% ;調(diào)節(jié)pH值6.0。培養(yǎng)條件為：通風(fēng)比為1:0.5vvm，罐壓 0.03Mpa，培養(yǎng)溫度26-28°C，培養(yǎng)6天左右即可得到種子液。將培養(yǎng)好種子液接種到滅菌后 5化發(fā)酵培養(yǎng)基，接種量15 %，發(fā)酵培養(yǎng)基組成為葡萄糖2%、酵母粉0.5 %、黃豆餅粉1.5 %、 憐酸二氨鐘0.3 %、屯水硫酸儀0.3%、硫酸銅0.3%、豆油0.03% ;調(diào)節(jié)抑值6.5;通風(fēng)比為1: 0.4vvm，罐壓0.04Mpa，在27 °C下發(fā)酵培養(yǎng)6天后，放出20L的發(fā)酵液，補(bǔ)入20L滅菌后的發(fā)酵 培養(yǎng)基，繼續(xù)發(fā)酵2天;如此不斷放料、補(bǔ)料，反復(fù)3次，發(fā)酵結(jié)束可得發(fā)酵液11化，發(fā)酵周期 為12天。
[0029] 2)微濾過濾:分別將四次發(fā)酵后的桑黃發(fā)酵液20L、20L、20L和5化通過微濾過濾， 分別得到桑黃濕菌絲體1.624肖、1.5化肖、1.544肖、4.3化肖(含水量80%左右），微濾透析液 18.38Kg、18.44Kg、18.46Kg和50.64Kg，透析液的透光率為82-87 %，COD為30-60mg/L。微濾 過濾所用的膜材料是孔徑為50nm的陶瓷膜，具體工藝條件是:操作溫度為50~6(TC，進(jìn)壓為 3. Obar，出壓為1. Obar，壓力差為2. Obar。
[0030] 3)低溫干燥:將步驟2得到的1.62kg、1.5化g、1.54kg、4.36kg桑黃濕菌絲體進(jìn)入真 空烘箱進(jìn)行烘干，得到0.334kg、0.320kg、0.31化g和0.894kg水分含量3.0%左右的桑黃菌 絲體，該菌絲體黃酬為0.3-0.5 %，多糖含量5-8%。依據(jù)Q/JSFF 0020S-2015標(biāo)準(zhǔn)方法檢驗(yàn)。 具體干燥工藝條件是:干燥溫度65 °C，真空度為-ο. 085Mpa。
[0031] 傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝與本發(fā)明實(shí)施例1工藝產(chǎn)品產(chǎn)量、質(zhì)量對比表
[0032]
[0034] 從上述表格可W看出采用傳統(tǒng)工藝14天發(fā)酵2個(gè)批次，可獲得菌絲體1.508kg;而 采用本發(fā)明工藝總發(fā)酵周期為12天，可獲得4個(gè)批次的菌絲體1.864kg，發(fā)酵周期為傳統(tǒng)的 86%，而獲得菌絲體產(chǎn)量是傳統(tǒng)的123.6%，并且菌絲體產(chǎn)品質(zhì)量要高于傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)。因 此采用本發(fā)明工藝既可縮短發(fā)酵周期，提高產(chǎn)量和質(zhì)量，降低生產(chǎn)成本。
[0035] 實(shí)施例2
[0036] 1)桑黃菌株(Phellinus igniarius)由中國科學(xué)院微生物研究所提供并鑒定，保 藏編號(hào)CGMCC NO.50095。將培養(yǎng)好的桑黃菌株種子液種到種子培養(yǎng)基，接種量是10%，種子 培養(yǎng)基組成為葡萄糖1.8%、蠶蛹粉0.7%、黃豆餅粉1.6%、憐酸二氨鐘0.3%、屯水硫酸儀 0.2 %、硫酸銅0.3 %、豆油0.02 % ;調(diào)節(jié)pH值6.0。培養(yǎng)條件為：通風(fēng)比為1:0.5vvm，罐壓 0.03Mpa，培養(yǎng)溫度26-28°C，培養(yǎng)6天左右即可得到種子液。將培養(yǎng)好種子液接種到滅菌后 100L發(fā)酵培養(yǎng)基，接種量15%，發(fā)酵培養(yǎng)基組成為葡萄糖2%、酵母粉0.4%、黃豆餅粉 1.7 %、憐酸二氨鐘0.3%、屯水硫酸儀0.3 %、硫酸銅0.3%、豆油0.03% ;調(diào)節(jié)抑值6.5;通風(fēng) 比為1:0.4vvm，罐壓0.04Mpa，在27 °C下發(fā)酵培養(yǎng)6天后，放出40L的發(fā)酵液，補(bǔ)入40L滅菌后 的發(fā)酵培養(yǎng)基，繼續(xù)發(fā)酵2天;如此不斷放料、補(bǔ)料，反復(fù)3次，發(fā)酵結(jié)束可得發(fā)酵液11化，發(fā) 酵周期為12天。
