截短側(cè)耳素類衍生物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種具較強(qiáng)抑菌活性的截短側(cè)耳素類新衍生 物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 截短側(cè)耳素是上世紀(jì)50年代首次從高等真菌Pleurotus multilus(Fr. )Sacc.和 Pleurotus Passecke-rianus Pilat中分離了一種具有抗菌活性的雙砲類化合物。該化合 物及其衍生物作用于細(xì)菌核糖體50S亞基的23SRNA上，結(jié)合位點(diǎn)在肽基轉(zhuǎn)移酶(PTC)的V結(jié) 構(gòu)域。其三元母核結(jié)合于A位點(diǎn)的活性口袋中，而側(cè)鏈部分覆蓋了tRNA與核糖體結(jié)合的P位 點(diǎn)，通過抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成而達(dá)到抑菌目的。正是由于這種特殊的作用機(jī)制，截短側(cè)耳 素及其衍生物在體內(nèi)和體外均有著良好的抗陽性耐藥菌的活性，以及較好的藥代動(dòng)力學(xué)性 質(zhì)和較低的耐藥性。
[0003] 截短側(cè)耳素 C14的酯基結(jié)構(gòu)側(cè)鏈?zhǔn)沁M(jìn)行化學(xué)修飾的主要位點(diǎn)，國內(nèi)外對截短側(cè)耳 素 C14的側(cè)鏈的結(jié)構(gòu)修飾研究一般是在保留酯基結(jié)構(gòu)的前提下，在C22位進(jìn)行改造，這樣能 夠大大提高其抑菌活性和生物利用度。構(gòu)效關(guān)系表明，C-14位側(cè)鏈連接一個(gè)堿性中心的硫 醚基側(cè)鏈，其衍生物活性就會發(fā)生決定性的改進(jìn)。
[0004]由于截短側(cè)耳素及其衍生物的抑菌作用是通過抑制肽基轉(zhuǎn)移酶的活性而使蛋白 質(zhì)合成受阻，從而在核糖體水平上抑制細(xì)菌生長，與目前市場上普遍使用的抗菌藥物作用 靶點(diǎn)不同，而與其他藥物之間不會出現(xiàn)交叉耐藥性，尤其對耐藥的金黃色葡萄球菌、肺炎鏈 球菌和結(jié)核分枝桿菌等有良好的抑制作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明目的在于提供一種具有氨基取代的嘧啶雜環(huán)側(cè)鏈的截短側(cè)耳素類新衍生 物。本發(fā)明所提供的截短側(cè)耳素類衍生物在細(xì)胞水平上具有與延胡索酸泰秒菌素、沃尼妙 林等已知藥物相當(dāng)，甚至更高活性。
[0006] 本發(fā)明實(shí)現(xiàn)上述目的所提供的截短側(cè)耳素類衍生物具有如下結(jié)構(gòu)式：
[0007] ?
GT .
[0008] 其中，R)
其中，Ri和R2各自獨(dú)立的為Η或C1-C4的直鏈烷基;m為0、1、2或3;η為1、2或3;Χ為C、N或0;R 3為Η、0Η或順2。
[0009] 本發(fā)明所述截短側(cè)耳素類衍生物的制備過程如下：
[0010] 以
丄
[0011] 在堿性條件下，截短側(cè)耳素先與對甲苯磺酰氯反應(yīng)，反應(yīng)得到的中間體再與4，6-二氨基2-巰基嘧啶反應(yīng)得到式I所示的截短側(cè)耳素類衍生物。體系中的中間體可不用分離 提純直接與4，6-二氨基2-巰基嘧啶反應(yīng)。
[0012] 其中所述的堿選自：碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、三 乙胺、三甲胺、二異丙基乙胺、吡啶、4-二甲氨基吡啶、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶或N-乙基哌 啶中的一種或一種以上混合物。
[0013] 堿的用量是截短側(cè)耳素摩爾量的1-5倍，更優(yōu)的用量是截短側(cè)耳素摩爾量的1-3 倍。
[0014] 該步的反應(yīng)介質(zhì)為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、乙二醇、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、 乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙腈、四氫呋喃、甲基叔丁基醚、甲基異丁基酮或水中的一種或一種以 上的混合溶液。
