一種預(yù)防與治療腫瘤的肽聚糖-鋅螯合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明是一種新物質(zhì)的合成，此物質(zhì)涉及醫(yī)藥、食品及飼料添加、生物化學(xué)等領(lǐng)域，特別涉及醫(yī)藥領(lǐng)域。
二、【背景技術(shù)】
[0002]現(xiàn)在只有對(duì)肽聚糖的制備及其方法，但并未有人進(jìn)行肽聚糖-鋅螯合物的制備。
[0003]肽聚糖對(duì)腫瘤的抑制和預(yù)防效果有限。肽聚糖的提取工藝耗費(fèi)時(shí)間長，操作繁瑣，提取率低，且提取試劑具有危險(xiǎn)性。
[0004]現(xiàn)在只有用多肽或者有機(jī)酸來改變鋅的形態(tài)，使無機(jī)鋅離子轉(zhuǎn)變成有機(jī)鋅化合物。而本發(fā)明首次使用多肽與糖的聚合物來改變鋅的形態(tài)，在不改變肽聚糖活性的情況下，使功效疊加。
三、
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明合成了一種新的物質(zhì)，可從各種細(xì)菌中提取，由肽聚糖和鋅離子螯合而成。此物質(zhì)對(duì)食道癌、結(jié)腸癌、膀胱癌、肝癌、肺癌和乳腺癌等具有抑制作用，對(duì)頭頸部癌癥、食道癌及結(jié)腸癌等癌癥的具有預(yù)防作用，能提高身體免疫力。同時(shí)，還具有高效補(bǔ)鋅的效果?？勺鳛樗幤?、保健品、食品及飼料補(bǔ)鋅劑。
[0006]本發(fā)明在肽聚糖制備方法的基礎(chǔ)上，對(duì)制備方法進(jìn)行了改進(jìn)制備出一種新型物質(zhì)(肽聚糖-鋅螯合物)。本物質(zhì)可以從各類細(xì)菌細(xì)胞壁中提取合成，且對(duì)肽聚糖提取工藝進(jìn)行了改進(jìn)，縮短了提取時(shí)間，增加了操作的簡便性、有效性和安全性，增加了防治癌癥的療效。
[0007]本發(fā)明首次利用多肽和糖的聚合物來改變鋅的形態(tài)，將無機(jī)鋅離子轉(zhuǎn)變成了有機(jī)鋅化合物，增加了人體吸收的高效性，使肽聚糖與鋅的功效得到疊加。
四、【具體實(shí)施方式】
[0008]制備方法:
[0009]1、收集菌種:將乳酸菌(雙歧桿菌、嗜熱鏈球菌、保加利亞菌等皆可)經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后，4000r/min，30min離心后，取沉淀溫箱65°C，2_3h烘干，以恒重為準(zhǔn)。
[0010]2、去除磷壁酸:取乳酸菌樣品，按照固體液體比為1:5加入預(yù)熱至65°〇、10%1^八(三氯乙酸)，65°C抽提lh。離心4000r/min，30min，去上清液，取沉淀用雙蒸水徹底洗滌。蒸餾水和乙醇(1:2)清洗5次，每次五分鐘，4000r/min離心。
[0011]3、去脂:取沉淀，按固液(1:3)加入甲醇，4000r/min，30min離心。同法甲醇:氯仿(1:1)及氯仿各清洗一次，脫脂后離心，控干氯仿。
[0012]4、水解多余蛋白質(zhì)并進(jìn)行螯合:將固體物質(zhì)轉(zhuǎn)入平皿中，加入10ml提前過濾除菌并預(yù)熱至37°C的含有胰蛋白酶(lmg/ml)及堿性蛋白酶(0.5mg/ml)、ΡΗ7.2的Tris-HCl緩沖液、400yg/mL ZnCl。將平皿置于空氣搖床，37°C振蕩孵育24h。孵育結(jié)束后，三角瓶中的樣品離心(4000r/min，15min)獲得沉淀，將沉淀用PH7.2的Tris-HCl的緩沖液振蕩搖勻后，離心(4000r/min，30min)，棄上清，如此離心清洗兩次。
[0013]5、乳酸菌壁肽聚糖-鋅螯合物的分離純化:向沉淀加入400yg/mL ZnCl溶液，將螯合液連續(xù)進(jìn)行透析，透析后45°C溫箱烘干，得到肽聚糖-鋅螯合物。
[0014]產(chǎn)品為淡黃色，提取合成率可達(dá)12%。
[0015]產(chǎn)品說明:肽聚糖鋅螯合物包括完整肽聚糖與鋅的螯合物、非完整肽聚糖(即肽聚糖片段)與鋅的螯合物。以上提取的大部分是完整肽聚糖與鋅的螯合物。細(xì)菌中一般都可以提取合成肽聚糖-鋅螯合物。
[0016]效果:1、單一的肽聚糖只能做到對(duì)結(jié)腸癌等腫瘤細(xì)胞進(jìn)行抑制，且防治效果有限。單一的鋅以離子形態(tài)不易讓人體吸收，且有副作用。
[0017]2、肽聚糖-鋅螯合物的效果比肽聚糖預(yù)防和治療更加有效，尤其對(duì)消化系統(tǒng)癌癥，且改變了鋅的形態(tài)，使人體對(duì)鋅的吸收更加高效，提高人體免疫力，輔助肽聚糖更加防治癌癥。
