一種從肉蓯蓉低聚糖漿中制備尿囊素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離純化技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種從肉蓯蓉低聚糖漿中制備尿囊素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]尿囊素又名5-尿基乙內(nèi)酰胺、脲基醋酸內(nèi)酰胺、脲基海因、脲咪唑二酮，是一種乙內(nèi)酰脲衍生物。是一種重要的精細(xì)化工產(chǎn)品，廣泛用于醫(yī)藥、化妝品、農(nóng)業(yè)和工業(yè)防腐劑生產(chǎn)。
[0003]在醫(yī)藥方面:尿囊素具有促進細(xì)胞生長，加快傷口愈合，軟化角質(zhì)蛋白等生理功能，是皮膚創(chuàng)傷的良好愈合劑和抗?jié)兯巹??？捎米骶徑夂椭委熎つw干燥癥、鱗肩性膚疾患、皮膚潰瘍、消化道潰瘍及炎癥，對骨髓炎、糖尿病、肝硬化、痤瘡均有較好療效。
[0004]在化妝品方面:由于尿囊素是一種兩性化合物，能結(jié)合多種物質(zhì)形成復(fù)鹽，具有避光、殺菌防腐、止痛、抗氧化作用，能使皮膚保持水分，滋潤和柔軟，是美容美發(fā)等化妝品的特效添加劑，廣泛用于雀斑霜、粉刺液、香波、香皂、牙膏、刮臉洗劑、護發(fā)劑、收斂劑、抗汗除臭洗劑等的添加劑。添加尿囊素的化妝品具有保護組織、親水、吸水和防止水分散發(fā)等作用；添加尿囊素的發(fā)乳、發(fā)膏、洗發(fā)露，對頭發(fā)有保護作用，可使頭發(fā)不分叉、不斷發(fā)；添加尿囊素的唇膏、面霜能使皮膚、嘴唇柔軟且富有彈性，并有美麗的光澤。
[0005]在農(nóng)業(yè)上:尿囊素是優(yōu)良的植物生長調(diào)節(jié)劑，可刺激植物生長，對小麥、柑桔、水稻、蔬菜、大豆等均有顯著增產(chǎn)效果，并有固果，早熟作用。
[0006]目前，尿囊素的合成方法有:(1)尿酸高錳酸鉀氧化法:該法應(yīng)用高錳酸鉀作為氧化劑，反應(yīng)屬于強氧化反應(yīng)，不易控制，不適合大規(guī)模生產(chǎn)，而且尿酸成本高并且不易得至IJ。(2)乙醛酸鈣鹽酸溶解法:該法分兩步進行，先制備乙醛酸鈣，再用鹽酸酸化與尿素縮合生成尿囊素，該法在反應(yīng)過程中需要強酸強堿，不易操作，而且產(chǎn)率低，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。(3)尿素二氯乙酸加熱法:該法一步生產(chǎn)尿囊素，但是反應(yīng)需要甲醇作為溶劑，并需加熱40-50°C，使反應(yīng)過程存在爆炸危險，而且該反應(yīng)需要減壓蒸餾，操作復(fù)雜，而且產(chǎn)率低，不適合大規(guī)模生產(chǎn)。(4)尿素乙醛酸縮合法:該法是當(dāng)前尿囊素生產(chǎn)廠家普遍采用的方法，該法通過尿素與乙醛酸一步縮合生產(chǎn)尿囊素，應(yīng)用傳統(tǒng)的質(zhì)子酸如硫酸、磷酸、鹽酸等強酸以及不同比例質(zhì)子酸的混合酸作為催化劑，可以得到相對產(chǎn)率較高的尿囊素，而且具有操作簡單，原料易得，產(chǎn)率相對較高的優(yōu)點，但是這些路線也存在著合成母液酸性高，三廢處理困難的問題。
[0007]因此，如何研發(fā)一種操作簡單、原料易得、產(chǎn)率較高的尿囊素的生產(chǎn)方法已成為目前亟待解決的問題。
[0008]CN1861581A公開了從肉蓯蓉中制備尿囊素和尿囊素提取物的方法，其制備過程包括:以肉從蓉為原料，經(jīng)水或任何比例的醇-水混合溶劑提取，提取液經(jīng)濃縮，加乙醇沉淀雜質(zhì)后或不經(jīng)乙醇沉淀雜質(zhì)直接通過大孔吸附樹脂分離，收集水洗脫部分，其中含尿囊素的組份再通過顆粒活性炭吸附分離，先以水洗脫，再以10-50%的乙醇洗脫，收集含尿囊素的流份，冷凍干燥，得含尿囊素的提取物，用乙醇或甲醇重結(jié)晶得尿囊素。然而該方法中，由于還含有多種其它化合物，導(dǎo)致尿囊素的純度不高。
