前列腺素類似物的制備方法和用圖
【專利摘要】本發(fā)明提出了前列腺素類似物的制備方法和用途，該方法包括使式1所示化合物與二氯二氰基苯醌接觸，以便獲得式2所示化合物。該方法步驟簡單、方便，反應(yīng)條件溫和，且目標產(chǎn)物收率和純度高。
【專利說明】
前列腺素類似物的制備方法和用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體的，本發(fā)明涉及前列腺素類似物的制備方法和用 途。
【背景技術(shù)】
[0002] 曲伏前列素(式1所示化合物)是一種人工合成的前列腺素類似物，曲伏前列素滴 眼液(Travatan)由美國FDA于2006年9月批準上市，臨床上用于治療原發(fā)性開角型青光眼和 高眼壓癥。
[0004] 藥物雜質(zhì)通常是指藥物中存在的，化學(xué)結(jié)構(gòu)與該藥物不一致的任何成分。藥物中 含有雜質(zhì)會降低療效，影響藥物的穩(wěn)定性，有的甚至對人體健康有害或產(chǎn)生其他毒副作用。 因此，檢測有關(guān)物質(zhì)，控制藥物純度非常重要。對于曲伏前列素藥物，現(xiàn)有技術(shù)中對于其雜 質(zhì)尤其是各種原料藥和劑型中均存在的雜質(zhì)的研究較少，目前對該藥物的質(zhì)量檢測方法明 顯受到限制。而且，本領(lǐng)域技術(shù)人員知曉:合成出高純度的已知雜質(zhì)化合物，將該化合物作 為對照品，用于可能含有該雜質(zhì)的藥物檢測中，對于控制該藥物的質(zhì)量是十分必要的。
[0005] 然而，目前關(guān)于曲伏前列素藥物中的雜質(zhì)和合成雜質(zhì)的方法的研究仍有待改進。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問題之一。
[0007] 本發(fā)明是基于發(fā)明人的下列發(fā)現(xiàn)而完成的：
[0008] 發(fā)明人在進行曲伏前列素藥物質(zhì)量檢測過程中發(fā)現(xiàn)，各種曲伏前列素藥物原料以 及制劑中都含有共同的雜質(zhì)，經(jīng)過結(jié)構(gòu)確認及質(zhì)量分析驗證，確定這些雜質(zhì)為式2所示化合 物、以及式3所示化合物，其中，式2所示化合物為15-keto-曲伏前列素，式3所示化合物為15 曲伏前列素，式2所示化合物和式3所示化合物均作為前列腺素類似物，是曲伏前列素合 成過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)。式2所示化合物以及式3所示化合物的結(jié)構(gòu)式分別如下：
[0010] 為了能夠?qū)⑹?所示化合物、以及式3所示化合物用于對曲伏前列素藥物進行質(zhì)量 檢測，需要有高純度的化合物用作對照品，用于控制可能含有該雜質(zhì)的藥物的質(zhì)量。因而， 發(fā)明人經(jīng)過進一步深入研究，提出了合成式2所示化合物和式3所示化合物的方法，該方法 步驟簡單，操作容易，反應(yīng)條件溫和，產(chǎn)物收率較高，且獲得的產(chǎn)物純度較高，可以有效果用 于曲伏前列素藥物原料藥以及制劑的質(zhì)量檢測。
[0011] 有鑒于此，在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種制備式2所示化合物的方法。 根據(jù)本發(fā)明的實施例，該方法包括：使曲伏前列素（式1所示化合物）與二氯二氰基苯醌 (DDQ)接觸，以便獲得式2所示化合物。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過該方法可以高效地制備獲得式2所 示化合物，步驟簡單、方便，反應(yīng)條件溫和，且目標產(chǎn)物收率和純度較高，同時本發(fā)明的制備 式2所示化合物的過程中應(yīng)用DDQ，使得到的式2所示化合物的產(chǎn)物易于分離純化，且副反應(yīng) 少。另外，發(fā)明人在對曲伏前列素藥物進行質(zhì)量檢測中發(fā)現(xiàn)，式2所示化合物作為雜質(zhì)普遍 存在于各種曲伏前列素及其制劑中。經(jīng)過結(jié)構(gòu)確認及質(zhì)量分析驗證該化合物為曲伏前列素 合成過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)。由此，可以將該式2所示化合物作為對照品對曲伏前列素藥物進行 質(zhì)量檢測，用于控制可能含有該雜質(zhì)的藥物的質(zhì)量。
