一種玫瑰香型精油的制備方法及其產(chǎn)品的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物工程領(lǐng)域，更具體地，設(shè)及一種玫瑰香型精油及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 玫瑰精油是一種從菩薇科玫瑰花瓣中提煉出的天然名貴香料，被譽(yù)為"液體黃 金"，含有香茅醇、香葉醇、芳精醇、β-苯乙醇等揮發(fā)性香味物質(zhì)。其香氣濃郁、具有減緩疲 勞、鎮(zhèn)靜安神、舒緩壓力、開(kāi)闊屯、智的功效，多作為高檔天然食品添加劑、名貴化妝品與日化 產(chǎn)品，具有非常廣闊的市場(chǎng)前景。
[0003] 目前市場(chǎng)上高檔的玫瑰精油，其生產(chǎn)方法主要是從新鮮的玫瑰花瓣中提取，通常 采用水蒸氣蒸饋法、有機(jī)溶劑浸提法。通過(guò)水蒸氣蒸饋法提取的玫瑰精油，其得油率較低， 且由于高溫蒸汽的不良作用，所提取的精油色澤深，含有20%左右蠟質(zhì)（即長(zhǎng)鏈燒控），并帶 有少量焦糊味。通過(guò)有機(jī)溶劑提取的精油雜質(zhì)較多，0-苯乙醇含量高，精油品質(zhì)不高。
[0004] 而且，天然玫瑰花瓣中含油量較低，W國(guó)際認(rèn)可的保加利亞的玫瑰花計(jì)，通常只有 0.025%，即4000kg鮮花只能生產(chǎn)得到1kg玫瑰精油。更為重要的是玫瑰花的種植受到季節(jié)、 地域條件、花朵的采摘時(shí)間、人工采摘費(fèi)用等因素的影響，我國(guó)精油的品質(zhì)不穩(wěn)定、生產(chǎn)成 本逐年升高。
[0005] 因此，大量、低成本的制備玫瑰精油或者具有相似香型和功能的玫瑰精油類似物 具有廣泛的市場(chǎng)需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的W上缺陷或改進(jìn)需求，本發(fā)明提供了一種玫瑰香型精油及其制 備方法，其目的在于通過(guò)微生物發(fā)酵法制備具有玫瑰香型和玫瑰精油類似功能的生物精 油，由此解決現(xiàn)有的玫瑰香型精油產(chǎn)量低、成本高或者效果不佳的技術(shù)問(wèn)題。
[0007] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，按照本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種玫瑰香型精油的制備方法， 利用酵母菌進(jìn)行發(fā)酵，將發(fā)酵結(jié)束的培養(yǎng)液經(jīng)有機(jī)溶劑萃取、蒸饋后，即制得所述的玫瑰香 型精油;所述有機(jī)溶劑優(yōu)選正己燒或石油酸。
[000引優(yōu)選地，所述玫瑰香型精油的制備方法，其所述酵母菌其分類命名為 化emothec ium ashbyi i H4565，于2015年10月30日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中屯、CCTCC， 地址為湖北省武漢市武漢大學(xué)，編號(hào)為CCTCC NO.Μ 2015655。
[0009] 優(yōu)選地，所述玫瑰香型精油的制備方法，其包括w下步驟：
[0010] (1)將酵母菌接入培養(yǎng)基進(jìn)行分級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，獲得酵母菌種子液；
[0011] (2)將步驟（1)中獲得的酵母菌種子液轉(zhuǎn)種發(fā)酵培養(yǎng)，當(dāng)發(fā)酵培養(yǎng)至20-3化后，向 培養(yǎng)液中添加2g/L至5g/L的活性炭；
[001^ (3)當(dāng)培養(yǎng)液抑值回升至7.5至8.0之間且溶氧值回升至90% W上時(shí)，結(jié)束發(fā)酵，獲 得發(fā)酵液；
[0013] (4)將步驟(3)中獲得的發(fā)酵液進(jìn)行固液分離，分離出活性炭，并采用有機(jī)溶劑洗 脫所述活性炭，獲得洗脫液。
[0014] 優(yōu)選地，所述玫瑰香型精油的制備方法，其包括W下步驟：
[0015] (5)將步驟(3)中獲得的發(fā)酵液進(jìn)行固液分離，分離出液相，并采用有機(jī)溶劑萃取 所述液相，獲得萃取液。
[0016] 優(yōu)選地，所述玫瑰香型精油的制備方法，其包括W下步驟：
[0017] (6)將步驟(4)中獲得的洗脫液和步驟(5)中獲得的萃取液合并，蒸發(fā)有機(jī)溶劑獲 得油相；
