Ecma復(fù)合微生物菌劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬生物工程領(lǐng)域技術(shù)，涉及ECMA復(fù)合微生物菌劑的制造方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 為了解決人口增長對產(chǎn)量的需求，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中長期依靠大量使用化學(xué)肥料、農(nóng) 藥做為增產(chǎn)的主要措施，于是綠肥、農(nóng)家肥被忽視，化肥的使用量越來越多，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本 激增，同時還導(dǎo)致土壤板結(jié)，肥料下降。由于化肥、農(nóng)藥的流失，殘留，影響了農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)和 人體健康，造成環(huán)境污染，同時也破壞了作物根際土壤中原有的微生態(tài)平衡，使土傳病害加 重。土壤是農(nóng)作物生長發(fā)育營養(yǎng)源，它是由礦物質(zhì)、有機物和微生物三大部分組成。土壤礦 物質(zhì)是土壤物質(zhì)組成的主體，既是植物生長的機制，又是植物無機營養(yǎng)的主要來源。有機質(zhì) 是土壤供肥、保肥的重要的物質(zhì)基礎(chǔ)，又是形成土壤傳遞結(jié)構(gòu)和防止土壤板結(jié)的重要必要 成分。微生物是土壤中活的有機體，是轉(zhuǎn)化土壤肥力不可缺少的活性物質(zhì)。土壤中礦物質(zhì)、 有機物和微生物三者之間的關(guān)系就好像動物的骨架、肌肉和血球的關(guān)系，而微生物是其中 最活躍的組成部分。土壤微生物的活動直接參與土壤、物質(zhì)和能量的轉(zhuǎn)化。腐殖質(zhì)的形成 和分解、養(yǎng)分釋放、氮素固定等土壤肥力形成和發(fā)育過程。因此，向土壤中增施有益微生物 數(shù)量也能夠增強土壤微生物活性，提高土壤肥力。特別是農(nóng)作物根際周圍的土壤微生物活 性對植物根系營養(yǎng)環(huán)境改善更為重要，在根際施用青霉菌孢子粉、枯草牙孢桿菌等即可增 加根層土壤中有益菌類數(shù)量及作用。農(nóng)業(yè)的基礎(chǔ)在土壤，微生物是土壤發(fā)生發(fā)育的活躍因 素。近年來，家庭農(nóng)場和聯(lián)合社的推廣，使得人們更加重視微生物肥改良土壤、改善植物營 養(yǎng)吸收功能等積極作用，隨著質(zhì)量農(nóng)業(yè)的不斷推廣，無害有機的農(nóng)產(chǎn)品將成為未來農(nóng)業(yè)發(fā) 展的趨勢，而功能性微生物肥正發(fā)揮著保持作物高產(chǎn)、建立良好生態(tài)環(huán)境等作用，是發(fā)展質(zhì) 量農(nóng)業(yè)的有效保障。。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明是提供ECMA復(fù)合微生物菌劑的生產(chǎn)方法，在研究中本申請的發(fā)明人發(fā)現(xiàn) 氨基酸顆粒在青霉菌培養(yǎng)基中作為氮源，作用顯著，并且使用以氨基酸顆粒為營養(yǎng)物載體 的青霉菌微生物復(fù)合肥料對水稻、玉米等作物的生長過程的有益促進(jìn)、增收作用顯著。而枯 草牙孢桿菌（BY1336)微生物對水稻、玉米等作物的生長過程的有益促進(jìn)，以及對于重茬種 植的土壤，防治土傳病害效果顯著。
