一種從川芎揮發(fā)油中分離洋川芎內(nèi)酯a的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥制藥領(lǐng)域，涉及一種從富含洋川芎內(nèi)酯A的川芎揮發(fā)油中分離洋 川1f內(nèi)酯A的方法。 (二）
【背景技術(shù)】
[0002] 洋川芎內(nèi)酯A是存在于川芎揮發(fā)油中的一種苯酞類物質(zhì)，具有抗腦缺血并減輕腦 缺血損傷，以及抗驚厥等作用。洋川；內(nèi)酯A，英文名senkyunolideA，分子式C12H1602，分子 量192. 25,分子結(jié)構(gòu)如下：
[0003]
[0004] 川芎具有活血祛瘀、行氣開郁、祛風(fēng)止痛的功效。臨床上主要用于治療心血管疾 病、婦科疾病等。目前，洋川芎內(nèi)酯A的提取主要利用大孔吸附樹脂法進(jìn)行分離。一般的逆 流色譜分離方法，得到目標(biāo)物洋川芎內(nèi)酯A耗時(shí)長(zhǎng)，溶劑消耗大。 (三）

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題就是提供一種快速分離洋川芎內(nèi)酯A的方法，本發(fā)明 利用環(huán)糊精與洋川芎內(nèi)酯A的包結(jié)作用，快速的將洋川芎內(nèi)酯A從川芎揮發(fā)油中分離出來， 具有更強(qiáng)的目的性，快捷高效。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0007] -種從川芎揮發(fā)油中分離洋川芎內(nèi)酯A的方法，所述方法為：將甲基-β_環(huán)糊精 水溶液與正己烷按體積比1:〇. 5~2充分混合后靜置、分液，分別得到上相和下相，下相作 為高速逆流色譜的固定相，上相為流動(dòng)相；稱取川芎揮發(fā)油，用體積比1:1的上相和下相 溶解后進(jìn)樣，高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖的峰形收集對(duì)應(yīng) 流出液，將含有洋川芎內(nèi)酯Α的流出液濃縮干燥，制得洋川芎內(nèi)酯Α純品。
[0008] 所述的甲基-β-環(huán)糊精水溶液的濃度為0· 05-0. 2mol/L，優(yōu)選0· 05~0·lmol/L〇
[0009] 所述甲基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷的體積比為1 :0. 5~2,優(yōu)選1 :1。
[0010] 所述的高速逆流色譜的柱溫為15 °C~30 °C，優(yōu)選20 °C。
[0011] 所述方法優(yōu)選按以下操作：將〇. 05~0.2mol/L的甲基-β-環(huán)糊精水溶液與正己 烷按體積比1 5~2充分混合后靜置、分液，分別得到上相和下相，下相作為高速逆流色 譜的固定相，上相為流動(dòng)相；先將固定相充滿高速逆流色譜儀的多層線圈分離柱，設(shè)定高 速逆流色譜儀，柱溫15°C~30°C(優(yōu)選20°C)，在500~1000r/min轉(zhuǎn)速（優(yōu)選800r/min 轉(zhuǎn)速）下，以0. 5~5ml/min(優(yōu)選2ml/min)的流速注入流動(dòng)相，以波長(zhǎng)200-300nm(優(yōu)選 210~280nm)的紫外檢測(cè)器檢測(cè)，當(dāng)柱尾端明顯有流動(dòng)相流出時(shí)，稱取川芎揮發(fā)油，用體積 比1:1的上相和下相溶解后進(jìn)樣，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖的峰形收集對(duì)應(yīng)流出液，將含有 洋川芎內(nèi)酯A的流出液濃縮干燥，制得洋川芎內(nèi)酯A純品。
[0012] 更進(jìn)一步，所述方法更優(yōu)選按以下操作：將0. 05~0.lmol/L的甲基-β-環(huán)糊精 水溶液與正己烷按體積比1 :1充分混合后靜置、分液，分別得到上相和下相，下相作為高速 逆流色譜的固定相，上相為流動(dòng)相；先將固定相充滿高速逆流色譜儀的多層線圈分離柱， 設(shè)定高速逆流色譜儀，柱溫20°c，在800~1000r/min轉(zhuǎn)速下，以2ml/min的流速注入流動(dòng) 相，以波長(zhǎng)210~280nm(優(yōu)選254nm)的紫外檢測(cè)器檢測(cè)，當(dāng)柱尾端明顯有流動(dòng)相流出時(shí)， 稱取川芎揮發(fā)油，用體積比1 :1的上相和下相溶解后進(jìn)樣，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖的峰形 收集對(duì)應(yīng)流出液，將含有洋川芎內(nèi)酯A的流出液濃縮干燥，制得洋川芎內(nèi)酯A純品。
[0013] -般將100-1000mg的川芎揮發(fā)油用10~20mL的體積比1 :1的上相和下相混合 溶劑溶解，然后進(jìn)樣。
