使用表面活性劑的細菌纖維素薄膜的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明為關(guān)于一種細菌纖維素薄膜的制備方法，尤其有關(guān)一種對550nm波長的光 具有約90%的穿透度的細菌纖維素薄膜的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 木葡糖酸醋桿菌發(fā)酵所生成的細菌纖維素可利用培養(yǎng)天數(shù)的增加而提升膜片的 厚度，但過短培養(yǎng)時間所生成的薄型膜片過軟易破碎，且易出現(xiàn)膜片外觀不均勻之問題。因 此，常利用擠壓或切割等后段加工方式獲取薄型膜片，而增加制程所需的時間及成本。
[0003] 日本發(fā)明專利公開號JP2009296979A掲示一種此發(fā)明是利用添加非離子型表面 活性劑，濃度范圍為0. 05~3(K)ppm可提升細菌纖維素膜的產(chǎn)量（干膜重）。此前案并無論 及細菌纖維素膜的厚度及透明度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的主要目的即為提出一種對550nm波長的光具有約90 %的穿透度的細菌 纖維素薄膜的制備方法。
[0005] 本發(fā)明方法直接可制備出細菌纖維素薄膜，不需要擠壓或切割等后段加工方式獲 取薄型膜片。
[0006] 依本
【發(fā)明內(nèi)容】
所完成的一種細菌纖維素薄膜的制備方法，包含于內(nèi)部充填有已接 種細菌的培養(yǎng)液的容器內(nèi)，于容器加蓋下靜置培養(yǎng)該細菌一段時間直到形成一片細菌纖維 素薄膜，該培養(yǎng)液含有1000-20000ppm的表面活性劑。
[0007] 在一個具體的實施方式中，該細菌包括產(chǎn)醋桿菌、醋化桿菌、己氏醋桿 菌（Acetobacter pasteurianus)、葡萄糖桿菌、農(nóng)桿菌（Agrobacterium)、根瘤菌 巧hizobium)、八疊球菌、洋蔥假單胞菌（Pseudomonas C巧acia)、挪毒假單胞菌、空腸彎曲 菌（Campylobacter je化ni)中的一種或幾種。
[0008] 優(yōu)選的，該細菌為木葡糖酸醋桿菌（Gluconacetobacter x}dinus)。
[0009] 優(yōu)選的，該表面活性劑為陰離子型的表面活性劑。
[0010] 優(yōu)選的，該表面活性劑為非離子型表面活性劑。
[0011] 優(yōu)選的，該非離子型表面活性劑為卵磯脂、商品名TWEEN的聚己氧基化山梨糖醇 酢脂肪酸醋（polyetho巧lated sorbitan fatty acid ester)或商品名SPAN的山梨糖醇 酢脂肪酸醋（sorbitan fatty acid ester)。
[0012] 優(yōu)選的，本發(fā)明方法進一步包含從該容器中移出該細菌纖維素薄膜；及W堿性水 溶液清洗該細菌纖維素薄膜，再W水清洗該細菌纖維素薄膜直到用過的清洗水的抑值約 為7。
[0013] 優(yōu)選的，本發(fā)明方法進一步包含從該容器中移出該細菌纖維素薄膜；及W水清洗 該細菌纖維素薄膜直到用過的清洗水的抑值約為7。
[0014] 優(yōu)選的，該段時間為1-5天。
[0015] 優(yōu)選的，該細菌纖維素薄膜具有0. 1-3. 0mm的厚度。
[0016] 優(yōu)選的，該細菌纖維素薄膜對550nm波長的光具有80-99%的穿透度。
[0017] 優(yōu)選的，該細菌纖維素薄膜具有0. 1-1. 0mm的厚度。
[0018] 優(yōu)選的，該細菌纖維素薄膜對550nm波長的光具有大于90%的穿透度。
[0019] 優(yōu)選的，位于該容器內(nèi)的已接種細菌的培養(yǎng)液具有l(wèi)OO-lOOOcm2的液面表面積，及 0. 2-0. 5cm 的厚度。
[0020] 優(yōu)選的，其中該水平靜置培養(yǎng)一段時間在室溫下，例如25-35°C的溫度，進行。
[0021] 于本發(fā)明的優(yōu)選的具體實施例中直接于含有l(wèi)〇〇(K)ppm表面活性劑的已接種木葡 糖酸醋桿菌的培養(yǎng)液進行靜置培養(yǎng)1. 5-3天即可收取膜厚度<lmm、不易破碎且外觀透明的 細菌纖維素薄膜，毋須后續(xù)加工制程。再加上膜薄且透明，故大為減少水洗制程所需的時 間及成本，有效率的制備出透明細菌纖維素薄膜，可W被應(yīng)用于皮膚敷料、包裝材料、或工 業(yè)材料例如；裡電池隔離膜、透明導(dǎo)電薄膜及過濾膜等等用途。該透明細菌纖維素薄膜于 550nm波長的光的穿透度>90%，W及整片薄膜各處的穿透度差異性<0. 5%。
【具體實施方式】
[0022] 本發(fā)明的制備方法是添加低抑菌性的表面活性劑于培養(yǎng)基中，促使菌體均勻分散 于培養(yǎng)基中，進行靜置培養(yǎng)1. 5-3天即可收取膜厚度<lmm、不易破碎且外觀透明的細菌纖 維素薄膜。本發(fā)明方法可將該添加有表面活性劑的培養(yǎng)基置于一般開口的容器中，容器加 蓋后進行靜置培養(yǎng)。該透明的細菌纖維素薄膜為形成于空氣及液態(tài)培養(yǎng)基的表面，故可方 便的從該容器內(nèi)收取該薄膜，經(jīng)水洗或先W堿性水溶液清洗再水洗該薄膜，使薄膜的抑值 約為7即可制備出厚度<lmm之透明細菌纖維素薄膜產(chǎn)品。
[0023] 適用于本發(fā)明的表面活性劑包括但不限于陰離子型表面活性劑、陽離子型表面 活性劑、兩性表面活性劑（amphoteric surfactant)或非離子型表面活性劑。W非離子 型表面活性劑較為合適，例如卵磯脂、商品名TWEEN的聚己氧基化山梨糖醇酢脂肪酸醋 (polyethoxylated sorbitan fatty acid ester)或商品名 SPAN 的山梨糖醇酢脂肪酸醋 (sorbitan fatty acid ester)。
