一種從桑黃子實體中提取水溶性β葡聚糖的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從桑黃子實體中提取水溶性β葡聚糖的方法及其產品。屬于中藥的活性成分提取領域。
【背景技術】
[0002]桑黃Phellinusigniarius(L.exFr.)，桑黃的成分極其復雜，除含大量多糖類物質夕卜，還含β葡聚糖、幾丁質(殼聚糖)、雜多糖(果膠、半纖維素、多糖醛酸等膳食纖維)等成分，在腸道中有促進有害物質及膽固醇排泄的作用。此外，桑黃還具有抗衰老、降低膽固醇、護肝和抗肝硬化等藥理作用，而這些藥理作用恰恰是備受制藥界青睞的。桑黃及其人工培養(yǎng)菌絲體的另一重要應用領域為治療脂肪肝以及病毒性肝炎引起的肝硬化。日本和韓國早已將桑黃微粉膠囊用于臨床治療脂肪肝或肝纖維化等肝病，其療效十分顯著。據了解，桑黃子實體含有異常豐富的天然氨基酸、維生素與礦物質等成分，能促進肝臟新陳代謝和肝細胞的再生，并可降低血液中G0T、GPT值以及減弱肝炎病毒的復制作用。
[0003]隨著桑黃的應用越來越廣泛，桑黃的活性成分提取成為了一個比較熱門的課題。桑黃多糖是桑黃的主要活性成分之一，對于桑黃多糖的提取液已經有了一些報道。但是這些文獻都只是對桑黃總多糖的提取，桑黃多糖在桑黃中以α和β兩種構型共存，目前對于桑黃總多糖的工藝研究的文獻都沒有提到這兩種構型的分離，僅僅是從提取總多糖本身入手，對提取的總多糖進行進一步純化，分離得到某一種構型的多糖均一體。
[0004]多糖分子量從幾千到幾百萬不等，分子量越大其水溶性越差，桑黃多糖也不例外。桑黃多糖大分子量部分水溶性較差，在分離提取中用水做溶劑很難提取完全，即使使用堿液提取，雖然提取率高，但是干燥后得到多糖產品應用時仍然不溶解于水。人體對于這種大分子桑黃多糖吸收不好。

【發(fā)明內容】

[0005]本發(fā)明主要解決的技術問題為:1、桑黃子實體中提取β葡聚糖的工業(yè)化生產問題?，F有技術提取通常提取的是總多糖，而本發(fā)明的方法提取得到了 β葡聚糖，并可應用于工業(yè)生產。2，解決β葡聚糖的水溶性問題，更有利于桑黃β葡聚糖的吸收利用和產品開發(fā)。分子量大的葡聚糖不溶于水本發(fā)明利用酸水解技術降低了大分子量桑黃多糖的分子量。提高了桑黃多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人體吸收。
[0006]為了解決上述技術問題，本發(fā)明的目的在于提供一種從桑黃菇子實體中提取水溶性β葡聚糖的方法。
[0007]—種從桑黃子實體中提取水溶性β葡聚糖的方法，其特征在于:包括以下步驟:
步驟1、制備桑黃粗多糖:
取桑黃子實體，粉碎得到粉末，粉末用堿液浸提，過濾除去殘渣，濾液中加入乙醇，靜置，過濾得到沉淀，得桑黃粗多糖；
步驟2、制備桑黃β葡聚糖: 取桑黃粗多糖，干燥后加水攪拌，加入α淀粉酶水解，水解液過濾，棄去濾液，得到殘渣，得桑黃β葡聚糖；
步驟3、制備水溶性β葡聚糖:
取桑黃β葡聚糖，加堿液攪拌提取，提取液調酸堿度至ΡΗ2.0-6.8,加熱水解，水解液過濾，濾液中加入乙醇，靜置，分離沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。
[0008]所述步驟I中，將桑黃子實體粉碎后過50目的篩，得到粉末。
[0009 ]所述步驟I中，向粉末中加入5-20倍重量的堿液浸提取1-10小時，所用堿液的濃度優(yōu)選是0.1-1.0摩爾/升。
[0010]所述步驟I中，過濾采用濾布進行過濾，其中濾布孔徑為0.5-5微米。
[0011 ]所述步驟I或步驟3中，向濾液中加入1-4倍體積的無水乙醇靜置2小時。
[0012]所述步驟2中，桑黃粗多糖干燥后加5-10倍重量的水攪拌，充分溶解。
