用于治療炎性疾病和/或免疫疾病的皮質抑素類似物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及皮質抑素類似物及其用途。本發(fā)明的化合物是在其中表達能夠結合皮 質抑素的受體的那些病理的診斷、預防或治療中具有潛在應用的肽配體。
【背景技術】
[0002] 皮質抑素(CST)是1996年在大鼠中發(fā)現(xiàn)的14個氨基酸的一種天然內源性肽(CST-14)[德萊賽亞（de Lecea)等人，自然(Nature)，1996,381，242-245]且之后在1997年在人中 作為17個氨基酸的一種延伸形式(CST-17)發(fā)現(xiàn)[福庫思米(Fukusimi)等人，生物化學與生 物物理研究通訊(Biochem.Biophys .Res.Commun)，1997，232，157-163]。皮質抑素事實上以 兩種生物活性形式存在，因為其前體(前原-CST)在嚙齒動物中產生CST-14和CST-29并且在 人中產生CST-17和CST-29。
[0003] 皮質抑素與另一種內源性肽，即生長抑素(SST)具有高同源性，生長抑素是高度保 守的并且在哺乳動物中以生長抑素-14(SST-14)和生長抑素-28(SST-28)的形式發(fā)現(xiàn)：
[0004] 皮質抑素和生長抑素的序列
[0005] H2N-Pc[CKNFFWKTFSSC]K-OH 皮質抑素-14(大鼠 / 小鼠）
[0006] H2N-DRMPC [ CRNFFWKTFSSC ] Κ-0Η 皮質抑素-17 (人）
[0007] H2N-AGc[CKNFFWKTFTSC]-OH 生長抑素 _14(人 / 大鼠 / 小鼠）
[0008] 事實上，皮質抑素與針對生長抑素所描述的5G蛋白偶聯(lián)膜受體sstrl-sstr5相互 作用[a)施皮爾（Spier)等人，腦研究評論(Brain Research Reviews)2000，33,228-241 ;b) 帕特爾(Patel)等人，內分泌學(Endocrinology)1994,135,2814-2817]。但皮質抑素不是生 長抑素[R薩雷斯-雷伊（Gonzalez-Rey)等人，分子與細胞內分泌學 (Mol.Cell.Endocrinol. )2008，286(1-2)，135-140]，并且因此，除其對生長抑素受體的納 摩爾親和力外，皮質抑素還與饑餓素受體(GHSR)相互作用。此外，在皮質抑素的特異性受體 的搜索中，孤兒受體MrgX2被描述為皮質抑素的第一人特異性受體[瑞博斯(Robas)等人，生 物化學雜志(J.Biol. Chem.)2003，278，44400-44404]。隨后，該受體在免疫系統(tǒng)細胞中的不 存在及其對其他神經肽如腎上腺髓質素原的高親和力使得其當前不被認為是特異性皮質 抑素受體[萬哈根(vanHagen)等人，分子與細胞內分泌學2008,286(1-2)，141-147]并且一 種特異性皮質抑素受體的表征是仍未解決的一個問題。
[0009] 皮質抑素的免疫調節(jié)活性已在具有炎性應答和自身免疫應答過程的疾病(如致死 性內毒素休克、克羅恩氏病和類風濕性關節(jié)炎）的實驗模型中廣泛證明[a)閃薩雷斯-雷伊 等人，實驗醫(yī)學雜志(1』鄧1 6(1.)2006,203(3)，563-571;13)閃薩雷斯-雷伊等人，美國科學 院院刊（Proc ·Natl .Acad · Sci · USA)，2006，103，4228-4233; c)岡薩雷斯-雷伊等人，風濕病 年鑒（Ann.Rheum.Dis. )2007,66(5)，582-588;d)W0 2007/082980 A1]?？