一種烯丙基苯酚雙糖苷化合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物活性成分領(lǐng)域，尤其涉及一種烯丙基苯酚雙糖苷化合物及其制備 方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 珠蘭（拉丁學(xué)名：Chloranthusspicatus(Thunb. )Makino)。又名魚子蘭、茶蘭，屬 金粟蘭科，金粟蘭屬，是多年生常綠草本或半灌木花卉。直立或稍伏地，高30~60厘米。葉 對生，倒卵狀橢圓形，邊緣有鈍齒，齒尖有一腺體；葉面光滑、濃綠，稍呈泡狀皺起。穗狀花序 頂生，成圓錐花序式排列?；ㄐ?，兩性，無花被，黃綠色，有濃郁的蘭花香味。花期8 -10月 份【陳海山，程用謙，熱帶亞熱帶植物學(xué)報，1994, 2 (4) : 31-34.】。
[0003]目前研究表明，珠蘭的化學(xué)成分主要有倍半砲、二聚倍半砲【Sang-Yong Kim,YoshikiKashiwada,KazuyoshiKawazoe,KotaroMurakami，Han-DongSun，Shun-Lin Li，YoshihisaTakaishi,PhytochemistryLetters.Volume2,Issue3, 24August 2009,Pages110 - 113】。但是烯丙基苯酚糖苷類化合物研究很少，為此，研究珠蘭全草中的 天然多酚糖苷活性成分，可以為珠蘭全草的利用提供新思路。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供了一種烯丙基苯酚雙糖苷化合物，該化合物為珠蘭的全草中提取獲得 的天然活性物質(zhì)，具有抗氧化活性。
[0005] -種烯丙基苯酚雙糖苷化合物，結(jié)構(gòu)如式（I)所示：
[0006]
[0007] 該烯丙基苯酚雙糖苷化合物為首次從珠蘭的全草中提取出來并確認(rèn)了其結(jié)構(gòu)的 新化合物，研究結(jié)果表明，該烯丙基苯酚雙糖苷化合物對酪氨酸酶具有較好的抑制活性，可 以有效地抑制黑色素的合成，從而具有作為美白化妝品或美白保健食品的潛力。
[0008] 本發(fā)明還提供了一種所述的烯丙基苯酚雙糖苷化合物的制備方法，包括以下步 驟：
[0009] (1)采用有機(jī)溶劑對粉碎后的珠蘭（Chloranthusspicatus(Thunb. )Makino)全 草進(jìn)行浸提得到浸提液；
[0010] 所述的有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、正丁醇和丙酮中的一種或多種混合物；
[0011] (2)用萃取劑對步驟（1)得到的浸提液進(jìn)行萃取，萃取液經(jīng)濃縮后得到粗提物；
[0012] (3)對步驟（2)得到的粗提物進(jìn)行層析分離和純化處理，得到所述的烯丙基苯酚 雙糖苷化合物。
[0013] 步驟（1)中，將所述的珠蘭全草粉碎后置于有機(jī)溶劑中進(jìn)行浸提，更有利于烯丙 基苯酚雙糖苷化合物的浸出。作為優(yōu)選，步驟（1)中，所述的珠蘭全草與有機(jī)溶劑的重量比 為所述的浸提可以為冷浸或熱回流提取。
[0014] 作為優(yōu)選，步驟（2)中，所述的萃取劑為氯仿或正丁醇。
[0015] 作為優(yōu)選，步驟（2)中，所述的提取液先進(jìn)行濃縮，然后加水混懸得到水混懸液， 再加入所述萃取劑進(jìn)行萃取。
[0016] 作為優(yōu)選，步驟（2)中，所述的提取液先進(jìn)行濃縮，然后加入硅藻土拌樣，再加入 所述萃取劑進(jìn)行萃取。
