海參小分子肽的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種海參小分子肽的制備方法，采用海參為主要原料，通過原料預(yù)處理、酶解、過濾、脫色和干燥等技術(shù)制成海參小分子肽，其中酶解過程是經(jīng)過多種蛋白酶進行多次酶解，將海參中的膠原蛋白酶解為易被人體消化吸收的小分子肽。本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明的海參小分子肽的制備方法是利用復(fù)合生物酶酶解技術(shù)，依次采用堿性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白進行酶解，將海參中含有的大分子蛋白水解成海參小分子肽，得到的海參小分子肽分子量主要分布在100?1000D之間，多為二肽、三肽、四肽等小分子肽，屬于小分子結(jié)構(gòu)，極易被人體吸收和利用。
【專利說明】
海參小分子肽的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及一種制備方法，具體涉及一種海參小分子肽的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]海參是世界八大珍品之一，同人參、燕窩、魚翅齊名。海參不僅是珍貴的食品，也是名貴的藥材。據(jù)《本草綱目拾遺》中記載:海參，味甘咸，補腎，益精髓，攝小便，壯陽療痿，其性溫補，足敵人參，故名海參。海參具有提高記憶力、延緩性腺衰老，防止動脈硬化以及抗腫瘤等作用。隨著海參價值知識的普及，海參逐漸進入百姓餐桌。海參體內(nèi)有含量很高的膠原蛋白，這種蛋白可以與傳統(tǒng)中藥的阿膠、龜板膠、鱉甲膠、鹿膠在營養(yǎng)成分上相媲美，其功能是生血養(yǎng)血，使肌膚保持光滑及富有彈性，延緩機體衰老。但海參體內(nèi)含有的膠原蛋白不易被人體消化吸收，人體必須在某些特定的酶作用下才能分解利用這類蛋白質(zhì)，而人體內(nèi)的酶是有限的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問題，本發(fā)明提供了一種海參小分子肽的制備方法。海參小分子肽運用生物酶解技術(shù)精制而成，既完整保留了海參特有的營養(yǎng)成份，又將大分子蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)楦孜?、功能更強的小分子活性肽，比傳統(tǒng)海參制品吸收更全面。
[0004]本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為:一種海參小分子肽的制備方法，包括以下步驟:
[0005](I)原料預(yù)處理:將海參原料進行真空干燥至水分含量小于7%，然后粉碎成粒徑為100-200微米的海參細粉；
[0006](2)酶解:向所述海參細粉中加入所述海參細粉10-15倍重量的水，混合均勾后加熱至92-98 °C，保溫10-20分鐘，然后降溫至45-55 °C，調(diào)節(jié)pH至8.0-9.0，加入堿性蛋白酶進行第一次酶解，所述堿性蛋白酶的使用量為所述海參細粉重量的1.0-1.5%;然后保持溫度為45-55 V，調(diào)節(jié)pH至7.8-8.5，加入胰蛋白酶進行第二次酶解，所述胰蛋白酶的使用量為所述海參細粉重量的0.8-1.2% ;最后保持溫度為45-55°C，調(diào)節(jié)pH至3.0-4.0，加入胃蛋白酶進行第三次酶解，所述胃蛋白酶的使用量為所述海參細粉重量的0.8-1.2%；升溫至92-98°C滅酶10-15min，得到酶解液；
[0007](3)過濾:將所述酶解液進行第一次過濾，得到濾過液；
[0008](4)脫色:向所述濾過液中加入所述濾過液重量的1.5-2.5%的活性炭，進行脫色，再用硅藻土進行第二次過濾，得到小分子肽液；
[0009](5)干燥::將所述小分子肽液在55_65°C條件下真空濃縮至起始重量的20%，然后進行噴霧干燥或冷凍干燥，得到海參小分子肽干制品。
[0010]進一步地，步驟(I)中所述真空干燥的溫度為50-60°C，所述真空干燥的時間為15-17小時。
[0011]進一步地，步驟(2)中所述調(diào)節(jié)pH為使用濃度為1 %的NaOH溶液或使用濃度為10%的HCl溶液進行調(diào)節(jié)。
[0012]進一步地，步驟(2)中所述堿性蛋白酶為枯草桿菌堿性蛋白酶，所述堿性蛋白酶的活性為500000u/g，所述堿性蛋白酶的酶解溫度為45-55 °C，所述堿性蛋白酶的酶解時間為2.5-3.5 小時。