[0012] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，上述制備式2所示化合物的方法還可以具有下列附加技術(shù) 特征至少之一：
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，在制備式2所示化合物的方法中，式1所示化合物與DDQ的摩 爾比為1: (4~6)。由此，有利于促進反應(yīng)物反應(yīng)完全，提高反應(yīng)效率和產(chǎn)物收率。在本發(fā)明 的一些優(yōu)選實施例中，式1所示化合物與DDQ的摩爾比為1:5。由此，可以進一步提高反應(yīng)效 率和產(chǎn)物收率。
[0014] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，可以于30°C~50°C下，使所述式1所示化合物與二氯二氰基 苯醌接觸6h~12h。由此，可以使得反應(yīng)在最適合的溫度條件下進行，如果反應(yīng)溫度過低，則 反應(yīng)不能進行或反應(yīng)速度較慢，如果溫度過高則易引發(fā)副反應(yīng)，目標產(chǎn)物收率降低，而接觸 時間為6h~12h可以保證反應(yīng)充分進行，又不會造成時間浪費，如果時間過短，反應(yīng)未充分 進行，目標產(chǎn)物收率較低，如果時間過長，反應(yīng)效率不會進一步提高，經(jīng)濟性較差。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，制備式2所示化合物的方法可以進一步包括：（1)將所述式1 所示化合物溶于二氧六環(huán)中，并向所得到的混合物中加入二氯二氰基苯醌，得到混合溶液； (2)將所述混合溶液于30°C~50°C下反應(yīng)6h~12h，得到反應(yīng)液；（3)將所述反應(yīng)液過濾，得 到的濾液依次經(jīng)水、碳酸氫鈉溶液、飽和氯化鈉溶液洗滌，將經(jīng)過洗滌的溶液分層，將得到 的有機相進行濃縮，得到所述式2所示化合物。反應(yīng)所用溶劑為二氧六環(huán)，反應(yīng)溫度30°C~ 50°C，反應(yīng)時間6h~12h，濾液先后用水、碳酸氫鈉溶液、飽和氯化鈉溶液洗滌，可以進一步 提高利用該方法制備式2所示化合物的效率。另外，可以進一步提高利用所得到的式2所示 化合物作為對照品檢測曲伏前列素藥物的效率。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，制備式2所示化合物的方法包括:將式1所示化合物溶 于二氧六環(huán)中，攪拌均勻，再加入DDQ，保持反應(yīng)溫度為30°C~50°C，反應(yīng)6h~12h;取樣點 板，原料點消失，反應(yīng)完畢，將得到的反應(yīng)液過濾，濾液先后用水、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和 氯化鈉溶液洗滌，分層，取有機相，濃縮除去溶劑，得式2所示化合物。此范圍反應(yīng)劑量和加 藥反應(yīng)順序，可以進一步提高利用該方法制備式2所示化合物的效率。另外，可以進一步提 高利用所得到的式2所示化合物作為對照品檢測曲伏前列素藥物的效率。
[0017] 發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用該方法可以有效地制備式2所示化合物。如前所述，根據(jù)本發(fā)明 的方法所制備的式2所示化合物作為對照品，能夠有效地用于對曲伏前列素藥物進行質(zhì)量 控制。
