2] LC-MS:tR = 3.067min，MS = 226
[0053] HPLC:tR = 3.278min，84%，214nm。
[0054] (5)室溫下，將.
，220ml DCM(二氯甲烷)依次加入 500ml三口瓶?jī)?nèi)，向反應(yīng)體系中滴加 Br2(6 · 4g，0 · 0405moI，0 · 95eq)與100mLDCM的混合溶液。 滴加完全后，HPLC監(jiān)控。反應(yīng)完全后，直接旋干即可得到紅色油狀液體目標(biāo)產(chǎn)物
12.3g，收率 100%。
[0055] LC-MS:tR = 3.731min,MS = 304〇
[0056] (6)在室溫下，將
>，200ml DCM，三乙胺（12.1g， 0.012mol，1.2eq)依次加入三口瓶?jī)?nèi)。向反應(yīng)體系中加入Boc20(24g，0.0105mol，1.05eq)。 反應(yīng)完全后，旋干后得到白色固體
，粗品產(chǎn)率105%，直接用于下一步。
[0057] LC-MS :tR=min，MS = 144
[0058] HPLC:tR=min,90% ,214nm
[0059] (7)在室溫下，氮?dú)獗Ｗo(hù)
（27.368,0.12111〇1，169)，勞倫斯試劑 (24.26g，0.06mol，0.5eq)混合后加入1,4-二氧六環(huán)250ml，混合后加熱到50°C，4h。液質(zhì)監(jiān)
控，反應(yīng)完全后。將反應(yīng)體系直接旋干即可得到目標(biāo)產(chǎn)物 51.86g粗品(含有勞倫 ， 斯試劑衰敗產(chǎn)物），純度50%。粗品為粘度很大的淡黃色油狀液體。
[0060] (8)室溫下，將
（42.53g，0.14mol，leq)
0. Hlmol，leq)和300ml甲醇依次加入500ml三口瓶中。50°C氮?dú)獗Ｗo(hù)下攪拌2h，反應(yīng)生成
液質(zhì)監(jiān)控，待反應(yīng)完全后，向反應(yīng)體系中直接加入濃鹽酸，液質(zhì)監(jiān)控，使 用二氯甲燒（5*50ml)萃取，水相加20%氫氧化鈉堿化至?!1>12，堿化完成后再用乙酸乙酯 (5*50ml)萃取(有機(jī)相比較干凈，可以直接用于下一步反應(yīng)）。柱層析（Si〇2，PE/EA=l/l~ DCM: MeOH = 10:1 )，旋干得到29.1 g黃色油狀液體，收率60 %。
將反應(yīng)體系直接旋干，先后加 100mL水
[0061] (9)冰浴條件下，氮?dú)獗Ｗo(hù)，向100mL三口瓶中先后加> l·0eq，10mmol)，20mlDCM(二氯甲烷），DIPEA(N，N-二異丙基乙胺）（l·9g，l·5eq，15mmol)，向 反應(yīng)體系中滴加
，滴加完成后室溫下攪拌4h，TLC反應(yīng)完全 后，加 IOml水淬滅反應(yīng)，DCM萃取(3*10ml)，無(wú)水硫酸鈉干燥后柱層析(Si02，PE/EA=10/l~ 3/1)得到化合物1
黃色固體，產(chǎn)率為60%。
[0062] LC-MS: tR = 4 · 52min，MS = 505，化合物1的核磁譜圖如圖1所示。
[0063] 實(shí)施例2:化合物2的制備
[0064]本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于步驟（9)所用原料不同，在本實(shí)施例中用
〇
[0065]實(shí)施例3:化合物3的制備
[0066] 本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別僅在于步驟（9)所用原料不同，在本實(shí)施例中用
[0067] 下面采用實(shí)驗(yàn)例1和實(shí)驗(yàn)例2來(lái)測(cè)定化合物1的生物活性。本發(fā)明的化合物，與現(xiàn)有 殺菌劑相比具有更為優(yōu)異的生物活性，可用于防治由終極腐霉、辣椒疫霉、荔枝霜疫霉、煙 草疫霉和致病疫霉等多種病原卵菌引起的病害。
[0068] 實(shí)驗(yàn)例1:抑制病原菌菌絲生長(zhǎng)試驗(yàn)