[0013]所述步驟3中，堿液濃度是0.1-0.4摩爾/升;所述的加熱水解優(yōu)選為加熱至80-1000C，水解時間為1-4小時。
[0014]本發(fā)明的提取方法的具體描述:
桑黃子實體粉碎得到粉末，粉末用堿液浸提，過濾除渣，濾液中加入乙醇，靜置，過濾得到沉淀;此沉淀即桑黃粗多糖。桑黃β葡聚糖是桑黃粗多糖的一部分，其相當一部分位于真菌的細胞壁上，為了最大限度的提取桑黃β葡聚糖，本發(fā)明選擇堿液提取，堿液加量為原料重量的5-20倍，堿液的濃度選取0.1-1.0摩爾/升中任一濃度均可，提取時間1-10小時。堿液可以用氫氧化鈉，氫氧化鉀，氫氧化鋅，有機堿等配制，考慮到成本問題，堿液一般選取氫氧化鈉溶液。提取液過濾除去殘渣，濾液加1-4倍體積的無水乙醇，靜置2小時后過濾得沉淀即桑黃粗糖。
[0015]沉淀干燥后加水攪拌，而后加α淀粉酶水解，水解液過濾，棄去濾液得殘渣。
[0016]此步的殘渣即桑黃β葡聚糖但水溶性較差。此步驟采用上一步中的沉淀(桑黃粗多糖)為原料，加α淀粉酶(因為不同廠家產品酶活力不一樣，加量相差巨大，本領域技術人員可根據實際情況和酶的活力確定加入α淀粉酶的用量；用量多一點或者少一點不影響本發(fā)明的效果)將水不溶解的α構型多糖水解變?yōu)榭扇?，棄去水解液，同時水解液也溶解了粗多糖中的大部分殘留單糖和寡糖，起到純化的作用，雖然水解液中也可能存在少量β葡聚糖，但是考慮到回收成本，故舍去。僅對殘渣中的大量β葡聚糖進行下一步處理使其變?yōu)榭扇芙?。α淀粉酶選取市售的各種型號均可。水解條件，酶用量依據各廠家不同型號的α淀粉酶說明書。
[0017]殘渣加堿液攪拌提取，提取液調酸度至ρΗ2.0-6.8，加熱水解，水解液過濾，濾液中加入乙醇，靜置，分離沉淀并干燥，即得。
[0018]采用步驟b)的殘渣為原料，加堿液提取，堿液加量為原料重量的5-20倍，提取液調酸堿至pH2.0-6.8,80-100°C加熱水解1-4小時，水解液過濾，濾液加1_4倍體積的無水乙醇進行沉淀，分離沉淀干燥后即本發(fā)明產物，也就是桑黃菇水溶性β葡聚糖。
[0019]堿堿液可以用氫氧化鈉，氫氧化鉀，氫氧化鋅，有機堿等配制，優(yōu)選氫氧化鈉，液濃度選取0.1-1.0摩爾/升中任一濃度均可。pH可以用鹽酸、醋酸、硫酸、乙酸等。pH2.0-6.8中任何一個值均可，只是不同的pH，水解強度不同，水解后所得最終產物重均分子量不同。
[0020]現有技術中雖然有對桑黃菇的某一種構型進行了分離并且進一步純化得到了高純度多糖，但是其分離方法與本發(fā)明有本質區(qū)別，在經過常規(guī)的水提醇沉后現有方法多使用柱層析對粗多糖分離，截去粗多糖中某一特定部分得到高純度的桑黃多糖以用于科學研究，這和本發(fā)明的工業(yè)化方法有顯著區(qū)別，并且本發(fā)明除了對桑黃多糖的β構型進行分離提取外，還通過對桑黃多糖的分子量控制提高了其水溶性。本發(fā)明通過酸水解，水復溶的方法控制桑黃多糖的分子量在一定范圍內增強了桑黃多糖的水溶性，提高了桑黃多糖大分子量段的收率，有利于工業(yè)化生產桑黃β水溶性多糖。
[0021]本發(fā)明提取方法所得到桑黃子實體多糖是除去了α構型多糖的β葡聚糖，并且種β葡聚糖具有良好的水溶性。紅外光譜顯示本發(fā)明產物為β葡聚糖，硫酸苯酚法檢測多糖含量大于50%，多糖平均分子量2000-200000道爾頓不等。
【具體實施方式】
[0022]下面結合實施例對本發(fā)明作進一步說明，應該理解的是這些實施例僅用于例證的目的，決不限制本發(fā)明的保護范圍。
[0023]實施例1
一種從桑黃子實體中提取水溶性β葡聚糖的方法，其特征在于:包括以下步驟:
步驟1、制備桑黃粗多糖:
取桑黃子實體，粉碎得到粉末，粉末用堿液浸提，過濾除去殘渣，濾液中加入乙醇，