一種半日花烷型二萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術領域，具體涉及從燈心草的干燥莖髓中分離得到的一種具有 治療骨破壞性疾病作用的半日花烷型二萜類化合物及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 燈心草別名燈芯草、燈草，為燈心草科植物燈心草JuncuseffususL.的干燥莖 髓。夏末至秋季割取莖，曬干，取出莖髓，理直，扎成小把。為多年生稀一年生草本，主產(chǎn)于江 蘇、福建、四川、貴州、云南，通常生長在草甸、沼澤、水邊及陰濕的環(huán)境中。味甘、淡，性微寒， 歸心、肺、小腸經(jīng)，是治療心煩少眠、高熱口渴、尿少澀痛、小兒疳積、口舌生瘡等癥的傳統(tǒng)藥 物。
[0003] 各國學者對燈心草屬植物的化學成分進行了一系列研究，發(fā)現(xiàn)其化學成分比較復 雜，主要含二萜類、三萜類、苯并香豆素類、留類化合物，此外還含有黃酮類、糖類及苷等化 合物。
[0004] 燈心草屬植物在中國和日本都有悠久的藥用歷史，被收錄于很多醫(yī)藥學著作。燈 心草屬植物中大部分化合物為具有二氫菲和菲母核的二萜類化合物，并且都具有酚羥基， 因此許多化合物都具有較好的生物活性。燈心草具有抗藻活性、抗菌活性、抗?jié)裾罨钚?、?氧化活性、抗病毒活性、鎮(zhèn)靜作用等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從燈心草的干燥莖髓中分離得到的一種具有治療骨破 壞性疾病作用的半日花烷型二萜類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結構式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：(a)將燈心草的干燥莖髓粉 碎，用70~80 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟 (a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱體積，再用80%乙醇洗 脫10個柱體積，收集80 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得80 %乙醇洗脫物浸膏；（C)步驟（b)中 80 %乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1、45:1、25:1、15:1和1:1的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用 體積比為20:1、15:1和8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分 2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫， 收集10~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0010] 進一步地，所述大孔樹脂為D101大孔吸附樹脂。
[0011] 進一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為75 %。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I)在制備治療骨破壞性疾病的藥物中的應用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療骨破壞性疾病的藥物中的應用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物（I)結構式；
[0019] 圖2為化合物（I)理論E⑶值與實驗E⑶值比較。
【具體實施方式】
[0020] 下面結合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對 本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的實質(zhì)和范圍。
[0021] 實施例1 :化合物（I)分離制備及結構確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化 學試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學試劑有限公司。
[0023] 制備方法：（a)將燈心草的干燥莖髓（10kg)粉碎，用75 %乙醇熱回流提取 (25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3 次）和水飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（431g) 和正丁醇萃取物；(b)步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用D101大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗 脫8個柱體積，再用80 %乙醇洗脫10個柱體積，收集80 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得80 %乙 醇洗脫物浸膏（161g) ;(c)步驟（b)中80%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比 為75:1 (8個柱體積）、45:1 (8個柱體積）、25:1 (8個柱體積）、15:1 (10個柱體積）和1:1 (5 個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分4 (52g)用正相 硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1 (8個柱體積）、15:1 (10個柱體積）和8:1 (8個柱體 積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2 (26g)用十八烷基硅 烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10-12個柱 體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)(224mg)。
[0024]結構確證：白色粉末，熔點126~128°C;HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z345. 2410， 結合核磁特征可得分子式為C2QH3403，不飽和度為4。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ρρηι，DMS0-d6， 500MHz) :H-1(0. 84，m)，H-1(L52，m)，H-2(L29，m)，H-2(L56，m)，H-3(L00，m)，Η-3(1· 17， m)，Η-5(0· 82,m)，Η-6(4· 31，br，d，J= 2· 3)，Η-7(1· 48,m)，Η-7(1· 83,br，d，J= 13. 8)， H-9(l. 01，m)，H-11(1. 76，m)，H-11(2. 02，m)，H-12(5. 43，m)，H-14(3. 24，dd，J= 5. 0,3. 6)， H-15 (2. 57,dd，J= 7. 0, 3. 6)，H-15 (2. 66,dd，J= 7. 0, 5. 0)，H-16 (1. 80,s)，H-17 (1. 25， s)，H-18(0.87,s)，H-19(1.06,s)，H-20(1.02,s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)Sc(ppm，DMS0-d6， 125MHz) :41. 2 (CH2,1-C)，18. 1 (CH2, 2-C)，43. 5 (CH2, 3-C)，32. 8 (C，4-C)，56. 4 (CH，5-C)， 67. 7 (CH，6-C)，50. 3 (CH2, 7-C)，72. 8 (C，8-C)，61. 6 (CH，9-C)，38. 6 (C，10-C)，23. 2 (CH2， 11-C)，129. 8(CH，12-C)，136. 1 (C，13-C)，61. 9(CH，14-C)，43. 3(CH2, 15-C)，14. 6(CH3， 16-C)，25. 1(CH3，17-C)，32. 5(CH3，18-C)，22. 7(CH3，19-C)，16. 1(CH3,20-C);碳原子標記參 見圖1。紅外光譜表明該化合物含有羥基（3432cm3和環(huán)氧基團（1273和867cm3。i-NMR 譜顯示了 五個甲基信號[δHO. 87(s，Me-18)，1. 02(s，Me-20)，1. 06(s，Me-19)，1. 25(s， 10-17)和1.80(8，]^-16)]，一個含氧亞甲基質(zhì)子信號[5!12.57((1(1，了 = 7.0,3.6抱，!1-15)， 2. 66(dd，J= 0,5· 0Hz，H-15)]，兩個含氧次甲基質(zhì)子信號[δΗ4· 31(br，d，J= 2. 3Hz， H-6)，3. 24 (dd，J= 5. 0, 3. 6Hz，H-14)]，一個烯屬次甲基信號[δH5. 43 (m，H-12)]。此外， 13C-NMR譜顯示出20個碳信號，包括五個甲基，六個亞甲基（一個含氧亞甲基），五個次甲 基（一個烯屬次甲基，兩個含氧次甲基），以及四個季碳（一個烯烴季碳，一個含氧季碳）。 HMBC譜中，Η-5α和Η-7α與C-6,以及H-6與C-8和C-10之間的相關性表明C-6位連有 一個羥基。通過Η-6的耦合常數(shù)（δΗ4. 31，br，d，J= 2. 3Hz)，可知C-6位的羥基為β 構型。N0ESY譜中，Η-6與Η-5和H-7ax的相關性驗證了上述推論。烯屬次甲基質(zhì)子信號 [δH5. 43 (m，H-12)]以及碳信號[δC129. 8 (C-12)和 136. 1 (C-13)]表明該化合物含有一 個三取代雙鍵。此外，次甲基碳（δC61. 9)和末端亞甲基（δC43. 3)信號以及氫質(zhì)子信號 [δΗ2. 57(dd，J= 7. 0,3· 6Hz，H-15)，2. 66(dd，J= 7. 0,5· 0Hz，H-15)，3. 24(dd，J= 5. 0， 3. 6Hz，H-14)]表明了 14, 15-環(huán)氧結構的