一種用于酶固定的高分子磁性微球及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種磁性微球及其制備方法，更具體地說，本發(fā)明涉及一種用于酶固定的高分子磁性微球及其制備方法，屬于高分子磁性微球技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]高分子磁性微球是近年發(fā)展起來的一種新型功能材料。微球內(nèi)部含有一個磁核，因此，在外界磁場的作用下，微球能夠方便地和底液分離；同時，微球的高分子層表面可修飾多種活性基團，使微球能和細胞、酶、蛋白質(zhì)、抗體、核酸等生物物質(zhì)偶聯(lián)，并能在磁場作用下實現(xiàn)分離，其操作過程簡便，分離效率遠優(yōu)于常規(guī)分離方法。因此，磁性微球在生化領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。目前，磁性微球的制備方法主要有包埋法、懸浮聚合法、浸漬法和生物合成法。同其它微球制備方法相比，懸浮聚合法具有顯著的優(yōu)點。該法能夠有效地控制微球的粒徑范圍。并能控制微球表面活性基團的種類。故采用懸浮聚合法制備磁性微球倍受重視。本專利采用懸浮分散聚合法，在磁流體Fe3O存在下，以乙醇、水為分散體系，以聚乙二醇為分散劑和穩(wěn)定劑，并采用超聲波預(yù)處理技術(shù)，營造磁流體表面的兩親性環(huán)境，使苯乙烯和丙烯酸的共聚反應(yīng)能夠在Fe3O磁性顆粒表面順利進行。所制得的磁性微球粒徑均勻，磁響應(yīng)性強，其表面含有豐富的活性基團-C00H，經(jīng)處理后可以和多種生物物質(zhì)偶聯(lián)，在生物活性物質(zhì)分離純化、酶固定化等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
[0003]國家知識產(chǎn)權(quán)局于2013.7.24公開了一件公開號為CN103212377A，名稱為“一種瓊脂糖免疫磁性微球的制備方法及其應(yīng)用”的發(fā)明，該發(fā)明涉及一種微球的制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明是要解決現(xiàn)有純化的單克隆抗體的過程復(fù)雜，收率低，成本高且偶聯(lián)劑有劇毒的技術(shù)問題。制備方法:一、制備油酸鐵前驅(qū)體；二、制備磁流體；三、制備油相和水相；四、制備瓊脂糖磁性微球；五、制備活化交聯(lián)的瓊脂糖磁性微球；六、制備接入間隔臂的瓊脂糖磁性微球；七、制備瓊脂糖免疫磁性微球。本發(fā)明的一種瓊脂糖免疫磁性微球用于純化基因工程重組曲妥珠單克隆抗體。本發(fā)明制備瓊脂糖免疫磁性微球應(yīng)用于單克隆抗體分離純化領(lǐng)域。
[0004]上述磁性微球主要應(yīng)用于單克隆抗體分離純化，不適合用于酶固定領(lǐng)域。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明旨在解決上述磁性微球不合適用于酶固定領(lǐng)域的問題，提供一種高分子磁性微球，該磁性微球能夠應(yīng)用于酶固定領(lǐng)域。
[0006]為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，其具體的技術(shù)方案如下:
一種高分子磁性微球，其特征在于:包括以下按照重量份數(shù)計的原料:
苯乙烯35-45份丙烯酸20-30份
二乙烯基苯15-27份
過氧化二苯甲酰5-9份聚乙二醇40010-22份磁流體15-20份乙醇20-30份水30-50份。
[0007]優(yōu)選的，一種高分子磁性微球，其特征在于:包括以下按照重量份數(shù)計的原料: 苯乙烯39-42份丙烯酸22-28份
二乙烯基苯18-22份
過氧化二苯甲酰7-9份
聚乙二醇40015-21份磁流體18-20份乙醇21-27份水32-40份。
[0008]—種高分子磁性微球的制備方法，其特征在于:包括以下工藝步驟:
A、按照配方稱取磁流體、聚乙二醇400、乙醇和水并轉(zhuǎn)移至三頸燒瓶中，超聲分散10_15min ；
