-(4-氟苯基)環(huán)丙烷-1，1-二甲酰胺的代謝物的制作方法
【專利說明】N- (4- {[6, 7-雙（甲基氧基）喹啉-4-基]氧基}苯 基）-N' -(4-氟苯基）環(huán)丙烷-1,1-二甲釀胺的代謝物
[0001] 優(yōu)先權(quán)要求
[0002] 本申請要求享有2013年3月15日提交的系列號為61/792,413的美國申請的優(yōu) 先權(quán)。上述申請的全部內(nèi)容并入本文。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003] 本公開內(nèi)容涉及N-(4-{[6,7-雙（甲基氧基）喹啉-4-基]氧基}苯 基）-N' -(4-氟苯基）環(huán)丙烷-1，1-二甲酰胺的代謝物，其為c-Met抑制劑。
【背景技術(shù)】
[0004] 傳統(tǒng)上，癌癥治療的顯著改善與鑒定通過新穎機制起作用的治療劑相關(guān)。在癌癥 治療中可利用的一種機制是蛋白激酶活性的調(diào)節(jié)，因為通過蛋白激酶激活的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)致 腫瘤細胞的許多特性。蛋白激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在例如甲狀腺癌、胃癌、頭頸癌、肺癌、乳腺癌、前 列腺癌和結(jié)腸直腸癌中以及在腦腫瘤細胞的生長和增殖中是特別相關(guān)的。
[0005] 蛋白激酶可以被分類為受體型或非受體型。受體型酪氨酸激酶由具有不同生物活 性的大量跨膜受體組成。關(guān)于受體型酪氨酸激酶的詳細討論，參見Plowman等，DN&P7(6): 334-339,1994。由于蛋白激酶及其配體在各種細胞活動中發(fā)揮關(guān)鍵作用，因此蛋白激酶酶 活性的失調(diào)可導(dǎo)致細胞性質(zhì)改變，如與癌癥相關(guān)的不受控制的細胞生長。除了腫瘤指征之 外，被改變的激酶信號傳導(dǎo)牽涉到許多其它的病理疾病，包括例如免疫病癥、心血管疾病、 炎性疾病和退行性疾病。因此，蛋白激酶對于小分子藥物研發(fā)來說是具有吸引力的目標(biāo)。對 關(guān)于抗血管生成及抗增殖活性的小分子調(diào)節(jié)來說特別具有吸引力的目標(biāo)包括受體型酪氨 酸激酶Ret、c-Met和VEGFR2。
[0006] 激酶c-Met是包括Met、Ron和Sea的異源二聚受體酪氨酸激酶（RTK)的亞家族的 原型成員。對于c-Met的內(nèi)源性配體是肝細胞生長因子（HGF)，一種有效的血管生成誘導(dǎo) 物。HGF與c-Met的結(jié)合誘導(dǎo)受體經(jīng)由自磷酸化而激活，導(dǎo)致受體依賴性信號傳導(dǎo)增加，其 促進細胞生長和侵襲。已顯示抗HGF抗體或HGF拮抗劑在體內(nèi)抑制腫瘤轉(zhuǎn)移(參見Maulik 等，Cytokine&GrowthFactorReviews，2002,13,41-59)。已表明c-Met、VEGFR2 和 / 或 Ret在很多種腫瘤類型上過表達，包括乳腺癌、結(jié)腸癌、腎癌、肺癌、鱗狀細胞骨髓性白血病、 血管瘤、黑素瘤和星形細胞腫瘤（其包括膠質(zhì)母細胞瘤、巨細胞膠質(zhì)母細胞瘤、膠質(zhì)肉瘤和 具有少突神經(jīng)膠質(zhì)性成分的膠質(zhì)母細胞瘤）。Ret蛋白是具有酪氨酸激酶活性的跨膜受體。 Ret在甲狀腺髓樣癌的大多數(shù)家族性形式中突變。這些突變激活Ret的激酶功能，并將其轉(zhuǎn) 變成致癌形式。
[0007] 因此，特異性抑制、調(diào)控和/或調(diào)節(jié)激酶（特別地包括上述的Ret、c-Met和 VEGFR2)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的小分子化合物作為治療或預(yù)防與異常細胞增殖和血管生成相關(guān)的疾 病狀態(tài)的手段是特別可取的。一種這樣的小分子是XL184,別稱為N-(4-{[6,7-雙（甲基氧 基）喹啉-4-基]氧基}苯基）-N' _(4_氣苯基）環(huán)丙烷-1，1-二甲酰胺，且按名稱是卡 博替尼（cabozantinib，COMETRIQ?)，其是卡博替尼的L-蘋果酸鹽?？ú┨婺峋哂腥缦禄?學(xué)結(jié)構(gòu)：
[0008]
[0009] 在2012年十一月，卡博替尼在美國獲得監(jiān)管機構(gòu)的批準(zhǔn)，用于治療進行性轉(zhuǎn)移的 甲狀腺髓樣癌?？ú┨婺岬钠渌R床試驗正在進行中。