[0018] (7)將步驟(6)獲得的油相進(jìn)行水蒸氣蒸饋，即制得本發(fā)明提供的玫瑰香型精油。
[0019] 按照本發(fā)明的另一方面，提供了一種玫瑰香型精油，其特征在于，所述玫瑰香型 精油含有酵母菌代謝產(chǎn)物經(jīng)有機(jī)溶劑提取后的揮發(fā)性成分。
[0020] 優(yōu)選地，所述玫瑰香型精油，其含有質(zhì)量比例3.24% -20.42 %的香茅醇、40.18 % - 74.09% 的香葉醇、2.19 %-8.43 % 的澄花醇、8.19 %-33.65 % 的β-苯乙醇、W 及0.79 %- 3.86 %的巧樣醒。
[0021] 優(yōu)選地，所述玫瑰香型精油，其不含有碳數(shù)大于等于10的長(zhǎng)鏈燒控。
[0022] 優(yōu)選地，所述玫瑰香型精油，其經(jīng)質(zhì)譜檢測(cè)含有微量成分:順、反-玫瑰酸、合金歡 醇、下香酪、甲基下香酪、香葉酸、甲酸香葉醋、W及乙酸香葉醋。
[0023] 優(yōu)選地，所述玫瑰香型精油，其經(jīng)檢測(cè)含有微量成分:β-月桂締、2-曹締、D-巧樣 締、化)-β-羅勒締、丫-祗品締、羅勒締、祗品油締、甲酸香草醋、甲酸香葉醋、W及甲基庚締 酬。
[0024] 總體而言，通過(guò)本發(fā)明所構(gòu)思的W上技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)相比，能夠取得下列有 益效果。
[0025] 本發(fā)明公開(kāi)的一種由微生物發(fā)酵法制備的玫瑰香型精油，具有直接從玫瑰花瓣中 提取的玫瑰精油的香味，共有的主要組分有:香茅醇、香葉醇、澄花醇、0-苯乙醇、巧樣醒等， 運(yùn)些組分的比例接近于保加利亞精油標(biāo)準(zhǔn)（IS09842_2003)。除了運(yùn)些主要組份外，還具有 大量的微量呈香組分如：順、反-玫瑰酸，合金歡醇，下香酪，甲基下香酪，香葉酸，甲酸香葉 醋，乙酸香葉醋等。采用微生物發(fā)酵制備成的玫瑰香型精油，能量產(chǎn)且品質(zhì)穩(wěn)定，解除了從 玫瑰花瓣中提取的精油受到季節(jié)、地域條件、花朵的采摘時(shí)間、人工采摘費(fèi)用等因素的限 審IJ，同時(shí)解決了勾兌精油難W模擬玫瑰精油中天然含有的微量組分問(wèn)題。
[0026] 本發(fā)明首次提出采用微生物發(fā)酵法制備玫瑰香型精油，較于從玫瑰花瓣中提取的 精油而言，本發(fā)明的玫瑰香型精油成本低，且生產(chǎn)過(guò)程不受地域、季節(jié)限制，品質(zhì)穩(wěn)定;較勾 兌的精油而言，本發(fā)明的玫瑰香型精油含有勾兌過(guò)程中難W滿足的微量成分W及各組分之 間配比的要求，有望取代花瓣提取的玫瑰精油與勾兌的精油，彌補(bǔ)玫瑰精油的市場(chǎng)空缺， 推動(dòng)相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
[0027] 除此W外，本發(fā)明提供的玫瑰香型精油不含長(zhǎng)鏈蠟質(zhì)，揮發(fā)性更強(qiáng)、純度更高。
【附圖說(shuō)明】
[0028] 圖1是本發(fā)明實(shí)施例1提供的玫瑰香型精油氣相色譜檢測(cè)結(jié)果；
[0029] 圖2是本發(fā)明實(shí)施例2提供的玫瑰香型精油氣相色譜檢測(cè)結(jié)果；
[0030] 圖3是本發(fā)明實(shí)施例3提供的玫瑰香型精油氣相色譜檢測(cè)結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0031] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，W下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì) 本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用W解釋本發(fā)明，并 不用于限定本發(fā)明。此外，下面所描述的本發(fā)明各個(gè)實(shí)施方式中所設(shè)及到的技術(shù)特征只要 彼此之間未構(gòu)成沖突就可W相互組合。
[0032] 本發(fā)明提供的玫瑰香型精油的制備方法，采用酵母菌發(fā)酵法，將酵母菌代謝產(chǎn)物 采用有機(jī)溶劑提取后揮發(fā)有機(jī)溶劑，即制得所述玫瑰香型精油;所述有機(jī)溶劑優(yōu)選正己燒 或石油酸。具體而言，所述方法包括W下步驟：
[0033] (1)將酵母菌接入培養(yǎng)基進(jìn)行分級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，獲得酵母菌種子液；
