mg/g和 0. 412mg/g;G.V和Be單接種組葉片N素含量接近，而P素含量G.V組顯著高于Be單接種 處理組，顯示出G.V接種對P代謝的有效調(diào)節(jié)。
[0100] 表14不同處理番茄光合速率、硝酸還原酶活力、根系活力、N和P素含量
陽102] (4)G.V及Be對番茄根結(jié)線蟲的抑制作用
[0103] 于上述試驗相同條件下，各處理組移栽時接根結(jié)線蟲二齡幼蟲500條/株。表 15顯示，G.V和Be能有效緩解番茄根結(jié)線蟲病，發(fā)病率分別下降25. 4%和53. 8%，防效 達(dá)到35. 72 %和51. 06 %，二者比較，在本試驗條件下，Be的抗病效果更佳；而G.v+Bc混合 處理組表現(xiàn)出較好的協(xié)同作用優(yōu)勢，發(fā)病率、病情指數(shù)防效均高于單接種處理組，防效達(dá)到 64. 28%，具有較高防治根結(jié)線蟲的作用。
[0104] 根結(jié)線蟲為南方根結(jié)線蟲M.inco即itaQiitwood(Mi)。
[0105] 表15G.V及Be對番茄根結(jié)線蟲病發(fā)病情況的影響
陽107] (S)G.V接種劑量、Be接種濃度和劑量對番茄苗生長發(fā)育的影響
[0108] 1、G.V接種劑量對番茄苗定植前AM真菌侵染率的影響
[0109] (1)試驗設(shè)計 陽110] 共設(shè)置4個處理：對照組（CK)、分別接種G.V500、1000、2000和50001口11處理組。 各處理組播種時接入G.V菌劑。將滅菌催芽番茄種子兩粒播于預(yù)混AM菌劑的育苗±中，每 鉢2株，每處理6盆，正常管理。待番茄苗長至3-4葉期時取樣測定菌根侵染率。
[0111] (2)菌根侵染率測定方法 陽11引將根段切成0. 5~1.Ocm的小段，加入10%KOH溶液透明，放入90°C水浴鍋中 15-20min。去掉堿液，用自來水沖洗根系3次，再加入2%的肥1溶液酸化5min。去掉酸液 后加入酸性品紅（0. 1% )乳酸甘油染色液（乳酸875ml，甘油63ml,蒸饋水63ml,酸性品 紅0.Ig),室溫下過夜。加入乳酸分色后即可鏡檢。
[0113] 菌根侵染率（％)=E(0%X根段數(shù)+10 %X根段數(shù)+…+100%X根段 數(shù)）XlOO% /總根段數(shù)
[0114] 做結(jié)果 陽115] 番茄苗根系A(chǔ)M真菌菌根侵染率見表16,由此可知，隨著G.V接種劑量的增加，番茄 苗的菌根侵染率也逐漸增加，但是考慮考G.V菌劑的繁育和經(jīng)濟(jì)效益問題，番茄苗播種時 接入2000IPUG.V菌劑較為合理。 陽116] 表16接種不同劑量G.V番茄苗的菌根侵染率
[0119] 2、Bc接種濃度和劑量對番茄苗生長發(fā)育的影響
[0120] (1)試驗設(shè)計 陽121]Bc接種濃度對番茄苗生長發(fā)育的影響：共設(shè)置5個處理，分別為CK、Bc發(fā)酵原液、 2倍稀釋液、5倍稀釋液、10倍稀釋液處理組。移栽時每株接菌劑200ml。
[0122] Be接種劑量對番茄苗生長發(fā)育的影響：Bc接種發(fā)酵原液接種劑量分別為（每 株）Oml、50ml、100mL、200ml、500ml。
[0123] 似試驗方法
[0124] 將滅菌催芽番茄種子播于育苗±中，每鉢2株，重復(fù)6次。待番茄苗長至3-4葉期 移栽入花盆，同時按照Be接種濃度和接種劑量接種菌劑。其余正常管理。
[01巧]接種后30天，測定各處理組番茄生長發(fā)育指標(biāo)。 陽126] (3)結(jié)果 陽127] 由表17和表18可知，Be接種濃度和接種劑量對番茄苗的生長發(fā)育有十分顯著的 影響，隨著菌液濃度的減小，番茄苗株高、莖粗、莖節(jié)數(shù)、地上鮮重和地下鮮重逐漸下降，接 種Be發(fā)酵原液能夠顯著促進(jìn)番茄苗的生長發(fā)育；隨著接種Be發(fā)酵液劑量的增加番茄苗的 各生長發(fā)育指標(biāo)升高，接種200ml和500ml時差異不是很大，考慮到經(jīng)濟(jì)因素，接種200ml 發(fā)酵液可W有效提高番茄苗的生長發(fā)育。 陽128] 表17Be接種濃度對番茄苗生長發(fā)育的影響
