一種用于治療卵巢癌的新的二萜化合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從益母草干燥地上部分中分離得到的一種二 萜化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 益母草（16011111'118」3。011；[0118!10111：1：)為唇形科植物益母草，藥用部分是干燥或新 鮮地上部分，全國各地均產(chǎn)。益母草是一味古老的中藥材，《神農(nóng)本草經(jīng)》、《本草綱目》等古 代醫(yī)藥著作均有記載。一年或二年生草本全國大部分地區(qū)均有分布，生于山野荒地、田埂、 草地等。在夏季生長茂盛花未全開時采摘，味辛苦、涼，活血、祛淤、調(diào)經(jīng)、消水，治療婦女月 經(jīng)不調(diào)，胎漏難產(chǎn)，胞衣不下，產(chǎn)后血暈，瘀血腹痛，崩中漏下，尿血、瀉血，癰腫瘡瘍。古時常 用于婦科疾病，故名為益母。
[0003] 益母草的化學(xué)成分是益母草中發(fā)揮藥理作用的主要因素。益母草中主要含有的化 合物有:生物堿類，黃酮類，二萜類，苷類，脂肪酸類，揮發(fā)油類，環(huán)型多肽等，并含有鋅，銅， 錳，鐵等多種微量元素。
[0004] 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，益母草還有溶栓，抗凝，降脂，降血黏度，降低紅細(xì)胞聚集，抑制血 小板聚集，改善微循環(huán)，抗氧自由基等諸多作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從益母草干燥地上部分中分離得到的一種二萜化合物， 含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(I):
[0008]
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將益母草干燥地上部分粉 碎，用70~80%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水 飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a) 中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫8個柱 體積，收集70 %洗脫液，減壓濃縮得70 %乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70 %乙醇洗脫濃縮 物用正相硅膠分離，依次用體積比為50:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到 4個組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1、5:1和2:1的二 氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠 分離，用體積百分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液 減壓濃縮得到純的化合物(I)。
[0010] 進(jìn)一步地，步驟(a)中，用75%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0011] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的載 體。
[0013] 所述的化合物(I)在制備治療卵巢癌的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療卵巢癌的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對 人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物(I)結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物（I)計算E⑶和實驗E⑶圖。
【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0021 ] 主要材料、試劑來源及儀器類型：
[0022]乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試劑有限 公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023]實施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0024] (a)將益母草干燥地上部分(8kg)粉碎，用75%乙醇熱回流提取(30LX3次），合并 提取液，濃縮至無醇味(6L)，依次用石油醚(6L X 3次）、乙酸乙酯(6L X 3次)和水飽和的正丁 醇(6LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(375g)和正丁醇萃取物；（b)步 驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇 洗脫8個柱體積，收集70 %洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物（129g);(c)步驟(b)中 70 %乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為50:1 (8個柱體積）、30 :1 (8個柱體 積）、15:1(8個柱體積)和5:1(10個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d)步 驟(c)中組分4(27g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為8:1(8個柱體積）、5:1(10個柱 體積）和2:1(8個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2 (15g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗 脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)(38mg)。
[0025] 結(jié)構(gòu)確證:冊431]\^顯示[]\1+他]+為111/2 469.1802，結(jié)合核磁特征可得分子式為 C24H3Q〇8，不飽和度為 10。核磁共振氫譜數(shù)據(jù) δΗ( ppm，DMS〇-d6，600MHz ):H-l(5.01，d，J = 4.9)，H-2(4.49，br，d，J=4.9)，H-3(4.05，br，s)，H-5(2.75，s)，H-7(5.77，s)，H-9(2.86， m)，H-ll(1.37，m)，H-12(4.38，dd，J=10.2,4.0)，H-14(2.63，d，J=16.0)，H-14(2.16，d，J = 16.0)，H-15(5.79，dd，J=17.8，11.2)，H-16(5.12，d，J=11.2)，H-16(4.97，d，J=17.8)， H-17( 1.01，s)，H-19( 1.48, s)，H-20( 1.03, s)，2-C0CH3(2.18, s)，12-C0CH3( 1.99, s);核磁共 振碳譜數(shù)據(jù)3。（口口111，0150-(16，15冊抱）：78.5(〇1，1-〇,72.2(〇1，2-〇,76.4(〇1，3-〇,46.1 (C，4-C)，57.7(CH，5-C)，193.9(C，6-C)，126.0(CH，7-C)，155.1(C，8-C)，45.4(CH，9-C)， 41.5(C，10-C)，11.9(CH2，11-C)，76.6(CH，12-C)，41.1(C，13-C)，43.1(CH2，14-C)，138.8 (CH，15-C)，116.2(CH2，16-C)，20.0(CH 3，17-C)，175.3(C，18-C)，17.2(CH3，19-C)，20.7 (CH 3，20-C)，169 · 1 (C，2-C0CH3)，25 · 7 (CH3，2-C0CH3)，170 · 3 (C，12-C0CH3)，25 · 8 (CH3，12-C0CH3);碳原子標(biāo)記參見圖1。紅外光譜表明該化合物含有羥基(3438CHT 1)和羰基（1757(31^1) 基團(tuán)。4和13C NMR譜表明該化合物含有一個酮羰基，一個酯羰基，兩個乙酰氧基，單取代和 三取代雙鍵。此外，典型的乙烯基[雙二重峰狃5.79( J= 17.8和11.2Hz，H-15)，兩個雙峰δ Η5.12( J= 11.2Hz，H-16)，4.97( J = 17.8Hz，Η-16)和δ(：138.8(015)，116.2(C-16)和20.0 (C-l7)]和偕甲基[δΗΙ. 07 (s，Me-17)]信號表明該化合物為二萜類化合物。HMBC譜中，C-l3 與 Me-17;C-15 與!1-12，!1-168，!12-14和]^-17;(：-17與!1-12，!12-14，!1-15和!12