B、在氮氣氛保護下相繼加入苯乙烯、丙烯酸、二乙烯基苯和過氧化二苯甲酰，然后開動機械攪拌分散10_15min，并將反應(yīng)溫度升至到75°C ；
C、控制攪拌速度在200-300r/min，75°C下反應(yīng)3_5h，80°C下反應(yīng)3_5h，85°C下反應(yīng)4_6h ；
D、反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)溫度降至室溫，得到棕黃色乳液，磁過濾出固體樹脂，反復(fù)洗滌，得到磁性微球。
[0009]本發(fā)明帶來的有益技術(shù)效果:
本發(fā)明解決了現(xiàn)有主要應(yīng)用于單克隆抗體分離純化的磁性微球不合適用于酶固定領(lǐng)域的問題。本發(fā)明的磁性微球非常適合用于酶固定領(lǐng)域。
【具體實施方式】
[0010]實施例1
一種高分子磁性微球，包括以下按照重量份數(shù)計的原料:
苯乙烯35份丙烯酸20份二乙烯基苯15份
過氧化二苯甲酰5份
聚乙二醇40010份磁流體15份乙醇20份水30份。
[0011]實施例2
一種高分子磁性微球，包括以下按照重量份數(shù)計的原料:苯乙稀45份丙烯酸30份二乙烯基苯27份
過氧化二苯甲酰9份
聚乙二醇40022份磁流體20份乙醇30份水50份。
[0012]實施例3
一種高分子磁性微球，包括以下按照重量份數(shù)計的原料:
苯乙烯40份丙烯酸25份二乙烯基苯21份
過氧化二苯甲酰7份
聚乙二醇40016份磁流體17.5份乙醇25份水40份。
[0013]實施例4
一種高分子磁性微球，包括以下按照重量份數(shù)計的原料:
苯乙烯37份丙烯酸21份二乙烯基苯25份
過氧化二苯甲酰8份
聚乙二醇40012份磁流體19份乙醇28份水46份。
[0014]實施例5
一種高分子磁性微球，包括以下按照重量份數(shù)計的原料:
苯乙烯39份丙烯酸22份二乙烯基苯18份
過氧化二苯甲酰7份
聚乙二醇40015份磁流體18份乙醇21份水32份。
[0015]實施例6 一種高分子磁性微球，包括以下按照重量份數(shù)計的原料:
苯乙烯42份丙烯酸28份二乙烯基苯22份
過氧化二苯甲酰9份
聚乙二醇40021份磁流體20份乙醇27份水40份。
[0016]實施例7
一種高分子磁性微球，包括以下按照重量份數(shù)計的原料:
苯乙烯40.5份丙烯酸25份二乙烯基苯20份
過氧化二苯甲酰8份
聚乙二醇40018份磁流體19份乙醇24份水36份。
[0017]實施例8
一種高分子磁性微球，包括以下按照重量份數(shù)計的原料:
苯乙烯40份丙烯酸23份二乙烯基苯15份
過氧化二苯甲酰7.5份
聚乙二醇40017份磁流體18.5份乙醇26份水39份。
[0018]實施例9
一種高分子磁性微球的制備方法，包括以下工藝步驟:
A、按照配方稱取磁流體、聚乙二醇400、乙醇和水并轉(zhuǎn)移至三頸燒瓶中，超聲分散1min ；
B、在氮氣氛保護下相繼加入苯乙烯、丙烯酸、二乙烯基苯和過氧化二苯甲酰，然后開動機械攪拌分散lOmin，并將反應(yīng)溫度升至到75°C ;
C、控制攪拌速度在200r/min，75°C下反應(yīng)3h，80°C下反應(yīng)3h，85°C下反應(yīng)4h；
D、反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)溫度降至室溫，得到棕黃色乳液，磁過濾出固體樹脂，反復(fù)洗滌，得到磁性微球。
[0019]實施例10 一種高分子磁性微球的制備方法，包括以下工藝步驟:
A、按照配方稱取磁流體、聚乙二醇400、乙醇和水并轉(zhuǎn)移至三頸燒瓶中，超聲分散15min ；
B、在氮氣氛保護下相繼加入苯乙烯、丙烯酸、二乙烯基苯和過氧化二苯甲酰，然后開動機械攪拌分散15min，并將反應(yīng)溫度升至到75°C ;
C、控制攪拌速度在300r/min，75°C下反應(yīng)5h，80°C下反應(yīng)5h，85°C下反應(yīng)6h；
D、反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)溫度降至室溫，得到棕黃色乳液，磁過濾出固體樹脂，反復(fù)洗滌，得到磁性微球。
