作為葛瑞林o-?；D移酶抑制劑的被取代的哌啶基-乙基-嘧啶的制作方法
【專利說明】作為葛瑞林ο-?；D移酶抑制劑的被取代的哌啶基-乙基- 嘧啶
[0001]本發(fā)明涉及可用于抑制葛瑞林〇-酰基轉移酶(GOAT)的化合物、用于治療與GOAT活 性有關的疾病的藥物組合物和方法。
[0002] GOAT屬于膜結合的0-?；D移酶(ΜΒ0ΑΤ)家族的酶。它通過將脂肪酸轉移至脫酰 基葛瑞林肽的Ser3殘基而將脫?；?葛瑞林(也被稱作未?；母鹑鹆只騏AG)轉化成生物 活性形式，即酰基-葛瑞林(AG)。已經(jīng)證實?；?葛瑞林會在人類中和在嚙齒類動物中增加 食物攝入和增加體脂肪率。還已經(jīng)證實AG在人類中的輸注會抑制葡萄糖誘導的胰島素分 泌。已經(jīng)證實葛瑞林基因的消除會增強胰島素釋放以預防或改善高脂肪飲食飼喂的ob/ob 小鼠的葡萄糖不耐受性。
[0003] 肥胖和糖尿病的流行以及對肥胖和糖尿病的當前治療的可變有效性和應答，要求 患者可得到更多的治療選擇。認為GOAT抑制劑在肥胖的治療中是一種有用的藥劑。進一步 認為，GOAT抑制劑也可以用于減少重量增加或重量恢復（由飲食和/或鍛煉、被設計成減少 重量增加或治療肥胖的其它治療藥物試劑或程序引起）。類似地，GOAT抑制劑單獨地或與II 型糖尿病的其它治療組合地可以用于治療II型糖尿病。
[0004] 本發(fā)明提供了一種化合物，其為GOAT抑制劑。具體地，本發(fā)明提供了下式的化合物 或其藥學上可接受的鹽
[0005] 本發(fā)明還提供了一種化合物，其為下式的GOAT抑制劑
[0006] 本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包含本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽以 及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了 一種藥物組合物，其包含本發(fā)明的化合物和一種或多種其它治療劑。
[0007] 本發(fā)明的另一個方面提供了一種減少重量增加或重量恢復或治療II型糖尿病或 肥胖的方法，所述方法包括給有此需要的患者施用本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的 鹽。
[0008] 本發(fā)明也提供了用于治療中、尤其是用于減少重量增加或重量恢復或治療II型糖 尿病或肥胖的本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽。此外，本發(fā)明提供了本發(fā)明的化合 物或其藥學上可接受的鹽在藥物制備中的用途，所述藥物用于減少重量增加或重量恢復或 治療II型糖尿病或肥胖。
[0009]本發(fā)明的化合物在寬劑量范圍內是通常有效的。例如，每天的劑量落在約0.03至 約150 mg/Kg體重的范圍內。在一些情況下，低于前述范圍下限的劑量水平可能已經(jīng)足夠， 而在其它情況下，仍可以在維持有利的益處/風險比（profile)的同時使用更大劑量，且因 此以上劑量范圍無意以任何方式限制本發(fā)明的范圍。應該理解，化合物的實際施用量將由 醫(yī)師考慮到有關情況來確定，所述情況包括要治療的病癥、所選擇的給藥途徑、施用的一種 或多種實際化合物、個體患者的年齡、重量和應答、以及患者的癥狀的嚴重程度。
[00?0] 本文中使用的術語"治療（treating)"（或"治療（treat)"或"治療（treatment)"） 表示抑制、減慢、終止或逆轉現(xiàn)有癥狀、病癥或障礙的進展或嚴重程度。
[0011] 本文中使用的術語"減少重量增加"表示減少患者的重量的增加。術語"減少重量 恢復"表示減少在重量減輕以后經(jīng)歷重量反彈的患者的重量增加。重量恢復可以是由于重 量減輕停止以后的反彈效應，所述重量減輕通過飲食、鍛煉、行為矯正或經(jīng)批準的療法實 現(xiàn)。為了避免疑義，本文中使用的重量增加或重量恢復表示由食物攝入或飲食習慣誘導的 重量增加或重量恢復，且不表示非食品相關的重量增加諸如流體的積累，由水潴留、肌肉質 量或炎癥引起的重量。
