在密封袋內(nèi)進(jìn)行的細(xì)菌纖維素薄膜的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明為關(guān)于一種細(xì)菌纖維素薄膜的制備方法，尤其有關(guān)一種對550nm波長的光 具有約90%的穿透度之細(xì)菌纖維素薄膜的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 木葡糖酸醋桿菌發(fā)酵所生成的細(xì)菌纖維素可利用培養(yǎng)天數(shù)的增加而提升膜片的 厚度，但過短培養(yǎng)時(shí)間所生成的薄型膜片過軟易破碎，且易出現(xiàn)膜片外觀不均勻之問題。因 此，常利用擠壓或切割等后段加工方式獲取薄型膜片，而增加制程所需的時(shí)間及成本。
[0003] 中國發(fā)明專利公開號CN 101487033 A掲示一種制備細(xì)菌纖維素異型產(chǎn)品的方法， 其中利用具有氧滲透功能的材料為模具，于該模具內(nèi)填充細(xì)菌培養(yǎng)液，或?qū)⒃撃＞呓诩?xì) 菌培養(yǎng)液且使空氣流入及流出該模具內(nèi)部，靜置培養(yǎng)5-10天而于該模具表面成長細(xì)菌纖 維素薄膜。在此前案發(fā)明中模具的形狀是固定的，模具的材料是具有氧滲透功能，而且所成 長的細(xì)菌纖維素薄膜是附著在模具表面，必須從該模具表面剝離才能得到薄膜產(chǎn)品（如果 在剝離過程中未破損）。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的主要目的即為提出一種不具有前述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)的細(xì)菌纖維素薄膜 的制備方法。
[0005] 在本發(fā)明方法中，不需要使用具有氧滲透功能的材料作為培養(yǎng)液的容器，而且不 需要從該培養(yǎng)液的容器的表面剝離即能得到薄膜產(chǎn)品。本發(fā)明方法直接可制備出細(xì)菌纖維 素薄膜，不需要擠壓或切割等后段加工方式獲取薄型膜片。
[0006] 依本
【發(fā)明內(nèi)容】
所完成的一種細(xì)菌纖維素薄膜的制備方法包含于已接種細(xì)菌的培 養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，其特征包含該已接種細(xì)菌的培養(yǎng)液系密封在內(nèi)部充滿該已接種細(xì)菌的 培養(yǎng)液的可挽曲袋內(nèi)，及在水平靜置該可挽曲袋情況下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)一段時(shí)間直到形成一 片細(xì)菌纖維素薄膜。
[0007] 在一個(gè)具體的實(shí)施方式中，該細(xì)菌包括產(chǎn)醋桿菌、醋化桿菌、己氏醋桿 菌（Acetobacter pasteurianus)、葡萄糖桿菌、農(nóng)桿菌（Agrobacterium)、根瘤菌 巧hizobium)、八疊球菌、洋蔥假單胞菌（Pseudomonas C巧acia)、挪毒假單胞菌、空腸彎曲 菌（Campylobacter je化ni)中的一種或幾種。
[0008] 優(yōu)選的，其中該細(xì)菌為木葡糖酸醋桿菌（Gluconacetobacter X}dinus)。
[0009] 優(yōu)選的，本發(fā)明方法進(jìn)一步包含從該袋中移出該細(xì)菌纖維素薄膜；及W-堿性水 溶液清洗該細(xì)菌纖維素薄膜，再W水清洗該細(xì)菌纖維素薄膜直到用過的清洗水的抑值約 為7。
[0010] 優(yōu)選的，本發(fā)明方法進(jìn)一步包含從該袋中移出該細(xì)菌纖維素薄膜；及W水清洗該 細(xì)菌纖維素薄膜直到用過的清洗水的抑值約為7。
[0011] 優(yōu)選的，該段時(shí)間為1-5天。
[0012] 優(yōu)選的，該細(xì)菌纖維素薄膜具有0. 1-3. 0mm的厚度。
[0013] 優(yōu)選的，該細(xì)菌纖維素薄膜對550nm波長的光具有80-99%的穿透度。
[0014] 優(yōu)選的，該細(xì)菌纖維素薄膜具有0. 1-1. 0mm的厚度。
[0015] 優(yōu)選的，該細(xì)菌纖維素薄膜對550nm波長的光具有大于90%的穿透度。