[0004] 本發(fā)明使用青霉菌，營養(yǎng)菌絲體無色，分枝成帚狀的分生孢子從菌絲體伸向空中， 各頂端的小梗產(chǎn)生鏈狀的青綠色的分生孢子，分生孢子表面光滑。該菌代謝時產(chǎn)生細(xì)胞分 裂素、吲哚乙酸、赤霉素等多種植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，還產(chǎn)生多種抗生素類的活性物質(zhì)。
[0005] 本發(fā)明是按照如下方式實現(xiàn)的：1、ECMA復(fù)合微生物菌劑的制造方法，其特征在于 該方法按下述步驟進(jìn)行： (1)斜面菌種培養(yǎng)：在裝有馬鈴薯培養(yǎng)基的試管中，接種菌株青霉菌（黑龍江棵樂農(nóng)業(yè) 有限公司提供），在26°C~34°C斜面培養(yǎng)一周，直至氣生的孢子堆呈青綠色； (2) 搖瓶菌種培養(yǎng)基與菌種培養(yǎng)： 培養(yǎng)基：葡萄糖 10 ~50g/l，KH2P04 0· 5 ~2g/l，K2HP04 0· 5 ~3g/1，（NH4)2S04 1 ~4g/1，MgS04 · 7H20 0· 2g/1，玉米漿 0· 5 ~3g/1，CaC035 ~20g/1，調(diào)節(jié)pH至 7. 0 ~8. 0 ; 在裝有搖瓶菌種培養(yǎng)基的三角瓶中，接種上述斜面培養(yǎng)菌種，在150轉(zhuǎn)/分搖床上， 26~37°C，培養(yǎng)20- 28小時； (3) 液體發(fā)酵罐種子培養(yǎng)基與擴大培養(yǎng)： 培養(yǎng)基：葡萄糖 10 ~200g/l，KH2P04 1 ~2g/l，K2HP04 1 ~3g/1，（NH4)2S04 2 ~6g/l，MgS04.7H20 0.2g/1，氨基酸顆粒1~10g/l，PH值為5.5~8.5,發(fā)酵溫度28~40°C， 通風(fēng)比0~1.Ovvm，攬摔轉(zhuǎn)速為20~500rpm，培養(yǎng)時間為36~54小時。
[0006] (4)固體發(fā)酵： 培養(yǎng)基：谷糠或稻糠35~55%、淀粉8~16%、氨基酸顆粒4~10%、麥麩0. 5~2%、磷 礦石粉10~15%、草炭灰或秸桿粉20~30%，按此比例配制的固體發(fā)酵培養(yǎng)基加水25~ 40%，pH6. 0 ~8. 0。
[0007] 在裝有上述培養(yǎng)基的固體培養(yǎng)箱中接種發(fā)酵罐種子液；接種量為5~10%，在 26~37°C進(jìn)行培養(yǎng)，通風(fēng)量為1:0. 2~0. 8,發(fā)酵136~168小時，產(chǎn)生孢子后，在55~ 80°C烘干得到所述的塊狀或粉末狀產(chǎn)品。
[0008] (5)均勻混合： 將上述1一4步驟制成的粉末狀產(chǎn)品與枯草牙孢桿菌(菌種BacillussubtilisY1336 來源自臺灣百泰生物科技公司）微生物制劑按1 :1的比例均勻混合后，制成ECMA。
[0009] 該ECMA復(fù)合微生物菌劑含有2億/克以上活孢子青霉菌及枯草牙孢桿菌（BY1336)，符 合農(nóng)用微生物菌劑標(biāo)準(zhǔn)。
[0010] 采用GB20287-2006《農(nóng)用微生物菌劑》規(guī)定中平板計數(shù)法檢測，上述方法制得的 ECMA復(fù)合微生物菌劑可以達(dá)到2億/克以上活孢子青霉菌與枯草牙孢桿菌（BY1336)，最高 可達(dá)到10億/克活孢子青霉菌及枯草牙孢桿菌（BY1336)。
[0011] 這種ECMA復(fù)合微生物菌劑可與有機肥、無機肥摻混用作農(nóng)作物基肥和追肥?；?方法是每畝用0. 8 - 2. 6千克，附著在有機肥、無機肥上，進(jìn)行穴施或溝施。
