一種頭孢曲松鈉光降解產(chǎn)物及其制備方法和分析檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種頭孢曲松鈉光降解產(chǎn)物，以及該光降解 產(chǎn)物的制備方法和分析檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 頭孢曲松鈉是瑞士 Roche公司1982年上市的廣譜長效抗菌素，具有很大市場份 額，是第三代具有廣譜抗菌活性的頭孢菌素，用于敏感致病菌所致的下呼吸道感染、尿路、 膽道感染，以及腹腔感染、盆腔感染、皮膚軟組織感染、骨和關(guān)節(jié)感染、敗血癥、腦膜炎等及 手術(shù)期感染預(yù)防。頭孢曲松鈉原料藥生產(chǎn)廠家眾多，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下：
[0003]
[0004] 該原料藥的質(zhì)量標準在英國藥典、歐洲藥典、美國藥典中均有收載，雜質(zhì)控制要求 為：五個已知雜質(zhì)A、B、C、D、E限度不超過1. 0%，未知雜質(zhì)限度不超過0. 05%，總雜限度不 超過4.0%。中國藥典2010版雜質(zhì)限度要求為：單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面 積的〇. 5倍（0. 5% )，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的2倍（2. 0% )。 [0005] 五個已知雜質(zhì)A、B、C、D、E化學(xué)結(jié)構(gòu)如下：
[0007] 國際上公認的藥品注冊要符合人用藥品注冊技術(shù)國際協(xié)調(diào)會（ICH)及EP歐洲藥 典中的要求，其對藥物中的雜質(zhì)進行了嚴格的規(guī)定。ICH要求申報者應(yīng)對原料藥在合成、精 制和儲存過程中最可能產(chǎn)生的那些實際存在的和潛在的雜質(zhì)進行概述，該描述應(yīng)對合成中 的化學(xué)反應(yīng)、由原料引起的雜質(zhì)及可能的降解產(chǎn)物進行合理的、科學(xué)地評估；并且申報資料 中還應(yīng)對那些在原料藥中實際存在的表觀量大于或等于0.05% (每日最大劑量大于2g)的 雜質(zhì)結(jié)構(gòu)特征進行描述。
[0008] 可能的降解產(chǎn)物可通過破壞性試驗和穩(wěn)定性試驗進行評估。但是，現(xiàn)有的頭孢曲 松鈉質(zhì)量標準中，有關(guān)物質(zhì)的液相分析方法洗脫強度較弱，可能并不能將降解產(chǎn)物都分離 檢測出來。這些漏檢出的降解產(chǎn)物無疑降低了頭孢曲松鈉的質(zhì)量，如不對這些降解產(chǎn)物加 以嚴格控制，可能會對人體產(chǎn)生嚴重的毒副作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 為了克服上述缺陷，本發(fā)明采用洗脫強度高的洗脫劑對頭孢曲松鈉的破壞性試 驗樣品和穩(wěn)定性試驗樣品進行分析，在光破壞樣品中發(fā)現(xiàn)了一種新的降解產(chǎn)物，該降解產(chǎn) 物在穩(wěn)定性試驗長期6個月未避光樣品中開始檢測到，且含量隨時間增高，長期18月時達 0. 05%。因此：
[0010] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種新的頭孢曲松鈉光降解產(chǎn)物；
[0011] 本發(fā)明的第二目的在于提供所述光降解產(chǎn)物的制備方法；
[0012] 本發(fā)明的第三目的在于提供所述光降解產(chǎn)物的分析檢測方法；
[0013] 本發(fā)明的第四目的在于提供所述光降解產(chǎn)物在頭孢曲松鈉及其制劑的有關(guān)物質(zhì) 檢查項中作為雜質(zhì)對照品的用途。
[0014] 上述目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0015] -種頭孢曲松鈉光降解產(chǎn)物，化學(xué)結(jié)構(gòu)如下，
[0016]
[0017] -種所述光降解產(chǎn)物的制備方法，包括如下步驟：
[0018] (1)光照破壞樣品制備：將頭孢曲松鈉原料藥光照破壞，先經(jīng)冷白熒光燈照射，再 經(jīng)紫外熒光燈照射；
[0019] (2)降解產(chǎn)物富集：將上述光照破壞樣品溶于甲醇體積百分濃度為60%~90%的 甲醇-水溶液中，攪拌，抽濾，收集濾液，減壓濃縮得濃縮物；
[0020] (3)降解產(chǎn)物粗品：將上述濃縮物用正相硅膠柱色譜分離，用體積比為2:1~1:2 的二氯甲烷-甲醇混合溶劑等度洗脫，收集5~9個柱體積洗脫液，濃縮得降解產(chǎn)物粗品；
