快速核酸提取方法、核酸提取方法和核酸提取設(shè)備的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本申請涉及核酸的提取并且尤其涉及通過提取裝置或設(shè)備提取核酸。
【背景技術(shù)】
[0002]核酸是所有已知生命形式必需的聚合大分子。核酸包括DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)，DNA和RNA由被稱為核苷酸的單體制成。在活物中發(fā)現(xiàn)的最重要的大分子是核酸和蛋白質(zhì)，因為其在編碼、傳輸以及表達遺傳信息方面起作用。為了檢驗核酸，需要‘提取’工藝?！疤崛　钡钠渌Q包括“純化”、“分離”或“濃縮”。提取核酸的復(fù)雜的實驗室方法是已知的，如通過柱色譜和基于磁珠的分離的提取。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]根據(jù)本申請的第一方面，提供一種方法，其包括:構(gòu)造含有洗滌緩沖液的可破裂的密封盒；將所述密封盒插入注射器裝置中以使得所述密封盒安置在所述注射器裝置的下端之上并且在所述注射器裝置的柱塞之下；將所述注射器裝置的下端插入含有包含核酸的溶液的容器中，所述容器進一步包括配置為捕獲核酸的膜；按壓所述注射器裝置的該柱塞以首先迫使所述溶液通過所述膜，以使得所述膜保留核酸而同時使所述溶液的不想要的組分從中穿過；其后使得所述密封盒破裂以釋放所述洗滌緩沖液；以及進一步推進所述注射器裝置的該柱塞以驅(qū)動所述洗滌緩沖液流出所述注射器裝置的下端并且通過所述膜，而在所述膜上留下純核酸。
[0004]優(yōu)選地，其中通過按壓所述柱塞產(chǎn)生的氣動壓力迫使所述溶液通過所述膜。
[0005]優(yōu)選地，其包括，采用第二注射器設(shè)備，該第二注射器設(shè)備被配置為進一步洗滌所述膜，以洗脫所選核酸。
[0006]優(yōu)選地，其中，所述所選核酸包括以下中的一者:RNA、DNA、cDNA、cRNA、修飾DNA、修飾 RNA、tRNA、rRNA、tmRNA、PM、LNA、GNA 或 TM。
[0007]優(yōu)選地，其中，所述可破裂的密封盒包括固體中空主體組件和附接到所述固體中空主體組件的材料，該材料是可破裂的以釋放所述洗滌緩沖液。
[0008]優(yōu)選地，其中，所述材料是金屬箔片，并且其中通過刺穿所述箔片使所述密封盒破
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[0009]根據(jù)本申請的第二方面，提供一種快速核酸提取方法，其采用第一容器，該第一容器具有包含開口的上端和填充有配置為保留核酸的膜的下端，并且進一步采用注射器裝置，該注射器裝置包括筒管和可移動地安裝在所述筒管中的柱塞，所述方法包括:構(gòu)造含有洗滌緩沖液液體的洗滌緩沖液釋放密封盒；將所述洗滌緩沖液釋放密封盒插入所述注射器裝置中；使第二容器預(yù)填充有核酸制備溶液，選擇該核酸制備溶液以破碎原始樣品的細(xì)胞，從而釋放核酸并且保存所述核酸；將含有核酸的原始樣品引入該經(jīng)預(yù)填充的第二容器中并且攪拌所述第二容器的內(nèi)容物以產(chǎn)生待備用于提取的經(jīng)處理的核酸溶液；使所述第一容器填充有所選量的所述經(jīng)處理的核酸溶液；將所述注射器裝置插入所述第一容器中；向下按壓所述注射器裝置的該柱塞以產(chǎn)生氣壓，以首先迫使所述經(jīng)處理的核酸溶液通過所述膜，從而在所述膜上捕獲核酸，而同時使所述經(jīng)處理的核酸溶液的其它組分穿過所述膜；其后使得所述洗滌緩沖液釋放密封盒在所述柱塞下方位置處釋放所述洗滌緩沖液；以及進一步向下推進所述柱塞以驅(qū)動所述洗滌緩沖液通過所述膜，從而留下滯留在所述膜上的純核酸。
[0010]優(yōu)選地，其中，所述原始樣品包含固體材料。
[0011 ] 優(yōu)選地，其中，所述原始樣品是液體。
[0012]優(yōu)選地，其中，通過將所述樣品與所述核酸制備溶液混合來攪動所述第二容器的所述內(nèi)容物。
[0013]優(yōu)選地，其中，通過采用振蕩步驟攪動所述第二容器的所述內(nèi)容物。
[0014]優(yōu)選地，其進一步包括采用第二注射器設(shè)備以進一步洗滌所述膜，從而洗脫所選核酸。
