一種藏羊血血粉酶解物的生產(chǎn)方法
【專利摘要】一種藏羊血血粉酶解物的生產(chǎn)方法，涉及一種對藏羊血全血粉酶解方法的領域，包括以下步驟：一：本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用噴霧干燥法，得到血粉；二：將血粉放入滅菌器中預處理；三：將預處理好的血粉迅速冷卻；四：將藏羊血粉加水溶解，調(diào)酶解液PH值；五：將血粉溶解液放入溫度為53?57℃恒溫水浴鍋中，以5000?7000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為3.5?4.5h；六：將酶解好的酶解液滅酶；七：將滅酶好的物料置于離心管中離心10min,取上清液，為最終獲得的酶解液。
【專利說明】
一種藏羊血血粉酶解物的生產(chǎn)方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種藏羊血資源開發(fā)的產(chǎn)品領域，更具體的說，涉及一種對藏羊血全 血粉酶解的方法，在此方法下，血粉酶解物有較強抗氧化能力。
【背景技術】
[0002] 藏羊血液蛋白質(zhì)含量大于17%，新鮮藏羊血液中除80%左右水分外，血液的營養(yǎng) 特性首先體現(xiàn)在蛋白質(zhì)上，組成蛋白質(zhì)的氨基酸都能和自由基發(fā)生反應。全血含有17%~ 21%的蛋白質(zhì)，干燥血粉的蛋白質(zhì)含量達80%以上，是全乳粉的3倍。且礦物質(zhì)（鉀、鈉、鎂、 磷)多以無機鹽的形式存在，而鐵和銅與蛋白質(zhì)有機結合存在。由于人們對血液營養(yǎng)價值認 識不全面，大部分被當作廢棄物低價回收，或加工成附加值很低的初級產(chǎn)品"血豆腐"食用 外，大大降低了其使用值。目前對血液中優(yōu)質(zhì)蛋白利用不足，是對能源短缺背景下可利用資 源的巨大浪費。
[0003] 目前，我國利用藏羊血資源開發(fā)的產(chǎn)品還比較單調(diào)，羊血利用率不超過10%，一小 部分被加工成血粉或發(fā)酵血粉作為飼料添加劑、氨基酸口服液及用于生化制藥生產(chǎn)血紅 素、超氧化物歧化酶、免疫球蛋白、蛋白胨、凝血酶、殺菌性通透性增加蛋白，但生成規(guī)模都 不大，只在研究階段。
[0004] 現(xiàn)在國外有許多關于羊血的蛋白質(zhì)水解物具有許多不同的生理活性的報道。如 Mi to等用胃蛋白酶酶解羊血血紅蛋白得到了抗高血壓肽，從血紅蛋白中得到了具有生物活 性的鴉片肽，肽類物質(zhì)具有內(nèi)原性抗氧化活性。Man等人依次用外肽酶Flvourzyme和內(nèi)肽酶 Esperase水解羊的血紅蛋白得到富含亞鐵血紅素的低分子量的小肽，羊血胰蛋白酶水解液 可增強機體免疫活性。Park等人用三氯乙酸從羊血漿中獲得血管緊張素轉換酶(ACE)抑制 肽五肽，Rajapakse等人也在羊血漿的胰蛋白酶水解物中獲得了血管緊張素轉換酶(ACE) 抑制肽三肽等，除此之外，尚未見國內(nèi)外對全血粉、血球粉、血漿粉的抗氧化性的文獻報道。
[0005] 藏羊血中含有豐富的蛋白質(zhì)和多種礦物質(zhì)，但由于人們對血液營養(yǎng)價值認識不全 面，導致目前對藏羊血液中的優(yōu)質(zhì)蛋白利用不足，是對能源短缺背景下可利用資源的巨大 浪費。從環(huán)境保護方面講，因血液含有大量營養(yǎng)物質(zhì)，處理不當極易腐敗，從而引起嚴重的 環(huán)境污染。近幾年隨著生物酶技術的迅速發(fā)展，利用蛋白酶類水解血粉的方法多有報道，但 由于血粉酶解物的抗氧化活性較低，酶解的效果并不好。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種使藏羊血血粉酶解物抗氧化活 性較強的酶解的方法，在此工藝條件下，血粉酶解物有較強抗氧化能力。
[0007] 本發(fā)明藏羊血血粉酶解的加工方法技術方案具體包括以下步驟：
[0008] 步驟一:本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為150-170 °C出口溫度72 °C對 新鮮藏羊血進行噴霧干燥，得到血粉；
[0009] 步驟二:將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過100°C，30min滅菌預處理；
[0010] 步驟三:將經(jīng)過步驟二所述的預處理好的的血粉迅速冷卻；
[0011] 步驟四：將藏羊血粉加水溶解，按1:20(w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻，調(diào)酶解液PH值 至 IJ7.8-8.2;
[0012] 步驟五:將經(jīng)過步驟四處理好的血粉溶解液放入溫度為53-57°C恒溫水浴鍋中，以 5000-7000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為3.5-4.5h;
