農(nóng)用復(fù)合菌的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及復(fù)合菌種的培育領(lǐng)域，尤其涉及一種農(nóng)用復(fù)合菌的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前國(guó)內(nèi)微生物菌劑發(fā)展迅速，用以做復(fù)合肥、有機(jī)肥、沖施肥等的功能菌，可有 效提高肥料利用率，防治細(xì)菌真菌病害感染，見效快，收益高。現(xiàn)在很多使用的農(nóng)業(yè)微生物 復(fù)合菌主要是按照各個(gè)菌種使用功能以不同比例復(fù)配的，或者是多種相同屬性的菌種配成 復(fù)合菌，單獨(dú)通過(guò)液體培養(yǎng)或者單獨(dú)通過(guò)固體培養(yǎng)，這樣容易產(chǎn)生菌種之間互相抵觸，導(dǎo)致 難以實(shí)現(xiàn)功能統(tǒng)一，功效較低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題，在于提供一種農(nóng)用復(fù)合菌的制備方法，包括以下步驟：
[0004] 1、選取菌種:根據(jù)用途選取農(nóng)用微生物菌并確定各菌種的相對(duì)比例后作為復(fù)合菌 種，所述農(nóng)用微生物菌包括固氮菌、根瘤菌、芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌、放線菌或真菌中的 一種以上；
[0005] 2、液體發(fā)酵:將選取好的各農(nóng)用微生物菌按照各自的培養(yǎng)基配方，通過(guò)液體發(fā)酵， 擴(kuò)大培養(yǎng)獲得各微生物菌液；
[0006] 3、固體發(fā)酵:在固體發(fā)酵罐中依次投入60 %農(nóng)作副產(chǎn)物、20 %大豆粉或玉米粉、 10 %糖蜜水溶液和10 %復(fù)合菌液，投料完后進(jìn)行48-72小時(shí)的固體發(fā)酵，所述復(fù)合菌液為步 驟2通過(guò)液體發(fā)酵后的各微生物菌液混合所得，其中各菌液的比例為步驟1所確定的比例；
[0007] 4、出料:經(jīng)過(guò)固體發(fā)酵后，檢測(cè)后出料，出料的物料水分控制在25-35 %之間；
[0008] 5、包裝:物料下罐，隨后立即包裝并抽真空。
[0009] 進(jìn)一步的，所述復(fù)合菌種中各菌種的比例為：固氮菌30%-40%、根瘤菌20%-30%、芽孢桿菌30%-60%、酵母菌20%-40%、乳酸菌20%-30%、放線菌10%-20%、真菌 5%-10%〇
[0010] 進(jìn)一步的，所述農(nóng)作副產(chǎn)物為米糠、米?；蛎撝卓贰?br>[0011] 進(jìn)一步的，所述糖蜜水溶液中糖蜜和水比例為1: 3。
[0012] 進(jìn)一步的，所述步驟3中，固體發(fā)酵罐中各參數(shù)控制為:溫度在30_40°C之間，初始 水分控制在30%-50%，風(fēng)量比控制在0.2-0.5之間，固體攪拌轉(zhuǎn)速控制在2-5轉(zhuǎn)/分。
[0013] 進(jìn)一步的，所述步驟3中，在固體發(fā)酵期間每隔4小時(shí)檢測(cè)物料的水分、水溶液pH 值、0D600值、菌落計(jì)數(shù)的參數(shù)指標(biāo)。
[0014]進(jìn)一步的，所述步驟1中，選取比例為40%芽孢桿菌、40%酵母、20%乳酸菌作為用 于畜禽養(yǎng)殖的復(fù)合菌種。
[0015]進(jìn)一步的，所述步驟2中，芽孢桿菌采用枯草芽孢桿菌，其培養(yǎng)基配方:葡萄糖2%、 淀粉0.5%、酵母膏1 %、蛋白胨1 %、磷酸二氫鉀0.2g%、磷酸氫二鉀0.2%、氯化鈉0.5%、硫 酸錳0.1 % ;pH值調(diào)制6.80-7.2，培養(yǎng)溫度控制在31°C，發(fā)酵48小時(shí)；
[0016]所述酵母菌采用畢赤酵母，其培養(yǎng)基配方:葡萄糖2%，蔗糖1%、蛋白胨1%，酵母 膏1 %、磷酸二氫鉀0.25%、磷酸氫二鉀0.25% ;pH自然，培養(yǎng)溫度控制在29°C，發(fā)酵48小時(shí)；
[0017] 所述乳酸菌采用嗜酸乳桿菌，其培養(yǎng)基配方:葡萄糖4%、蔗糖2%、蛋白胨1 %、磷 酸二氫鉀〇 . 25%、磷酸氫二鉀0.25%、玉米漿1 %、硫酸錳0.1 %、硫酸鎂0.1 % ;pH控制在 6.5-6.8之間，培養(yǎng)溫度控制在34°C、發(fā)酵48小時(shí)。
[0018] 進(jìn)一步的，所述步驟3中，在固體發(fā)酵罐中投入60 %米糠和20 %大豆粉，經(jīng)過(guò)130 °〇、0.謂?&蒸汽高壓滅菌3〇!^11，待其冷卻至室溫后，再投入10%糖蜜水，經(jīng)過(guò)溫度為121°〇 和壓力為O.IMpa的高溫滅菌，滅菌持續(xù)20-30min，冷卻至室溫，接著再投入10%復(fù)合菌液。