[0010]W0 2005/030140描述了卡博替尼的合成（實施例48)，并且還公開了這種分子抑 制、調(diào)控和/或調(diào)節(jié)激酶的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的治療活性（Assay，表4,條目289)。實施例48在TO 2005/030140中的第段。
[0011] 仍然需要鑒定對卡博替尼表現(xiàn)出類似活性曲線的化合物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 涉及卡博替尼的代謝物的本發(fā)明滿足這些及其它需求。
[0013] 在這方面的一個實施方案中，所述代謝物為式la的化合物
[0014]
[0015] 具有一種或多種以下屬性：
[0016] a)RiSR2之一是H、S03H或葡萄糖醛酸部分，且另一者為Me;
[0017] b) R3是 0H 或 0S0 3H ;
[0018] (：)1?4是0，條件是當(dāng)1?4為0時，N是N+;
[0019] d)R5是 0H 或 0S03H;且
[0020] 6)1?6是 0H 或 0S03H。
[0021] 在這方面的另一實施方案中，所述代謝物為式lb的化合物
[0022]
[0023]其中：
[0024] a) &或R 2是Me ;或者R R 2之一是H、SO 3H或葡萄糖醛酸部分，且另一者為Me ;
[0025] b) R3是H、0H或0S0 3H ;
[0026] c)R4不存在或為0，條件是當(dāng)心為0時，N是N+;且
[0027] (1)1?6是11或Me。
[0028] 在這方面的另一實施方案中，所述代謝物為式Ic的化合物
[0029]
[0030]其中：
[0031] &)尺5是0H或0S03H;且
[0032]幻&是0H或0S03H;且
[0033] c)馬是H、SO 3H或葡萄糖醛酸部分。
[0034] 在一方面，本發(fā)明涉及具有式Ia、lb或Ic的卡博替尼的分離代謝物。
[0035] 在一個實施方案中，卡博替尼的代謝物選自：
[0036]
[0037] 其中GA是葡萄糖醛酸部分，如在例如下式中，
[0038]
[0039] 在另一方面，本發(fā)明涉及選自以下的化合物：
[0040]
[0041]
[0042] 其中GA是葡萄糖醛酸部分。
[0043] 在另一方面，本發(fā)明涉及治療與不受控制、異常和/或不需要的細胞活動相關(guān)聯(lián) 的疾病或病癥的方法，所述方法包括對有這種需要的哺乳動物施用治療有效量的化合物， 所述化合物為卡博替尼的代謝物。在一個實施方案中，所述代謝物選自：
[0044]
[0046] 或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0047] 在另一方面，本發(fā)明涉及包含卡博替尼的治療活性代謝物和至少一種藥學(xué)上可接 受的載體的藥物組合物。在一個實施方案中，所述代謝物選自：
[0048]
[0049] 或其藥學(xué)上可接受的鹽和至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
[0050] 在另一方面，本發(fā)明涉及鑒定卡博替尼的代謝物的方法，其包括：
[0051] 對哺乳動物施用卡博替尼；
[0052] 在哺乳動物中檢測或測量卡博替尼的代謝物在哺乳動物的組織或體液中的水平 或濃度；
[0053] 其中所述代謝物選自：
[0054]
[0055] 其中GA是葡萄糖醛酸部分。
[0056] 所述化合物可另外用在其它方法中；例如，在生物測定方法中用于測定測試化合 物的激酶抑制活性或者在相關(guān)方法中用作內(nèi)標(biāo)。
【具體實施方式】
[0057] 在一方面，本發(fā)明涉及卡博替尼的代謝物，特別是人體代謝物。因此，所述代謝物 在下文可以被稱為"人體代謝物"。卡博替尼的人體代謝物包括在根據(jù)有關(guān)給藥和監(jiān)測的臨 床方案（包括本文描述的那些）攝取或施加卡博替尼之后形成于人受試者的身體中的卡博 替尼的代謝物。在各種實施方案中，該術(shù)語包括在體內(nèi)形成的分子種類，而無論在特定試驗 中甚至是否檢測到或分析了這些種類。還可預(yù)期的是，一些代謝物對于特定的個體來說是 獨特的，反映了不同的基因組成和各種酶的存在及活性，包括參與代謝的細胞色素P450和 UGT酶。因此，人體代謝物涵蓋在人體中形成的所有這類代謝物。
[0058] 方案1中描述一些人體代謝物。這些人體代謝物是在卡博替尼的臨床研究期間鑒 定的，通過特別是來自于人血漿、尿和糞便的代謝分析，卡博替尼在方案1中呈現(xiàn)為化合物 1〇
[0059]方案1
[0060]