[0017] 作為優(yōu)選，步驟（3)中，所述的層析分離為正相硅膠柱層析分離，洗脫劑為氯仿和 甲醇的混合液。作為進(jìn)一步的優(yōu)選，所述的正相硅膠柱層析分離中：上樣后，以氯仿/甲醇 混合液作為洗脫劑，按體積比9:1、5:1、3:1、1:1、1: 3、1:9進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫劑體積 比3:1時洗脫出的餾分。
[0018] 作為優(yōu)選，步驟（3)中，所述的純化處理包括：反相硅膠柱層析分離、高效液相色 譜分離和重結(jié)晶中的一種或者多種。通過純化，能獲得純度較高的烯丙基苯酚雙糖苷化合 物。
[0019] 作為優(yōu)選，所述反相硅膠柱層析分離的洗脫劑為甲醇和水的混合液。更優(yōu)選地， 所述的反相硅膠柱層析分離中：上樣后，以甲醇/水混合液作為洗脫劑，按體積比9:1、5:1、 1:1、1:3、1:9進(jìn)行梯度洗脫。
[0020] 本發(fā)明還提供了所述的烯丙基苯酚雙糖苷化合物在制備酪氨酸酶抑制藥物或抗 黑色素瘤藥物中的應(yīng)用。該藥物以本發(fā)明的烯丙基苯酚雙糖苷化合物為主要活性成分，添 加藥劑學(xué)上可接受的輔料制成，可按照藥劑學(xué)上記載的制劑制備方法制成制劑。所述的制 劑可以為注射液、滴注液、粉針劑、顆粒劑、片劑、沖劑、散劑、口服液、糖衣片劑、薄膜衣片 劑、腸溶衣片劑、□含劑、顆粒劑、丸劑、膏劑、丹劑、噴霧劑、滴丸劑、崩解劑、□崩片、微丸 等。
[0021] 本發(fā)明還提供了所述的烯丙基苯酚雙糖苷化合物在美白化妝品中的應(yīng)用。該化妝 品以本發(fā)明的烯丙基苯酚雙糖苷化合物為主要活性成分，添加可接受的化妝品輔料制成。
[0022] 本發(fā)明還提供了所述的烯丙基苯酚雙糖苷化合物在制備美白保健食品中的應(yīng)用。 該保健食品以本發(fā)明的烯丙基苯酚雙糖苷化合物為主要活性成分，添加可接受的保健食品 輔料制成。
[0023] 本發(fā)明從珠蘭全草中提取、分離獲得了一種具有新穎結(jié)構(gòu)的烯丙基苯酚雙糖苷化 合物，該方法操作簡便、提取得率高、產(chǎn)物純度高，適合規(guī)?；a(chǎn)。
[0024] 通過體外酪氨酸酶活性抑制試驗，表明本發(fā)明提供的烯丙基苯酚雙糖苷化合物具 有較好的酪氨酸酶抑制作用，其IC5。值為19M，可用于制備酪氨酸酶抑制藥物、美白化妝品 或美白保健食品，具有良好的開發(fā)前景。
【附圖說明】
[0025] 圖1為實施例6中化合物的HMBC相關(guān)圖譜。
【具體實施方式】
[0026] 實施例1烯丙基苯酚雙糖苷化合物的制備
[0027]取 5kg珠蘭（Chloranthusspicatus(Thunb. )Makino)全草，干燥，粉碎，用甲 醇（40L)浸泡2周，浸泡液經(jīng)濃縮（100mL)后用1L蒸餾水混懸，水混懸液用1L正丁醇萃 取，正丁醇萃取液經(jīng)濃縮得到浸膏；用硅膠（100目，l〇〇g)拌樣，進(jìn)行正相硅膠柱層析分離 (200-300 目，lkg;硅膠柱尺寸L500mm，0 120mm)，依次以體積比 9:1、5:1、3:1、1:1、1:3、 1:9的氯仿/甲醇進(jìn)行梯度洗脫，每次5L;TLC檢測餾分，收集洗脫比例4:1的餾分合并，再 用甲醇重結(jié)晶。
[0028] 實施例2烯丙基苯酚雙糖苷化合物的制備
[0029] 取5kg珠蘭全草，干燥，粉碎，用5L乙醇回流提取，提取液濃縮，水混懸液用1L氯 仿萃取，氯仿層棄去。水層用1L正丁醇萃??；正丁醇部分濃縮，用硅膠（100目，100g)拌樣， 進(jìn)行正相硅膠柱層析分離（200-300目，lkg;硅膠柱尺寸L500mm，0 120mm)，依次以體積 比9:1、5:1、3:1、1:1、1:3、1:9的氯仿/甲醇進(jìn)行梯度洗脫，每次5L;TLC檢測餾分，收集洗 脫比例4:1的餾分合并，再用甲醇重結(jié)晶。
[0030] 實施例3烯丙基苯酚雙糖苷化合物的制備
[0031] 取5kg珠蘭全草，粉碎，用5L甲醇/乙醇混合液提取，提取物濃縮，用100