[0012] 填加ECMA復(fù)合微生物菌劑的生物肥具有下述積極效果： 該種菌劑在土壤中產(chǎn)生大量的纖維素酶，此種酶類直接參與土壤有機質(zhì)的分解過程， 可將復(fù)雜的含碳化合物分解為簡單的化合物，從而能夠保證植物對有機態(tài)養(yǎng)分的吸收。
[0013] 可以與植物根系形成內(nèi)生與外生菌根。菌根分泌的酸性磷酸酶，對溶解土壤中有 機、無機態(tài)磷酸鹽具有明顯的效果，從而增加了根際土壤有效磷的庫容強度，滿足了植物對 磷素營養(yǎng)在數(shù)量上的需求。
[0014] 能夠產(chǎn)生多種生理活性物質(zhì)，例如細(xì)胞分裂素、吲哚乙酸、赤霉素等。這些生理活 性物質(zhì)，可以明顯提高植物的發(fā)根力和對某些中、微量元素的吸收能力，促進(jìn)植物生長發(fā) 育，增加抗旱、抗病、耐鹽堿等抗逆性能。
[0015] 產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，可以有效抑制土壤中病原菌和病毒的生長與繁殖，凈化土壤，減 輕土傳病害的發(fā)生。
[0016] 可以將多種有機、無機物質(zhì)作為生物載體，并能夠在3 5天內(nèi)將有機載體轉(zhuǎn)化成 可被植物吸收的"綠色養(yǎng)分"，這對發(fā)展有機農(nóng)業(yè)和綠色產(chǎn)品生產(chǎn)，具有十分重要的意義。
[0017] 本發(fā)明ECMA復(fù)合微生物菌劑具有以下優(yōu)點： 1、改良土壤：施用本發(fā)明ECMA復(fù)合微生物菌劑以后，一方面ECMA中的有益微生物在作 物根部大量繁殖，并在繁殖過程中產(chǎn)生大量的次生代謝產(chǎn)物，這樣就能促進(jìn)土壤團粒結(jié)構(gòu) 的形成。土壤中形成的團粒結(jié)構(gòu)將板結(jié)的土壤變得疏松、同時使得其保肥、保水性及通氣性 能增強為農(nóng)作物提供了舒適的生長環(huán)境，因此可以促進(jìn)根系的生長發(fā)育。
[0018] 2、抗重茬：將本發(fā)明的ECMA復(fù)合微生物菌劑施入土壤，由于它含有大量的有益微 生物，故能使作物獲得比較全面均衡的營養(yǎng)，增加了作物的抗病性，因此起到了抗重茬的作 用。
[0019] 3、抗逆性強(抗寒、抗旱、抗病害）：本發(fā)明ECMA復(fù)合微生物菌劑在土壤中，可促使 菌根分泌大量的生理活性物質(zhì)，例如：細(xì)胞分裂素、吲哚乙酸、赤霉素等，可明顯提高植物的 發(fā)根力和對某些中、微量元素的吸收能力，刺激和促進(jìn)植物生長發(fā)育，增強發(fā)根能力，提高 營養(yǎng)成分吸收強度，調(diào)節(jié)植物生理代謝功能，增加抗旱、抗病、耐鹽堿等抗逆性能。本發(fā)明 ECMA復(fù)合微生物菌劑能夠給作物提供全面而均衡的營養(yǎng)，進(jìn)而大大的提高了植物對各種致 病菌的抵抗能力。
[0020] 4、顯著降低了化學(xué)肥料和農(nóng)藥的使用：由于本發(fā)明ECMA復(fù)合微生物菌劑中含有 的多種微量元素可以和氮、磷、鉀等大量元素構(gòu)成了一個營養(yǎng)平衡體系，從而促進(jìn)植物對 氮、磷、鉀的吸收，讓作物得到均衡營養(yǎng)，因此可以減少使用化肥。如果配合生物有機肥的使 用甚至可以不使用化肥。全面的營養(yǎng)使得作物生長茁壯不易生病，加之本發(fā)明ECMA復(fù)合微 生物菌劑中的可以加入絡(luò)合劑、活化劑、展著劑可以增強農(nóng)藥的生理活性，還能增加農(nóng)藥在 葉片的附著強度和時間，因此提高了農(nóng)藥的藥效。一方面不易生病，另一方面提高藥效其結(jié) 果就是可以明顯降低農(nóng)藥用量。在明顯降低化肥、農(nóng)藥用量的基礎(chǔ)上改換使用生物有機肥 和生物農(nóng)藥，對于生產(chǎn)有機農(nóng)產(chǎn)品是極為有利的。