[0034] 所述酵母菌種子液按照如下方法獲得：
[0035] (1-1)將凍干保藏的酵母菌接入已滅菌的一級(jí)種子培養(yǎng)基，一級(jí)種子培養(yǎng)基組成 為(g/L):葡萄糖10、蛋白腺4、W及K2HP化0.5，接種量為5 %，培養(yǎng)20至40小時(shí)，獲得一級(jí)種 子液；
[0036] (1-2)將步驟（1-1)中獲得的一級(jí)種子液，接入二級(jí)種子培養(yǎng)基，二級(jí)種子培養(yǎng)基 組成為(g/L):葡萄糖15、蛋白腺6、W及拉冊(cè)化0.5，接種量為5 %，培養(yǎng)20至30小時(shí)，獲得酵 母菌種子液。
[0037] (2)將步驟(1)中獲得的酵母菌種子液轉(zhuǎn)種發(fā)酵培養(yǎng)，當(dāng)發(fā)酵培養(yǎng)至20-3化后，向 培養(yǎng)液中添加2g/L至5g/L的活性炭;發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(g/L):薦糖20、蛋白腺6、K2HP化1、 W及班巧酸鋼2,接種量為5%。
[003引（3)當(dāng)所述培養(yǎng)液pH值回升至7.5至8.0之間且溶氧值回升至90% W上時(shí)，結(jié)束發(fā) 酵，獲得發(fā)酵液；
[0039] (4)將步驟(3)中獲得的發(fā)酵液進(jìn)行固液分離，分離出活性炭，并采用有機(jī)溶劑洗 脫所述活性炭，獲得洗脫液。
[0040] (5)將步驟(3)中獲得的發(fā)酵液進(jìn)行固液分離，分離出液相，并采用有機(jī)溶劑萃取 所述液相，獲得萃取液。
[0041] (6)將步驟(4)中獲得的洗脫液和步驟(5)中獲得的萃取液蒸發(fā)有機(jī)溶劑并合并獲 得油相。
[0042] (7)將步驟(6)獲得的油相進(jìn)行水蒸氣蒸饋，即制得本發(fā)明提供的玫瑰香型精油。
[0043] 優(yōu)選地，所述酵母菌其分類命名為Elremothecium ashbyii H4565,于2015年10月 30日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中屯、CCTCC，編號(hào)為CCTCC NO.Μ 2015655。
[0044] 所述酵母菌是在研究阿舒假囊酵母發(fā)酵生產(chǎn)核黃素中發(fā)現(xiàn)的，通過(guò)對(duì)能產(chǎn)玫瑰花 香味物質(zhì)的菌株進(jìn)行紫外-亞硝基脈誘變后定向篩選后得到的。
[0045] 按照上述方法制備的玫瑰香型精油，具有從玫瑰花中提取的玫瑰精油香味，該精 油具有玫瑰精油的主要組成成分和相似的微量成分，由香葉醇、香茅醇、澄花醇、β-苯乙醇 等主要成分W及順、反-玫瑰酸，合金歡醇，下香酪，甲基下香酪，香葉酸，甲酸香葉醋，乙酸 香葉醋等重要的微量成分組成。
[0046] 具體而言，本發(fā)明提供的玫瑰香型精油，含有質(zhì)量比例3.24%-20.42%的香茅醇、 40.18%-74.09%的香葉醇、2.19%-8.43%的澄花醇、8.19%-33.65%的護(hù)苯乙醇、^及 0.79%-3.86%的巧樣醒，經(jīng)質(zhì)譜檢測(cè)還含有微量順、反-玫瑰酸、合金歡醇、下香酪、甲基下 香酪、香葉酸、甲酸香葉醋、W及乙酸香葉醋;尤其需要指出，本發(fā)明提供的玫瑰香型精油， 為酵母菌代謝產(chǎn)物經(jīng)有機(jī)溶劑提取的揮發(fā)性成分，因此其純度較高，幾乎不含有玫瑰精油 中的碳數(shù)大于或等于10的長(zhǎng)鏈燒控。
[0047] W下為實(shí)施例：
[004引實(shí)施例1
[0049] -種玫瑰香型精油的制備方法，具體包括W下步驟：
[0050] (1)將酵母菌接入培養(yǎng)基進(jìn)行分級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，獲得酵母菌種子液：
[0051] (1-1)將凍干保藏的酵母菌液接入已滅菌的一級(jí)種子培養(yǎng)基，一級(jí)種子培養(yǎng)基組 成為(g/L):葡萄糖10、蛋白腺4、W及K2HP化0.5，接種量為5 %，培養(yǎng)20至40小時(shí)，獲得一級(jí) 種子液；
[0052] 所述酵母菌其分類命名為化emothecium ashbyii H4565,于2015年10月30日保藏 于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中屯、CCTCC，編號(hào)為CCTCC N0.M 2015655。
[0053] (1