雙重選擇性PI3δ和γ激酶抑制劑的制作方法
【專利說明】雙重選擇性ΡΙ3δ和γ激酶抑制劑
[0001] 本申請(qǐng)要求2013年6月7日提交的印度專利申請(qǐng)第2501/CHE/2013號(hào)以及2013 年12月3日提交的印度專利申請(qǐng)第5567/CHE/2013號(hào)的權(quán)益，每篇申請(qǐng)均據(jù)此以引用的方 式全文并入。 發(fā)明領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明提供雙重delta(δ)及gamma(γ)ΡΙ3Κ蛋白激酶調(diào)節(jié)劑、其制備方法、含有 其的藥物組合物以及用其治療、預(yù)防和/或改善Pi3K激酶介導(dǎo)的疾病或病癥的方法。
[0003] 發(fā)明背景
[0004] 磷酸肌醇-3激酶（PI3K)屬于一類細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)激酶，所述激酶磷酸化磷酸肌醇脂 質(zhì)（PI)的肌醇環(huán)的3位羥基，從而產(chǎn)生脂質(zhì)第二信使。雖然α及β同種型的普遍分布， 但δ和γ的表達(dá)只限于循環(huán)造血細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞。與ΡΙ3Κ_α或β不同，缺乏γ或δ 表達(dá)的小鼠不顯示任何不利的表型，表明這些特定同種型的靶向不會(huì)導(dǎo)致明顯的毒性。 [0005] 最近，已提出將磷酸肌醇-3-激酶（ΡΙ3Κ)途徑的靶向抑制劑作為免疫調(diào)節(jié)劑。此 興趣源于以下事實(shí)：ΡΙ3Κ途徑在免疫細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中主要經(jīng)由產(chǎn)生一種膜結(jié)合的第二信 使磷脂酰肌醇（3,4,5)_三磷酸（ΡΙΡ3)發(fā)揮多重功能。ΡΙΡ3將蛋白質(zhì)募集至脂質(zhì)雙層的細(xì) 胞質(zhì)側(cè)，包括蛋白激酶及GTP酶，引發(fā)在免疫細(xì)胞黏著、迀移以及細(xì)胞-細(xì)胞通訊的調(diào)節(jié)中 重要的下游信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。
[0006] 4種I類ΡΙ3Κ同種型在其組織分布方面顯著不同。ΡΙ3Κα和ΡΙ3Κβ是普遍存 在的且是受體酪氨酸激酶（RTK)的經(jīng)活化的下游，而ΡΙ3Κδ和ΡΙ3Κγ主要限于造血及內(nèi) 皮細(xì)胞且分別是RTK和G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR)的經(jīng)活化的下游。小鼠遺傳學(xué)研究已揭露 ΡΙ3Κα和ΡΙ3Κβ對(duì)正常發(fā)育而言必不可少，而ΡΙ3Κδ和/或ΡΙ3Κγ的損失得到具有選擇 性免疫缺陷的可存活的后代。
[0007]ΡΙ3Κδ和ΡΙ3Κγ的表達(dá)模式及功能已使得對(duì)開發(fā)ΡΙ3Κδ/γ抑制劑作為用于 以下許多疾病的藥劑產(chǎn)生極大的興趣，所述疾病包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、過敏、哮喘、慢性阻 塞性肺病及多發(fā)性硬化癥（Hirsch等人，Pharmacol.Ther.，118,192_205,2008;Marone 等人，Biochim.Biophys.Acta.，1784,159-185, 2008;Rommel等人，Nat.Rev.Immunol.，7， 191-201,2007;Ruckle等人，Nat.Rev.DrugDiscov.，5,903-918,2006)。使用藥理學(xué)方 法及遺傳學(xué)方法兩者的研究已顯示該兩種同種型經(jīng)常顯示彼此協(xié)同的相互作用（Konrad 等人，J.Biol.Chem.，283, 33296-33303, 2008;Laffargue等人，Immunity，16,441-451， 2002)。舉例而言，在肥大細(xì)胞中，PI3Kδ對(duì)響應(yīng)于Fc-受體的IgE交聯(lián)的去顆粒而言必 不可少（Ali等人，J.Immunol.