一種新的檸檬苦素類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及從九里香的干燥葉中分離得到的一種具有治 療腎癌作用的巧樣苦素類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 九里香MurrayaexoticaL為蕓香科九里香屬植物，主要分布在我國云南、貴州、 湖南、廣東、廣西、福建、海南、臺灣等省區(qū)，W及亞洲一些熱帶及亞熱帶地區(qū)，其氣香，味苦、 辛，有麻舌感，具有行氣止痛、活血散疲之功效，用于胃痛、風(fēng)濕搏痛，也用于治療牙痛、跌撲 腫痛、蟲蛇咬傷。
[0003] 近年來，中外學(xué)者對九里香的化學(xué)成分進(jìn)行了大量研究，從其葉、根皮、果實等部 位中分離得到了多種化合物，主要包括香豆素類、黃酬類、生物堿類W及揮發(fā)油等。九里香 含有大量的香豆素類成分，運類成分的常見特征為在7-甲氧基或5, 7-二甲氧基香豆素骨 架的C8位帶有異戊二締單位，W氧化、醋化或骨架重排等多種形式存在。九里香含有多種 黃酬類化合物，還含有黃酬巧類成分。九里香的葉中含有大量的黃酬類和香豆素類化合物， 而九里香的根、皮中主要含有生物堿類成分。揮發(fā)油類是九里香的主要化學(xué)成分之一。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種從九里香的干燥葉中分離得到的一種具有治療腎癌作 用的巧樣苦素類化合物及其制備方法。 陽〇化]本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得W實現(xiàn)的：
[0006] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0007]
[0008] 所述的化合物（I)的制備方法，包含W下操作步驟：(a)將九里香的干燥葉粉 碎，用75~85 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和 水飽和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；(b)步驟 (a)中乙酸乙醋萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱體積，再用75%乙醇洗 脫10個柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物浸膏；(C)步驟化）中 75 %乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、45:1、25:1、10:1和1:1的二氯 甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（C)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用 體積比為15:1、10:1和5:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分 2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫， 收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0009] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為Dioi大孔吸附樹脂。
[0010] 進(jìn)一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為80%。
[0011] 一種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的 載體。
[0012] 所述的化合物（I)在制備治療腎癌藥物中的應(yīng)用。
[0013] 所述的藥物組合物在制備治療腎癌藥物中的應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可W直接使用，或者W藥物組合物的形式使用。
[0015] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0016] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 W及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物W單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0017] 圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式； 陽〇1引 圖2為化合物（I)理論ECD值與實驗ECD值比較。
【具體實施方式】
[0019] 下面結(jié)合實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不W此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可W對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0020] 實施例1 :化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0021] 試劑來源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲燒為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0022] 制備方法：(a)將九里香的干燥葉（IOkg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取（2化X3 次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和 水飽和的正下醇0LX3次）萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（431g)和正下 醇萃取物；化）步驟（a)中乙酸乙醋萃取物用DlOl大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱 體積，再用75 %乙醇洗脫10個柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物 浸膏（172g) ;(c)步驟化）中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1(8 個柱體積）、45:1 (8個柱體積）、25:1 (8個柱體積）、10:1 (10個柱體積）和1:1巧個柱體 積）的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（C)中組分4 (65g)用正相硅膠進(jìn) 一步分離，依次用體積比為15:1 (8個柱體積）、10:1 (10個柱體積）和5:1 (8個柱體積）的 二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2 (37g)用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-12個柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I) (45mg)。
[0023] 結(jié)構(gòu)確證：白色無定形粉末；HR-ESIMS顯示[M+Na]+為m/z553. 2406,結(jié)合核磁 特征可得分子式為C29H3訴9,不飽和度為12。核磁共振氨譜數(shù)據(jù)5H(ppm，DMS0-d6,500MHz): H-I(7. 29,d，J= 10.6)，H-2 (5. 97,d，J= 10.6)，H-5 (2. 99,dd，J= 7. 0,1. 9)，H-6(2. 22， m)，H-6(2. 37，m)，H-9(2.86，d，J= 7. 2)，H-1U5. 31，dd，J= 10. 3,7. 2)，H-12(4. 19，dd，J= 10. 3,6. 0)，H-15 化 79,s)，H-16 (I. 81，m)，H-16 (2. 23,m)，H-17 (2. 92,dd，J= 10. 4, 7.I)， H-18 0). 71，s)，H-19〇). 91，s)，H-21(7. 13,s)，H-22 化 29,s)，H-23(7. 22,s)，H-28(0. 94， s)，H-29(1.01，s)，H-30 巧.09,s)，H-30 巧.19,s)，7-0CH3(3. 59,s)，ll-0Ac(1.94,s)， 12-0H(1. 76,d，J=6. 0)，14-OH巧.21，br，s)，15-OH巧.35,br，s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) 5C(卵m，DMSO-de，125MHz) : 152.6(CH，1-C)，124. 7 (CH，2-C)，203.6(C，3-C)，45.I(C，4-C)， 44. 5 (CH，5-C)，30. 7 (細(xì)2,6-C)，173.6(C，7-C)，136.6(C，8-C)，52. 2 (CH，9-C)，41. 4 (C， 10-C)，73. 7 (CH，11-C)，75. 3 (CH，12-C)，45. 2 (C，13-C)，71. 3 (C，14-C)，59.I(CH，15-C)， 31.8(細(xì)2, 16-C)，38. 4 (CH，17-C)，12. 2 (細(xì)3, 18-C)，20. 9 (細(xì)3, 19-C)，122.6(C，20-C)， 139. 4 (CH，21-C)，111. 5 (CH，22-C)，142. 0 (CH，23-C)，22. 5 (CH3, 28-C)，22.I(CH3, 29-C)， 119. 9 (邸2, 30-C)，51.8(CH3,7-OCH3)，170. 3 (C，11-OAc)，20. 4 (CH3,11-OAc);碳原子標(biāo)記 參見圖1。紅外光譜表明該化合物含有徑基（3443cmI)和幾基（1737cmI)基團。該化合 物在234nm有紫外吸收帶，說明含有a, 0-不飽和酬幾基基團。古和"CNMR譜表明該 化合物含有四個叔甲基，一個甲氧基，一個環(huán)外雙鍵，一個乙酷氧基，一個a,0-不飽和 酬幾基，一個醋基，W及一個P單取代巧喃環(huán)。通過核磁數(shù)據(jù)分析可知該化合物是一個 B環(huán)開環(huán)的巧樣苦素類化合物。根據(jù)HMBC譜中H-17(S肥.92,dd，J= 10.4,7.IHz)與 C-20( 5C122.6)，C-21( 5C139. 4)和C-22(Scm. 5)的相關(guān)性，可推斷巧喃環(huán)位于C-17 位上。HMBC譜中，H-ll(5 冊.31，dd，J= 10.3,7.2Hz)與乙