[0037] 2)微濾過濾:分別將四次發(fā)酵后的桑黃發(fā)酵液40L、40L、40L和11化通過微濾過濾， 分別得到桑黃濕菌絲體2.62kg、2.5化g、2.50kg、7.42kg(含水量76%左右），微濾透析液 37.38Kg、37.44Kg、37.5Kg和 104.58Kg，透析液的透光率為83-87 %，COD為30-50mg/L。微濾 過濾所用的膜材料是孔徑為50nm的陶瓷膜，具體工藝條件是:操作溫度為50~6(TC，進(jìn)壓為 3. Obar，出壓為1. Obar，壓力差為2. Obar。
[003引 3)低溫干燥:將步驟2得到的2.62kg、2.5化g、2.50kg、7.42kg kg桑黃濕菌絲體進(jìn) 入真空烘箱進(jìn)行烘干，得到0.64化g、0.632kg、0.618kg和1.83化g水分含量3.2%左右的桑 黃菌絲體，該菌絲體黃酬為ο. 3-0.5 %，多糖含量5-8 %。依據(jù)Q/JSFF 0020S-2015標(biāo)準(zhǔn)方法 檢驗(yàn)。具體干燥工藝條件是:干燥溫度65 °C，真空度為-0.085Mpa。
[0039] 傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝與本發(fā)明實(shí)施例2工藝產(chǎn)品產(chǎn)量、質(zhì)量對比表
[0040]
[0042]從上述表格可W看出采用傳統(tǒng)工藝14天發(fā)酵2個(gè)批次，可獲得菌絲體3.364kg;而 采用本發(fā)明工藝總發(fā)酵周期為12天，可獲得4個(gè)批次的菌絲體3.73kg，發(fā)酵周期為傳統(tǒng)工藝 的86%，而獲得菌絲體產(chǎn)量是傳統(tǒng)工藝的110.9%，并且菌絲體產(chǎn)品質(zhì)量要高于傳統(tǒng)工藝生 產(chǎn)。因此采用本發(fā)明工藝既可縮短發(fā)酵周期，提高產(chǎn)量和質(zhì)量，降低生產(chǎn)成本。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種快速深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)桑黃菌粉的方法，其特征是該方法包括下述步驟： 1) 桑黃半連續(xù)發(fā)酵液制備:將桑黃種子液接種到滅菌后的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行深層液態(tài)發(fā) 酵得到桑黃發(fā)酵培養(yǎng)液，接種量為體積含量的10~20%，通風(fēng)比為1:0.1-1.Ovvm，罐壓0.02 ~0.05Mpa，在20~30 °C下發(fā)酵培養(yǎng)3-7天后，放出培養(yǎng)器容積的10-50 %的發(fā)酵液，補(bǔ)入等 同體積的滅菌后的發(fā)酵培養(yǎng)基，繼續(xù)發(fā)酵1-3天;如此不斷放料、補(bǔ)料，每次補(bǔ)料繼續(xù)發(fā)酵1-3天，反復(fù)多次，得到桑黃發(fā)酵液； 2) 桑黃發(fā)酵液陶瓷膜過濾:將步驟1)中所得的桑黃發(fā)酵液通過微濾膜得到發(fā)酵液的微 濾透析液和菌絲體，收集菌絲體； 3) 低溫真空烘干:將步驟2)中所得的菌絲體在真空度為-0.065~-0.095Mpa，70~85°C 條件下進(jìn)行干燥。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)桑黃菌粉的方法，其特征是所述的桑 黃種子液是通過以下方法制備得到的：桑黃種子培養(yǎng)基組成為葡萄糖1-3%、蠶蛹粉0. ΙΟ . 5 % 、 黃豆餅粉 0 . 5-2 % 、 磷酸二氫鉀0 .1 -0 . 