-2-基]]哌嗪
[0034] 1)合成[1-[2_ (二芐基胺基）苯甲醜基]_4_ [5_ (2_羥基丙烷_2_基）-批 啶-2-基]]哌嗪。
[0035] 500mg6-[4-[2-(二芐基胺基）苯甲酰基]哌嗪-1-基]-煙酸乙酯，溶 解于THF(15ml)中，氬氣保護(hù)，冷卻至-KTC，用注射器加入碘甲烷的格式試劑 (CH3MgI, 3ml，3. 0M/L)，自然升溫至室溫，室溫下攪拌2h，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，飽和氯化銨溶 液（50ml)淬滅反應(yīng)，分層，水層用乙酸乙酯（50ml X 3)萃取，合并有機(jī)層，飽和氯化鈉洗，無 水硫酸鈉干燥，減壓蒸去溶劑，得粗產(chǎn)物420mg，取IOOmg制備薄層分離得純化的產(chǎn)物40mg。 MS(ESI)m/z([M+H]+) :521. 1。
[0036] 2)合成[1-[2_(芐基胺基）苯甲醜基]-4-[5-(2-羥基丙烷-2-基）-批 啶-2-基]]哌嗪
[0037]