[0021] 5、大幅度提高農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)、品味；本發(fā)明ECMA復(fù)合微生物菌劑能滿足作物的營 養(yǎng)均衡，使其按自身的生育規(guī)律發(fā)育，發(fā)育正常，代謝平穩(wěn)，理所當(dāng)然地會提高農(nóng)產(chǎn)品的品 質(zhì)，品味，恢復(fù)其天然風(fēng)味。
[0022] 6、增產(chǎn)增收效果明顯：本發(fā)明ECMA復(fù)合微生物菌劑含有的微生物在土壤萌發(fā)與 生長的過程中，可分泌大量有益植物生長的物質(zhì)，這些物質(zhì)刺激作物根系生長發(fā)達(dá)，從而可 以吸收更多作物所需的營養(yǎng)元素，且各元素間無拮抗，用其給作物施肥，作物對各種營養(yǎng)都 能全面而均衡的地吸收，不存在障礙因子，最小養(yǎng)分，因而也就能表現(xiàn)出最大的產(chǎn)量水平。
[0023] 7、ECMA通過與植物形成的內(nèi)生和外生菌根，可以分泌多種酶類，這些酶類對土壤 中有機化合物的降解和被固定態(tài)磷酸鹽的活化具有顯著的效果，可以明顯提高耕地土壤 的養(yǎng)分庫容： ①ECMA在土壤中可以產(chǎn)生多種代謝產(chǎn)物，這些物質(zhì)對抑制土壤中病原菌的生長與繁 殖，具有明顯的效果，從而達(dá)到凈化土壤、減少土壤病害發(fā)生目的。
[0024] ②ECMA進(jìn)入土壤之后，可以分泌大量的纖維素酶，在較短時間內(nèi)，能夠?qū)?fù)雜的 大分子含碳化合物，分解為簡單的小分子化合物，從而為植物提供了充足的有機態(tài)養(yǎng)分。
[0025] ③ECMA進(jìn)入土壤之后，能夠在土壤中分泌大量的磷酸酶，該種酶類對溶解土壤中 被固定態(tài)的磷酸鹽具有明顯的效果，可以為植物提供豐富的磷素營養(yǎng)，減少磷肥在土壤中 的固定。
[0026] 8、ECMA可以提高作物產(chǎn)量、改善作物品質(zhì)、減少化肥投入、降低生產(chǎn)成本、改良土 壤環(huán)境，是有機農(nóng)業(yè)種植首選的微生物制劑。肥效期長，通常情況下，生物效果可以達(dá)到3- 5個月。具有良好的休眠性，在干燥、通風(fēng)條件下，可以保存3-5年，而不失去生物活性。處 于休眠狀態(tài)的ECMA粉劑，可以與各種無機鹽類、殺蟲劑、殺菌劑共存；涂膜或混拌于各種無 機復(fù)混肥料中，不會出現(xiàn)高濃度無機鹽對生物致死現(xiàn)象。與發(fā)酵菌液相比，ECMA孢子粉劑 在各類肥料造粒工藝中，具有較強的耐高溫性。當(dāng)溫度、濕度達(dá)到適宜條件時，ECMA在土壤 中能夠快速萌發(fā)。
[0027] 9、對低溫冷害、凍害有特效：早春氣候不正常，低溫冷害，霜凍，倒春寒，大雪等對 農(nóng)作物有危害。果蔬，瓜類育苗期，定植期，一但發(fā)生凍害、冷害等，只要生長點還沒有凍死， ECMA就可挽救。
[0028] 10、降解有毒氣體：低空中的臭氧，一氧化碳，二氧化硫，酸雨等有毒氣體對植物的 傷害很大，很難預(yù)防。農(nóng)作物一旦被污染后有葉面發(fā)黃，很快就會枯萎。ECMA可盡快使作物 恢復(fù)正常，起死回生。
[0029]
【具體實施方式】
[0030] 通過下面實例更進(jìn)一步說明本發(fā)明，而這些實施并不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0031] 以下實例中： 菌株：青霉菌、枯草牙孢桿菌（BY1336) 斜面培養(yǎng)基配方：馬鈴薯