一種高含量梔子苷結(jié)晶的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種高含量梔子苷結(jié)晶的制備方法，屬于植物提取純化技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]梔子，又稱黃梔子、山梔、白蟾，是茜草科植物梔子的果實。梔子中含有40余種生理活性物質(zhì)，其中國內(nèi)外所公認(rèn)的中藥梔子有效成分為環(huán)烯醚萜類物質(zhì)。梔子所含的環(huán)烯醚萜類物質(zhì)包括梔子苷、京尼平苷、羥異梔子苷、梔子苷酸等，其中活性成分最高的是梔子苷或京尼平苷。梔子苷通過葡萄糖苷酶水解為京尼平(梔子苷元)，即梔子苷必須在腸道內(nèi)代謝為梔子苷元后才能發(fā)揮療效，具有保肝利膽、降壓、通便、緩解II型糖尿病、消炎、抗血栓、抗腫瘤、抗衰老的癥狀等功效，具有極高的藥用價值，同時梔子苷又是生產(chǎn)梔子藍(lán)、梔子紅、梔子紫的中間體和生藥品的有效單體。
[0003]目前，梔子鮮果中梔子苷含量為2?3%，梔子干果中梔子苷含量為5?7%，對梔子苷的分離較為成熟的方法是采用大孔樹脂吸附解吸的技術(shù)。選用的樹脂多為弱極性和無極性，文獻(xiàn)報道梔子苷的提純方法主要有:鉛鹽沉淀法、活性炭除雜法、硅膠吸附法等。通過比較研究得出的初步結(jié)論是，上述方法作為研究尚可，但無法進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。其主要問題在于:工藝復(fù)雜、物耗過大、收得率低，采用柱層析法可以有效地將梔子苷的含量由50%純化到95%左右，但是處理能力小，投入成本過高，所得產(chǎn)品含量尚且達(dá)不到市場的要求。
[0004]其他對于梔子苷結(jié)晶的生產(chǎn)工藝，多用乙酸乙酯加熱溶解梔子苷至飽和，飽和液經(jīng)冷凍后溶解度下降而結(jié)晶。該方法的缺點(diǎn)主要是乙酸乙酯對梔子苷的溶解度太低，即使加熱也需要30倍以上梔子苷的重量，并不適合用來做結(jié)晶溶劑，而且結(jié)晶過程需要對熱飽和溶液冷凍，降低乙酸乙酯對梔子苷溶解度的方法來實現(xiàn)結(jié)晶，這種方法生產(chǎn)周期長、結(jié)晶得率低，并不適合工業(yè)生產(chǎn)。其他的結(jié)晶工藝多選用氯仿、丙酮、乙醚等作為結(jié)晶溶劑，由于溶劑本身帶有很大的毒性，不符合食品、藥品的生產(chǎn)規(guī)范?，F(xiàn)階段國內(nèi)梔子苷結(jié)晶體價格非常高，但是供應(yīng)量卻很少，因此尋找開發(fā)一種生產(chǎn)過程安全可靠、生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品質(zhì)量高的生產(chǎn)方法正是市場的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明目的在于提供一種高含量梔子苷結(jié)晶的制備方法，具有生產(chǎn)過程安全、成本低、周期短、產(chǎn)品質(zhì)量高的特點(diǎn)。
[0006]本發(fā)明通過下列技術(shù)方案實現(xiàn):一種高含量梔子苷結(jié)晶的制備方法，經(jīng)過下列各步驟:
(1)將梔子果實粉碎成粗粉，按固液比g/mL計1:5?20加入濃度為50?75v/v%的乙醇，在50?80°C下提取1?3次，合并提取液，再以硅藻土吸附，然后過濾得濾液，將濾液再經(jīng)常規(guī)減壓濃縮，得到梔子苷提取浸膏；
(2)將步驟(1)所得梔子苷提取浸膏用乙酸乙酯和甲醇的混合液進(jìn)行超聲波萃取2?6次，合并萃取液，再經(jīng)減壓濃縮，即得到梔子苷粗品； (3)取步驟(2)所得梔子苷粗品，用質(zhì)量濃度為15%的甲醇溶液在60°C的水浴中溶解得到飽和液；
(4)將步驟(3)所得飽和液趁熱過濾后，冷卻至室溫后按5kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯進(jìn)行一次攪拌結(jié)晶2小時，停止加液并靜置3小時，待針狀晶體出現(xiàn)后，按2kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯進(jìn)行二次攪拌結(jié)晶，直至針狀晶體停止生長，得到結(jié)晶體系；
(5)將步驟(5)所得結(jié)晶體系過濾，得到結(jié)晶，經(jīng)常溫下減壓干燥后，即得到雪白色針狀梔子苷結(jié)晶。
[0007]所述步驟(2)的乙酸乙酯和甲醇的混合液為分析純的乙酸乙酯與甲醇按體積比1: (1?3)混合所得混合液。
[0008]所述步驟(4)的一次攪拌是在轉(zhuǎn)速為30r/min下進(jìn)行攪拌。