[0013] 步驟六:將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán)境下滅酶1 Omin;
[0014] 步驟七:將經(jīng)過步驟六滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min，取 上清液，為最終酶解液。
[0015] 本發(fā)明有如下優(yōu)點和效果：
[0016] 本發(fā)明所用的堿性蛋白酶，是以水解度為指標，比較了堿性蛋白酶、中性蛋白酶、 木瓜蛋白酶和動物蛋白水解酶在其最適條件下酶解血粉時水解度的大小，進一步選擇了酶 解液水解度最大的為堿性蛋白酶，測定其抗氧化性，并通過單因素分析了加酶量、酶解時 間、酶解溫度和PH值等因素對水解度的影響，又通過正交試驗對酶解工藝進行了優(yōu)化。實驗 數(shù)據(jù)如下：
[0017] 酶解液水解度的測定：
[0018] 采用雙指示劑甲醛滴定法測定氨基酸態(tài)氮含量，凱式定氮法測定總氮量。
[0020]氨基酸態(tài)氮含量的測定：取5g酶解上清液2份，分別置于250mL錐形瓶中，加水 40mL;其中一份加3滴中性紅指示劑，用0. lOOmoLNaOH溶液滴定至琥珀色，消耗NaOH溶液體 積記為h。另一份加入中性甲醛10mL及3滴百里酚酞指示劑，搖勻，靜置1分鐘，再用0.100N NaOH溶液滴定至淡藍色，消耗NaOH溶液體積記為V 2。
[0022] 其中：N: NaOH標準溶液當量濃渡；
[0023] W:測定空白消耗NaOH標準溶液的體積(mL);
[0024] V2:測定酶解上清液消耗NaOH標準溶液體積(mL);
[0025] W:樣品溶液相當樣品的質(zhì)量(g);
[0026] 0.014:氮的毫克當量。
[0027]蛋白酶確定：
[0028] 取2g血粉，按1:20添加蒸餾水，經(jīng)預處理、迅速冷卻之后，調(diào)節(jié)中性蛋白酶，堿性蛋 白酶，木瓜蛋白酶，動物蛋白水解酶的pH，在各自最適pH下加入酶，在最佳條件下反應(見表 1)，反應時間定為3h，經(jīng)滅酶、離心、過濾后，取上清液測其水解度，選取水解度較大者為實 驗水解酶。
[0029]表1蛋白酶最佳反應條件
[0031] 酶解工藝單因素實驗設計：
[0032] (1)加酶量對水解度的影響
[0033] 稱取5份2.0g血粉，按l:20(w/w)添加蒸餾水，經(jīng)100°C加熱處理30min后，迅速冷 卻，調(diào)pH為8.0,添加堿性蛋白酶，加酶量分別為2000U/g、4000U/g、6000U/g、8000U/g、 10000U/g，在55°C恒溫水浴鍋中反應4h，做3次平行試驗，實驗結果取平均值，研究加酶量對 水解度的影響。
[0034] (2)酶解時間對水解度的影響
[0035] 堿性蛋白酶添加量選用6000U/g，酶解時間分別為lh、2h、3h、4h、5h，其他條件不 變，做3次平行試驗，實驗結果取平均值，研究酶解時間對水解度的影響。
[0036] (3)起始pH對水解度的影響
[0037] 堿性蛋白酶添加量選用6000U/g，酶解時間為3h，起始pH分別為7.0、7.5、8.0、8.5、 9.0，其他反應條件不變，做3次平行試驗，實驗結果取平均值，研究不同起始pH對水解度的 影響。
[0038] (4)酶解溫度對水解度的影響
[0039] 堿性蛋白酶添加量選用6000U/g，酶解時間為3h，起始pH選8.0,固液比(w/w)選1: 20，溫度分別為40°C、45°C、50°C、55°C、60°C，其他條件不變，做3次平行試驗，實驗結果取平 均值?？疾觳煌附鉁囟葘λ舛鹊挠绊憽?br>[0040] 酶解工藝優(yōu)化：
[0041] (1)血粉酶解最佳條件正交試驗因素水平表
[0042] 采用L9(34)正交試驗設計篩選血粉酶解最佳工藝的條件，以加酶量、溫度、酶解時 間、起始PH為篩選指標，確定加酶量(A)、溫度(B)、酶解時間（C)、起始pH(D)的最佳組合，正 交試驗因素水平見表2。
[0043] 表2血粉酶解因素水平表
[0045]酶解液抗氧化測定
[0046] (l)DPPH自由基清除率的測定
[0047] 在4mL酶解液中加入2mL0.2mol/LDPPH溶液，置于室溫下暗處反應30min，于517nm 處測定吸光度，每組做3組平行試驗，以95 %乙醇代替待測液作空白實驗。
[0049] 式中:心一酶解液+DPPH ?溶液的吸光度；
[0050] A2-酶解液+95 %乙醇溶液的吸光度；
[0051 ] A3-95%乙醇+DPPH ?溶液的吸光度。
[0052] (2)超氧陰離子自由基清除率的測定
[0053]采用改良的鄰苯三酚自氧化法產(chǎn)生02_鄰苯三酚在弱堿條件下發(fā)生自氧化，產(chǎn)生 〇2 ? _。02 ?-清除劑能使鄰苯三酚自氧化產(chǎn)物在325nm處的吸收峰減弱，通過吸光值A325的變 化率，計算對? 〇2-的清除能力。取4 ? 5ml的50mol/L磷酸鹽緩沖液(pH8 ? 34)和4? 2mL蒸餾水， 混勻后在25 °C水浴中保溫20min，取出后立即加入25 °C預熱的0.2mo 1/L鄰苯三酚0.3mL，總 體積9mL;迅速搖勻后，在325nm下每30s測定吸光值，計算在線性范圍內(nèi)每分鐘吸光度的增 加值。除用樣品液代替蒸餾水外，待測樣所取試劑同前，按上述方法計算在線性范圍內(nèi)每分 鐘吸光度的增加值，并按下式計算清除率。