，180, 2538-2544, 2008)，但ΡΙ3Κγ在放大該反應(yīng)中發(fā)揮重 要作用（Laffargue等人，Immunity，16,441-451，2002)。類似作用已見于其它細(xì)胞功能 中，包括淋巴細(xì)胞歸巢及嗜中性粒細(xì)胞呼吸爆發(fā)，其中ΡΙ3Κγ發(fā)揮關(guān)鍵作用且PI3Kδ放 大每個(gè)過程。ΡΙ3Κδ和ΡΙ3Κγ的非冗余但相關(guān)的作用使得難以確定兩種同種型（單獨(dú) 或組合）中的哪種在特定炎癥性病癥中得以最佳靶向。使用缺乏ΡΙ3Κδ和/或ΡΙ3Κγ 或表達(dá)ΡΙ3Κδ和ΡΙ3Κγ的激酶-死變體的小鼠的研究在理解其作用方面是有價(jià)值的工 具。舉例而言，PI3Kδ敲除小鼠顯示出降低的嗜中性粒細(xì)胞趨化性、減少的抗體產(chǎn)生（T細(xì) 胞依賴性和非依賴性兩者）（Jou等人，Mol.Cell.Biol.，22,8580-8591，2002)、減少數(shù)量的 成熟B細(xì)胞（Clayton等人，J.Exp.Med.，196, 753-763, 2002;Jou等人，Mol.Cell.Biol.， 22,8580-8591，2002)、以及響應(yīng)于抗IgM在其增殖方面的減少（Jou等人，2002)。此表型 在PI3Kδ激酶-死變體中有復(fù)制且使用PI3Kδ選擇性抑制劑時(shí)，伴隨減少數(shù)量的肥大細(xì) 胞及肥大細(xì)胞增殖以及減弱的過敏反應(yīng)。ΡΙ3Κγ敲除含有較大數(shù)量但較小響應(yīng)性的嗜中 性粒細(xì)胞、較小數(shù)量且較小響應(yīng)性的巨噬細(xì)胞，并且樹突細(xì)胞呈現(xiàn)減少的肥大細(xì)胞去顆粒 (Laffargue等人，2002)、較高比率的CD4+與CD8+T細(xì)胞）、增加的胸腺細(xì)胞凋亡、CXCR3對(duì) 活化T細(xì)胞減少的誘導(dǎo)以及減弱的心肌收縮力。對(duì)心臟組織的后一種作用是對(duì)于以PI3Kγ 抑制劑向患者長(zhǎng)期給藥的擔(dān)憂。然而，此問題在當(dāng)ΡΙ3Κγ激酶-死變體（其更好地模擬 激酶的抑制而非蛋白質(zhì)的損失）顯示類似的免疫細(xì)胞表型時(shí)得以極大地緩和，但重要的是 沒有心臟缺陷。心臟作用在后來顯示系由于支架作用而非ΡΙ3Κγ的催化活性導(dǎo)致。雙 重ΡΙ3Κδ/ΡΙ3Κγ敲除是可行的但在Τ細(xì)胞發(fā)育及胸腺細(xì)胞存活方面呈現(xiàn)出嚴(yán)重缺陷。 ΡΙ3Κγ敲除/ΡΙ3Κδ激酶-死亡組合產(chǎn)生類似表型，表明至少在免疫系統(tǒng)內(nèi)部，ΡΙ3Κδ的 作用或許僅是催化作用。使用敲除及激酶死亡小鼠解釋研究可具有挑戰(zhàn)性，此是由于所述 模型僅提供免疫系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)圖片，缺乏暫時(shí)的及劑量控制，并且不允許充分了解動(dòng)態(tài)免疫 反應(yīng)將如何對(duì)可逆性抑制做出反應(yīng)。具有變化型態(tài)的選擇性抑制劑（ΡΙ3Κδ、ΡΙ3Κγ及 ΡΙ3Κδ/γ)為白細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)研究所必需的，以便評(píng)定每種ΡΙ3Κ對(duì)免疫細(xì)胞活化的相對(duì) 貢獻(xiàn)（Olusegon等人，Chemistry&Biology，1，123-134(2010)，包括其中所引用的參考文 獻(xiàn)）。
[0008]δ/γ的雙重抑制被強(qiáng)烈地視為氣道的過敏性及非過敏性炎癥以及其它自身免疫 疾病中的干預(yù)策略。對(duì)于ΡΙ3Κ_δ和γ參與哮喘及C0PD中所潛在的各種細(xì)胞過程中的科 學(xué)證據(jù)源于抑制劑研究及基因靶向方法。再者，對(duì)于常規(guī)療法諸如皮質(zhì)類固醇在若干C0PD 患者中的抗性已歸因于ΡΙ3Κδ/γ途徑的上調(diào)。因此，ΡΙ3Κ_δ/γ信號(hào)傳導(dǎo)的中斷提供一 種目的在于抵消免疫炎性反應(yīng)的新型策略。由于ΡΙ3Κ_δ和γ在介導(dǎo)炎癥細(xì)胞功能性諸如 白細(xì)胞迀移和活化以及肥大細(xì)胞去顆粒中所發(fā)揮的關(guān)鍵性作用，所以阻斷這些同種型也可 能為治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎同樣有效的策略。鑒于這些同種型在免疫監(jiān)督中確定的關(guān)鍵性， 特別是靶向S和γ同種型的抑制劑將預(yù)期減緩在氣道炎癥和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中所遭遇的 免疫反應(yīng)的進(jìn)展（William等人Chemistry&Biology，17,123-134, 2010 以及Thompson等人 Chemistry&Biology，17 :101-102, 2010)。
