用布氏乳桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于混菌固態(tài)發(fā)酵飼料制備技術(shù)領(lǐng)域，具體是用布氏乳桿菌和植物乳桿菌 組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 木薯渣是我國主要的農(nóng)副產(chǎn)品飼料資源之一，應(yīng)用微生物固態(tài)發(fā)酵木薯渣能有效 解決其水分含量高不能長(zhǎng)期貯存、蛋白質(zhì)含量低及適口性差等問題。大量青貯微生物制劑 的研究都集中在單菌方面，主要研究如何提高飼料蛋白質(zhì)含量、降低粗纖維含量，如何提高 飼料發(fā)酵品質(zhì)等。大部分研究認(rèn)為，混合菌種發(fā)酵飼料比單一菌種效果好。應(yīng)用微生物發(fā)酵 木薯渣，菌株的選擇及搭配非常關(guān)鍵，微生物品種繁多，但目前研究的微生物品種及搭配非 常有限，用布氏乳桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的研究基本未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種用布氏乳桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方 法，能有效解決木薯渣水分含量高不能長(zhǎng)期貯存、蛋白質(zhì)含量低及適口性差等問題，能顯著 提高發(fā)酵木薯渣的乙酸和丙酸含量，降低pH值，有效改善木薯渣品質(zhì)。
[0004] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：用布氏乳桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法， 包括如下步驟：
[0005] (1)新鮮木薯渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0006] (2)向經(jīng)過步驟⑴處理過的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加1%的尿素 或者添加1%尿素+0.6%紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃 度；
[0007] (3)將布氏乳桿菌和植物乳桿菌的菌液以1:1的體積比混合，按木薯渣干物質(zhì)5% 的量進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá)到2.0 X 105cfu/g和3 · 3 X 105cfu/g;
[0008] (4)將步驟(3)添加了布氏乳桿菌和植物乳桿菌混合制劑的木薯渣，用生理鹽水調(diào) 制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀 態(tài)，密封，置于室溫下貯藏；
[0009] (5)將步驟⑷包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0010] 本發(fā)明應(yīng)用的微生物菌種來源:植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum);布氏乳 桿菌(Lactobasillus buchneri)均購買于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心。
[0011] 本發(fā)明應(yīng)用的尿素和紅糖來源:尿素和紅糖均為市購。
[0012] 本發(fā)明應(yīng)用的培養(yǎng)基:MRS的液體培養(yǎng)基用于植物乳桿菌、布氏乳桿菌活化和菌液 培養(yǎng);MRS固體培養(yǎng)基用于植物乳桿菌和布氏乳桿菌涂板計(jì)數(shù)；
[0013] 試驗(yàn)菌種的活化及擴(kuò)培：安瓿管凍干菌種-活化-按5%添加量接種到相應(yīng)的液 體培養(yǎng)基中，植物乳桿菌和布氏乳桿菌的培養(yǎng)條件為溫度37°C，靜態(tài)培養(yǎng)。
[0014] 接種液計(jì)數(shù):采用涂板對(duì)各菌種接種液進(jìn)行計(jì)數(shù)。
[0015] 除另有說明外，本發(fā)明所述的百分比均為質(zhì)量百分比，各組分含量百分?jǐn)?shù)之和為 100%。本發(fā)明的有益效果：
[0016] 1、經(jīng)產(chǎn)品檢測(cè)，采用布氏乳桿菌+植物乳桿菌+尿素固態(tài)發(fā)酵木薯渣后，得到木薯 渣發(fā)酵產(chǎn)物中pH值由3.49降低到3.27 ;采用布氏乳桿菌+植物乳桿菌+尿素+紅糖固態(tài)發(fā)酵 木薯渣后，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中pH值由3.49降低到3.12，乙酸含量由18.9lmmol/kg提高 到22.84mmol/kg，丙酸含量為4.40mmol/kg，其中空白組、對(duì)照組和布氏乳桿菌+植物乳桿菌 +尿素組均未檢出丙酸。通過在木薯渣固體發(fā)酵過程中添加布氏乳桿菌和植物乳桿菌能夠 有效改善木薯渣品質(zhì)。
[0017] 2、本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，便于操作，原料豐富易得。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明。
[0019] 以下實(shí)施例僅為本發(fā)明示意性的【具體實(shí)施方式】，并非用以限定本發(fā)明的范圍。任 何本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和原則的前提下所作的等同變化、修改與結(jié) 合，均應(yīng)屬于本發(fā)明保護(hù)范圍。
[0020] 實(shí)施例1
[0021] 本發(fā)明所述的用布氏乳桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法的一個(gè)實(shí) 例，操作步驟如下：
[0022] (1)將新鮮木薯渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0023] (2)向經(jīng)過步驟（1)處理過的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加1%的尿素 作為氮源；
[0024] (3)將布氏乳桿菌和植物乳桿菌的菌液以1:1的體積比混合，按木薯渣干物質(zhì)5% 的量進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá)到2.0 X 105cfu/g和3 · 3 X 105cfu/g;
