香菇中多糖類物質(zhì)的提取純化方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種香菇中多糖類物質(zhì)的提取純化方法。
【背景技術(shù)】
[0002]香菇已經(jīng)公認(rèn)為是一種珍貴的食藥兩用的資源。香菇多糖具有較強(qiáng)的藥用價值，能調(diào)節(jié)并恢復(fù)人體的免疫功能，具有一定的抗癌作用。香菇多糖以β_1，3葡聚糖為主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能和刺激干擾素形成等功能。香菇多糖的副作用輕微，對正常細(xì)胞無殺傷作用，這是它優(yōu)于細(xì)胞毒抗癌藥的特點(diǎn)之一。而且香菇多糖能有效拮抗化療藥物的毒副反應(yīng)。
[0003]以香菇為原料可開發(fā)各種保健食品、飲品、調(diào)味品和藥品，關(guān)于香菇多糖提取工藝的研究有很多傳統(tǒng)工藝，如熱水浸提法、稀酸浸提法、稀堿浸提法等，還有新興工藝超聲輔助法、微波輔助法、酶法、超濾法等，但均存在多糖提取率較低的缺陷。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種香菇中多糖類物質(zhì)的提取純化方法，有效提高香菇中多糖類物質(zhì)的提取率。
[0005]本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
香菇中多糖類物質(zhì)的提取純化方法，其特征在于:
由以下步驟實(shí)現(xiàn):
干燥粉碎一高溫浸提一超聲波提取一離心濃縮一反復(fù)凍融離心過濾一醇沉一離心干燥。
[0006]所述干燥粉碎的步驟為:
新鮮香菇清洗除雜后，將菇蓋與菇柄分開并進(jìn)行剪切，之后置于80°C恒溫干燥箱中烘干8 h，取出放入粉碎機(jī)中粉碎得到香菇粉。
[0007]所述高溫浸提的步驟為:
取香菇粉按料液比(m/v)1: (20-40)的比例加入純凈水，攪拌均勻后置于容器中，密封放入高壓滅菌鍋中在115-125°C下保溫，0.5-2h后取出。
[0008]所述超聲波提取的步驟為:
高溫浸提結(jié)束后，在超聲功率550W、溫度75-100°C條件下超聲處理0.5_2h進(jìn)行提取。
[0009]所述離心濃縮的步驟為:
超聲波提取結(jié)束后，在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心15min，去除沉淀，收集上清液；將收集的上清液在溫度100°C條件下加熱濃縮至原料液體積的五分之一，得到香菇多糖水溶液。
[0010]所述反復(fù)凍融離心過濾的步驟為:
將香菇多糖水溶液在-80°C冰箱中冷凍40min，拿出后在40°C水浴加熱溶解，在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心30min后過濾，反復(fù)四次凍融離心過濾除去蛋白。
[0011]所述醇沉的步驟為:
在除去蛋白的香菇多糖水溶液中加入四倍體積乙醇溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%，冰箱冷藏室中2-6 °C下靜置過夜。
[0012]所述離心干燥的步驟為:
將醇沉后的香菇多糖水溶液在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心20min除去上清液收集沉淀，對沉淀進(jìn)行干燥制得香菇多糖。
[0013]本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn):
本發(fā)明采用超高溫結(jié)合超聲的工藝流程對香菇多糖進(jìn)行提取。①通過超聲的空化作用和振蕩作用，使粒子的運(yùn)動速度增大，香菇多糖的溶出率增加，比一般傳統(tǒng)的熱水浸提法提取率大，超聲時間的延長會使香菇細(xì)胞破碎充分，多糖溶出徹底，從而提高了香菇子實(shí)體多糖得率。②超高溫高壓使細(xì)胞膜受損，細(xì)胞的通透性增強(qiáng)，分子的擴(kuò)散速度增大，同時，高溫環(huán)境會使部分蛋白質(zhì)變質(zhì)，使香菇多糖溶液中的蛋白質(zhì)含量減少。將高溫與超聲結(jié)合提取香菇多糖，高溫使細(xì)胞膜受損，細(xì)胞通透性增強(qiáng)，分子擴(kuò)散速度增大，再經(jīng)過超聲的空化作用和振蕩使細(xì)胞中粒子的運(yùn)動速度更加快速，通過物理作用，使細(xì)胞中的多糖分子更易穿過細(xì)胞膜，使香菇多糖的溶出率大大增加。