[0014]與現(xiàn)有技術(shù)比較，本發(fā)明具有的優(yōu)勢(shì)在于：本發(fā)明操作簡(jiǎn)便，高效快捷，溶劑消耗 少；甲基-β-環(huán)糊精對(duì)洋川芎內(nèi)酯A具有專屬包結(jié)作用，目的性強(qiáng)，分離效果優(yōu)秀。 (四）
【附圖說明】
[0015] 圖1實(shí)施例1的高速逆流色譜（HSCCC)圖。
[0016] 圖2實(shí)施例2的高速逆流色譜（HSCCC)圖。
[0017] 圖3實(shí)施例3的高速逆流色譜（HSCCC)圖。
[0018] 圖4實(shí)施例1制備的洋川芎內(nèi)酯A的GC-MS的液相圖譜。
[0019] 圖5實(shí)施例1制備的洋川芎內(nèi)酯A的GC-MS的質(zhì)譜圖。
[0020] 圖1~圖3中，2號(hào)峰代表洋川芎內(nèi)酯A。 (五）
【具體實(shí)施方式】
[0021] 下面以具體實(shí)施例來對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不 限于此。下述實(shí)施例中，采用的高速逆流色譜型號(hào)為：HSCCC-TBE200V
[0022] 實(shí)施例1:
[0023] 配制0. lmol/L甲基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷按體積比1 :1在分液漏斗中混 合，充分振蕩，靜止，臨用前分層，下相選為固定相，上相選為流動(dòng)相；柱溫設(shè)定為20°C， 先用恒流栗將溶劑體系的下相打入HSCCC的聚四氟乙烯螺旋管，直至注滿整個(gè)管子，然后 開啟HSCCC，轉(zhuǎn)速為803.6prm，同時(shí)將流動(dòng)相以2. 0ml/min流速?gòu)闹氖锥死跞際SCCC分 離柱；等到柱尾端流出流動(dòng)相時(shí)，表明HSCCC中兩相已達(dá)到平衡，通過六通閥將樣品注入 HSCCC(522mg川芎揮發(fā)油樣品溶解于18ml等體積混合的上下相溶劑中）；以波長(zhǎng)254nm的 紫外檢測(cè)器檢測(cè)流出液，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖，見圖1，圖1中2號(hào)峰代表洋川芎內(nèi)酯A， 自動(dòng)收集洗脫液，將2號(hào)峰的洗脫液的溶劑揮干，得洋川芎內(nèi)酯A37mg。所得洋川芎內(nèi)酯A 產(chǎn)品的GC-MS圖見圖4和圖5,圖4為液相色譜圖，圖5為質(zhì)譜圖。
[0024] 實(shí)施例2:
[0025] 配制0.lmol/L甲基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷按體積比1 :1在分液漏斗中混 合，充分振蕩，靜止，臨用前分層，下相選為固定相，上相選為流動(dòng)相；柱溫設(shè)定為20°C， 先用恒流栗將溶劑體系的下相打入HSCCC的聚四氟乙烯螺旋管，直至注滿整個(gè)管子，然后 開啟HSCCC，轉(zhuǎn)速為800.6prm，同時(shí)將流動(dòng)相以2.Oml/min流速?gòu)闹氖锥死跞際SCCC分 離柱；等到柱尾端流出流動(dòng)相時(shí)，表明HSCCC中兩相已達(dá)到平衡，通過六通閥將樣品注入 HSCCC(232mg川芎揮發(fā)油樣品溶解于18ml等體積混合的上下相溶劑中）；以波長(zhǎng)254nm的 紫外檢測(cè)器檢測(cè)流出液，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖，見圖2,圖2中2號(hào)峰代表洋川芎內(nèi)酯A， 自動(dòng)收集洗脫液，將2號(hào)峰的洗脫液的溶劑揮干，得洋川芎內(nèi)酯A晶體17mg。
[0026] 實(shí)施例3 :
[0027] 配制0. 05mol/L甲基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷按體積比1 :1在分液漏斗中 混合，充分振蕩，靜止，臨用前分層，下相選為固定相，上相選為流動(dòng)相；柱溫設(shè)定為20°C， 先用恒流栗將溶劑體系的下相打入HSCCC的聚四氟乙烯螺旋管，直至注滿整個(gè)管子，然后 開啟HSCCC，轉(zhuǎn)速為800.6prm，同時(shí)將流動(dòng)相以2.Oml/min流速?gòu)闹氖锥死跞際SCCC分 離柱；等到柱尾端流出流動(dòng)相時(shí)，表明HSCCC中兩相已達(dá)到平衡，通過六通閥將樣品注入 HSCCC(230mg川芎揮發(fā)油樣品溶解于18ml等體積混合的上下相溶劑中）；以波長(zhǎng)254nm的 紫外檢測(cè)器檢測(cè)流出液，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖，見圖3,圖3中2號(hào)峰代表洋川芎內(nèi)酯A， 自動(dòng)收集洗脫液，將對(duì)應(yīng)峰的洗脫液的溶劑揮干，得洋川芎內(nèi)酯A12mg。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種從川芎揮發(fā)油中分離洋川芎內(nèi)酯A的方法，其特征在于所述方法為：將甲 基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷按體積比1 :0. 