[0025] (4)將步驟(3)添加了布氏乳桿菌和植物乳桿菌混合制劑的木薯渣，用生理鹽水調(diào) 制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀 態(tài)，密封，置于室溫下貯藏；
[0026] (5)將步驟⑷包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0027]應(yīng)用Agilent 7890A型氣相色譜儀測(cè)定木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中的乙酸和丙酸含量。產(chǎn) 品檢測(cè)結(jié)果為：
[0028]采用布氏乳桿菌+植物乳桿菌+尿素固態(tài)發(fā)酵木薯渣后，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中pH 值由3.49降低到3.27;
[0029] 實(shí)施例2
[0030] 本發(fā)明所述的用布氏乳桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法的另一個(gè) 實(shí)例，操作步驟如下：
[0031] (1)新鮮木薯渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0032] (2)向經(jīng)過步驟（1)處理過的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加1%尿素+ 0.6 %紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度。
[0033] (3)將布氏乳桿菌和植物乳桿菌的菌液以1:1的體積比混合，按木薯渣干物質(zhì)5% 的量進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá)到2.0 X 105cfu/g和3 · 3 X 105cfu/g;
[0034] (4)將步驟(3)添加了布氏乳桿菌和植物乳桿菌混合制劑的木薯渣，用生理鹽水調(diào) 制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀 態(tài)，密封，置于室溫下貯藏；
[0035] (5)將步驟(4)包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。 [0036]應(yīng)用Agilent 7890A型氣相色譜儀測(cè)定木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中的乙酸和丙酸含量，產(chǎn) 品檢測(cè)結(jié)果為：
[0037]采用布氏乳桿菌+植物乳桿菌+尿素+紅糖固態(tài)發(fā)酵木薯渣后，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn) 物中PH值由3.49降低到3.12，乙酸含量由18.91111111〇1/1^提高到22.84111111〇1/1^，丙酸含量為 4.40mmol/kg，其中空白組、對(duì)照組和布氏乳桿菌+植物乳桿菌+尿素組均未檢出丙酸。
[0038]應(yīng)用Agilent 7890A型氣相色譜儀測(cè)定木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中的乙酸和丙酸含量。不 同微生物添加劑對(duì)木薯渣發(fā)酵品質(zhì)的影響見表1。
[0039] 表1不同微生物添加劑對(duì)木薯渣發(fā)酵品質(zhì)的影響
[0040]
[0041] 注：同列無字母或肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差 異顯著(P〈〇. 05)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用布氏乳桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法，其特征在于，操作步驟如 下： (1) 新鮮木薯渣在65°c下烘干后作為發(fā)酵原料； (2) 向經(jīng)過步驟（1)處理過的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加1%尿素或者添 加1 %尿素+0.6 %紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度； (3) 將布氏乳桿菌和植物乳桿菌的菌液以1:1的體積比混合，按木薯渣干物質(zhì)5 %的量 進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá)到2.0X105cfu/ g和3.3X105cfu/g; (4) 將步驟(3)添加了布氏乳桿菌和植物乳桿菌混合制劑的木薯渣，用生理鹽水調(diào)制含 水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)， 密封，置于室溫下貯藏； (5) 將步驟⑷包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
【專利摘要】用布氏乳桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法，以木薯渣為發(fā)酵原料，將布氏乳桿菌和植物乳桿菌的菌液以1:1的體積比混合，按木薯渣干物質(zhì)5％的量進(jìn)行接種。按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分添加0.6％的紅糖，調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度，添加1％尿素作為氮源，用生理鹽水調(diào)制含水量為60～65％，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。經(jīng)過發(fā)酵處理后，能顯著提高發(fā)酵木薯渣的乙酸和丙酸含量，降低pH值，有效改善木薯渣品質(zhì)。
【IPC分類】C12R1/25, C12P7/54, C12P1/04, C12P7/52, C12R1/225
【公開號(hào)】CN105483168
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510953330
【發(fā)明人】唐慶鳳, 鄒彩霞, 彭開屏, 韋升菊, 梁辛, 楊炳壯, 梁賢威, 黃鋒, 李麗莉, 林波, 楊承劍, 彭麗娟
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)水牛研究所
【公開日】2016年4月13日
【申請(qǐng)日】2015年12月18日