[0021] (4)反相硅膠柱制備：將上述降解產(chǎn)物粗品用反相硅膠柱純化，固定相為十八烷 基硅烷鍵合硅膠，流動相為甲醇體積百分濃度為85 %~95 %的甲醇-水，等度洗脫，收集 4~8個柱體積洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得所述光降解產(chǎn)物。
[0022] 進一步地，步驟（1)所述光照破壞方法為：先經(jīng)一百二十萬勒克斯冷白熒光燈照 射15~25小時，再經(jīng)200瓦小時/平方米的紫外熒光燈照射10~20小時。先經(jīng)冷白熒 光照射，再經(jīng)紫外熒光照射，能顯著提高所述光降解產(chǎn)物的得率，光照時間過長不但不能繼 續(xù)提高得率，反而會有降低趨勢，可能是因為會進一步轉(zhuǎn)化成其他化學(xué)物質(zhì)。
[0023] 進一步地，步驟（3)所述正相硅膠粒徑大小為200~300目。分離硅膠粒徑大小 決定了硅膠表面積，粒徑太大會導(dǎo)致所述光降解產(chǎn)物與極性相近的雜質(zhì)難以分離開，粒徑 太小會顯著增大柱內(nèi)壓力，洗脫速度過慢。同時，硅膠粒徑還影響所需要的洗脫液體積。
[0024] -種所述光降解產(chǎn)物的液相分析檢測方法，HPLC色譜條件包括：
[0025] 色譜柱：Agilent ZORBAX XDB-C18 (4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0026] 流動相：Α為乙腈，B為0· 05mol/L正辛胺溶液（磷酸調(diào)節(jié)pH值至6· 5);
[0027] 梯度洗脫程序：0 ~5min，A 20%;5 ~15min，A 20%-75%;15 ~40min，A 75%; 40 ~50min，A 75% - 20% ;50 ~60min，A 20% ;
[0028] 流動相流速：1. OmL · min S
[0029] 檢測波長：260nm ;
[0030] 柱溫：30 Γ ;
[0031] 進樣量：10 μ L。
[0032] 上述色譜條件下，所述光降解產(chǎn)物能與極性相近的化合物完全分離開，分離度大 于1. 5。流動相在260nm檢測波長下紫外本底吸收低，且260nm為所述光降解產(chǎn)物的最大吸 收波長，保證了所述光降解產(chǎn)物的響應(yīng)靈敏度，提高檢出量。
[0033] 所述的頭孢曲松鈉光降解產(chǎn)物在頭孢曲松鈉及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查項中作為 雜質(zhì)對照品的用途。該光降解產(chǎn)物容易獲得，且純度高（大于98%)，可以使用該化合物作 為對照品利用外標法對其進行質(zhì)量控制。
[0034] 本發(fā)明的有益效果：
[0035] (1)本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種新的頭孢曲松鈉光降解產(chǎn)物，該降解產(chǎn)物結(jié)構(gòu)首次報道；
[0036] (2)本發(fā)明提供的所述光降解產(chǎn)物的制備方法簡單易行，可大量制備該降解產(chǎn) 物；
[0037] (3)本發(fā)明提供的液相分析方法能快速檢測出所述降解產(chǎn)物，選擇該降解產(chǎn)物的 最大吸收波長作為檢測波長，提高了該降解產(chǎn)物的檢出率，結(jié)果準確可靠；
[0038] (4)本發(fā)明提供的光降解產(chǎn)物可以用于頭孢曲松鈉及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查，進 一步提尚頭抱曲松納及其制劑的質(zhì)量標準，提尚其安全性和可控性。
【附圖說明】
[0039] 圖1為光降解產(chǎn)物氫譜信號歸屬圖；
[0040] 圖2為光降解產(chǎn)物碳譜信號歸屬圖；
[0041] 圖3為頭孢曲松鈉穩(wěn)定性試驗長期6個月未避光樣品的供試品溶液色譜圖（箭頭 指示的色譜峰即為本發(fā)明提供的降解產(chǎn)物的色譜峰）。
【具體實施方式】
[0042] 下面結(jié)合具體實施例詳細說明本發(fā)明的技術(shù)方案。
[0043] 實施例1 :頭孢曲松鈉光降解產(chǎn)物的制備和結(jié)構(gòu)確證
[0044] 取50g頭孢曲松鈉原料均勻攤在培養(yǎng)皿中，置于冷白熒光燈下光照20小時，光照 強度為一百二十萬勒克斯；取出表面皿，再置于紫外熒光燈下照射15小時，紫外熒光燈照 射強度為200瓦小時/平方米，照射結(jié)束后取出。然后將光照破壞樣品溶于甲醇體積百分 濃度為75 %的甲醇-水溶液中，攪拌20分鐘，用抽濾漏斗抽濾，收集濾液，減壓濃縮得濃縮 物3. 5g ;然后將濃縮物用5ml甲醇溶解，用4g粒度為100~200