[0069] 采用微孔板法測(cè)定本發(fā)明化合物1的離體抑菌活性，具體操作步驟如下:稱取供試 藥劑〇. Ig溶于IOmL二甲亞砜(DMSO)中，制成高濃度藥液母液，然后以無(wú)菌水為溶劑，稀釋成 系列濃度梯度藥液。將靶標(biāo)病菌接種于胡蘿卜培養(yǎng)基平板上，在19°C_25°C培養(yǎng)活化4-8d，獲 得新鮮菌絲，然后將菌絲收集后置于高速搗碎機(jī)搗碎，配制成濃度為IO 3段/mL左右的菌絲 段懸浮液。將菌絲段懸浮液和配置好的藥液按照100μΙ: 100μΙ的比例混合加入到96孔酶標(biāo) 板的每個(gè)微孔內(nèi)，以加入無(wú)菌水處理為空白對(duì)照，每處理6個(gè)重復(fù)，然后把酶標(biāo)板置于恒溫 培養(yǎng)箱（19°C_25°C)內(nèi)靜置培養(yǎng)72-120h，記錄各濃度處理的0D 6QQ，計(jì)算藥劑對(duì)靶標(biāo)菌的抑 制率。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。
[0073] 由表1可知，本發(fā)明的化合物1對(duì)多種病原卵菌均具有優(yōu)異的抑制作用，其中，化合 物1對(duì)終極腐霉、辣椒疫霉、煙草疫霉、荔枝霜疫霉和致病疫霉的抑菌活性極為優(yōu)異(如圖2 所示），其對(duì)上述靶標(biāo)菌的EC 5q分別為0.56、0.094、0.59、0.084和0.023mg/L，明顯優(yōu)于對(duì)照 藥劑烯酰嗎啉（目前卵菌病害防治中田間使用最為普遍和有效的殺菌劑），具有很好的推廣 前景。
[0074] 圖2為微孔板法測(cè)定本發(fā)明化合物1的離體抑菌活性的照片，其中每一行為不同處 理的6次重復(fù)。由上至下，第一行為溶劑二甲亞砜處理(作為參比），第二行為無(wú)菌水處理(空 白對(duì)照），第三行至第八行分別為濃度為0.000001-0. lmg/L的6個(gè)系列藥劑濃度處理，培養(yǎng) 120h后可以觀察到隨著藥劑濃度提高，微孔中培養(yǎng)物的渾濁度明顯降低。
[0075]實(shí)施例2:抑制黃瓜霜霉病菌試驗(yàn)
[0076]采用活體葉盤(pán)法測(cè)定本發(fā)明化合物1的對(duì)黃瓜霜霉病菌的抑菌活性（參照NY/T 1156.3-2006農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則），具體操作步驟如下：稱取供試藥劑0.1 g溶于 IOmL二甲亞砜(DMSO)中，制成高濃度藥液母液，然后以無(wú)菌水為溶劑，稀釋成系列濃度梯度 藥液。采集新鮮發(fā)病的黃瓜霜霉病病葉，保濕培養(yǎng)后洗脫病斑表面的孢子囊，制成濃度為 IO5個(gè)/ml的孢子囊懸浮液。采集健康的黃瓜葉片，用打孔器制成直徑為1.5cm的葉盤(pán)，將葉 盤(pán)分別浸泡入含有不同濃度的藥劑的藥液lh，以浸泡無(wú)菌水處理為空白對(duì)照，每處理30個(gè) 葉盤(pán)。將藥液浸泡后的葉盤(pán)撈出，去掉表面的藥液后，背面朝上放置在水瓊脂平板表面，然 后用移液器將孢子囊懸浮液接種在葉盤(pán)中央，每個(gè)葉盤(pán)接種1〇μ1，最后將接種后的葉盤(pán)放 置在19°C、RH=90 %的人工氣候箱內(nèi)，12h光暗交替培養(yǎng)，培養(yǎng)7-10d后調(diào)查各處理葉盤(pán)霜霉 病的發(fā)病面積，計(jì)算藥劑對(duì)靶標(biāo)菌的抑制率。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2,對(duì)黃瓜霜霉病菌的抑菌活性 如圖3所示（圖3為采用活體葉盤(pán)法測(cè)定本發(fā)明化合物1對(duì)黃瓜霜霉病菌的抑菌活性照片）， 左圖，右圖分別為葉盤(pán)浸泡入無(wú)菌水和〇.5mg/L的藥液處理后，在葉盤(pán)背面接種10μ1黃瓜霜 霉孢子囊懸浮液，經(jīng)IOd培養(yǎng)后葉盤(pán)霜霉病的發(fā)病情況，可以看到藥劑處理的葉盤(pán)發(fā)病面積 明顯小于空白對(duì)照。
[0078]表2化合物1對(duì)黃瓜霜霉病菌的抑菌活性
[0080] 由表2可知，本發(fā)明的化合物1對(duì)黃瓜霜霉病菌具有優(yōu)異的抑制作用，其EC50為 0.068mg/L，明顯優(yōu)于生產(chǎn)中常規(guī)對(duì)照藥劑烯酰嗎啉，具有很好的推廣潛力。