[0130] 表18Be接種劑量對番茄苗生長發(fā)育的影響
[0131]
[0133] (四）G.v+Bc復(fù)合菌劑的應(yīng)用
[0134] 1、試驗設(shè)計
[0135] 共設(shè)置3個處理：對照組（CK)、化肥處理組和G.v+Bc處理組。G.v+Bc處理組播種 時接入G.V菌劑，移栽時接入Bc發(fā)酵原液，濃度為IO9C化/ml;化肥處理組移栽時施史丹利 化學(xué)肥料作為基肥。 陽136] 2、番茄保護(hù)地選擇 陽137] 試驗所選番茄大棚位于山東省青島市即墨市圈子村。 陽13引 3、育苗與G.V接種
[0139] 番茄種子經(jīng)75%乙醇5min、2%化ClO20min滅菌，催芽后播于5X5黑色穴盤內(nèi)， 1株/穴。栽培上為上壤和育苗基質(zhì)（體積比1:1)混合物，G.v+Bc處理組接入2000IPU的 G.V菌劑，對照組和化肥處理組接入等量的滅菌混合接種物。正常管理。
[0140] 4、定植
[0141] 將3-4葉期番茄苗移栽入番茄大棚，株距20畑1，行距50畑1，每個處理100株。 G.v+Bc處理組移栽時灌根接入Bc發(fā)酵原液200ml/株；化肥處理組移栽前按照40kg/畝用 量施史丹利復(fù)合肥，深播15cm作為基肥。待Bc發(fā)酵液滲入±壤后稍干，壟溝灌水。其余正 常管理。定植15天和35天時G.v+Bc處理組再分別接入Bc發(fā)酵原液200ml/株。 陽142] 5、取樣 陽143] 定植后15天、35天和75天分別取樣，將番茄根系及根圍±壤一起挖出，盡量不損 傷根系。
[0144] 6、結(jié)果
[0145] 分別于定植后15天、35天和75天取樣測定根鮮重、地上鮮重、根長和株高；定植 75天取樣時測定莖粗、莖節(jié)數(shù)、花節(jié)數(shù)、側(cè)根鮮重和單株產(chǎn)量。結(jié)果見表19-23。 陽146] 化肥處理組和聯(lián)合接種處理組的各階段根長高于CK處理組，75天時效果最明顯， 是CK組的1. 18倍，是化肥處理組的1. 06倍；根鮮重指標(biāo)中，CK處理組根鮮重與化肥處理組 和聯(lián)合接種處理組差異不大，在接種35天時CK組和化肥組甚至高于G.v+Bc組，運(yùn)與接種 后根結(jié)線蟲的侵染和發(fā)病有直接關(guān)系，根結(jié)線蟲使番茄根系組織異常增生，增加根系鮮重， 而G.v+Bc組能夠有效抑制根結(jié)線蟲病，同時促進(jìn)根系的發(fā)育；番茄苗地上鮮重和株高指標(biāo) 與根長相似，化肥處理組和G.v+Bc處理組顯著高于CK處理組，二者差異不大；由表23可知 接種75天后，G.v+Bc處理組莖粗、花穗數(shù)、側(cè)根鮮重和單株產(chǎn)量與化肥組接近，遠(yuǎn)大于CK處 理組，其中顯著的側(cè)根鮮重，是CK組的I. 41倍，單株產(chǎn)量是CK組的I. 42倍?？蒞看出聯(lián) 合接種G.v+Bc可W有效提高番茄苗的莖粗、株高、莖節(jié)數(shù)、側(cè)根鮮重、單株產(chǎn)量等指標(biāo)，提 高番茄苗生長發(fā)育。 陽147] 不僅如此，接種G.v+Bc后還能后有效抑制番茄根結(jié)線蟲的發(fā)病情況，G.V和Bc可 W與根結(jié)線蟲競爭有效侵染位點，提高番茄自身免疫系統(tǒng)和酶活，直接抑制和殺滅根結(jié)線 蟲。由表24可知，接種75天時，防效達(dá)到63. 68%，能夠有效防治番茄根結(jié)線蟲病。
[0148] 表19不同處理番茄根長（cm)
陽1加]表20不同處理番茄根鮮重（g)
陽巧2] 表21不同處理番茄地上鮮重（g)
[0154] 表22不同處理番茄株高（cm)
