一種從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物活性物質(zhì)提取。更具體地說，本發(fā)明涉及一種牡丹果莢粗多糖的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]牡丹原產(chǎn)于中國西部秦嶺和大巴山一帶山區(qū)，為多年生落葉小灌木。牡丹除了作為觀賞植物外，在傳統(tǒng)對(duì)牡丹的利用主要為生產(chǎn)中藥材一一丹皮，具有改善心血管疾病、鎮(zhèn)靜、抑菌、抗炎和提高免疫系統(tǒng)活力等功效。
[0003]自2011年牡丹籽油被衛(wèi)生部批準(zhǔn)為新資源食品后，使得牡丹籽在作為種子使用外增加了一條牡丹綜合利用的新途徑。牡丹種子的采收一般在七月下旬至八月上旬，此時(shí)牡丹莢果顏色變黃但未開裂，因此牡丹籽采收時(shí)是種子和果莢一起采收的，在采收后再進(jìn)行果莢和種子的分離。分離后的牡丹籽用來生產(chǎn)牡丹籽油，而生物量與牡丹籽接近的果莢則一般被當(dāng)作廢料進(jìn)行堆積廢棄從而造成環(huán)境污染，或被農(nóng)民當(dāng)做低值薪柴使用，并未得到很好的利用。已有報(bào)道表明牡丹皮和牡丹葉均含有豐富的多糖成分，并且這些多糖成分均具有良好的抗氧化等功能。因此，從牡丹果莢中提取多糖成分，可以整體提升牡丹的應(yīng)用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，對(duì)牡丹綜合利用具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，通過該方法提取的牡丹果莢粗多糖，不僅收率及純度高，而且具有較高的抗氧化活性。
[0005]為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，提供了一種從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，包括如下步驟:
[0006]步驟1):原料預(yù)處理，取干凈且干燥的牡丹果莢，用粉碎機(jī)粉碎至50?200目，得到干粉；
[0007]步驟2):將步驟1)所得的干粉加水，在一定的溫度下浸提1?3h ;然后用800?1200W超聲波細(xì)胞粉碎儀處理10?15分鐘，過濾得水提液和提取渣；
[0008]步驟3):將步驟2)中的提取渣稱重置于提取罐中，按其濕重質(zhì)量比1:3?10加入45?65°C的溫水，調(diào)節(jié)pH4.5?6.5，加入一定量的纖維素酶，酶解4?12h，然后將酶滅活，過濾，得酶解液；
[0009]步驟4):將步驟2)中的水提液和步驟3)中的酶解液合并，先用陶瓷膜過濾除去雜質(zhì)，得到濾過液，再將所述濾過液過超濾膜過濾，除去所述濾過液中的蛋白質(zhì)物質(zhì)，得到超濾液，然后將所述超濾液過納濾膜進(jìn)行濃縮除去小分子雜質(zhì)，得納濾濃縮液；
[0010]步驟5):將步驟4)中的納濾濃縮液減壓濃縮收膏，得到浸膏；
[0011]步驟6):將步驟5)中的浸膏置于真空帶式干燥機(jī)中干燥，干燥后粉碎，得到牡丹果莢粗多糖。
[0012]優(yōu)選的是，所述步驟1)中牡丹果莢水分含量< 12%。
[0013]優(yōu)選的是，所述步驟2)中一定的溫度為40?80°C，所述干粉與水的質(zhì)量比為1:6 ?30ο
[0014]優(yōu)選的是，所述步驟3)中纖維素酶的加入量為提取渣濕重的0.3?2.0%，其酶活彡8萬U/g。
[0015]優(yōu)選的是，所述步驟4)中陶瓷膜的孔徑為50?150nm，所述超濾膜截留分子量為8000?20000，過超濾膜時(shí)的過濾溫度為20?45°C、過濾壓力為0.1?0.5Mpa ;所述的納濾膜截留分子量為300?2000，過納濾膜過濾時(shí)過濾溫度為20?45°C、過濾壓力為1.0?3.0Mpao
[0016]優(yōu)選的是，所述步驟5)中浸膏密度為1.1?1.3g/ml。
[0017]優(yōu)選的是，所述步驟6)中真空帶式干燥溫度為50?80°C，真空度為lOOOPa。
[0018]本發(fā)明至少包括以下有益效果:
[0019](1)本發(fā)明提供的一種牡丹果莢粗多糖的制備方法，通過該方法提取的牡丹果莢粗多糖，不僅收率及純度較高，而且抗氧化活性好，