[0061]在各種實施方案中，卡博替尼代謝物（包括方案1中描述的那些）是自身體組織 和體液分離的，和/或是根據(jù)技術(shù)人員現(xiàn)有的方法以合成方式制備的。可以對組織和液體 樣本實施各種各樣的分離方法以提供樣本供進一步分析，如核磁共振、氣相色譜（GC)、液相 色譜（LC)和質(zhì)譜。在此類樣本中，代謝物含在基本上缺少任何其它代謝物存在的組合物 中?？赏ㄟ^物理方法對代謝物的存在進行定量，如測量放射性同位素的核衰變、測量折射 率、火焰離子化、離子化和磁場中的偏轉(zhuǎn)、紫外線（UV吸收）等。
[0062]在各種實施方案中，以具有相當(dāng)程度的純度的結(jié)晶或溶液形式提供人體代謝物。 有機合成途徑可用于制備相對純形式的化合物，例如純度為80%或更高、90%或更高、95% 或更高，或者為99%或更高。可以實施重結(jié)晶及其它純化方法以提供基本上100%純的化 合物。這類合成方法和純化技術(shù)是本領(lǐng)域中公知的。
[0063] 在各種實施方案中，以基本上純的形式提供代謝物。"基本上純"意指代謝物純度 足以獲得FDA批準(zhǔn)，并且基本上不含有污染物或其它物質(zhì)?；蛘撸?基本上純"意指雜質(zhì)的水 平?jīng)]有不利或不可接受地影響化合物在安全性、有效性、穩(wěn)定性方面的性質(zhì)及其它所需的 性質(zhì)。
[0064] 在一個實施方案中，本發(fā)明涉及如方案1中描述的分離代謝物。在這一及其它實 施方案中，所述代謝物選自：
[0065]
[0066]
[0067] 其中GA是葡萄糖醛酸部分。
[0068] 更具體地，所述代謝物選自：
[0069]
[0070] 在特定的實施方案中，所述分離代謝物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0071 ] 在另一特定的實施方案中，所述分離代謝物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0072] 在另一特定的實施方案中，所述分離代謝物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0073] 在另一特定的實施方案中，所述分離代謝物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0074] 在另一特定的實施方案中，所述分離代謝物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0075] 在另一特定的實施方案中，所述分離代謝物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0076] 在另一特定的實施方案中，所述分離代謝物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0077] 在另一特定的實施方案中，所述分離代謝物是
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0078] 本發(fā)明的方法包括對哺乳動物（如人）施用卡博替尼或卡博替尼代謝物，并通過 測量代謝物之一在哺乳動物的組織或體液中的濃度水平來檢測代謝物。體液包括但不限于 血漿、膽汁、尿和糞便，而組織包括但不限于肝微粒體、肝細胞和灌注肝。在各種實施方案 中，用各種同位素對代謝物進行同位素標(biāo)記以協(xié)助檢測或定量組織或體液中的代謝物。因 此，代謝物包括用于由核衰變產(chǎn)物檢測或鑒定特定代謝物的目的而用14c或3H(氚）標(biāo)記的 那些。代謝物還包括用13c或2H(氘）標(biāo)記的代謝物，以便于進行化合物的核磁共振和/或 質(zhì)譜分析。如本文所用，氘化意指用氘取代，并且氚化意指用氚取代。在各種其它實施方案 中，如方案1中描述的本發(fā)明的代謝物還包括它們的鹽、互變異構(gòu)體和同位素標(biāo)記的變體 (包括14c、13c、3h或2H)。
[0079] 更具體地，在一個實施方案中，本發(fā)明提供鑒定卡博替尼的代謝物的方法，其包 括：
[0080] 對哺乳動物施用卡博替尼；
[0081] 在哺乳動物中檢測或測量卡博替尼的代謝物在哺乳動物的組織或體液中的水平 或濃度；
[0082] 其中所述代謝物選自：
[0083]
[0085] 其中GA是葡萄糖醛酸部分。在所述方法中，體液選自血漿、膽汁、尿和糞便。在這 些及其它方法中，采用常規(guī)的分析技術(shù)鑒定代謝物，包括同位素標(biāo)記和HPLC/MS。
[0086] 更具體地，所述代謝物選自：
[0087]
[0088] 本發(fā)明的另一方面是調(diào)節(jié)激酶的體內(nèi)活性的方法，所述方法包括對受試者施用有 效量的卡博替尼代謝物，其為選自以下的化合物：
[0089]
[0090」

[0091] 或包含這種化合物的藥物組合物。
[0092] 在這方面的一個實施方案中，調(diào)節(jié)激酶的體內(nèi)活性包括抑制所述激酶。
[0093] 在這