[0016] 優(yōu)選的，該密封的、內(nèi)部充滿已接種木葡糖酸醋桿菌的培養(yǎng)液的可挽曲袋的準(zhǔn)備 包含對具有開口的可挽曲袋填充該已接種木葡糖酸醋桿菌的培養(yǎng)液，直到該袋內(nèi)的空氣為 該填充的培養(yǎng)液所趕出，及密封該開口。
[0017] 優(yōu)選的，該可挽曲袋為不透氣的，且為塑料材料所制成。
[0018] 優(yōu)選的，該密封的、內(nèi)部充滿已接種木葡糖酸醋桿菌的培養(yǎng)液的可挽曲袋具有 100-600cm2的表面積，及0. 3-0. 6cm的厚度。
[0019] 優(yōu)選的，該水平靜置培養(yǎng)一段時(shí)間在室溫下，例如25-35°C的溫度，進(jìn)行。
[0020] 于本發(fā)明的優(yōu)選的具體實(shí)施例中直接W于一密封的、內(nèi)部充滿已接種木葡糖酸醋 桿菌的培養(yǎng)液的可挽曲袋水平靜置培養(yǎng)2-3天即可收取膜厚度<lmm、不易破碎且外觀透明 的細(xì)菌纖維素薄膜，毋須后續(xù)加工制程。再加上膜薄且透明，故大為減少水洗制程所需的時(shí) 間及成本，有效率的制備出透明細(xì)菌纖維素薄膜，可W被應(yīng)用于皮膚敷料、包裝材料、或工 業(yè)材料例如；裡電池隔離膜、透明導(dǎo)電薄膜及過濾膜等等用途。該透明細(xì)菌纖維素薄膜于 550nm波長的光的穿透度>90%，W及整片薄膜各處的穿透度差異性<0. 5%。
【具體實(shí)施方式】
[0021] 本發(fā)明的制備方法利用培養(yǎng)基本身的溶氧作為細(xì)菌培養(yǎng)所需的氧氣的主要來源， 通過給予溶氧有限的培養(yǎng)環(huán)境內(nèi)，例如于一個(gè)內(nèi)部空氣實(shí)質(zhì)上被排盡的密封袋內(nèi)，水平靜 置培養(yǎng)1. 5-3天。將該密封袋打開，即可從袋內(nèi)收取薄膜，經(jīng)水洗或先W堿性水溶液清洗再 水洗薄膜，使薄膜的抑值約為7即可制備出厚度<lmm之透明細(xì)菌纖維素薄膜產(chǎn)品。前述 溶氧有限的培養(yǎng)環(huán)境指培養(yǎng)基溶氧值小于該培養(yǎng)基的飽和溶氧值的30%。
[0022] 實(shí)施例1
[0023] 將木葡糖酸醋桿菌Gluconacetobacter x}dinus菌落接種于含有l(wèi)OOmL AC培養(yǎng) 基（如下表2)的250mL錐形瓶中，3(TC、100巧m培養(yǎng)3天后，取出菌液W 10體積％ (v/v)接 菌量接種于180mL的被裝于可挽曲袋（材質(zhì)為聚丙帰（polypropylene),單面袋厚0. 15mm) 中（面積20巧0cm)的液態(tài)媒體，該液態(tài)媒體（YE培養(yǎng)基）含下面表1所列成分。將袋口密 封后于3(TC下水平靜置培養(yǎng)3天（袋內(nèi)空氣須排盡），得到透明細(xì)菌纖維素薄膜。打開該 密封袋，從其中取出該薄膜，其中該薄膜并無黏貼附著于袋體上。接著W逆滲透（R0)水于 80°C水洗10分鐘，再于常溫下水洗至薄膜的抑值為7,于是獲得厚度為0. 6mm且于550皿 波長之光的穿透度約90 %的透明細(xì)菌纖維素薄膜。
[0024] 人眼對于波長在550nm-560nm之間的光線，大體上是墨綠色的部分最為敏感，眼 睛在觀看送個(gè)范圍的顏色時(shí)，最為感到放松舒適，故本實(shí)施例采用波長在550nm的光線進(jìn) 行膜片的穿透度測定。
[00巧]表1YE培養(yǎng)基*
[0026]
[0027] *%;(克重/100ml 培養(yǎng)基）*100%
[0028] 表2AC培養(yǎng)基*
[0029]
[0030] * 同表 1