[0020](2)本發(fā)明提供的方法結(jié)合了牡丹果莢生藥學(xué)原理，應(yīng)用了理化相結(jié)合的三步提取方法:水提、超聲波技術(shù)、酶解法；大大提高牡丹果莢多糖的提取率，采用多級(jí)膜分離純化及真空帶式干燥技術(shù)，防止多糖醇沉法純化及傳統(tǒng)高溫干燥過程中對(duì)其生物活性的破壞，并且高效節(jié)能。牡丹果莢粗多糖含量為65?80%，提取率約為8?9%，粗多糖收率為11?13%，產(chǎn)量穩(wěn)定。
[0021]本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅是本發(fā)明的一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其它實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0023]實(shí)施例1
[0024]取干凈且干燥(水分含量< 12% )的牡丹果莢，用粉碎機(jī)粉碎至150目；然后將所得的干粉加6倍量水于65°C條件下浸提3h ;然后用800W超聲波細(xì)胞粉碎儀處理12分鐘，過濾得水提液和提取渣；將上述提取渣稱重置提取罐中，按其濕重質(zhì)量比1:10加入45°C的溫水，調(diào)節(jié)pH4.5，加入提取渣濕重1.5%的纖維素酶，酶解12h，然后將酶滅活，過濾，得酶解液；將酶解液和水提液合并，用lOOnm孔徑的陶瓷膜過濾除去一部分雜質(zhì)，將所述濾過液過截留分子量為8000的超濾膜過濾，過濾溫度為45°C，過濾壓力為0.5Mpa，除去所述濾過液中的蛋白質(zhì)物質(zhì)，得到超濾液；然后將該超濾液過截留分子量為300的納濾膜進(jìn)行濃縮，過濾溫度為35°C，過濾壓力為3.0Mpa，得納濾濃縮液；將所述納濾濃縮液減壓濃縮收膏，所得浸膏密度為1.lg/mL，將浸膏置于真空帶式干燥機(jī)，于80°C、真空度lOOOPa條件下干燥，粉碎，得牡丹果莢粗多糖，測(cè)得粗多糖收率為11.4%，多糖含量78.2%。
[0025]實(shí)施例2
[0026]取干凈且干燥(水分含量< 12% )的牡丹果莢，用粉碎機(jī)粉碎至50目；然后將所得的干粉加20倍量水于80°C條件下浸提2h ;然后用1200W超聲波細(xì)胞粉碎儀處理10分鐘，過濾得水提液和提取渣；將上述提取渣稱重置提取罐中，按其濕重質(zhì)量比1:3加入55°C的溫水，調(diào)節(jié)pH5.5，加入提取渣濕重2.0%的纖維素酶，酶解4h，然后將酶滅活，過濾，得酶解液；將酶解液和水提液合并，用150nm孔徑的陶瓷膜過濾除去一部分雜質(zhì)，將所述濾過液過截留分子量為15000的超濾膜過濾，過濾溫度為30°C，過濾壓力為0.3Mpa，除去所述濾過液中的蛋白質(zhì)物質(zhì)，得到超濾液；然后將該超濾液過截留分子量為2000的納濾膜進(jìn)行濃縮，過濾溫度為20°C，過濾壓力為2.0Mpa，得納濾濃縮液；將所述納濾濃縮液減壓濃縮收膏，所得浸膏密度為1.2g/mL，將浸膏置于真空帶式干燥機(jī)，于65°C、真空度lOOOPa條件下干燥，粉碎，得牡丹果莢粗多糖，測(cè)得粗多糖收率為11.2%，多糖含量71.6%。
[0027]實(shí)施例3
[0028]取干凈且干燥(水分含量< 12% )的牡丹果莢，用粉碎機(jī)粉碎至200目；然后將所得的干粉加30倍量水于40°C條件下浸提lh ;然后用1000W超聲波細(xì)胞粉碎儀處理15分鐘，過濾得水提液和提取渣；將上述提取渣稱重置提取罐中，按其濕重質(zhì)量比1:7加入65°C的溫水，調(diào)節(jié)pH6.5，加入提取渣濕重0.3 %的纖維素酶，酶解8h，然后將酶滅活，過濾，得酶解液；將酶解液和水提液合并，用50nm孔徑的陶瓷膜過濾除去一部分雜質(zhì)，將所述濾過液過截留分子量為20000的超濾膜過濾，過濾溫度為20°C，過濾壓力為0.1Mpa，除去所述濾過液中的蛋白質(zhì)物質(zhì)，得到超濾液；然后將該超濾液過截留分子量為1000的納濾膜進(jìn)行濃縮，過濾溫度為45°C，過濾壓力為1.0Mpa，得納濾濃縮液；將所述納濾濃縮液減壓濃縮收膏，所得浸膏密度為1.3g/mL，將浸膏置于真空帶式干燥機(jī)，于50°C、真空度lOOOPa條件下干燥，粉碎，得牡丹果莢粗多糖，測(cè)得粗多糖收率為12.5%，多糖含量65.3%。