[0009] 關(guān)于PI3K及相關(guān)蛋白激酶途徑的綜述及研究已由以下給出：Liu等人，Nature ReviewsDrugDiscovery，8,627-644,2009);NathanΤ·等人，MolCancerTher·，8(1)， 2009;Marone等人，BiochimicaetBiophysica厶(^&，1784，159-185,2008 以及]\^^1]1&11等 人，AnnalsofOncologyAdvanceAccess，2009年8 月出版。類似地，關(guān)于ΡΙ3Κδ和γ的 作用的綜述及研究已由以下給出：William等人，Chemistry&Biology，17,123-134, 2010以 及Timothy等人J.Med.Chem.，55 (20)，8559-8581，2012。所有這些文獻(xiàn)公開內(nèi)容均據(jù)此以 全文引用的方式并入。
[0010] 化合物諸如IPI-145及CAL130已經(jīng)報(bào)導(dǎo)作為Pi3Kδ/γ的雙重抑制劑。IPI-145 是在用于癌癥、哮喘以及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的臨床研究中。ΙΡΙ-45已經(jīng)報(bào)導(dǎo)具有75mgBID 的最大耐受劑量（MTD)(第 55 屆ASH'?AnnulaMeetingNew0releans-LA，2013 年 12 月 7-10日）。沒有關(guān)于CAL-130出于臨床目的而在研究中的報(bào)導(dǎo)。
[0011] 仍然存在對(duì)于用于治療與SγΡΙ3Κ激酶介導(dǎo)的事件相關(guān)聯(lián)的疾病及病癥的雙重 δ/γΡΙ3Κ調(diào)節(jié)劑的未滿足的需要。
[0012] 在本文中對(duì)國(guó)際公布第W0 11/055215號(hào)和第W0 12/151525號(hào)以及美國(guó)公布第 2011/0118257號(hào)及第2012/0289496號(hào)做出進(jìn)一步參考，每篇公布以全文引用的方式并入 本文中。
[0013] 發(fā)明概述
[0014] 本發(fā)明涉及ΡΙ3Κδ和γ蛋白激酶的選擇性雙重抑制劑。這些化合物適用于治療 ΡΙ3Κ相關(guān)疾病、病癥或疾患例如增殖性疾病，諸如癌癥的藥物組合物中。ΡΙ3Κδ和γ蛋白 激酶兩者的抑制可在某些疾病及病癥的治療中提供有益的作用。
[0015] 本發(fā)明的選擇性雙重抑制劑包括下列化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽及其前藥：
[0016] (RS) -2- (1- (9Η-嘌呤-6-基氨基）丙基）-3- (3-氟苯基）-4Η-色烯-4-酮（化合 物Α)
[0017] (S) -2- (1- (9Η-嘌呤-6-基氨基）丙基）-3- (3-氟苯基）-4Η-色烯-4-酮（化合 物Α1)
[0018] (R) -2- (1- (9Η-嘌呤-6-基氨基）丙基）-3- (3-氟苯基）-4Η-色烯-4-酮（化合 物Α2)
[0019] 本發(fā)明化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)如下顯示。
[0020]
[0021] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及化合物⑶-2-(1-(9Η-嘌呤-6-基氨基）丙 基）-3- (3-氟苯基）-4Η-色烯-4-酮，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0022] 在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物（S)-2-(1-(9Η-嘌呤-6-基氨基）丙基）-3_ (3-氟苯 基）-4H-色烯-4-酮或其藥學(xué)上可接受的鹽基本上不含（例如，含有小于約10重量％， 諸如小于約5重量％、小于約2. 5重量％、小于約1重量％、小于約0. 1重量％或不含） (R) -2- (1- (9H-嘌呤-6-基氨基）丙基）-3- (3-氟苯基）-4H-色烯-4-酮及其藥學(xué)上可接 受的鹽。