墒顾雒庖哒{控 作用與其在淋巴細胞、單核細胞、巨噬細胞和樹突細胞以及免疫系統(tǒng)的細胞中的表達相關 [a)達拉姆V.A. (Dalm V.A.)等人，美國生理學會雜志：內分泌學與新陳代謝 (Am. J.Physiol .Endocrinol .Metab· )2003，285，E344_353;b)達拉姆V.A·等人，臨床內分泌 學和代謝雜志(J. Cl in. Endocrinol. Metab.) 2003，88，270-276 ]。最近綜述了皮質抑素及其 受體在人免疫系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)病理中的表達[萬哈根等人，分子與細胞內分泌學2008,286 (1-2)，141-147]。
[0010] 在上文參考的顯示皮質抑素在具有炎性和免疫組分的疾病中的功效的研究性研 究中，使用了 CST-29XST-29是具有高合成難度且因此對其在醫(yī)藥行業(yè)中的工業(yè)應用具有 低工業(yè)可行性的一種長內源性肽。它的藥物用途還存在一個另外問題:它的低血清穩(wěn)定性。
[0011] 在研究中的其他提議證明內源性肽CST-17與神經肽EI組合用于治療炎性疾病和 自身免疫性疾病的功效[W0 2009/043523 A2]，這呈現(xiàn)用于其工業(yè)用途的更低合成難度的 優(yōu)點。然而，它仍然具有由于其L-氨基酸的天然結構而在血清中具有低穩(wěn)定性的缺點。
[0012] -般來說，基于肽的藥物是有利的，因為肽是本質上無毒的，相較于基于小分子或 基于抗體的其他藥物，這些基于肽的藥物在低劑量下的功效確保它們不會引起顯著副作 用，但是它們確實必須進行修飾以便改進它們的生物利用度和半衰期。將非天然氨基酸并 入天然序列中是現(xiàn)有技術中已知用于增加一種內源性肽的穩(wěn)定性的策略之一。例如，已經 描述了在位置6、7和11中用鹵代氨基酸、用對-氯-Phe和五氟-Phe修飾生長抑素[W0 2007/ 081792 A2;邁耶斯C.A. (Meyers C.A.)等人，消化(Digestion) 1981，21(1)，21-4]。原始生 長抑素的相同位置6、7和11也已用三甲苯基丙氨酸和三甲苯基甘氨酸修飾，從而產生更穩(wěn) 定的生長抑素類似物[W0 2010/128098 A1]。然而，這些穩(wěn)定化修飾可能損害原始分子的官 能度。奧曲肽的情況即如此，奧曲肽是在臨床使用中的比原始分子更穩(wěn)定的一種生長抑素 類似物，其保持結合sstrt2受體，但完全喪失其對sstrl和sstr4受體的親和力。[帕特爾 (Patel)等人，內分泌學 1994,135,2814-2817]。
[0013] 內源性肽如生長抑素和皮質抑素的血液半衰期是極其短的，僅僅達到幾分鐘[斯 卡米尼（Skamene)等人，臨床內分泌學(Clin.Endocrinol. )1984，20,555-564]。因此，需要 發(fā)現(xiàn)新型合成皮質抑素類似物，這些皮質抑素類似物用于治療其中表達特異性皮質抑素受 體以及與其他分子像生長抑素（sstrl、sstr2、sstr3、sstr4和/或sstr5)和/或饑餓素 (GHSR)共有的那些受體的那些病理且此外在血液中比皮質抑素更穩(wěn)定。

【發(fā)明內容】