[0014]采用本發(fā)明技術(shù)方案中“超高溫”的提取過程，香菇多糖提取量已經(jīng)可以達(dá)到常規(guī)超聲提取方法(如100°C條件結(jié)合超聲波提取香菇多糖的方法)的1.9倍，而采用本發(fā)明技術(shù)方案的完整技術(shù)方案一一 “超高溫結(jié)合超聲”的提取過程，能將香菇多糖提取量提高到常規(guī)超聲提取方法(如100°C條件結(jié)合超聲波提取香菇多糖的方法)的2.21倍，且提取時間大大縮短。
[0015]另外，本發(fā)明在醇沉之前通過反復(fù)凍融法除蛋白，將多糖溶液放置在冷凍箱中快速冷凍，然后迅速融化，如此反復(fù)凍融多次，破壞香菇中蛋白質(zhì)的穩(wěn)定，使其沉淀出來。常規(guī)方法往往是采用先濃縮、后醇沉提取多糖的方法，得到醇沉多糖以后還要對該多糖進(jìn)行復(fù)溶解，然后再進(jìn)行除蛋白操作，操作更麻煩。本發(fā)明在步驟設(shè)置上較該常規(guī)方法大大簡化，也比傳統(tǒng)的用化學(xué)試劑的方法更簡單、安全、經(jīng)濟(jì)和環(huán)保，而且選擇是在醇沉之前進(jìn)行反復(fù)凍融，更利于后續(xù)香菇多糖，而且提取率純度更高。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說明。
[0017]本發(fā)明涉及的香菇中多糖類物質(zhì)的提取純化方法，其具體工藝流程為干燥粉碎一高溫浸提一超聲波提取一離心濃縮一反復(fù)凍融離心過濾一醇沉一離心干燥。
[0018]具體為:
(I)干燥粉碎:
新鮮香菇清洗除雜后，將菇蓋與菇柄分開并進(jìn)行剪切，之后置于80°c恒溫干燥箱中烘干8 h，取出放入粉碎機(jī)中粉碎得到香菇粉。
[0019](2)尚溫浸提:
取香菇粉按料液比(m/v)1: (20-40)的比例加入純凈水，即將Ig香菇粉加入到20_40mL水中，攪拌均勻后置于容器中，密封放入高壓滅菌鍋中在115-125Γ下保溫，0.5-2h后取出。
[0020](3)超聲波提取:
高溫浸提結(jié)束后，在超聲功率550W、溫度75-100°C條件下超聲處理0.5_2h進(jìn)行提取。
[0021](4)離心濃縮:
超聲波提取結(jié)束后，在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心15min，去除沉淀，收集上清液；將收集的上清液在溫度100°C條件下加熱濃縮至原料液體積的五分之一，得到香菇多糖水溶液。
[0022](5)反復(fù)凍融離心過濾:
將香菇多糖水溶液在-80°C冰箱中冷凍40min，拿出后在40°C水浴加熱溶解，在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心30min后過濾，反復(fù)四次凍融離心過濾除去蛋白。
[0023](6)醇沉:
在除去蛋白的香菇多糖水溶液中加入四倍體積乙醇溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%，冰箱冷藏室中2-6 °C下靜置過夜。
[0024](7)離心干燥:
將醇沉后的香菇多糖水溶液在3500r/min轉(zhuǎn)速下離心20min除去上清液收集沉淀，對沉淀進(jìn)行干燥制得香菇多糖。
[0025]實(shí)施例1:
(I)干燥粉碎:
新鮮香菇清洗除雜后，將菇蓋與菇柄分開并進(jìn)行剪切，之后置于80°C恒溫干燥箱中烘干8 h，取出放入粉碎機(jī)中粉碎得到香菇粉。
[0026](2)尚溫浸提:
取香菇粉按料液比(m/v) 1:20的比例加入純凈水，攪拌均勻后置于容器中，密封放入高壓滅菌鍋中在125°C下保溫，0.5h后取出。
[0027](3)超聲波提取:
高溫浸提結(jié)束后，在超聲功率550W、溫度100°C條件下超聲處理0