[0018]3、肽聚糖-鋅螯合物的提取合成工藝更比單一肽聚糖的提取更加簡便、安全，縮短了提取時(shí)間，提高了提取效率。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.肽聚糖-鋅螯合物，其特征為由肽聚糖與鋅螯合而成，可從細(xì)菌中提取。2.—種肽聚糖-鋅螯合物的制備方法，其特征是，包括(I)收集菌種并用65°C烘箱烘干；(2)用65°C的TCA(三氯乙酸)去除磷壁酸并經(jīng)雙蒸水、蒸餾水、乙醇洗滌沉淀；(3)加入甲醇去脂；(4)水解多余蛋白質(zhì)并加入400yg/mL ZnCl進(jìn)行螯合；(5)向沉淀中加入400yg/mLZnCl溶液，將乳酸菌壁肽聚糖-鋅螯合物進(jìn)行連續(xù)透析，分離純化，然后烘干。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽聚糖-鋅螯合物，其特征是，由鋅離子與完整肽聚糖或非完整肽聚糖(肽聚糖片段)螯合而成。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的肽聚糖-鋅螯合物，其特征是，以多肽與糖的聚合物將鋅離子轉(zhuǎn)變成有機(jī)鋅化合物。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽聚糖-鋅螯合物，其特征是，可以從各種細(xì)菌中提取合成。6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的肽聚糖-鋅螯合物的制備方法，其特征是，在收集菌種時(shí)沉淀用溫箱65°C，2-3h烘干，以恒重為準(zhǔn)。7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的肽聚糖-鋅螯合物的制備方法，其特征是，在去除磷壁酸沉淀時(shí)加入65°C的TCA(三氯乙酸)，先用雙蒸水洗滌，然后用蒸餾水和乙醇(1: 2)清洗5次，每次五分鐘。8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的肽聚糖-鋅螯合物的制備方法，其特征是，在去脂時(shí)按固液(1:3)向沉淀中加入甲醇。9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的肽聚糖-鋅螯合物的制備方法，其特征是，在水解多余蛋白質(zhì)并進(jìn)行鋅螯合時(shí)用平皿加入37°C的含有胰蛋白酶(lmg/ml)及堿性蛋白酶(0.5mg/ml)、PH7.2的Tris-HCl緩沖液、400yg/mL ZnCl進(jìn)行孵育螯合。10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的肽聚糖-鋅螯合物的制備方法，其特征是，在乳酸菌壁肽聚糖-鋅螯合物分離純化時(shí)向沉淀中加入400yg/mL ZnCl溶液，將螯合液連續(xù)進(jìn)行透析，透析后45°C溫箱烘干，得到肽聚糖-鋅螯合物。
【專利摘要】本發(fā)明是一種預(yù)防與治療腫瘤的肽聚糖-鋅螯合物，此物質(zhì)涉及醫(yī)藥、食品及飼料添加、生物化學(xué)等領(lǐng)域，特別涉及醫(yī)藥領(lǐng)域。單一的肽聚糖對(duì)腫瘤的防治效果有限，且肽聚糖的提取工藝繁瑣，耗時(shí)長，危險(xiǎn)性大。肽聚糖-鋅螯合物的效果比肽聚糖防治腫瘤更加有效，尤其對(duì)消化系統(tǒng)癌癥，肽聚糖-鋅螯合物的提取合成工藝更比單一肽聚糖的提取更加簡便、高效、安全。單一的鋅離子不易讓人吸收，且有副作用。本發(fā)明首次利用多肽和糖的聚合物來改變鋅的形態(tài)，將無機(jī)鋅離子轉(zhuǎn)變成有機(jī)鋅化合物物，使人體對(duì)鋅的吸收更加高效，提高人體免疫力，更能輔助肽聚糖的防治癌癥功效。此物質(zhì)對(duì)多種癌癥具有抑制和預(yù)防作用，能提高身體免疫力，還具有高效補(bǔ)鋅的效果。
【IPC分類】A61P35/00, A61K38/16, C08B37/00
【公開號(hào)】CN105504084
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610085401
【發(fā)明人】許玉燦
【申請(qǐng)人】許玉燦
【公開日】2016年4月20日
【申請(qǐng)日】2016年2月2日