[0055] (3)羥自由基清除率的測定
[0056] 取lmL0.75mol/L鄰二氮菲的無水乙醇溶液于試管中，依次加入2mL0.15mol/L磷酸 鹽緩沖溶液(pH值為7.40)和lmL蒸餾水，混勻；加入lmLO. 75moL/LFeS〇4 ? 7H20溶液混勻，加 入lmL0.0 1 %的H2O2，于37 °C水浴反應60min，在536nm處測定吸光度A損，未損傷管以蒸餾水代 替損傷管中H2〇2,同等操作下測吸光值A未，樣品管分別以不同體積分數(shù)的酶解液代替損傷管 中的蒸餾水，同等操作下測吸光值A，每個樣品做3個平行取平均值，計算清除率。
[0058] (4)酶解液還原能力測定
[0059]還原能力測定采用鐵氰化鉀法，采用Oyaizu方法并稍做修改。取lmL的酶解液，加 入lmL磷酸鹽緩沖溶液(0.2mol/L，pH值6.6)和lmLl %的鐵氰化鉀溶液混勻。50°C水浴加熱 20min，迅速冷卻并加入lmLIO%的三氯乙酸溶液，振蕩搖勾后在常溫下4000r/min離心 lOmin，取lmL上清液，加入lmL去離子水，0.2mL質(zhì)量分數(shù)為0.1 %的三氯化鐵溶液，振蕩混合 均勾后靜置lOmin，在625nm處測定混合液的吸光值，記為A〇。用lmL去離子水代替上述lmL樣 品溶液，其余操作相同，得A空。酶解液樣品的鐵氰化鉀還原能力以625nm處的相對吸光值八工 作為衡量標準，吸光值越大，則還原力越強。
[0060] Ai = A〇-As
[0061 ]結果與分析 [0062]蛋白酶的確定結果 [0063]表3蛋白酶水解度測定結果
[0065]水解度表示酶解過程中肽鍵斷裂的百分數(shù)，水解度越大，水解液中具有生理活性 的小分子肽類物質(zhì)越多，因此選用水解度作為衡量蛋白質(zhì)酶解效果的指標。從表3中可以看 出，在4種酶的最適反應條件下，堿性蛋白酶水解度最大，故選用堿性蛋白酶為酶解血粉的 蛋白酶。
[0066]酶解工藝單因素實驗設計結果 [0067]加酶量對水解度的影響：
[0068]由附圖1可知，加酶量在8000U/g以下時，水解度隨著加酶量的增加而逐漸增加。在 2000-6000U/g范圍內(nèi)時，加酶量對水解度影響較明顯，超過6000U/g，水解度增加緩慢，可能 是因為此時酶已達到飽和狀態(tài)，加酶量為6000u/g、8000u/g時，酶解液水解度較大，經(jīng)t檢驗 發(fā)現(xiàn)水解度無顯著差異(P>〇.〇5)。從經(jīng)濟方面考慮，加酶量選用6000U/g較為合適。
[0069]酶解時間對水解度的影響：
[0070] 由附圖2可知，在堿性蛋白酶作用下，1~3h內(nèi)，隨著酶解時間的延長，水解度呈上 升趨勢，但上升趨勢逐漸趨于平緩。其原因可能是隨著水解時間的延長，酶所作用的底物減 少，經(jīng)t檢驗發(fā)現(xiàn)酶解時間為3h、4h時，（P>0.05)無顯著差異，綜合考慮選擇酶解時間3h為 宜。
[0071] 起始pH對水解度的影響：
[0072]由附圖3可知，起始pH值小于8.0時，水解度隨pH值的增大逐漸增高，且在pH值為 8.0時水解度達到最大值13.06 %。隨后隨pH值的增大水解度有減少趨勢。所以起始pH選8.0 最佳。
[0073]溫度對水解度的影響：
[0074]由圖附4可知，在40~55°C范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，水解度不斷增加，并在55°C時 水解度達到最大值，這是因為在一定溫度范圍內(nèi)，隨溫度升高，反應速度加快，酶解效率也 相應提高。但隨著溫度的進一步升高，水解度則降低，此時是因為溫度過高，蛋白酶穩(wěn)定性 降低，從而導致變性。所以酶解溫度以55°C為宜。
[0075]血粉酶解物正交試驗結果：
[0076]實驗采用藏羊血粉，以加酶量、溫度、時間、起始PH為實驗因素，采用L9(34)正交實 驗確定最佳工藝條件，以水解度為評價依據(jù)，實驗結果見表4。
[0077]表4 L9(34)正交實驗因素表
[0079] 由表4可知，加酶量、酶解時間、起始pH、酶解溫度對水解度有不同程度的影響，由 表中4R值可以看出：Ra>Rc>Rd>Rb，影響血粉酶解的主要因素為A>C>D>B，從K值看來， 較優(yōu)的水平是A 2B3C3D2,即最優(yōu)酶解條件是:加酶量為6000U/g、溫度為55°C、酶解時間為4h、 起始pH為8.0。
[0080] 酶解液抗氧化測定結果
[0081] 表5酶解液抗氧化測定結果
[0083]通過對本發(fā)明最終物料進行檢測，從DPPH自由基清除率、超氧陰離子自由基清除 率、羥自由基清除率和酶解液還原能力這四個方面對酶解液的抗氧化性進行了測定分析， 最終得到，通過本發(fā)明方法得到的物料，測得的酶解物水解度為17.13%，測得還原能力較 大值為〇.74、測得0??11.自由基清除率為61.1%、011.-自由基清除率為72.9%、02.-自由 基清除率為65.7%，在堿性蛋白酶作用下血粉酶解物有一定的抗氧化能力。