[0012] 本發(fā)明的化合物可以反應以形成藥學上可接受的鹽。藥學上可接受的鹽和用于制 備它們的常見方法是本領域眾所周知的。參見，例如，P. Stahl,等人.Handbook of Pharmaceutical Salts :Properties, Selection and Use,第2次修訂版（Wiley-VCH, 2011); S.M. Berge,等人，"Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences,第66卷，第 1 期，1977年 1 月。
[0013] 技術人員會明白，本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽包含含有至少一個手性 中心的核心：
盡管本發(fā)明預見到所有單一對映異構體、以及所述化合物的對映異構體的混合物(包 括外消旋體），本發(fā)明的優(yōu)選化合物由下式表示： 或其藥學上可接受的鹽。
[0014] 本發(fā)明的化合物優(yōu)選地配制為通過多種途徑施用的藥物組合物。這樣的藥物組合 物和制備它們的方法是本領域眾所周知的。參見，例如，Remington : The Science and Practice of Pharmacy(A. Gennaro等人編，第21版，Mack Publishing Co·, 2005)。更特 別優(yōu)選的是這樣的藥物組合物:其包含由下式表示的本發(fā)明的化合物
或其藥學上可接受的鹽以及一種或多種藥學上可接受的載體或稀釋劑。
[0015] 從手性試劑開始或通過立體選擇性的或立體特異性的合成技術，可以制備單一對 映異構體或非對映異構體?？商鎿Q地，在本發(fā)明的化合物的合成中的任何方便點，通過標準 手性色譜或結晶技術可以從混合物中分離單一對映異構體或非對映異構體。本發(fā)明的化合 物的單一對映異構體和非對映異構體是本發(fā)明的優(yōu)選實施方案。
[0016] 本領域眾所周知，用于治療糖尿病和/或肥胖的藥劑可以與用于治療糖尿病和/或 肥胖的其它藥劑組合。本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽可以與糖尿病或肥胖的其它 有效治療(一種或多種）同時地或依次地共同施用。在經(jīng)批準的醫(yī)療程序(諸如治療肥胖癥 的外科手術，例如，胃分流術或可調節(jié)的胃囊?guī)g程序）以后，可以同時地或依次地施用單 獨的或與其它有效治療(一種或多種)組合的本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽。
[0017] 本發(fā)明還包括可用于合成本發(fā)明的化合物的中間體和方法。
[0018] 另外，在以下方案中描述的中間體可以含有許多氮保護基。所述可變保護基在每 次出現(xiàn)時可以相同或不同，這取決于特定反應條件和要進行的特定轉化。保護和去保護條 件是技術人員眾所周知的。參見，例如，Greene和Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, (T. Greene和P. Wuts編，第2版· 1991)〇
[0019] 制備和實施例 下述制備和實施例進一步例證本發(fā)明，且代表本發(fā)明的化合物的典型合成。試劑和起 始原料是容易得到的，或可以由本領域普通技術人員容易地合成。應當理解，所述制備和實 施例作為舉例說明而不是限制來闡述，并且本領域普通技術人員可以做出多種修改。
[0020] 本發(fā)明的化合物的R或S構型可以通過標準技術諸如X-射線分析和與手性-HPLC保 留時間的關聯(lián)來確定。通常使用MDL Accelrys ? Draw 4.0.呢1'版中的1即4(：命名性能執(zhí)行 下述制備和實施例的命名。