[0015] 該步的反應(yīng)溫度為0~90°C，更合適的溫度為10~60°C。
[0016] 截短側(cè)耳素與對甲苯磺酰氯、4,6_二氨基2-巰基嘧啶的摩爾比為（1~2):(1~2): 1，更優(yōu)的摩爾比為(1.05~1.2) :(1.05~1.2): 1。
[0017] 式I所示的截短側(cè)耳素類衍生物與氯乙酰氯在堿的作用下經(jīng)親核反應(yīng)制得式II所 示的化合物，式II所示的化合物再與胺反應(yīng)得到其余的截短側(cè)耳素類衍生物。
[0018] 所述胺具有如下結(jié)構(gòu)式
G中，R^R2各自獨(dú)立的為Η 或C1-C4的直鏈烷基;m為0、1、2或3;η為1、2或3;Χ為C、N或0;R3為Η、0Η或ΝΗ2。
[0019] 其中，所述的堿選自：碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、 三乙胺、三甲胺、二異丙基乙胺、吡啶、4-二甲氨基吡啶、Ν-甲基嗎啉、Ν-甲基哌啶或Ν-乙基 哌啶中的一種或一種以上混合物。
[0020] 堿的用量是式I所示化合物摩爾量的1-5倍，更合適用量是式I所示化合物摩爾量 的1.5-3倍。
[0021] 該步的反應(yīng)介質(zhì)為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、乙二醇、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、 乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙腈、四氫呋喃、甲基叔丁基醚、甲基異丁基酮或水中的一種或一種以 上的混合溶液。
[0022] 式I所示的化合物與氯乙酰氯的反應(yīng)溫度為-20~20°C，更合適的溫度為-10~10 Γ。
[0023] 式II所示的化合物與胺的反應(yīng)溫度為0~90°C，更合適的溫度為30~60°C。
[0024]式I所示的化合物、氯乙酰氯與胺的摩爾比為1: (1~4): (1~6)，式（I)所示的化合 物、氯乙酰氯與胺的更合適的摩爾比為1: (1.2~2): (1.2~3)。
[0025] 所述截短側(cè)耳素類衍生物與鹽酸、硫酸、磷酸、甲酸、乙酸、甲磺酸、延胡索酸、枸櫞 酸、苯磺酸或?qū)妆交撬嶂械囊环N或一種以上的酸形成相應(yīng)的鹽。
[0026] 所述酸的用量為所述截短側(cè)耳素類衍生物摩爾用量的1~10倍，更優(yōu)選地為2~5 倍。反應(yīng)溫度為-10~100 °C，更合適的溫度為10~60°C。反應(yīng)在甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、乙 二醇、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙腈、四氫呋喃、甲基叔丁基醚、甲基 異丁基酮或水中的一種或一種以上的混合溶液進(jìn)行。
[0027] 本發(fā)明所公開的衍生物合成條件溫和，對水、氧氣等不敏感;反應(yīng)原料易得、價(jià)格 低廉。操作簡單，所有的化合物均可以以截短側(cè)耳素為起始原料，采用一鍋法制備;產(chǎn)物容 易分離、純化，收率較高，易于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。
[0028] 本發(fā)明所述截短側(cè)耳素類衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物在制備抗菌 藥物中的應(yīng)用。
[0029] 所述菌為金黃色葡萄球菌（如耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌、非耐藥的金黃色葡 萄球菌）、枯草桿菌和/或大腸桿菌。
[0030] 本發(fā)明的截短側(cè)耳素類衍生物在體內(nèi)和體外對多種耐藥菌如耐甲氧西林的金黃 色葡萄球菌，以及臨床中常見的致病菌如金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和大腸桿菌有顯著的 抑制作用，部分衍生物的抑菌活性要優(yōu)于泰秒菌素，甚至與沃尼妙林相當(dāng)，具有潛在的醫(yī)用 價(jià)值。
【具體實(shí)施方式】
[0031] 以下對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用 于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0032] 14-0-[(4，6-二氨基嘧啶-2-基)巰乙?；鵠姆體林(式I):