[0009]所述步驟(5)的二次攪拌是在轉(zhuǎn)速為100r/min下進(jìn)行攪拌。
[0010]所述步驟(4)和(5)中的過濾是采用200目的濾布袋進(jìn)行過濾。
[0011]本發(fā)明選用混合溶劑純化和結(jié)晶梔子苷，是由于甲醇和乙酸乙酯互溶，梔子苷易溶于甲醇而微溶于乙酸乙酯的特性，用甲醇加熱溶解梔子苷至飽和，通過逐漸加入乙酸乙酯降低甲醇對梔子苷溶解度的原理結(jié)晶梔子苷。
[0012]本發(fā)明具備的優(yōu)點(diǎn)及效果:本發(fā)明選用混合溶劑進(jìn)行結(jié)晶，通過加入乙酸乙酯調(diào)節(jié)甲醇對梔子苷粗品的溶解度，完美解決了結(jié)晶飽和點(diǎn)不易控制的問題，得到的結(jié)晶經(jīng)過檢測梔子苷純度能達(dá)到98.8%以上，從粗品到產(chǎn)品結(jié)晶得率達(dá)88%以上，結(jié)晶產(chǎn)品中梔子苷無有毒物質(zhì)殘留。本發(fā)明的方法只需常溫進(jìn)行，結(jié)晶條件溫和，結(jié)晶成本低、速度快，同時在結(jié)晶過程中無需高溫或低溫，不會對物料造成破壞；具有生產(chǎn)過程安全、操作簡便、成本低、周期短、產(chǎn)品質(zhì)量高、質(zhì)量穩(wěn)定的特點(diǎn)，適于工業(yè)化生產(chǎn)，有較強(qiáng)的市場競爭力和開發(fā)前景。
【具體實施方式】
[0013]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明。
[0014]實施例1
(1)將梔子果實粉碎成粗粉，按固液比g/mL計1:10加入濃度為70v/v%的乙醇，在60°C下提取2次，合并提取液，再以硅藻土吸附，然后過濾得濾液，將濾液再經(jīng)常規(guī)減壓濃縮，得到梔子苷提取浸膏；
(2)將步驟(1)所得梔子苷提取浸膏用乙酸乙酯和甲醇的混合液進(jìn)行超聲波萃取4次，合并萃取液，再經(jīng)減壓濃縮，即得到梔子苷粗品；所述乙酸乙酯和甲醇的混合液為分析純的乙酸乙酯與甲醇按體積比1:2混合所得混合液；
(3)取步驟(2)所得梔子苷粗品1kg，用質(zhì)量濃度為15%的甲醇溶液在60°C的水浴中溶解得到飽和液；
(4)將步驟(3)所得飽和液用200目布袋趁熱過濾后，轉(zhuǎn)移至結(jié)晶罐中，冷卻至室溫后按5kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯在轉(zhuǎn)速為30r/min下進(jìn)行一次攪拌結(jié)晶2小時，停止加液并靜置3小時，待針狀晶體出現(xiàn)后，按2kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯在轉(zhuǎn)速為lOOr/min下進(jìn)行二次攪拌結(jié)晶，直至針狀晶體停止生長，得到結(jié)晶體系；
(5)將步驟(5)所得結(jié)晶體系用200目濾布袋過濾，得到結(jié)晶，經(jīng)常溫下減壓干燥后，SP得到雪白色針狀梔子苷結(jié)晶891g。梔子苷結(jié)晶的純度為99.25%。
[0015]實施例2
(1)將梔子果實粉碎成粗粉，按固液比g/mL計1:5加入濃度為50v/v%的乙醇，在50°C下提取1次，合并提取液，再以硅藻土吸附，然后過濾得濾液，將濾液再經(jīng)常規(guī)減壓濃縮，得到梔子苷提取浸膏；
(2)將步驟(1)所得梔子苷提取浸膏用乙酸乙酯和甲醇的混合液進(jìn)行超聲波萃取2次，合并萃取液，再經(jīng)減壓濃縮，即得到梔子苷粗品；所述乙酸乙酯和甲醇的混合液為分析純的乙酸乙酯與甲醇按體積比1:1混合所得混合液；
(3)取步驟(2)所得梔子苷粗品1kg，用質(zhì)量濃度為15%的甲醇溶液在60°C的水浴中溶解得到飽和液；
(4)將步驟(3)所得飽和液用200目布袋趁熱過濾后，轉(zhuǎn)移至結(jié)晶罐中，冷卻至室溫后按5kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯在轉(zhuǎn)速為30r/min下進(jìn)行一次攪拌結(jié)晶2小時，停止加液并靜置3小時，待針狀晶體出現(xiàn)后，按2kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯在轉(zhuǎn)速為lOOr/min下進(jìn)行二次攪拌結(jié)晶，直至針狀晶體停止生長，得到結(jié)晶體系；
(5)將步驟(5)所得結(jié)晶體系用200目濾布袋過濾，得到結(jié)晶，經(jīng)常溫下減壓干燥后，SP得到雪白色針狀梔子苷結(jié)晶880g。梔子苷結(jié)晶的純度為99.18%ο
[0016]實施例3
(1)將梔子果實粉碎成粗粉，按固液比g/mL計1:20加入濃度為75v/v%的乙醇，在80°C下提取3次，合并提取液，再以硅藻土吸附，然后過濾得濾液，將濾液再經(jīng)常規(guī)減壓濃縮，得到梔子苷提取浸膏；