[0018] 在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提出了一種制備式3所示化合物的方法。根據(jù)本發(fā)明 的實施例，該方法包括：（a)利用前面所述的方法制備式2所示化合物；（b)在(5)-2-甲基_ CBS-惡唑硼烷存在、氮氣保護條件下，使式2所示化合物與硼烷二甲硫醚接觸，得到式3所示 化合物。通過該方法，能夠快速有效地制備獲得式3所示化合物，且操作簡單、方便，目標產(chǎn) 物收率和純度較高。另外，發(fā)明人在對曲伏前列素藥物進行質(zhì)量檢測中發(fā)現(xiàn)，式3所示化合 物作為雜質(zhì)普遍存在于各種曲伏前列素及其制劑中。經(jīng)過結(jié)構(gòu)確認及質(zhì)量分析驗證該化合 物為曲伏前列素合成過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)。由此，該式3所示化合物可以作為對照品對曲伏前 列素藥物進行質(zhì)量檢測，有效用于控制可能含有該雜質(zhì)的藥物的質(zhì)量。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，步驟(a)中制備式2所示化合物的步驟、參數(shù)等與前面所述 的制備式2所示化合物的方法一致，在此不再一一贅述。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，在步驟(b)中，所述式2所示化合物、（S)-2_甲基-CBS-惡唑 硼烷和硼烷二甲硫醚的摩爾比為10:1:16。由此，有利于反應(yīng)充分進行，提高反應(yīng)效率和目 標產(chǎn)物收率。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，步驟(b)中，于-KTC~(TC下，使所述式2所示化合物與硼烷 二甲硫醚接觸3h~5h;然后在-5 °C~5 °C下，使所述式2所示化合物與硼烷二甲硫醚接觸Ih ~2h。由此，能夠使得反應(yīng)在最適合的條件下進行，不會因為溫度過低而無法反應(yīng)或反應(yīng)速 率較慢，也不會因溫度過高而導(dǎo)致副反應(yīng)嚴重，使得目標產(chǎn)物雜質(zhì)含量較高或收率較低，同 時，不會因為時間過短而導(dǎo)致反應(yīng)未充分進行，或時間過長而造成經(jīng)濟性較差。
[0022] 根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，步驟(b)可以進一步包括：（b_l)于-HTC~0°C、氮氣保 護條件下，將所述式2所示化合物的四氫呋喃溶液的與所述(S)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷混 合，然后向所得到的混合物中加入所述硼烷二甲硫醚(DMSB)的四氫呋喃溶液，并使所得到 的混合物反應(yīng)3h~5h;(b-2)向步驟(b-Ι)得到的產(chǎn)物中加入甲醇，并將所得到的混合物于-5°C~5°C下反應(yīng)Ih~2h;(b-3)將步驟(b-2)得到的產(chǎn)物進行減壓濃縮，并向所得到的濃縮 產(chǎn)物中加入乙酸乙酯，室溫下攪拌IOh~15h，得到所述式3所示化合物。由此，能夠快速高效 地制備獲得式3所示化合物，且操作簡單、方便，目標產(chǎn)物收率和純度較高，能夠有效用于曲 伏前列素藥物質(zhì)量控制。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，可以在氮氣保護下，將式2所示化合物與（5)-2-甲基_ CBS-惡唑硼烷在-10°C~0 °C接觸，然后滴加溶有DMSB的四氫呋喃溶液，控制反應(yīng)溫度在-10 。(:~0 °C，反應(yīng)3h~5h，再滴加甲醇，控制反應(yīng)溫度在-5 °C~5°C，反應(yīng)Ih~2h，反應(yīng)畢，減壓 濃縮除去溶劑，所得殘留物中加入乙酸乙酯，室溫攪拌IOh~15h，析出大量固體，抽濾，干 燥，得類白色固體產(chǎn)物，即為式3所示化合物。一些實施例中，可以預(yù)先將式2所示化合物溶 于四氫呋喃中，DMSB溶于四氫呋喃中，以便形成DMSB的四氫呋喃溶液。由此，可以進一步提 高利用該方法制備式3所示化合物的效率。另外，可以進一步提高利用所得到的式3所示化 合物作為對照品檢測曲伏前列素藥物的效率。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明的一個實施例，固體析出的室溫攪拌時間可以為10小時~15小時，優(yōu) 選為12小時。由此，目標產(chǎn)物的收率和純度較高。