[0009]目前也有研究將含尿囊素的洗脫液進行細(xì)化提取，例如張慧文研究了鹽生肉蓯蓉的化學(xué)成分及指紋圖譜，其采用鹽生肉蓯蓉藥材，粉碎后，用甲醇依次用7倍量和5倍量回流提取3次，合并濾液，減壓回收甲醇至有白色針尖結(jié)晶析出，用甲醇和水反復(fù)結(jié)晶得甘露醇化合物，再用溫水分散均勻，裝入大孔吸附樹脂柱，依次以水、乙醇洗脫，減壓回收乙醇，水洗脫部分，以1:1比例拌入硅膠中硅膠柱層析，以CHC13-CH30H為洗脫劑梯度洗脫，將其中部分流份合并后濃縮有白色固體析出，用甲醇結(jié)晶，得白色針狀結(jié)晶，即尿囊素(參見張慧文，“鹽生肉蓯蓉的化學(xué)成分及指紋圖譜研究”，內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文，2008年)。盡管其對尿囊素進行了提純，然而，由于其仍用到有機溶劑，不僅使尿囊素不純，而且工藝復(fù)雜，成本較高。
[0010]肉蓯蓉低聚糖漿溶液是將肉蓯蓉原料粉碎，乙醇溶液提取，大孔吸附樹脂吸附苯乙醇苷，經(jīng)水洗脫樹脂而得的以低聚糖為主，同時含有其他小分子化合物(甘露醇、尿囊素)的糖漿。CN104262414A公開了一種從肉蓯蓉中同時制備苯乙醇苷、甘露醇、低聚糖漿及多糖的方法，其試劑僅用乙醇，可操作性強，降低了肉蓯蓉生產(chǎn)成本，縮短了生產(chǎn)周期，提高了肉蓯蓉中主要成分的利用率，也為其后續(xù)產(chǎn)物例如尿囊素的分離提供了可能。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011]為了克服現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，本發(fā)明提供了一種工藝簡單、生產(chǎn)成本低、可以快速實現(xiàn)尿囊素與肉蓯蓉低聚糖、甘露醇的分離、得到高純度尿囊素、便于工業(yè)化應(yīng)用的一種從肉蓯蓉低聚糖漿中制備尿囊素的方法。
[0012]為達此目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案:
[0013]本發(fā)明提供了一種從肉蓯蓉低聚糖漿中制備尿囊素的方法，所述方法以肉蓯蓉低聚糖漿溶液為原料，經(jīng)活性炭吸附、水解吸、醇沉和結(jié)晶，將結(jié)晶后的上清液干燥，得到所述尿囊素。
[0014]本發(fā)明中是以肉蓯蓉低聚糖漿溶液為原料進行尿囊素的制備，采用肉蓯蓉低聚糖漿溶液作為原料時，相比直接采用粉碎的肉蓯蓉藥材本身，能夠減少肉蓯蓉中其他成分(如多糖，苯乙醇糖苷)對分離尿囊素的影響，從而提高尿囊素的純度，并降低分離純化的成本核算；同時，提高了肉蓯蓉低聚糖的綜合利用價值。
[0015]本發(fā)明所述肉蓯蓉低聚糖漿溶液的制備方法在CN104262414A中已公開，制備方法為利用乙醇溶液對肉蓯蓉原料進行提取，提取液濃縮，而后將濃縮液加入大孔吸附樹脂柱中，以去離子水洗脫，洗脫液濃縮，所得濃縮液即為低聚糖漿溶液。具體包括以下步驟:
[0016]a、將肉蓯蓉原料粉碎至10?60目，利用含量為20?70%的乙醇溶液在20?80°C提取30?180min，乙醇溶液與肉蓯蓉的液固比為8:1?40: 1，提取液濃縮，得到濃縮液I和殘渣II，其中，濃縮液I中主要含有單糖、低聚糖及苯乙醇苷；
[0017]b、將步驟a得到的濃縮液I加入到大孔吸附樹脂柱中，大孔吸附樹脂柱層析介質(zhì)的高徑比為5:1?8:1，上樣體積為1?2倍柱體積，以2?10倍柱體積的去離子水洗脫，流速控制在每小時0.2?1.5倍柱體積，收集水洗脫液，減壓濃縮，得到濃縮液III，即為低聚糖漿溶液。
[0018]本發(fā)明摒棄了以往采用乙醇進行解吸、洗脫的方式，直接采用水進行解吸，利用尿囊素易溶于熱水的特性，可以在提取尿囊素的過程中，減少乙醇的用量，從而大大降低分離純化尿囊素的成本。
[0019]本發(fā)明中，所述肉蓯蓉低聚糖漿來自于肉蓯蓉的肉質(zhì)莖。
[0020]本發(fā)明所述肉蓯蓉優(yōu)選為荒漠肉蓯蓉、鹽生肉蓯蓉、蘭州肉蓯蓉或沙蓯蓉中的任意一種或至少兩種的組合，但不局限于此。
[0021]作為優(yōu)選的技術(shù)方案，本發(fā)明所述方法包括以下步驟:
[0022](1)采用活性炭對肉蓯蓉低聚糖漿溶液進行吸附；
[0023](2)用水洗脫步驟⑴中的活性炭，收集洗脫液；
[0024](3)將步驟(2)得到的洗脫液濃縮，醇沉，收集上清液；
[0025](4)將步驟(3)的上清液濃縮，結(jié)晶，將結(jié)晶后的上清液干燥，得到所述尿囊素。
[0026]本發(fā)明中，步驟(1)所述活性炭為顆粒狀活性炭。
[0027]優(yōu)選地，相對于1