[0013]進一步地，步驟(2)中所述胰蛋白酶的活性為2500000u/g，所述胰蛋白酶的酶解溫度為45-55°C，所述胰蛋白酶的酶解時間為2.0-3.0小時。
[0014]進一步地，步驟(2)中所述胃蛋白酶的活性為500000u/g，所述胃蛋白酶的酶解溫度為45-55 °C，所述胃蛋白酶的酶解時間為1.5-2.5小時。
[0015]進一步地，步驟(3)中所述濾過液中所含蛋白的平均分子量在100Da以下。
[0016]進一步地，步驟(3)中所述第一次過濾為使用孔徑為30-70微米的砂布或濾紙進行過濾。
[0017]進一步地，步驟(4)中所述脫色為在65_75°C條件下邊攪拌邊脫色20-40分鐘。
[0018]本發(fā)明中使用的胰蛋白酶為蛋白酶的一種，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中，作為消化酶而起作用。作為胰液的成分而分泌，受腸激酶，或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶，是肽鏈內(nèi)切酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用。是特異性最強的蛋白酶。
[0019]本發(fā)明制備的海參小分子肽可加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成片劑、膠囊劑、散劑、丸劑、口服液體制劑等。
[0020]本發(fā)明所述的海參原料可以是鮮海參，也可以是海參干制品，均需先將海參的內(nèi)臟去除。
[0021]本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明的海參小分子肽的制備方法是利用復(fù)合生物酶酶解技術(shù)，依次采用堿性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白進行酶解，將海參中含有的大分子蛋白水解成海參小分子肽，得到的海參小分子肽分子量主要分布在100-1000D之間，多為二肽、三肽、四肽等小分子肽，屬于小分子結(jié)構(gòu)，純度較高，滋補效果較好。極易被人體吸收和利用。
【具體實施方式】
[0022]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步詳細說明。
[0023]實施例1
[0024]—種海參小分子肽的制備方法，包括以下步驟:
[0025](I)原料預(yù)處理:將海參原料進行真空干燥至水分含量為4.8%,然后粉碎成粒徑為150微米的海參細粉。
[0026](2)酶解:向海參細粉中加入海參細粉13倍重量的水，混合均勻后加熱至95°C，保溫15分鐘，然后降溫至50°C，調(diào)節(jié)pH至8.5，加入堿性蛋白酶進行第一次酶解，堿性蛋白酶的使用量為海參細粉重量的1.2%;然后保持溫度為50 V，調(diào)節(jié)pH至7.3，加入胰蛋白酶進行第二次酶解，胰蛋白酶的使用量為海參細粉重量的I % ;最后保持溫度為50 0C，調(diào)節(jié)pH至3.5，加入胃蛋白酶進行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量為海參細粉重量的1%;升溫至95°C滅酶12min，得到酶解液；
[0027](3)過濾:將酶解液進行第一次過濾，得到濾過液；
[0028](4)脫色:向濾過液中加入濾過液重量的2%的活性炭，進行脫色，再用硅藻土進行第二次過濾，得到小分子肽液；
[0029](5)干燥::將小分子肽液在60°C條件下真空濃縮至小分子肽液重量的20%，然后進行噴霧干燥，得到海參小分子肽干制品。
[0030]實施例2
[0031 ] 一種海參小分子肽的制備方法，包括以下步驟:
[0032](I)原料預(yù)處理:將海參原料在55°C條件下進行真空干燥16小時至水分含量為5%，然后粉碎成粒徑為150微米的海參細粉。
[0033](2)酶解:向海參細粉中加入海參細粉12倍重量的水，混合均勻后加熱至96°C，保溫16分鐘，然后降溫至48°C，使用濃度為10%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至8.6，加入枯草桿菌堿性蛋白酶進行第一次酶解，堿性蛋白酶的使用量為海參細粉重量的1.5%，堿性蛋白酶的活性為500000u/g，堿性蛋白酶的酶解溫度為48°C，堿性蛋白酶的酶解時間為3小時;然后升溫至500C，使用濃度為10 %的HCl溶液調(diào)節(jié)pH至7.1，加入胰蛋白酶進行第二次酶解，胰蛋白酶的使用量為海參細粉重量的0.8 %，胰蛋白酶的活性為2500000u/g，胰蛋白酶的酶解溫度為500C，胰蛋白酶的酶解時間為2.5小時；最后保持溫度為50°C，使用濃度為10%的HCl溶液調(diào)節(jié)PH至3.2，加入胃蛋白酶進行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量為海參細粉重量的1.2%，胃蛋白酶的活性為500000u/g，胃蛋白酶的酶解溫度為50°C，胃蛋白酶的酶解時間為2小時;升溫至97 °C滅酶13min，得到酶解液；