[0015]優(yōu)選地，其中，所述所選核酸包括以下中的一者:RNA、DNA、cDNA、cRNA、修飾DNA、修飾 RNA、tRNA、rRNA、tmRNA、PM、LNA、GNA 或 TM。
[0016]優(yōu)選地，其中，所述密封盒包括固體中空主體組件和附接到所述固體中空主體組件的材料，該材料是可破裂的以釋放所述洗滌緩沖液。
[0017]根據(jù)本申請的第三方面，提供一種方法，其包括:構(gòu)造含有洗滌緩沖液的可破裂的密封盒；將所述密封盒插入注射器裝置中；將所述注射器裝置插入容器中，該容器包含核酸溶液和包括配置用以捕獲核酸的膜；按壓所述注射器裝置的柱塞以首先迫使所述溶液通過所述膜；其后使得所述密封盒破裂以釋放所述洗滌緩沖液；以及進一步推進所述柱塞以驅(qū)動所述洗滌緩沖液通過所述膜。
[0018]根據(jù)本申請的第四方面，提供一種核酸提取方法，其采用含有可破裂的密封盒的注射器裝置，所述密封盒含有洗滌緩沖液，它安置在所述注射器裝置的下端之上且在所述注射器裝置的柱塞之下，所述方法包括:將所述注射器裝置的下端插入含有包含核酸的溶液的容器中，所述容器進一步包括配置為捕獲核酸的膜；按壓所述注射器裝置的該柱塞以首先迫使所述溶液通過所述膜以使得所述膜保留核酸，而同時使所述溶液的不想要的組分從中穿過；其后使得所述密封盒破裂以釋放所述洗滌緩沖液；以及進一步推進所述注射器裝置的該柱塞以驅(qū)動所述洗滌緩沖液流出所述注射器裝置的下端并且通過所述膜，而在所述膜上留下純核酸。
[0019]優(yōu)選地，其中，通過按壓所述柱塞產(chǎn)生的氣動壓力迫使所述溶液通過所述膜。
[0020]優(yōu)選地，其包括，采用第二注射器設(shè)備，該第二注射器設(shè)備被配置為進一步洗滌所述膜，以洗脫所選核酸。
[0021]優(yōu)選地，其中，所述所選核酸包括以下中的一者:RNA、DNA、cDNA、cRNA、修飾DNA、修飾 RNA、tRNA、rRNA、tmRNA、PM、LNA、GNA 或 TM。
[0022]優(yōu)選地，其中，所述可破裂的密封盒包括固體中空主體組件和附接到所述固體中空主體組件的材料，該材料是可破裂的以釋放所述洗滌緩沖液。
[0023]根據(jù)本申請的第五方面，提供一種核酸提取設(shè)備，其包括:第一容器，其配置為容納待備用于提取的核酸溶液并且具有位于其下端處的膜，所述膜配置為捕獲核酸而同時使所述溶液的其它組分穿過；可插入所述第一容器的開口頂端中的注射器，所述注射器含有響應(yīng)于所述注射器的柱塞的啟動而可向下移動的密封盒，所述密封盒具有安裝在其下端的長釘，所述長釘具有延伸出所述密封盒下端的第一末端，所述密封盒進一步具有橫跨其頂部開口的密封件，所述密封盒進一步含有緩沖液溶液；以及其中，所述密封盒如此配置并且安置在所述注射器內(nèi)，以使得所述密封盒在所述注射器內(nèi)的向下移動首先迫使所述第一容器中的所述核酸溶液通過所述膜、而其后所述長釘接觸所述注射器的下表面以擊穿所述密封件，從而將所述緩沖液溶液釋放到所述第一容器中。
[0024]根據(jù)本申請的第六方面，提供一種設(shè)備，其包括:可破裂的密封盒，其含有溶液；注射器裝置，其含有安置在柱塞下方的所述密封盒；密封機構(gòu)，其與所述密封盒結(jié)合提供以分離所述注射器裝置中的第一和第二腔室；破裂機構(gòu)，其用于破裂所述密封盒；所述密封盒、注射器、柱塞、密封機構(gòu)和破裂機構(gòu)如此配置以從所述注射器分配第一量的第一流體并且其后從所述注射器分配第一量的所述密封盒中的該溶液。
【附圖說明】
[0025]圖1是說明性的核酸溶液制備程序的步驟的示意圖；
[0026]圖2是說明在說明性的核酸提取工藝中所采用的其它步驟和設(shè)備的側(cè)視圖；
[0027]圖3是處于經(jīng)組裝狀態(tài)的圖2的設(shè)備的側(cè)視圖；
[0028]圖4是說明性的洗滌緩沖液密封盒的側(cè)視截面圖；
[0029]圖5是圖4的密封盒的主體組件的側(cè)視截面圖；
[0030]圖6是圖4的密封盒的俯視圖；
[0031]圖7是圖4的密封盒的長釘組件的側(cè)視圖；
[0032]圖8是說明根據(jù)圖4的密封盒在與圖2和3中所說明的設(shè)備協(xié)作的注射器中的布置的側(cè)視不意圖；
[0033]圖8A是說明處于洗滌緩沖液釋放位置的圖4的密封盒的側(cè)視截面圖；
[0034]圖9說明采用第二注射器以獲得純核酸的工藝。
[0035]圖10是替代密封盒實施例的側(cè)視截面圖