5 % 、 七水硫酸鎂0 .1-0 . 5 % 、 硫酸銅0 .1- 0.5%、豆油0.01-0.05% ;調(diào)節(jié)pH值5.0-7.0;培養(yǎng)條件為：通風(fēng)比為1:0.1-1. Ovvm，罐壓 0.02~0.05Mpa，培養(yǎng)溫度20~30°C，培養(yǎng)周期3-7天。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的快速深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)桑黃菌粉的方法，其特征是所述的桑 黃種子液是通過以下方法制備得到的：桑黃種子培養(yǎng)基組成為葡萄糖1-3%、蠶蛹粉0. ΙΟ . 5 % 、 黃豆餅粉 0 . 5-2 % 、 磷酸二氫鉀0 .1 -0 . 5 % 、 七水硫酸鎂0 .1-0 . 5 % 、 硫酸銅0 .1- 0.5%、豆油0.01-0.05% ;調(diào)節(jié)pH值5.0-7.0;培養(yǎng)條件為：通風(fēng)比為1:0.1-1. Ovvm，罐壓 0.02~0.05Mpa，培養(yǎng)溫度20~30°C，培養(yǎng)周期3-7天。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)桑黃菌粉的方法，其特征是所述的桑 黃發(fā)酵培養(yǎng)基組成為葡萄糖1-3 %、酵母粉0.1-1 %、黃豆餅粉0.5-2 %、磷酸二氫鉀0 . ΙΟ. 5% 、七水硫酸鎂 0.1-0.5% 、硫酸銅0.1-0.5% 、豆油 0.01-0.05% ; 調(diào)節(jié) pH值 5.0-7. 0。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)桑黃菌粉的方法，其特征是該方法所 述的微濾膜為陶瓷膜或有機(jī)膜，其孔徑在〇. 05~0.5μπι，操作溫度為50~60°C，工作壓力:進(jìn) 壓為2~4bar，出壓為0~5bar。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的快速深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)桑黃菌粉的方法，其特征是該方法所 述的微濾膜為陶瓷膜或有機(jī)膜，其孔徑在50nm，操作溫度為50~60°C，工作壓力：進(jìn)壓為 3bar，出壓為lbar。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種快速深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)桑黃菌粉的方法，該方法是將桑黃菌種采用半連續(xù)發(fā)酵工藝快速獲取富含大量的菌絲體的發(fā)酵液，然后將發(fā)酵液通過微濾膜處理分離得到桑黃的菌絲體。本發(fā)明改變了傳統(tǒng)桑黃間歇性的分批發(fā)酵工藝，并且菌絲體的分離采用高效的陶瓷膜微濾替代離心機(jī)分離方式。半連續(xù)發(fā)酵工藝克服了傳統(tǒng)分批發(fā)酵工藝的工藝環(huán)節(jié)多，中間間隙時(shí)間長，設(shè)備效率低等缺點(diǎn)；而采用高效的陶瓷膜過濾發(fā)酵液，能夠減少進(jìn)入濾液的菌絲體，既能提高菌絲體的收率，降低濾液的COD，降低污水處理量，又不破壞細(xì)胞本身，保證胞內(nèi)有效成分的全部回收。與傳統(tǒng)的工藝相比，本發(fā)明具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和環(huán)保效益。
【IPC分類】C12R1/645, C12N1/14, C12N1/02
【公開號(hào)】CN105670943
【申請?zhí)枴緾N201610146345
【發(fā)明人】王文風(fēng), 徐國華, 徐玲, 楊亞威, 張芙蓉, 孫妮娜
【申請人】江蘇神華藥業(yè)有限公司
【公開日】2016年6月15日
【申請日】2016年3月15日