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種細(xì)菌纖維素薄膜的制備方法，包含于已接種細(xì)菌的培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，其特 征包含該已接種細(xì)菌的培養(yǎng)液系密封在內(nèi)部充滿該已接種細(xì)菌的培養(yǎng)液的可撓曲袋內(nèi)，及 在水平靜置該可撓曲袋情況下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)一段時(shí)間直到形成一片細(xì)菌纖維素薄膜。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細(xì)菌包括產(chǎn)醋桿菌、醋化桿菌、巴氏醋 桿菌、葡萄糖桿菌、農(nóng)桿菌、根瘤菌、八疊球菌、洋蔥假單胞菌、椰毒假單胞菌、空腸彎曲菌中 的一種或幾種。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細(xì)菌為木葡糖酸醋桿菌 Gluconacetobacter xylinus。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，其進(jìn)一步包含從該袋中移出該細(xì)菌纖維 素薄膜；及以堿性水溶液清洗該細(xì)菌纖維素薄膜，再以水清洗該細(xì)菌纖維素薄膜直到用過 的清洗水的pH值約為7。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，其進(jìn)一步包含從該袋中移出該細(xì)菌纖維 素薄膜；及以水清洗該細(xì)菌纖維素薄膜直到用過的清洗水的pH值約為7。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該段時(shí)間為1-5天。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細(xì)菌纖維素薄膜具有0. 1-3. Omm的厚 度。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細(xì)菌纖維素薄膜對550nm波長的光具有 80-99 %的穿透度。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細(xì)菌纖維素薄膜具有0. 1-1. 0mm的厚 度。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細(xì)菌纖維素薄膜對550nm波長的光具 有大于90 %的穿透度。11. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該密封的、內(nèi)部充滿已接種木葡糖酸醋 桿菌的培養(yǎng)液的可撓曲袋的準(zhǔn)備包含對具有開口的可撓曲袋填充該已接種木葡糖酸醋桿 菌的培養(yǎng)液，直到該袋內(nèi)的空氣為該填充的培養(yǎng)液所趕出，及密封該開口。12. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該可撓曲袋為不透氣的，且為塑料材料 所制成。13. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該密封的、內(nèi)部充滿已接種木葡糖酸醋 桿菌的培養(yǎng)液的可撓曲袋具有100-600cm 2的表面積，及0. 3-0. 6cm的厚度。14. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該水平靜置培養(yǎng)一段時(shí)間在25-35°C的 溫度進(jìn)行。
【專利摘要】本發(fā)明為關(guān)于一種細(xì)菌纖維素薄膜的制備方法，該細(xì)菌纖維素薄膜對550nm波長的光具有約90％的穿透度，本發(fā)明的制備方法包含于密封的、內(nèi)部充滿已接種細(xì)菌的培養(yǎng)液的可撓曲袋內(nèi)，在水平靜置該可撓曲袋情況下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)一段時(shí)間直到形成一片細(xì)菌纖維素薄膜。本發(fā)明所制得的薄膜可做為皮膚敷料、包裝材料或工業(yè)材料等應(yīng)用。
【IPC分類】C12P19/04, C12R1/01
【公開號】CN105586375
【申請?zhí)枴緾N201410561629
【發(fā)明人】郭秋媚, 傅威昌, 賴進(jìn)此, 廖啟成
【申請人】財(cái)團(tuán)法人食品工業(yè)發(fā)展研究所
【公開日】2016年5月18日
【申請日】2014年10月21日