【附圖說明】
[0084]圖1表示加酶量對水解度的影響；
[0085]圖2表示酶解時間對水解度的影響；
[0086]圖3表示起始PH對水解度度的影響；
[0087]圖4表示溫度對水解度的影響。
【具體實施方式】
[0088] 實施例1
[0089] 本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為150°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到7.8;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為53°C恒溫水浴鍋中，以 6000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為4h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán)境 下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min,取上 清液，為最終酶解液。
[0090] 實施例2
[0091] 本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為150°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到8.0;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為55°C恒溫水浴鍋中，以 6000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為4h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán)境 下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min,取上 清液，為最終酶解液。
[0092] 實施例3
[0093] 本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為150°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到8.2;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為57°C恒溫水浴鍋中，以 5000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為3.5h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán) 境下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min，取 上清液，為最終酶解液。
[0094] 實施例4
[0095]本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為160°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到8.0;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為53°C恒溫水浴鍋中，以 7000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為4.5h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán) 境下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min，取 上清液，為最終酶解液
[0096] 實施例5
[0097] 本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為160°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到8.0;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為55°C恒溫水浴鍋中，以 6000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為4h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán)境 下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min,取上 清液，為最終酶解液。
[0098] 實施例6
[0099] 本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為160°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到8.2;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為57°C恒溫水浴鍋中，以 7000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為4.5h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán) 境下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min，取 上清液，為最終酶解液。
[0100] 實施例7
[0101] 本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為170°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到7.8;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為53°C恒溫水浴鍋中，以 5000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為3.5h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán) 境下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min，取 上清液，為最終酶解液。
[0102] 實施例8
[0103] 本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為170°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到8.0;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為55°C恒溫水浴鍋中，以 6000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為4. h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán)境 下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min,取上 清液，為最終酶解液。
[0104] 實施例9
[0105] 本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為170°C出口溫度72°C對新鮮藏羊血 進行噴霧干燥，得到血粉;將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過l〇〇°C，30min滅菌預處理;將經(jīng) 過預處理好的的血粉迅速冷卻;將藏羊血粉加水溶解，按1:20 (w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻， 調(diào)酶解液PH值到8.2;將經(jīng)過步驟4處理好的血粉溶解液放入溫度為55°C恒溫水浴鍋中，以 6000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為4.5h;將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán) 境下滅酶lOmin;將經(jīng)過第六步滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min，取 上清液，為最終酶解液。
【主權項】
1. 一種藏羊血血粉酶解物的生產(chǎn)方法，其特征包括以下步驟： 步驟一:本發(fā)明以新鮮藏羊血為原料，采用進口溫度為150-170°c，出口溫度72°C，對新 鮮藏羊血進行噴霧干燥，得到血粉； 步驟二:將得到的血粉放入滅菌器中經(jīng)過100°C，30min滅菌預處理； 步驟三:將經(jīng)過步驟二所述的預處理好的的血粉迅速冷卻； 步驟四：將藏羊血粉加水溶解，按l:20(w/w)添加蒸餾水，攪拌均勻，調(diào)酶解液PH值到 7.8-8.2； 步驟五：將經(jīng)過步驟四處理好的血粉溶解液放入溫度為53-57Γ恒溫水浴鍋中，以 5000-7000U/g的量加入堿性蛋白酶進行酶解，酶解時間為3.5-4.5h; 步驟六:將酶解好的酶解液在100 °C的環(huán)境下滅酶lOmin; 步驟七:將經(jīng)過步驟六滅酶好的物料置于離心管中，在6000r/min下離心10min,取上清 液，為最終獲得的酶解液。
【文檔編號】C12P21/06GK105821107SQ201610291997
【公開日】2016年8月3日
【申請日】2016年5月5日
【發(fā)明人】曹效海, 王樹林, 杜萬立, 楊曉玲, 李明艷, 葉英, 任姝, 吳海燕
【申請人】青海大學, 青海萬?？邓帢I(yè)有限公司