[0021] 本文中使用的以下術語具有指定的含義："ACN"表示乙腈；"BSA"表示牛血清白蛋 白；"DCM"表示二氯甲烷；"DIPEA"表示N，N-二異丙基乙胺；"DMF"表示二甲基甲酰胺；"DMS0" 表示二甲基亞砜；"EDTA"表示乙二胺四乙酸；"EtOAc"表示乙酸乙酯；"EtOH"表示乙醇； "FBS"表示胎牛血清；"HRP"表示辣根過氧化物酶；"IC50"表示產生最大應答的50%的藥劑的 濃度；"IPA"表示異丙醇；"MeOH"表示甲醇；"MTBE"表示甲基叔丁基醚；"PBS"表示磷酸鹽緩 沖鹽水；"RT"表示室溫；"TEA"表示三乙胺；"TFA"表示三氟乙酸；"T R"表示保留時間；"THF" 表示四氫呋喃;且"TMB"表示3,3'，5,5'_四甲基聯(lián)苯胺。
[0022] LC-MS條件（低pH):柱：Phenomenex Gemini NX C18 2.1 X50 mm 3.0 m;梯度：5-100%B保持3 min，然后 100%B保持0.75 min;柱溫度：50°C±10°C;流速：1 mL/min;溶劑A: 含有0.1 %甲酸的去離子水;溶劑B:含有0.1 %甲酸的ACN。
[0023] 制備 1 6-氯-2-甲基嘧啶-4-胺
在室溫給5 L鋼壓力容器(高壓釜)裝入4,6_二氯-2-甲基嘧啶(400 g，2.45 mol)和氫 氧化銨(2.8 L)。將反應物加熱至90°C保持5 h。將反應混合物冷卻至室溫，然后穿過布氏漏 斗過濾固體。將濾餅用水(200 mL)和己烷(200 mL)洗滌，然后在真空下干燥以得到作為白 色固體的標題化合物(290 g, 82%) IC-ES/MS m/z 144.0 (M+1)。
[0024] 制備 2 6-氯-5-碘-2-甲基嘧啶-4-胺
在配備機械攪拌器的20 L圓底燒瓶中組合6-氯-2-甲基嘧啶-4-胺(708 g，4.93 mol) 和MeOH (7.08 L)。冷卻至0-5°C。使用加料漏斗歷時1 h加入溶解在MeOH (6 L)中的一氯化 碘(4.806 kg，29.6 mol)。將反應混合物溫熱至室溫并在室溫攪拌16 h。將反應混合物冷 卻至0-5°C并加入亞硫酸鈉(46 L，20%水溶液）。將得到的固體過濾并用水(2 L)洗滌，隨后 用己烷（3 L)洗滌。在真空下干燥固體，得到作為白色固體的標題化合物（1061 g，80%)。 LC-ES/MS m/z 269.9 (M+1)。
[0025] 制備 3 4- [ 2- (4-氨基-6-氯-2-甲基-嘧啶-5-基）乙炔基]哌啶-1 -甲酸叔丁酯
將6-氯-5-碘-2-甲基-嘧啶-4-胺(20 g，74.22 mmol)、4-乙炔基-哌啶-1-甲酸叔丁酯 (18.64 g, 89.06 mmol)和二異丙胺（10.44 mL, 74.22 mmol)溶解在3-頸燒瓶內的THF (200 mL)中。交替地，將燒瓶抽真空并充入氮氣3次。將雙(三苯基膦)氯化鈀(II) (2.63 g， 3.71 mmol)和碘化亞銅（I) (0.713 g，3.71 mmol)加入溶液中。將混合物加熱至50-55°C 之間保持16 h。將混合物冷卻至室溫并加入更多的雙（三苯基膦）氯化鈀（II) (1.31 g， 1.86 mmol)、鵬化亞銅（I) (0.356 g, 1.86 mmol)和4-乙炔基-哌啶-1-甲酸叔丁酯（1.55 g，7.42 mmol)。將混合物加熱至60°C保持3.5 h。將混合物冷卻至室溫并在減壓下濃縮。將 所述物質用DCM (300 mL)稀釋并用飽和氯化銨水溶液(100 mL)、水（100 mL)和飽和氯化鈉 水溶液（1 〇〇 mL)洗滌。將溶液經(jīng)MgS(k干燥，過濾，并在減壓下濃縮。使用硅膠色譜法(800 g 硅膠柱），用20%至100%的EtOAc在己烷類中的溶液洗脫，純化殘余物。將純化的級分濃縮，得 到作為淡橙色粉末的標題化合物(22.6 g，Sea/ohLC-ES/MS m/z(35Cl/37Cl) 351.2/353.1 (M+l)〇
[0026] 制備 4 4- [ 2- (4-氨基-6-氯-2-甲基-嘧啶-5-基）乙基]哌啶-1 -甲酸叔丁酯
在EtOH (81 mL)和EtOAc (40 mL)中組合4-[2-(4_氨基-6-氯-2-甲基-嘧啶-5-基）乙 炔基]哌啶-1