(2)將步驟(1)所得梔子苷提取浸膏用乙酸乙酯和甲醇的混合液進(jìn)行超聲波萃取6次，合并萃取液，再經(jīng)減壓濃縮，即得到梔子苷粗品；所述乙酸乙酯和甲醇的混合液為分析純的乙酸乙酯與甲醇按體積比1:3混合所得混合液；
(3)取步驟(2)所得梔子苷粗品1kg，用質(zhì)量濃度為15%的甲醇溶液在60°C的水浴中溶解得到飽和液；
(4)將步驟(3)所得飽和液用200目布袋趁熱過濾后，轉(zhuǎn)移至結(jié)晶罐中，冷卻至室溫后按5kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯在轉(zhuǎn)速為30r/min下進(jìn)行一次攪拌結(jié)晶2小時，停止加液并靜置3小時，待針狀晶體出現(xiàn)后，按2kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯在轉(zhuǎn)速為lOOr/min下進(jìn)行二次攪拌結(jié)晶，直至針狀晶體停止生長，得到結(jié)晶體系；
(5)將步驟(5)所得結(jié)晶體系用200目濾布袋過濾，得到結(jié)晶，經(jīng)常溫下減壓干燥后，SP得到雪白色針狀梔子苷結(jié)晶889g。梔子苷結(jié)晶的純度為99.16%ο
【主權(quán)項】
1.一種高含量梔子苷結(jié)晶的制備方法，其特征在于經(jīng)過下列各步驟: (1)將梔子果實粉碎成粗粉，按固液比g/mL計1:5?20加入濃度為50?75v/v%的乙醇，在50?80°C下提取1?3次，合并提取液，再以硅藻土吸附，然后過濾得濾液，將濾液再經(jīng)常規(guī)減壓濃縮，得到梔子苷提取浸膏； (2)將步驟(1)所得梔子苷提取浸膏用乙酸乙酯和甲醇的混合液進(jìn)行超聲波萃取2?6次，合并萃取液，再經(jīng)減壓濃縮，即得到梔子苷粗品； (3)取步驟(2)所得梔子苷粗品，用質(zhì)量濃度為15%的甲醇溶液在60°C的水浴中溶解得到飽和液； (4)將步驟(3)所得飽和液趁熱過濾后，冷卻至室溫后按5kg/h的溶劑添加速率加入分析純乙酸乙酯進(jìn)行一次攪拌結(jié)晶2小時，停止加液并靜置3小時，待針狀晶體出現(xiàn)后，按2kg/h的溶劑添加速率加入乙酸乙酯進(jìn)行結(jié)晶，直至針狀晶體停止生長，得到結(jié)晶體系； (5)將步驟(5)所得結(jié)晶體系過濾，得到結(jié)晶，經(jīng)常溫下減壓干燥后，即得到雪白色針狀梔子苷結(jié)晶。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述步驟(2)的乙酸乙酯和甲醇的混合液為分析純的乙酸乙酯與甲醇按體積比1: (1?3)混合所得混合液。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述步驟(4)的一次攪拌是在轉(zhuǎn)速為30r/min下進(jìn)行攪拌。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述步驟(5)的二次攪拌是在轉(zhuǎn)速為100r/min下進(jìn)行攪拌。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述步驟(4)和(5)中的過濾是采用200目的濾布袋進(jìn)行過濾。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種高含量梔子苷結(jié)晶的制備方法，將梔子果實粉碎后用乙醇提取，再以硅藻土吸附，經(jīng)濃縮得到梔子苷提取浸膏；再用乙酸乙酯和甲醇的混合液萃取得到梔子苷粗品；然后用甲醇溶液溶解得到飽和液，趁熱過濾后，冷卻，加入分析純乙酸乙酯進(jìn)行一次攪拌結(jié)晶，停止加液并靜置數(shù)小時后，加入分析純乙酸乙酯進(jìn)行二次攪拌結(jié)晶，直至針狀晶體停止生長，得到結(jié)晶體系，經(jīng)過濾、減壓干燥后，即得到雪白色針狀梔子苷結(jié)晶。本發(fā)明得到的結(jié)晶經(jīng)過檢測梔子苷純度能達(dá)到98.8%以上，無有毒物質(zhì)殘留。本發(fā)明的方法結(jié)晶條件溫和，成本低、速度快；具有生產(chǎn)過程安全、操作簡便、成本低、周期短、產(chǎn)品質(zhì)量高、質(zhì)量穩(wěn)定的特點(diǎn)，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類】C07H17/04, C07H1/08
【公開號】CN105273014
【申請?zhí)枴緾N201510771204
【發(fā)明人】李定忠
【申請人】云南麥瑞科生物科技有限公司
【公開日】2016年1月27日
【申請日】2015年11月12日