[0025] 發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過采用該方法可以有效地制備式3所示化合物。如前所述，根據(jù)本 發(fā)明的方法所制備的式3所示化合物作為對照品，能夠有效地用于對曲伏前列素藥物進行 質(zhì)量控制。
[0026] 發(fā)明人研究表明，利用本發(fā)明上述制備式2所示化合物和式3所示化合物的方法， 可得到純度99%以上的式2所示化合物以及式3所示化合物產(chǎn)品，可以有效用于質(zhì)量研究， 可用于藥物質(zhì)量控制中的雜質(zhì)標準品或是雜質(zhì)對照品。經(jīng)過大量實驗驗證，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，分 別采用該式2所示化合物、式3所示化合物作為對照品，能夠有效地用于對曲伏前列素藥物 進行質(zhì)量控制。
[0027] 在本發(fā)明的第三方面，本發(fā)明提出了一種曲伏前列素藥物檢測分析方法。根據(jù)本 發(fā)明的實施例，該方法包括:將曲伏前列素溶于蒸餾水，得到供試品溶液;將式2所示化合物 和式3所示化合物溶于蒸餾水，得到對照品溶液，其中，式2所示化合物和式3所示化合物是 通過前面所述的方法制備的；于相同色譜條件下，分別將所述供試品溶液和對照品溶液注 入結(jié)合熒光檢測器的高效液相色譜儀進行檢測，分別得到供試品色譜圖和對照品色譜圖； 基于所述供試品色譜圖和對照品色譜圖獲得所述曲伏前列素藥物中的雜質(zhì)的定性和/或定 量分析結(jié)果。根據(jù)本發(fā)明的實施例，該方法的色譜條件為：色譜柱為C18-0DS柱，柱溫為30 °C，流動相A為磷酸鹽緩沖液與乙腈的混合液;流動相B為乙腈，流動相的流速為lml/min，進 樣量為20微升，檢測波長為254nm;洗脫方式為梯度洗脫，洗脫條件為:梯度洗脫的條件
[0029] 由此，可以高效地對曲伏前列素藥物進行檢測。
[0030] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，上述定性和/或定量分析結(jié)果的獲得方式不受特別限制，本 領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)實際需要靈活選擇，例如可以采用常規(guī)的色譜分析方法對曲伏前列 素藥物中的雜質(zhì)進行定性和/或定量分析。在本發(fā)明的一些實施例中，根據(jù)對照品色譜圖可 以確定式2所示化合物和式3所示化合物的保留時間，可以將供試品色譜圖與對照品色譜圖 進行比對，以確定曲伏前列素藥物中是否含有式2所示化合物和式3所示化合物雜質(zhì)，或者 確定曲伏前列素藥物中的未知雜質(zhì)是否為式2所示化合物和式3所示化合物;進一步地，如 果確定曲伏前列素藥物中含有式2所示化合物和式3所示化合物雜質(zhì)，還可以通過峰面積計 算獲得式2所示化合物和式3所示化合物的含量。根據(jù)本發(fā)明的實施例，上述HPLC檢測方法 可以如下:AgilentllOO型高效液相色譜儀;焚光檢測器;色譜柱為C18-0DS柱(4.6 X 150mm， 5μηι);總流速:lml/min;流動相:采用磷酸鹽緩沖液與乙腈的混合液作為流動相A;采用乙腈 為流動相B，按上表進行線性梯度洗脫;柱溫為30°C;檢測波長為254nm;理論塔板數(shù)按曲伏 前列素計算應(yīng)不低于1500。取曲伏前列素適量，適量的式2所示化合物和式3所示化合物的 混合物，用蒸餾水稀釋，分別配置成供試品溶液和對照品溶液，取20yL注入進樣，在以上 HPLC條件下檢測。