[0020]實施例11
一種高分子磁性微球的制備方法，包括以下工藝步驟:
A、按照配方稱取磁流體、聚乙二醇400、乙醇和水并轉(zhuǎn)移至三頸燒瓶中，超聲分散12.5min ；
B、在氮氣氛保護下相繼加入苯乙烯、丙烯酸、二乙烯基苯和過氧化二苯甲酰，然后開動機械攪拌分散12.5min，并將反應(yīng)溫度升至到75°C ；
C、控制攪拌速度在250r/min，75°C下反應(yīng)4h，80°C下反應(yīng)4h，85°C下反應(yīng)5h；
D、反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)溫度降至室溫，得到棕黃色乳液，磁過濾出固體樹脂，反復(fù)洗滌，得到磁性微球。
[0021]實施例12
一種高分子磁性微球的制備方法，包括以下工藝步驟:
A、按照配方稱取磁流體、聚乙二醇400、乙醇和水并轉(zhuǎn)移至三頸燒瓶中，超聲分散Ilmin ；
B、在氮氣氛保護下相繼加入苯乙烯、丙烯酸、二乙烯基苯和過氧化二苯甲酰，然后開動機械攪拌分散14min，并將反應(yīng)溫度升至到75°C ;
C、控制攪拌速度在210r/min，75°C下反應(yīng)4.5h，80°C下反應(yīng)3.5h，85°C下反應(yīng)5.5h ；
D、反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)溫度降至室溫，得到棕黃色乳液，磁過濾出固體樹脂，反復(fù)洗滌，得到磁性微球。
【主權(quán)項】
1.一種高分子磁性微球，其特征在于:包括以下按照重量份數(shù)計的原料:苯乙烯35-45份丙烯酸20-30份 二乙烯基苯15-27份 過氧化二苯甲酰5-9份 聚乙二醇40010-22份磁流體15-20份乙醇20-30份水30-50份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高分子磁性微球，其特征在于:包括以下按照重量份數(shù)計的原料:苯乙烯39-42份丙烯酸22-28份 二乙烯基苯18-22份 過氧化二苯甲酰7-9份 聚乙二醇40015-21份磁流體18-20份乙醇21-27份水32-40份。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高分子磁性微球的制備方法，其特征在于:包括以下工藝步驟: A、按照配方稱取磁流體、聚乙二醇400、乙醇和水并轉(zhuǎn)移至三頸燒瓶中，超聲分散10-15min ； B、在氮氣氛保護下相繼加入苯乙烯、丙烯酸、二乙烯基苯和過氧化二苯甲酰，然后開動機械攪拌分散10_15min，并將反應(yīng)溫度升至到75°C ； C、控制攪拌速度在200-300r/min，75°C下反應(yīng)3_5h，80°C下反應(yīng)3_5h，85°C下反應(yīng)4_6h ； D、反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)溫度降至室溫，得到棕黃色乳液，磁過濾出固體樹脂，反復(fù)洗滌，得到磁性微球。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于酶固定的高分子磁性微球及其制備方法，屬于高分子磁性微球技術(shù)領(lǐng)域。該磁性微球包括以下按照重量份數(shù)計的原料：苯乙烯35-45份、丙烯酸20-30份、二乙烯基苯15-27份、過氧化二苯甲酰5-9份、聚乙二醇400？10-22份、磁流體15-20份、乙醇20-30份、水30-50份。本發(fā)明解決了現(xiàn)有主要應(yīng)用于單克隆抗體分離純化的磁性微球不合適用于酶固定領(lǐng)域的問題。本發(fā)明的磁性微球非常適合用于酶固定領(lǐng)域。
【IPC分類】B01J13/14, C08F212/08, C08F222/36, C08F220/06, C12N11/08
【公開號】CN105131166
【申請?zhí)枴緾N201510691926
【發(fā)明人】曹先軍, 王鳳德, 趙奕, 崔曉靜, 高川, 劉詠梅
【申請人】藍星（成都）新材料有限公司
【公開日】2015年12月9日
【申請日】2015年10月23日