[0014] 本發(fā)明披露了具有與天然肽的抗炎和/或免疫調控作用類似的抗炎和/或免疫調 控作用的新型肽，即皮質抑素類似物。使用非天然氨基酸如三甲苯基丙氨酸和/或二鹵代苯 丙氨酸的某些修飾加上并入脂肪酸或聚乙二醇化保持且甚至改進天然分子在體外和體內 的抗炎和抗自身免疫作用。此外，新型皮質抑素類似物的主要益處是具有一種或幾種修飾 的所得肽具有在血清中比內源性分子的半衰期實質上更長的半衰期。新型皮質抑素類似物 的合成是經濟上可行的（具有優(yōu)選13至17個氨基酸的序列），這是保證其在制藥工業(yè)中的有 用性的一個方面。本發(fā)明的化合物是新型化合物并且在功能上等效于皮質抑素，因為這些 化合物都具有與皮質抑素類似的體外和/或體內抗炎和/或免疫調控作用。
[0015]
[0016] 在此包括一些術語和表述的含義，因為這些術語和表述在本發(fā)明的背景下使用， 其目的是為了增加對這些術語和表述的理解。
[0017]術語"皮質抑素類似物"是指與已知的皮質抑素受體和與其他分子共有的皮質抑 素受體如5種生長抑素受體(881^1、881^2、881^3、881^4和/或881^5)或饑餓素受體和/或仍 有待鑒別的一種特異性皮質抑素受體中的至少一種相互作用的一種化合物。因此皮質抑素 類似物是所述皮質抑素受體的一種配體，并且可以是皮質抑素的功能等效物(或一種激動 劑），具有與皮質抑素的活性類似的一種活性。
[0018] 術語"功能等效物(或激動劑)"是指顯示對原始分子的受體中的一些的親和力且 從定性的角度來看產生與該受體的內源性配體相同的作用的一種化合物。
[0019] 術語"生長抑素類似物"是指與一種或多種生長抑素受體（sstr)相互作用且還已 知為所述受體的一種配體的一種化合物。該定義由貝文(Bevan)等人[在臨床內分泌學和代 謝雜志2005，90，1856-1863中]介紹。在EP 1040837 A2中，術語生長抑素類似物還關于天然 生長抑素的所有修飾的衍生物進行定義，這些衍生物顯示一種生長抑素相關活性，如與生 長抑素受體(881：1'1、881^2、881^3、881^4或881^5)中的至少一種相互作用。
[0020]在本描述中，用于氨基酸的縮寫遵守在歐洲生物化學雜志（Eur. J.Biochem.)， 1984，138,9-37 中列出的 IUPAC IUM 生化命名委員會（IUPAC-IUB Commission of Biochemical Nomenclature)的規(guī)則（圖2)。
[0021] 圖2:氨基酸(立體化學未指定，在所有情況下它可以是L-、D或DL-)
[0022] Ala(A):丙氨酸
[0023] Asn(N):天冬酰胺
[0024] Asp(D):天冬氨酸 [0025] Arg(R):精氨酸
[0026] Cys(C):半胱氨酸
[0027] Gly(G):甘氨酸 [0028] Lys(K):賴氨酸 [0029] Met(M):蛋氨酸 [0030] Phe(F):苯丙氨酸
[0031] Pro (P):脯氨酸
[0032] Ser(S):絲氨酸
[0033] Thr(T):蘇氨酸
[0034] Trp(W):色氨酸 [0035] Phg:苯基甘氨酸
[0036]
[0037] Msa: 2，4，6-三甲基苯丙氨酸或3-三甲苯基丙氨酸
[0038]
[0039] Tmp:3,4,5-三甲基苯丙氨酸
[0040]
[0041 ] Msg: 2，4，6-三甲基苯基甘氨酸或2-三甲苯基甘氨酸 [0042]
[0043] 3，4,5-三甲基苯基甘氨酸
[0044]
[0045]二W-Phe(其中W是F、Cl、Br或I):二鹵代苯丙氨酸，其是一種苯丙氨酸，其中苯基基 團被兩個鹵素原子取代。
[0046]
W.