[0033]
[0034] 在250mL的燒瓶中加入3.79g(10mmol)的截短側(cè)耳素、2. lg(llmmol)的對甲苯磺酰 氯，加入60mL的二氯甲烷，升溫至45°C。攪拌并緩慢滴入濃度為0 . Olmol/ml的NaOH溶液 2.5ml，反應(yīng)40min后有大量的白色物質(zhì)生成。降至室溫，加入1.44g的4，6-二氨基-2-巰基嘧 啶和20mL甲醇，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)36h。反應(yīng)后減壓蒸干溶劑，粗產(chǎn)品用30mL乙酸乙酯和10mL萃 取三次，合并有機(jī)相，加入30mL飽和的NaHC0 3溶液，過濾、獲得式I所示化合物(4.77g，收率 95%)〇
[0035] IR(KBr):3475,3377,2933,1728,1619,1582,1547,1465,1309,1153,1117， 1019cm- 1·
[0036] 4 匪R(400MHz，DMS0)SlH 匪R(400MHz，DMS0)S6.20-6.11(m，lH)，6.06(d，J= 15·9Ηζ，3Η)，5.52(d，J = 7.8Hz，lH)，5.18(d，J = 33.9Hz，lH)，5.04(dd，J = 24.4,14.5Hz， 2H)，4.50(d，J = 5.8Hz，lH)，4.03(dd，J=14.1，7.1Hz，lH)，3.80(d，J = 9.7Hz，lH)，3.42(s， lH),2.39(s,lH),2.17(dd,J=25.8,15.3Hz,1H),2.13-1.93(m,4H),1.79-1.53(m,2H), 1.51-1.12(m,9H),l. 11-0.89(m,4H),0.82(d J = 6.5Hz,3H) ,0.62(d ,J = 6.4Hz,3H).
[0037] 13C 匪R(101MHz，DMS0)S217.6,168.3,167.3,163.8,141.2,115.8,79.6,73.1， 70·0，60·2，57·7，45·4，44·5，44·0，42·0，36·8，34·5，33·3，30·6，29·0，27·1，24·9，21·2， 16.6,15.0,12.0.HRMS(ES)calcd[M+H]+for[C26H38N404S 503.2687,found 503.2689.
[0038] 實(shí)施例l:14-0_[ (2-(二甲氨基)_乙酰氨基-6-氨基嘧啶-2-基)巰乙?；鵠姆體林：
[0039]
[0040] 在100mL的燒瓶中加入1.51g式I所示化合物，0.61g的N-甲基嗎啉和20mL的二氯甲 烷，混合物降溫至〇°C并攪拌，緩慢滴加10mL含有0.51g氯乙酰氯的二氯甲烷溶液，攪拌反應(yīng) lh。升溫至45 °C后，滴加加入0.5mL濃度為40 %的二甲胺水溶液，加入20mL的甲醇促進(jìn)兩相 的溶解，并補(bǔ)加〇. 61g的N-甲基嗎啉。攪拌反應(yīng)3h后加入30mL飽和的氯化銨溶液洗滌，分離 有機(jī)相，用水萃取3次，每次10mL，無水硫酸鈉干燥過夜，蒸干溶劑后獲得的粗產(chǎn)品用柱層析 分離(石油醚:乙酸乙酯=1:3)，獲得0.76g的產(chǎn)品（收率43% )。
[0041 ] IR(KBr):3345，2935，1720，1625，1593，1550，1498，1457，1287cm-1;
[0042]咕 NMR(400MHz，CDCl3)S9.36(s，lH)，7.09(d，J= 15.1Hz，1H) ,6.51 (dd，J= 17.4， 11.0Hz,lH),5.76(t,J=16.9Hz,lH),5.36-5.14(m,2H),5.04-4.82(m,2H),3.93-3.70(m, 2H),3.35(s,lH),3.06(s,lH),2.37-2.30(m,6H),2.25-2.13(m,2H),2.02(dt,J=13.1, 12.4Hz,3H),l.79-1.72(m,lH),1.69-1.48(m,4H),l.48-1.42(m,4H),l.38-1.24(m,3H), 1.17-1.08(m,4H),0.86(d ,J = 7.0Hz,3H),0.74(dd ,J = 15.9,5.4Hz,3H)；
[0043] 13C NMR(101MHz,CDCl3)5216.03,169.57,167.92,167.15,163.04,155.27, 138.26,116.05,86.86,73.60,68.57,62.64,57.16