[0023] 在另一實(shí)施方案中，化合物（S)-2-(1-(9H-嘌呤-6-基氨基）丙基）-3_ (3-氟苯 基）-4H-色烯-4-酮或其藥學(xué)上可接受的鹽具有大于約90%，諸如大于約91%、大于約 92 %、大于約93 %、大于約94 %、大于約95 %、大于約96 %、大于約97 %、大于約98 %、大于 約99%、大于約99. 5%、大于約99. 9%或大于約99. 99%的對(duì)映異構(gòu)體過量。
[0024] 在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及化合物（S)-2-(1-(9H-嘌呤-6-基氨基）丙 基）-3- (3-氟苯基）-4H-色烯-4-酮（化合物A1)。
[0025] 本發(fā)明進(jìn)一步提供一種藥物組合物，其包含一種或多種本發(fā)明化合物（諸如化合 物A1)以及藥學(xué)上可接受的載劑。藥物組合物可進(jìn)一步包含一種或多種其它活性劑（諸如 下文討論的抗癌劑及活性劑）。在一個(gè)實(shí)施方案中，藥物組合物包括治療有效量的一種或多 種本發(fā)明化合物。
[0026] 另一實(shí)施方案為一種通過向患者施用有效量的至少一種本發(fā)明化合物在患者中 抑制ΡΙ3Κδ和γ的方法。
[0027] 又一實(shí)施方案為一種通過向患者施用有效量的至少一種本發(fā)明化合物在患者中 治療、預(yù)防和/或抑制ΡΙ3Κ蛋白激酶介導(dǎo)的疾病、病癥或疾患（諸如癌癥或其它增殖性疾 病或病癥）的方法。
[0028] 本發(fā)明的又一實(shí)施方案為一種通過向患者施用有效量的至少一種本發(fā)明化合物 在患者中抑制ΡΙ3Κ、特別是ΡΙ3Κδ和γ激酶的方法。
[0029] 本發(fā)明的又一實(shí)施方案為一種通過向需要該治療的患者施用有效量的至少一種 本發(fā)明化合物而經(jīng)由調(diào)節(jié)蛋白激酶（諸如ΡΙ3δ和γ激酶）來治療炎癥性、自身免疫或增 殖性疾病的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物抑制ΡΙ3Κδ和γ蛋白激酶兩者。
[0030] 本發(fā)明的又一實(shí)施方案為一種通過向需要該治療的患者以與至少一種其它抗炎 劑、免疫調(diào)節(jié)劑或抗癌劑（或其組合）組合（同時(shí)或依次）施用有效量的至少一種本發(fā)明 化合物而經(jīng)由調(diào)節(jié)蛋白激酶（諸如ΡΙ3δ和γ激酶）來治療炎癥性、自身免疫或增殖性疾 病的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物抑制ΡΙ3Κδ和γ蛋白激酶兩者。
[0031] 本發(fā)明化合物適用于治療多種癌癥，所述癌癥包括但不限于以下：
[0032] 癌瘤，包括但不限于膀胱癌、乳房癌、結(jié)腸癌、腎癌、肝癌、肺癌（包括小細(xì)胞肺 癌）、食道癌、膽囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌以及皮膚癌（包 括鱗狀細(xì)胞癌）；
[0033] 淋巴系的造血系腫瘤，包括但不限于白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性淋巴母 細(xì)胞性白血病、Β細(xì)胞淋巴瘤、Τ細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤（HodgkiYslymphoma)、非 霍奇金氏淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤及伯基特淋巴瘤（Burkett'slymphoma);
[0034] 骨髓系的造血系腫瘤，包括但不限于急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生異常綜 合征及早幼粒細(xì)胞性白血??；
[0035] 間充質(zhì)來源的腫瘤，包括但不限于纖維肉瘤及橫紋肌肉瘤；