5~2充分混合后靜置、分液，分別得到上相 和下相，下相作為高速逆流色譜的固定相，上相為流動(dòng)相；稱取川芎揮發(fā)油，用體積比1 :1 的上相和下相溶解后進(jìn)樣，高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖的 峰形收集對(duì)應(yīng)流出液，將含有洋川芎內(nèi)酯Α的流出液濃縮干燥，制得洋川芎內(nèi)酯Α純品。2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的甲基-β-環(huán)糊精水溶液的濃度為 0·05 ~0· 2mol/L〇3. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述甲基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷的體積 比為1 :1。4. 如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的甲基-β-環(huán)糊精水溶液的濃度為 0·05 ~0·lmol/L〇5. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的高速逆流色譜的柱溫為15°C~30°C。6. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述方法按以下操作：將0. 05~0. 2mol/L的 甲基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷按體積比1 :〇. 5~2充分混合后靜置、分液，分別得到上 相和下相，下相作為高速逆流色譜的固定相，上相為流動(dòng)相；先將固定相充滿高速逆流色 譜儀的多層線圈分離柱，設(shè)定高速逆流色譜儀，柱溫15°C~30°C，在500~1000r/min轉(zhuǎn)速 下，以0. 5~5ml/min的流速注入流動(dòng)相，以波長(zhǎng)200~300nm的紫外檢測(cè)器檢測(cè)，當(dāng)柱尾 端明顯有流動(dòng)相流出時(shí)，稱取川芎揮發(fā)油，用體積比1 :1的上相和下相溶解后進(jìn)樣，根據(jù)紫 外檢測(cè)器光譜圖的峰形收集對(duì)應(yīng)流出液，將含有洋川芎內(nèi)酯A的流出液濃縮干燥，制得洋 川芎內(nèi)酯A純品。7. 如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于方法按以下操作：將0. 05~0.lmol/L的甲 基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷按體積比1 :1充分混合后靜置、分液，分別得到上相和下相， 下相作為高速逆流色譜的固定相，上相為流動(dòng)相；先將固定相充滿高速逆流色譜儀的多層 線圈分離柱，設(shè)定高速逆流色譜儀，柱溫20°C，在800~1000r/min轉(zhuǎn)速下，以2ml/min的流 速注入流動(dòng)相，以波長(zhǎng)210~280nm的紫外檢測(cè)器檢測(cè)，當(dāng)柱尾端明顯有流動(dòng)相流出時(shí)，稱 取川芎揮發(fā)油，用體積比1 :1的上相和下相溶解后進(jìn)樣，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖的峰形收 集對(duì)應(yīng)流出液，將含有洋川芎內(nèi)酯A的流出液濃縮干燥，制得洋川芎內(nèi)酯A純品。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從川芎揮發(fā)油中分離洋川芎內(nèi)酯A的方法：將甲基-β-環(huán)糊精水溶液與正己烷按體積比1：0.5～2充分混合后靜置、分液，分別得到上相和下相，下相作為高速逆流色譜的固定相,上相為流動(dòng)相；稱取川芎揮發(fā)油，用體積比1：1的上相和下相溶解后進(jìn)樣，高速逆流色譜分離，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)紫外檢測(cè)器光譜圖的峰形收集對(duì)應(yīng)流出液，將含有洋川芎內(nèi)酯A的流出液濃縮干燥，制得洋川芎內(nèi)酯A純品。本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)便，溶劑消耗少，高效快捷，目的性強(qiáng)，分離效果好。
【IPC分類】C07D307/88
【公開號(hào)】CN105330632
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510791691
【發(fā)明人】童勝?gòu)?qiáng), 魯夢(mèng)霞, 顏繼忠
【申請(qǐng)人】浙江工業(yè)大學(xué)
【公開日】2016年2月17日
【申請(qǐng)日】2015年11月17日