[0024] 實施例1
[00巧]將木葡糖酸醋桿菌Gluconacetobacter x^inus菌落接種于含有l(wèi)OOmL AC培養(yǎng) 基（如下表2)的250mL錐形瓶中，3(TC、100巧m培養(yǎng)3天后，取出菌液W 10體積％ (v/v) 接菌量接種于ΙΟΟ?^的被裝于尼龍制盒子（面積20巧0*8. 5cm)的液態(tài)媒體，再蓋上盒蓋進 行盒裝培養(yǎng)。該液態(tài)媒體（YE培養(yǎng)基）含下面表1所列成分，并且被進一步添加1 % Tween 80的非離子型表面活性劑，該％為該液態(tài)媒體的體積為基準。將盒子平放靜置于3(TC下培 養(yǎng)2天，得到透明細菌纖維素薄膜。打開蓋子，從盒子中取出該薄膜，接著W逆滲透（R0)水 于8(TC水洗10分鐘，再于常溫下水洗至薄膜的抑值為7,于是獲得厚度為0. 8mm且于550nm 波長之光的穿透度約90%的透明細菌纖維素薄膜。
[0026] 人眼對于波長在550nm-560nm之間的光線，大體上是墨綠色的部分最為敏感，眼 睛在觀看送個范圍的顏色時，最為感到放松舒適，故本實施例采用波長在550nm的光線進 行膜片的穿透度測定。
[0027] 表1YE培養(yǎng)基*
[0028]
[0029] *%;(克重/100ml 培養(yǎng)基）*100%
[0030] 表2AC培養(yǎng)基*
[0031]
[0032] * 同表 1
【主權(quán)項】
1. 一種細菌纖維素薄膜的制備方法，包含于內(nèi)部充填有已接種細菌的培養(yǎng)液的容器 內(nèi)，于容器加蓋下靜置培養(yǎng)該細菌一段時間直到形成一片細菌纖維素薄膜，其特征在于該 培養(yǎng)液含有1000-20000ppm的表面活性劑。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細菌包括產(chǎn)醋桿菌、醋化桿菌、巴氏醋 桿菌、葡萄糖桿菌、農(nóng)桿菌、根瘤菌、八疊球菌、洋蔥假單胞菌、椰毒假單胞菌、空腸彎曲菌中 的一種或幾種。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細菌為木葡糖酸醋桿菌 Gluconacetobacter xylinus。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該表面活性劑為陰離子型的表面活性劑。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該表面活性劑為非離子型表面活性劑。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，其中該非離子型表面活性劑為卵磷脂、商 品名TWEEN的聚乙氧基化山梨糖醇酐脂肪酸酯或商品名SPAN的山梨糖醇酐脂肪酸酯。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，其進一步包含從該容器中移出該細菌纖 維素薄膜；及以堿性水溶液清洗該細菌纖維素薄膜，再以水清洗該細菌纖維素薄膜直到用 過的清洗水的pH值約為7。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，其進一步包含從該容器中移出該細菌纖 維素薄膜；及以水清洗該細菌纖維素薄膜直到用過的清洗水的pH值約為7。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該段時間為1-5天。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細菌纖維素薄膜具有〇. 1-3. Omm的厚 度。11. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細菌纖維素薄膜對550nm波長的光具 有80-99 %的穿透度。12. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細菌纖維素薄膜具有0. 1-1. 0mm的厚 度。13. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該細菌纖維素薄膜對550nm波長的光具 有大于90%的穿透度。14. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，位于該容器內(nèi)的已接種細菌的培養(yǎng)液具 有100-1000cm2的液面表面積，及0. 2-0. 5cm的厚度。15. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該水平靜置培養(yǎng)一段時間在25-35°C的 溫度下進行。
【專利摘要】本發(fā)明為關(guān)于一種細菌纖維素薄膜的制備方法，該細菌纖維素薄膜對550nm波長的光具有約90％的穿透度。本發(fā)明的制備方法包含于內(nèi)部充填有已接種細菌的培養(yǎng)液的容器內(nèi)，于該容器加蓋下靜置培養(yǎng)該細菌一段時間直到形成一片細菌纖維素薄膜，其中該培養(yǎng)液含有1000-20000ppm的表面活性劑。本發(fā)明所制得的薄膜可做為皮膚敷料、包裝材料或工業(yè)材料等應(yīng)用。
【IPC分類】C12R1/02, C12P19/04, C12R1/38
【公開號】CN105586376
【申請?zhí)枴緾N201410563764
【發(fā)明人】郭秋媚, 傅威昌, 賴進此, 廖啟成
【申請人】財團法人食品工業(yè)發(fā)展研究所
【公開日】2016年5月18日
【申請日】2014年10月21日