[0019] 進(jìn)一步的，所述步驟3中，投料完后，固體發(fā)酵罐中設(shè)定培養(yǎng)溫度控制在36°C，初始 水分控制在35%，攪拌控制在4轉(zhuǎn)/分，前24小時(shí)不通風(fēng)，24小時(shí)后開始通風(fēng)，通風(fēng)比控制在 0.35，60小時(shí)后開始通熱風(fēng)，溫度設(shè)定在120°C，當(dāng)物料水分降至30%時(shí)，停止通熱風(fēng)并出 料;物料下罐進(jìn)行真空包裝，其中的有效活菌數(shù)2 1Xl〇9cfu/g。
[0020] 進(jìn)一步的，所述步驟1中，選取固氮菌、根瘤菌、放線菌、巨大芽孢桿菌作為用于農(nóng) 業(yè)種植的復(fù)合菌種。
[0021] 進(jìn)一步的，所述步驟1中，選取地衣芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌、放線菌、真菌為用于 農(nóng)業(yè)廢棄物生物堆肥的復(fù)合菌種。
[0022]本發(fā)明具有如下的優(yōu)點(diǎn)：
[0023] 1、用固液聯(lián)合培養(yǎng)農(nóng)業(yè)使用的復(fù)合微生物菌，節(jié)約成本，提高效率；
[0024] 2、可將不同的農(nóng)作副產(chǎn)物合理利用，將其變廢為寶；
[0025] 3、前期通過(guò)液體培養(yǎng)使各菌種迅速擴(kuò)大，后期將不同的微生物菌放在同一個(gè)發(fā)酵 罐培養(yǎng)，菌種在相同環(huán)境下共同培養(yǎng)以及共同生存以及相互協(xié)同作，提高菌種之間的契合 度，不僅提高有效活菌數(shù)同時(shí)增強(qiáng)復(fù)合菌功能。
【具體實(shí)施方式】
[0026]本發(fā)明的農(nóng)用復(fù)合菌的制備方法，包括以下步驟：
[0027] 1、選取菌種:根據(jù)用途選取農(nóng)用微生物菌并確定各菌種的比例后作為復(fù)合菌種， 所述復(fù)合菌種中各菌種的比例為：固氮菌30%_40%、根瘤菌20%-30%、芽孢桿菌30%-60%、酵母菌20%-40%、乳酸菌20%-30%、放線菌 10%-20%、真菌5%-10%。
[0028] 2、液體發(fā)酵:將選取好的各農(nóng)用微生物菌按照各自的培養(yǎng)基配方，通過(guò)液體發(fā)酵， 擴(kuò)大培養(yǎng)獲得各微生物菌液；
[0029] 3、固體發(fā)酵:在固體發(fā)酵罐中投入60 %農(nóng)作副產(chǎn)物、20 %大豆粉或玉米粉、10 %糖 蜜水溶液和10 %復(fù)合菌液，投料完后進(jìn)行48-72小時(shí)的固體發(fā)酵，所述農(nóng)作副產(chǎn)物為米糠、 米?；蛎撝卓?，所述糖蜜水溶液中糖蜜和水比例為1:3,所述復(fù)合菌液為步驟2通過(guò)液體 發(fā)酵后的各微生物菌液混合所得，其中各菌液的比例為步驟1所確定的比例；固體發(fā)酵罐中 各參數(shù)控制為:溫度在30_40°C之間，初始水分控制在30 % -50 %，風(fēng)量比控制在0.2-0.5之 間，固體攪拌轉(zhuǎn)速控制在2-5轉(zhuǎn)/分;在固體發(fā)酵期間每隔4小時(shí)檢測(cè)物料的水分、水溶液pH 值、0D600值、菌落計(jì)數(shù)的參數(shù)指標(biāo)；
[0030] 4、出料:經(jīng)過(guò)固體發(fā)酵后，檢測(cè)后出料，出料的物料水分控制在25-35 %之間；
[0031] 5、包裝:物料下罐，隨后立即包裝并抽真空。
[0032] 實(shí)施例1
[0033] 1、選取比例為40%芽孢桿菌、40%酵母、20%乳酸菌作為用于畜禽養(yǎng)殖的復(fù)合菌 種。
[0034] 2、將選取好的各農(nóng)用微生物菌按照各自的培養(yǎng)基配方，通過(guò)液體發(fā)酵，擴(kuò)大培養(yǎng) 獲得各微生物菌液；
[0035] 所述芽孢桿菌采用枯草芽孢桿菌，其培養(yǎng)基配方:葡萄糖2 %、淀粉0.5 %、酵母膏 1 %、蛋白胨1 %、磷酸二氫鉀〇. 2g%、磷酸氫二鉀0.2 %、氯化鈉0.5 %、硫酸錳0.1 % ;pH值 調(diào)制6.80-7.2，培養(yǎng)溫度控制在31°C，發(fā)酵48小時(shí)；
[0036] 所述酵母菌采用畢赤酵母，其培養(yǎng)基配方:葡萄糖2%，蔗糖1%、蛋白胨1%，酵母 膏1 %、磷酸二氫鉀0.25%、磷酸氫二鉀0.25% ;pH自然，培養(yǎng)溫度控制在29°C，發(fā)酵48小時(shí)；
[0037] 所述乳酸菌采用嗜酸乳桿菌，其培養(yǎng)基配方:葡萄糖4%、