陽157] 表23移栽75天不同處理番茄莖粗、莖節(jié)數(shù)、花穗數(shù)、側(cè)根鮮重及單株產(chǎn)量
[0159] 表24不同處理番茄根結(jié)線蟲病防效（％ )
【主權(quán)項】
1. 一種復(fù)合微生物菌劑，其特征在于，所述的微生物菌劑的活性成分由地表球囊霉 Glomusversiforme(G.v)和錯狀芽抱桿菌Bacilluscereus(Be)菌株組成。2. 采用權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物菌劑制備的促進(jìn)番茄苗生長發(fā)育并且抗根結(jié)線 蟲病的生防菌劑。3. 權(quán)利要求1所述復(fù)合微生物菌劑在促進(jìn)番茄苗生長發(fā)育并且抗根結(jié)線蟲病方面的 應(yīng)用。4. 采用權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物菌劑促進(jìn)番茄苗生長發(fā)育并且抗根結(jié)線蟲病的 方法，其特征在于，首先，在番前播種時，接種所述的地表球囊霉Glomusversiforme(G.v); 再次，在移栽期，接種所述錯狀芽孢桿菌Bacilluscereus(Be)菌株。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合微生物菌劑促進(jìn)番茄苗生長發(fā)育并且抗根結(jié)線蟲 病的方法，其特征在于，所述地表球囊霉Glomusversiforme(G.v)真菌的接種劑量為 2000-5000IPU/株；所述蠟狀芽孢桿菌Bacilluscereus(Be)菌株接種劑量為發(fā)酵原液 109cfu/ml，200-500ml/ 株?次。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的復(fù)合微生物菌劑促進(jìn)番茄苗生長發(fā)育并且抗根結(jié)線蟲病的 方法，其特征在于，所述地表球囊霉Glomusversiforme(G.v)真菌接種劑量為2000IPU/ 株；所述錯狀芽孢桿菌Bacilluscereus(Be)菌株接種劑量為發(fā)酵原液109cfu/ml，200ml/ 株?次。7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述復(fù)合微生物菌劑促進(jìn)番茄苗生長發(fā)育并且抗根結(jié)線蟲病的 方法，其特征在于，所述的移栽期為番茄發(fā)育至3-4葉時可定植時期，所述蠟狀芽孢桿菌 Bacilluscereus(Be)在番前定植時、定植后15天和定植后35天接種。
【專利摘要】本發(fā)明涉及農(nóng)作物育苗技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種促進(jìn)番茄苗生長發(fā)育的復(fù)合微生物菌劑，及其應(yīng)用，所述的微生物菌劑的活性成分由叢枝菌根(Arbuscular？mycorrhizae,AM)真菌中的地表球囊霉和根圍促生細(xì)菌(plant？growth-promoting？rhizobacteria,PGPR)中的蠟狀芽孢桿菌菌株組成。本發(fā)明公開的復(fù)合微生物菌劑不僅能夠提高番茄苗的生長發(fā)育和番茄產(chǎn)量，而且具有抗根結(jié)線蟲病的作用，兩種菌劑施于土壤，不會在果實中殘留，安全有效。
【IPC分類】C12R1/645, C12N1/20, A01P21/00, A01N63/04, C12N1/14, C12R1/085, A01P5/00
【公開號】CN105296366
【申請?zhí)枴緾N201510853590
【發(fā)明人】唐超, 劉潤進(jìn), 李敏
【申請人】青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2016年2月3日
【申請日】2015年11月27日