[0081] 雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在 本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。因 此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種殺菌化合物，其特征在于，具有如下結(jié)構(gòu)：申的一 種。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物為3. 權(quán)利要求1或2所述化合物的制備方法，其特征在于，包括W下步驟：(9)W為原料，反應(yīng)即得； 其中，R的定義與權(quán)利要求1相同。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物的制備方法，其特征在于，包括W下步驟： (1) 在室溫下，氮?dú)獗Ｗo(hù)，WI%3PMe化=1: (1~2)在反 應(yīng)容器中加入陸sPMeBr，然后加入THF，將反應(yīng)體系冷卻至0~-10°C，按摩爾比化H= 1:(2~3)向反應(yīng)體系中加入化H，室溫下攬拌，加入GC監(jiān)控反應(yīng)，反應(yīng)完全后過(guò)濾然 后將濾液蒸饋，得(2) 在冰浴條件下，按摩爾比KOH= 1: (1~1.5)在反應(yīng)容器中依次加入KOH和 水，將反應(yīng)體系冷卻至0~l〇°C，然后滴加廚加完成后在室溫下攬拌4~24h;再 次將反應(yīng)體系冷卻至0~l〇°C，向反應(yīng)體系中加入化N02，調(diào)節(jié)體系的PH為4~5，室溫下攬拌 1~化，然后調(diào)節(jié)PH為9~10，向反應(yīng)體系中加入甲苯，分離出有機(jī)相和水相，將水相的PH調(diào) 至5~6，利用乙酸乙醋萃取，經(jīng)干燥旋干后得(3) 室溫下，氮?dú)獗Ｗo(hù)，在反應(yīng)容器中加入NCS=1:1~ 1.5，利用0.5~化向反應(yīng)容器中加入NCS，GC監(jiān)控，反應(yīng)完全后，澤滅，經(jīng)萃取、洗涂、旋干后 得到(4) 室溫下，按摩爾比混合，在10~15°C 之間逐滴加入K2CO3溶液，1~3小時(shí)內(nèi)滴加完畢，室溫下攬拌4~12小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，用乙酸 乙醋萃取，經(jīng)干燥、柱層析得到；(5) 在室溫下，將和二氯甲燒加入到反應(yīng)容器中，按摩爾比化2 = 1: (1~1.5)向反應(yīng)體系中滴加化2與二氯甲燒的混合溶液，滴加完全后，HPLC監(jiān)控，待反應(yīng)完 全后，旋干得(6) 室溫下，將二氯甲燒和Ξ乙胺依次加入到反應(yīng)容器中，向反應(yīng)容器中加 入二碳酸二叔下醋，反應(yīng)完全后，旋干得到(7) 在室溫下，氮?dú)獗Ｗo(hù)和勞森試劑混合后加入1,4-二氧六環(huán)，加熱到40-~ 60°C，液質(zhì)監(jiān)控，反應(yīng)完全后，將反應(yīng)體系旋干即得(8) 室溫下，用甲醇作為溶劑，將摩爾比為1:(0.9~1.2)的<加入反應(yīng)容器中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下40~50°0攬拌1~6小時(shí)，反應(yīng)生]^!液質(zhì)監(jiān) 控，待反應(yīng)完全后，向反應(yīng)體系中直接加入濃鹽酸，液質(zhì)監(jiān)控，使?:部反 應(yīng)3(9) 冰浴條件下，氮?dú)獗Ｗo(hù)，在反應(yīng)容器中加 > 二氯甲燒和Ν，Ν-二異丙 基乙胺，按摩爾扎待反應(yīng)完全后，澤滅反應(yīng)，經(jīng)萃取、柱層析即得。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物的制備方法，其特征在于，包括W下步驟： 步驟（1)中，按摩爾ΗΝ址=1:2; 步驟(2)中，按摩爾比，，ΚΟΗ=1:1.16; 步驟(3)中，按摩爾tNCS=1：1.05；6.權(quán)利要求1或2所述的化合物在防治植物卵菌病害中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)植保領(lǐng)域，特別涉及一種殺菌化合物、制備方法及其應(yīng)用，所述的化合物的結(jié)構(gòu)為：其中R選自中的一種；此化合物對(duì)于馬鈴薯晚疫病菌、辣椒疫霉、煙草疫霉、荔枝霜疫霉和黃瓜霜霉等植物病原卵菌具有優(yōu)異的抑菌活性，在卵菌病害的防治中具有廣闊的應(yīng)用前景。
【IPC分類(lèi)】A01P3/00, C07D417/14
【公開(kāi)號(hào)】CN105541830
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510926531
【發(fā)明人】楊芳利
【申請(qǐng)人】北京迪爾樂(lè)農(nóng)業(yè)高新技術(shù)研發(fā)中心, 北京世紀(jì)大德環(huán)?？萍加邢薰?br>【公開(kāi)日】2016年5月4日
【申請(qǐng)日】2015年12月14日