[0047] DfD :3.5-二氟蘢丙氛酸
[0048]
[0049] 縮寫"Ac-"在本描述中用于識別乙?；鶊F（CH3-C〇-)，縮寫"Palm-"用于識別棕 櫚?；鶊F（CH3-(CH2)m-⑶_)并且縮寫"Myr_"用于識別肉豆蔻?；鶊F（CH 3-(CH2)12-C0-)〇
[0050] 術語"非環(huán)狀脂肪族基團"在本發(fā)明中用來涵蓋直鏈或支鏈的烷基、烯基、以及炔 基基團〇
[0051] 術語"烷基基團"是指一種飽和的、直鏈的或支鏈的基團，該基團具有1與24個之 間、優(yōu)選1與16個之間、更優(yōu)選1與14個之間、甚至更優(yōu)選1與12個之間、還更優(yōu)選1、2、3、4、5、 6、7或8個的碳原子，并且該基團通過一個單鍵結合至分子的其余部分，該基團包括例如并 且不局限于：甲基、乙基、異丙基、異丁基、叔丁基、庚基、辛基、癸基、十二烷基、月桂基、十六 烷基、十八烷基、戊基、2-乙基己基、2-甲基丁基、5-甲基己基、以及類似基團。
[0052] 術語"烯基基團"是指一種直鏈的或支鏈的基團，該基團具有在2與24個之間、優(yōu)選 2與16個之間、更優(yōu)選2與14個之間、甚至更優(yōu)選2與12個之間、還更優(yōu)選2、3、4、5或6個的碳 原子，其中具有一個或多個碳-碳雙鍵、優(yōu)選具有1、2或3個共輒的或非共輒的碳-碳雙鍵，該 基團通過一個單鍵結合至分子的其余部分，該基團包括例如并且不局限于：乙烯基(_CH 2 = CH2)、烯丙基(-CH2-CH=CH2)、油烯基、亞油烯基基團、以及類似基團。
[0053] 術語"炔基基團"是指一種直鏈的或支鏈的基團，該基團具有在2與24個之間、優(yōu)選 2與16個之間、更優(yōu)選2與14個之間、甚至更優(yōu)選2與12個之間、還更優(yōu)選2、3、4、5或6個的碳 原子，其中具有一個或多個碳-碳三鍵、優(yōu)選具有1、2或3個共輒的或非共輒的碳-碳三鍵，該 基團通過一個單鍵結合至分子的其余部分，該基團包括例如并且不局限于：乙炔基基團、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、戊炔基如1-戊炔基、以及類似基團。炔基 基團還可以包含一個或多個碳-碳雙鍵，包括例如并且不局限于：丁-1-烯-3-炔基、戊-4-烯-1-炔基基團、以及類似基團。
[0054] 術語"脂環(huán)族基團"在本發(fā)明中用來涵蓋例如并且不局限于:環(huán)烷基或環(huán)烯基或環(huán) 炔基基團。
[0055] 術語"環(huán)烷基"是指一種飽和的單環(huán)或多環(huán)脂肪族基團，該基團具有在3與24個之 間、優(yōu)選3與16個之間、更優(yōu)選3與14個之間、甚至更優(yōu)選3與12個之間、還更優(yōu)選3、4、5或6個 的碳原子，并且該基團通過一個單鍵結合至分子的其余部分，該基團包括例如并且不局限 于:環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、甲基環(huán)己基、二甲基環(huán)己基、八氫茚、十氫萘、 十二氫非那烯、以及類似基團。
[0056] 術語"環(huán)烯基"是指一種非芳香族的單環(huán)或多環(huán)脂肪族基團，該基團具有在5與24 個之間、優(yōu)選5與16個之間、更優(yōu)選5與14個之間、甚至更優(yōu)選5與12個之間、還更優(yōu)選5或6個 的碳原子，其中具有一個或多個碳-碳雙鍵、優(yōu)選具有1、2或3個共輒的或非共輒的碳-碳雙 鍵，該基團通過一個單鍵結合至分子的其余部分，該基團包括例如并且不局限于：環(huán)戊1-烯-1-基基團和類似基團。