[0036] 中樞及末梢神經(jīng)系統(tǒng)的腫瘤，包括但不限于星形細(xì)胞瘤（astrocytoma)、神經(jīng)母細(xì) 胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤及神經(jīng)鞘瘤；以及
[0037] 其它腫瘤，包括但不限于黑素瘤、精原細(xì)胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、著色性干皮病、角 化棘皮瘤（keratoctanthoma)、甲狀腺濾泡性癌癥及卡波西氏肉瘤（Kaposi^ssarcoma)。
[0038] 在一個(gè)實(shí)施方案中，施用本發(fā)明化合物以治療白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急 性淋巴母細(xì)胞性白血病、B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴 瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生異常綜合征及早幼 粒細(xì)胞性白血病。
[0039] 由于蛋白激酶一般而言在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖中的關(guān)鍵作用，所以本發(fā)明的蛋白激酶抑 制劑可充當(dāng)可逆性細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑，且可因此適用于治療特征為異常細(xì)胞增殖的任何疾病 過程，例如，良性前列腺肥大、家族性腺瘤病息肉病、神經(jīng)纖維瘤病、動(dòng)脈粥樣硬化、肺纖維 化、關(guān)節(jié)炎、銀肩病、血管球性腎炎、血管成形術(shù)或血管手術(shù)后的再狹窄、肥厚性瘢痕形成、 炎癥性腸病、移植排斥、內(nèi)毒素性休克以及真菌感染。
[0040] 作為細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)劑的本發(fā)明化合物適用于治療癌癥（包括但不限于在上文 中所提及的那些類型）、病毒感染（包括但不限于皰疹病毒、痘病毒、埃-巴二氏病毒 (Epstein-Barrvirus)、辛德畢斯病毒（Sindbisvirus)及腺病毒）、自身免疫疾?。ò?但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫介導(dǎo)的血管球性腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀肩病、炎癥 性腸病及自身免疫性糖尿?。?、神經(jīng)變性病癥（包括但不限于阿爾茨海默氏病、AIDS相關(guān)性 癡呆、帕金森氏癥、肌萎縮性側(cè)索硬化、色素性視網(wǎng)膜炎、脊髓性肌萎縮及小腦變性）、骨髓 增生異常綜合征、再生障礙性貧血、與心肌梗塞相關(guān)的缺血性損傷、中風(fēng)及再灌注損傷、心 律不齊、動(dòng)脈粥樣硬化、毒素誘發(fā)或酒精相關(guān)的肝病、血液系統(tǒng)疾?。òǖ幌抻诼载?血及再生障礙性貧血）、肌骨胳系統(tǒng)的退行性疾?。òǖ幌抻诠琴|(zhì)疏松癥及關(guān)節(jié)炎）、 阿斯匹林敏感性鼻竇炎、囊腫性纖維化、多發(fā)性硬化癥、腎病以及癌癥疼痛。本發(fā)明化合物 也適用于預(yù)防、抑制或遏止HIV感染個(gè)體中的AIDS發(fā)展。
[0041] 本發(fā)明化合物可調(diào)節(jié)細(xì)胞RNA及DNA合成的程度。這些試劑因此適用于治療病毒 感染，包括但不限于HIV、人類乳頭狀瘤病毒、皰疹病毒、痘病毒、埃-巴二氏病毒、辛德畢斯 病毒及腺病毒。
[0042] 本發(fā)明化合物適用于癌癥的化學(xué)預(yù)防?；瘜W(xué)預(yù)防是定義為通過阻斷起始性突變誘 發(fā)事件或通過阻斷已遭受損傷的前惡性細(xì)胞的進(jìn)展來抑制侵襲性癌癥的發(fā)展，或抑制腫瘤 復(fù)發(fā)。本發(fā)明化合物也適用于抑制腫瘤血管生成及轉(zhuǎn)移。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案為一種通 過施用有效量的一種或多種本發(fā)明化合