[0034](3)過濾:將酶解液使用孔徑為50微米的砂布或濾紙進行過濾進行第一次過濾，得到濾過液，濾過液的平均分子量在100Da以下；
[0035](4)脫色:向濾過液中加入濾過液重量的2 %的活性炭，在70 °C條件下邊攪拌邊進行脫色30分鐘，再用硅藻土進行第二次過濾，得到小分子肽液；
[0036](5)干燥:將小分子肽液在63°C條件下真空濃縮至小分子肽液重量的20%，然后進行噴霧干燥或冷凍干燥，得到海參小分子肽干制品。
[0037]實施例3
[0038]—種海參小分子肽的制備方法，包括以下步驟:
[0039](I)原料預(yù)處理:將海參原料在50°C條件下進行真空干燥17小時至水分含量為5%，然后粉碎成粒徑為200微米的海參細粉。
[0040](2)酶解:向海參細粉中加入海參細粉10倍重量的水，混合均勻后加熱至98°C，保溫10分鐘，然后降溫至55 0C，使用濃度為10 %的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至9.0，加入枯草桿菌堿性蛋白酶進行第一次酶解，堿性蛋白酶的使用量為海參細粉重量的1%，堿性蛋白酶的活性為5000001!/^，堿性蛋白酶的酶解溫度為55°(:，堿性蛋白酶的酶解時間為2.5小時;然后保持溫度為55 0C，使用濃度為10 %的HCl溶液(或其他酸性溶液)調(diào)節(jié)pH至7.8，加入胰蛋白酶進行第二次酶解，胰蛋白酶的使用量為海參細粉重量的1.2%，胰蛋白酶的活性為2500000u/g，胰蛋白酶的酶解溫度為55°C，胰蛋白酶的酶解時間為2.0小時;最后保持溫度為55°C，使用濃度為10 %的HCl溶液調(diào)節(jié)pH至4.0，加入胃蛋白酶進行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量為海參細粉重量的0.8%，胃蛋白酶的活性為500000u/g，胃蛋白酶的酶解溫度為55°C，胃蛋白酶的酶解時間為1.5小時;升溫至92 °C滅酶1，得到酶解液；
[0041](3)過濾:將酶解液使用孔徑為30微米的砂布或濾紙進行過濾進行第一次過濾，得到濾過液，濾過液的平均分子量在100Da以下；
[0042](4)脫色:向濾過液中加入濾過液重量的1.5%的活性炭，在75°C條件下邊攪拌邊進行脫色40分鐘，再用硅藻土進行第二次過濾，得到小分子肽液；
[0043](5)干燥:將小分子肽液在65°C條件下真空濃縮至小分子肽液重量的20%，然后進行噴霧干燥或冷凍干燥，得到海參小分子肽干制品。
[0044]實施例4
[0045]—種海參小分子肽的制備方法，包括以下步驟:
[0046](I)原料預(yù)處理:將海參原料在60°C條件下進行真空干燥15小時至水分含量為7%，然后粉碎成粒徑為100微米的海參細粉。
[0047](2)酶解:向海參細粉中加入海參細粉15倍重量的水，混合均勻后加熱至92°C，保溫20分鐘，然后降溫至45 °C，使用濃度為10 %的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至8.0，加入枯草桿菌堿性蛋白酶進行第一次酶解，堿性蛋白酶的使用量為海參細粉重量的1%，堿性蛋白酶的活性為5000001!/^，堿性蛋白酶的酶解溫度為45°(:，堿性蛋白酶的酶解時間為3.5小時;然后保持溫度為45 0C，使用濃度為10 %的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至8.5，加入胰蛋白酶進行第二次酶解，胰蛋白酶的使用量為海參細粉重量的I %，胰蛋白酶的活性為2500000u/g，胰蛋白酶的酶解溫度為45°C，胰蛋白酶的酶解時間為3.0小時;最后保持溫度為45°C，使用濃度為10%的HCl溶液調(diào)節(jié)PH至4.0，加入胃蛋白酶進行第三次酶解，胃蛋白酶的使用量為海參細粉重量的I %，胃蛋白酶的活性為500000u/g，胃蛋白酶的酶解溫度為45°C，胃蛋白酶的酶解時間為2.5小時；升溫至98 °C滅酶15min，得到酶解液；
[0048](3)過濾:將酶解液使用孔徑為70微米的砂布或濾紙進行過濾進行第一次過濾，得到濾過液，濾過液的平均分子量在100Da以下；