[0031] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，上述對曲伏前列素藥物進行檢測的方法還可以具有下列附 加技術(shù)特征至少之一：
[0032] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，供試品溶液的濃度不受特別限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根 據(jù)實際需要靈活選擇。在本發(fā)明的一些實施例中，供試品溶液的濃度可以為〇.2mg/mL。根據(jù) 本發(fā)明的實施例，對照品溶液的濃度也不受特別限制，一些實施例中，對照品溶液中式2所 示化合物的濃度可以為〇. 2mg/mL，式3所示化合物的濃度可以為0.2mg/mL。
[0033]根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述磷酸鹽緩沖液的pH為2.5。由此，可以進一步提高對曲 伏前列素藥物進行檢測的效率。
[0034] 根據(jù)本發(fā)明的實施例，在流動相A中，所述磷酸鹽緩沖液與所述乙腈的體積比為 75:25。由此，可以進一步提尚對曲伏如列素藥物進彳丁檢測的效率。
【具體實施方式】
[0035] 下面詳細描述本發(fā)明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā) 明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。
[0036] 本發(fā)明所述的各反應(yīng)步驟所使用的反應(yīng)溶劑沒有特別限制，任何在一定程度上能 溶解起始原料并且不抑制反應(yīng)的溶劑均包含在本發(fā)明中。另外，本領(lǐng)域的許多類似改動，等 同替換，或等同于本發(fā)明所描述的溶劑，溶劑組合，及溶劑組合的不同比例，均視為本發(fā)明 的包含范圍。
[0037] 下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的方案進行解釋。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下面的 實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術(shù)或條 件的，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀 器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0038]實施例1式2所示化合物的制備
[0039]曲伏前列素（5. Og，IOmmol)溶于IOOmL的二氧六環(huán)中，攪拌均勻，再加入DDQ (11.4g，50mmo 1)，保持反應(yīng)溫度40 °C，反應(yīng)9h;取樣點板，原料點消失，反應(yīng)完畢，過濾，濾液 先后用水50mL、飽和碳酸氫鈉溶液50mL、飽和氯化鈉溶液50mL洗滌，分層，取有機相，濃縮除 去溶劑，得式2所示化合物(4.70g，收率94.0% )，純度98.6% (HPLC法）。
[0040]化合物分析數(shù)據(jù):ESI-MS(m/z) :521.3[M+Na]。
[0041 ]實施例2式2所示化合物的制備
[0042]曲伏前列素（5. Og，IOmmol)溶于IOOmL的二氧六環(huán)中，攪拌均勻，再加入DDQ (13.6g，60mmo 1)，保持反應(yīng)溫度30°C，反應(yīng)12h;取樣點板，原料點消失，反應(yīng)完畢，過濾，濾 液先后用水50mL、飽和碳酸氫鈉溶液50mL、飽和氯化鈉溶液50mL洗滌，分層，取有機相，濃縮 除去溶劑，得式2所示化合物(4.63g，收率92.6 % )，純度98.5 % (HPLC法）。
[0043]實施例3式2所示化合物的制備