[0057] 術語"環(huán)炔基"是指一種非芳香族的單環(huán)或多環(huán)脂肪族基團，該基團具有在8與24 個之間、優(yōu)選8與16個之間、更優(yōu)選8與14個之間、甚至更優(yōu)選8與12個之間、還更優(yōu)選8或9個 的碳原子，其中具有一個或多個碳-碳三鍵、優(yōu)選具有1、2或3個共輒的或非共輒的碳-碳三 鍵，該基團通過一個單鍵結合至分子的其余部分，該基團包括例如并且不局限于:環(huán)辛-2-炔-1-基基團和類似基團。環(huán)炔基基團還可以包含一個或多個碳-碳雙鍵，包括例如并且不 局限于:環(huán)辛-4-烯-2-炔基基團和類似基團。
[0058] 術語"芳基基團"是指一種芳香族基團，該基團具有在6與30個之間、優(yōu)選6與18個 之間、更優(yōu)選6與10個之間、還更優(yōu)選6或10個的碳原子，該基團包含通過一個碳-碳鍵結合 的或稠合的1、2、3或4個芳環(huán)，該基團包括例如并且不局限于:苯基、萘基、聯(lián)苯基、茚基、菲 基或蒽基等等;或一個芳烷基基團。
[0059] 術語"芳烷基基團"是指被一個芳香族基團取代的一個烷基基團，該芳烷基具有在 7與24個之間的碳原子并且包括例如并且不局限于苯基、-(Ofch-fHl-萘基）、_ (CH 2)!-6- (2-萘基）、-(CH2)!-6-CH(苯基)2、以及類似基團。
[0060] 術語"雜環(huán)基基團"是指具有3-10個成員的一個碳氫化的環(huán)，其中該環(huán)中的一個或 多個原子、優(yōu)選該環(huán)中的1、2或3個原子是不同于碳的一種元素如氮、氧或硫，并且該基團可 以是飽和的或不飽和的。出于本發(fā)明的目的，該雜環(huán)可以是一種單環(huán)系統(tǒng)、雙環(huán)系統(tǒng)或三環(huán) 系統(tǒng)，其可以包括稠環(huán)系統(tǒng);并且在雜環(huán)基基團中的氮、碳或硫原子可以任選地被氧化;氮 原子可以任選地被季銨化;并且該雜環(huán)基基團可以是部分或完全地飽和的或者芳香族的。 最優(yōu)選的是，術語"雜環(huán)基"是指具有5或6個成員的一個環(huán)。飽和雜環(huán)基基團的實例是二噁 烷、哌啶、哌嗪、吡咯烷、嗎啉、以及硫代嗎啉。芳香族雜環(huán)基基團（還已知為雜芳香族基團） 的實例是啦啶、啦略、咲喃、噻吩、苯并咲喃、咪唑啉、喹啉(911；[11016；[11)、喹啉(911；[1101；[116)、 噠嗪、以及萘啶。
[0061] 術語"雜芳基烷基基團"是指被一個取代的或未取代的芳香族雜環(huán)基基團取代的 一個烷基基團，該烷基基團具有從1至6個碳原子，并且該芳香族雜環(huán)基基團具有在2與24個 之間的碳原子以及從1至3個不同于碳的原子，并且該雜芳基烷基包括例如并且不局限于:-(CH 2)卜6-咪唑基、-(CH2)!-6-三唑基、-(CH2)!-6-噻吩基、-(CH 2)卜6-呋喃基、-(CH2) 6_吡咯烷 基、以及類似基團。
[0062] 如在本技術領域中所理解的，在以上定義的基團中可以存在某一程度的取代。因 此，在明確指示如此的情況下，在本發(fā)明的基團中可以存在取代。在本文件中提及在本發(fā)明 的基團中的取代的基團指示規(guī)定的基團可以在一個或多個可用的位置，優(yōu)選在1、2或3個位 置，更優(yōu)選在1或2個位置、還更優(yōu)選在1個位置上被一個或多個取代基取代。這些取代基包 括例如并且不局限于:烷基Q-C4;羥基;烷氧基(al coxy 1) Q-C4;氨基;氨基烷基&<4;羰基 氧基&-C4;氧基羰基&-〇4;鹵素，如氟、氯、溴、以及碘;氰基;硝基;疊氮化物;烷基磺?；?amp;-C 4;硫醇;烷硫基Ci-C4;芳氧基，如苯氧基;_NRb (C = NRb)NRbRc;其中Rb和Rc獨立地選自下組， 該組由以下各項組成:Η、烷基&-C4、烯基C 2-C4、炔基C2-C4、環(huán)烷基C3-C1Q、芳基C 6-C18、芳烷基 C7-Cn、具有3-10個成員的雜環(huán)基、或氨基基團的保護基團。
[0063] 本發(fā)明的化合物
[0064 ]本發(fā)明的一個第一方面涉及一種由化學式(I)定義的化合物，
[0065] Ri-AAt-AA2-AA3-AA4-c[Cys-AA5-Asn-X-Y