[0049](4)脫色:向濾過液中加入濾過液重量的2.5%的活性炭，在65 °C條件下邊攪拌邊進行脫色20分鐘，再用硅藻土進行第二次過濾，得到小分子肽液；
[0050](5)干燥:將小分子肽液在55°C條件下真空濃縮至小分子肽液重量的20%，然后進行噴霧干燥或冷凍干燥，得到海參小分子肽干制品。
[0051]本發(fā)明不局限于上述最佳實施方式，任何人在本發(fā)明的啟示下都可得出其他各種形式的產(chǎn)品，但不論在其形狀或結(jié)構(gòu)上作任何變化，凡是具有與本申請相同或相近似的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種海參小分子肽的制備方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)原料預(yù)處理:將海參原料進行真空干燥至水分含量小于7%，然后粉碎成粒徑為100-200微米的海參細粉； (2)酶解:向所述海參細粉中加入所述海參細粉1-15倍重量的水，混合均勻后加熱至92-980C，保溫10-20分鐘，然后降溫至45-55°C，調(diào)節(jié)pH至8.0-9.0，加入堿性蛋白酶進行第一次酶解，所述堿性蛋白酶的使用量為所述海參細粉重量的1.0-1.5%;然后保持溫度為45-55 V，調(diào)節(jié)pH至7.8-8.5，加入胰蛋白酶進行第二次酶解，所述胰蛋白酶的使用量為所述海參細粉重量的0.8-1.2%；最后保持溫度為45-55 °C，調(diào)節(jié)pH至3.0-4.0，加入胃蛋白酶進行第三次酶解，所述胃蛋白酶的使用量為所述海參細粉重量的0.8-1.2%；升溫至92-98 V滅酶10-15min，得到酶解液； (3)過濾:將所述酶解液進行第一次過濾，得到濾過液； (4)脫色:向所述濾過液中加入所述濾過液重量的1.5-2.5%的活性炭，進行脫色，再用硅藻土進行第二次過濾，得到小分子肽液； (5)干燥:將所述小分子肽液在55-65°C條件下真空濃縮至起始重量的20%，然后進行噴霧干燥或冷凍干燥，得到海參小分子肽干制品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海參小分子肽的制備方法，其特征在于:步驟(I)中所述真空干燥的溫度為50-60 0C，所述真空干燥的時間為15-17小時。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海參小分子肽的制備方法，其特征在于:步驟(2)中所述調(diào)節(jié)pH為使用濃度為10%的NaOH溶液或使用濃度為10%的HCl溶液進行調(diào)節(jié)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海參小分子肽的制備方法，其特征在于:步驟(2)中所述堿性蛋白酶為枯草桿菌堿性蛋白酶，所述堿性蛋白酶的活性為500000u/g，所述堿性蛋白酶的酶解溫度為45-55°C，所述堿性蛋白酶的酶解時間為2.5-3.5小時。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海參小分子肽的制備方法，其特征在于:步驟(2)中所述胰蛋白酶的活性為2500000u/g，所述胰蛋白酶的酶解溫度為45-55 °C，所述胰蛋白酶的酶解時間為2.0-3.0小時。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海參小分子肽的制備方法，其特征在于:步驟(2)中所述胃蛋白酶的活性為500000u/g，所述胃蛋白酶的酶解溫度為45-55 °C，所述胃蛋白酶的酶解時間為1.5-2.5小時。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海參小分子肽的制備方法，其特征在于:步驟(3)中所述濾過液中所含蛋白的平均分子量在100Da以下。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海參小分子肽的制備方法，其特征在于:步驟(3)中所述第一次過濾為使用孔徑為30-70微米的砂布或濾紙進行過濾。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海參小分子肽的制備方法，其特征在于:步驟(4)中所述脫色為在65-75 °C條件下邊攪拌邊脫色20-40分鐘。
【文檔編號】C07K1/34GK105821106SQ201610192526
【公開日】2016年8月3日
【申請日】2016年3月30日
【發(fā)明人】蔡庭守
【申請人】蔡庭守