[0029]盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，其特征在于，包括如下步驟: 步驟1):原料預(yù)處理，取干凈且干燥的牡丹果莢，用粉碎機(jī)粉碎至50?200目，得到干粉； 步驟2):將步驟1)所得的干粉加水，在一定的溫度下浸提1?3h ;然后用800?1200W超聲波細(xì)胞粉碎儀處理10?15分鐘，過濾得水提液和提取渣； 步驟3):將步驟2)中的提取渣稱重置于提取罐中，按其濕重質(zhì)量比1:3?10加入45?65°C的溫水，調(diào)節(jié)pH4.5?6.5，加入一定量的纖維素酶，酶解4?12h，然后將酶滅活，過濾，得酶解液； 步驟4):將步驟2)中的水提液和步驟3)中的酶解液合并，先用陶瓷膜過濾除去雜質(zhì)，得到濾過液，再將所述濾過液過超濾膜過濾，除去所述濾過液中的蛋白質(zhì)物質(zhì)，得到超濾液，然后將所述超濾液過納濾膜進(jìn)行濃縮除去小分子雜質(zhì)，得納濾濃縮液； 步驟5):將步驟4)中的納濾濃縮液減壓濃縮收膏，得到浸膏； 步驟6):將步驟5)中的浸膏置于真空帶式干燥機(jī)中干燥，干燥后粉碎，得到牡丹果莢粗多糖。2.如權(quán)利要求1所述的從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，其特征在于，所述步驟1)中牡丹果莢水分含量< 12%。3.如權(quán)利要求1所述的從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，其特征在于，所述步驟2)中一定的溫度為40?80°C，所述干粉與水的質(zhì)量比為1:6?30。4.如權(quán)利要求1所述的從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，其特征在于，所述步驟3)中纖維素酶的加入量為提取渣濕重的0.3?2.0%，其酶活彡8萬U/g。5.如權(quán)利要求1所述的從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，其特征在于，所述步驟4)中陶瓷膜的孔徑為50?150nm，所述超濾膜截留分子量為8000?20000，過超濾膜時(shí)的過濾溫度為20?45°C、過濾壓力為0.1?0.5Mpa ;所述的納濾膜截留分子量為300?2000，過納濾膜過濾時(shí)過濾溫度為20?45°C、過濾壓力為1.0?3.0Mpa。6.如權(quán)利要求1所述的從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，其特征在于，所述步驟5)中浸膏密度為1.1?1.3g/ml7.如權(quán)利要求1所述的從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，其特征在于，所述步驟6)中真空帶式干燥溫度為50?80°C，真空度為lOOOPa。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從牡丹果莢中提取牡丹果莢粗多糖的方法，使用干燥的牡丹果莢為原料，經(jīng)過原料的粉碎，水提、超聲波技術(shù)、酶解法，大大提高牡丹果莢多糖的提取率，采用多級(jí)膜分離純化及真空帶式干燥技術(shù)，防止多糖醇沉法純化及傳統(tǒng)高溫干燥過程中對(duì)其生物活性的破壞，并且高效節(jié)能。牡丹果莢粗多糖含量為65～80％，提取率約為8～9％，粗多糖收率為11～13％，產(chǎn)量穩(wěn)定。
【IPC分類】A61P39/06, C08B37/00
【公開號(hào)】CN105294881
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510919766
【發(fā)明人】劉雪松, 欒連軍, 談滿良, 楊英士
【申請(qǐng)人】蘇州澤達(dá)興邦醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年2月3日
【申請(qǐng)日】2015年12月11日