[0044]曲伏前列素（5. Og，IOmmol)溶于IOOmL的二氧六環(huán)中，攪拌均勻，再加入DDQ (9.12g，40mmo 1)，保持反應(yīng)溫度50°C，反應(yīng)6h;取樣點板，原料點消失，反應(yīng)完畢，過濾，濾液 先后用水50mL、飽和碳酸氫鈉溶液50mL、飽和氯化鈉溶液50mL洗滌，分層，取有機相，濃縮除 去溶劑，得式2所示化合物(4.72g，收率94.4 % )，純度98.1 % (HPLC法）。
[0045] 實施例4不同摩爾配比的曲伏前列素與DDQ對式2所示化合物的制備收率、質(zhì)量的 影響
[0046] 按照實施例1的合成方法，選用5組不同摩爾配比的曲伏前列素與DDQ，完成5個實 驗，得到5個樣品，其得到的式2所示化合物收率以及HPLC純度數(shù)據(jù)見下表：
[0048] 結(jié)論：當曲伏前列素與DDQ的摩爾配比為I :(4~6)時，其所得的式2所示化合物的 收率、HPLC純度相對較佳，當曲伏前列素與DDQ的摩爾配比為1:5時，其所得的式2所示化合 物的收率、HPLC純度相對最佳。
[0049] 實施例5式3所示化合物的制備
[0050] 氮氣保護下，將式2所示化合物(9.97g，20mmol)溶于四氫呋喃150mL，加入(S)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷(0.554g，2mmol)，降溫至-10°C，滴加30mL溶有硼烷二甲硫醚的四氫呋 喃溶液(含硼烷二甲硫醚2.44g(32mmol))，控制反應(yīng)溫度在-10°C~-7°C，反應(yīng)5h，再滴加甲 醇10mL，控制反應(yīng)溫度在(TC，反應(yīng)1.5h，反應(yīng)畢，減壓濃縮除去溶劑，所得殘留物中加入乙 酸乙酯30mL，室溫攪拌12h，析出大量固體，抽濾，干燥，得類白色固體產(chǎn)物（8.55g，收率 85.5% )，即為式3所示化合物，純度99.5% (HPLC法）。
[0051] 化合物分析數(shù)據(jù)=1H NMR(CDC13)S:7.42~7.38(t，J = 8.0Hz，lH)，7.25-7.23(d，J =7 · 6Hz，1H)，7 · 14(brs，1H)，7 · 09-7 · 07(dd，J = 2 · 0/8 · OHz，1H)，5 · 7h5.61(m，2H)，5.45-5.36(m，2H)，5.05-4.95(m，lH)，4.55-4.50(m，lH)，4.35(m，lH)，4.22-4.18(m，lH)，4.05-3.90(m，2H)，2.50-2.48(m，lH),2.30-2.16(m，4H),2.05-1.96(m，3H),1.86-1.65(m，4H)， 1.25-1.22(m,6H)〇ESI-MS(m/z)：523.3[M+Na]〇
[0052] 實施例6式3所示化合物的制備
[0053] 氮氣保護下，式2所示化合物(9.97g，20mmol)溶于四氫呋喃150mL，加入(S)-2-甲 基-CBS-惡唑硼烷(0.554g，2mmol)，降溫至-5°C，滴加30mL溶有硼烷二甲硫醚的四氫呋喃溶 液(含硼烷二甲硫醚2.44g(32mmo 1))，控制反應(yīng)溫度在-7 °C~-4°C，反應(yīng)4h，再滴加甲醇 10mL，控制反應(yīng)溫度在-5°C，反應(yīng)2h，反應(yīng)畢，減壓濃縮除去溶劑，所得殘留物中加入乙酸乙 酯30mL，室溫攪拌IOh，析出大量固體，抽濾，干燥，得類白色固體產(chǎn)物(8.25g，收率82.5 % )， 即為式3所示化合物，純度99.3 % (HPLC法）。
[0054]實施例7式3所示化合物的制備
[0055] 氮氣保護下，式2所示化合物(9.97g，20mmol)溶于四氫呋喃150mL，加入(S)-2-甲 基-CBS-惡唑硼烷(0.554g，2mmol)，降溫至0°C，滴加30mL溶有硼烷二甲硫醚的四氫呋喃溶 液（含硼烷二甲硫醚2.4 4 g (3 2 mm 〇 1))，控制反應(yīng)溫度在-4 °C~0 °C，反應(yīng)3 h，再滴加甲醇 10mL，控制反應(yīng)溫度在5°C，反應(yīng)lh，反應(yīng)畢，減壓濃縮除去溶劑，所得殘留物中加入乙酸乙 酯30mL，室溫攪拌15h，析出大量固體，抽濾，干燥，得類白色固體產(chǎn)物(8.40g，收率84.0%)， 即為式3所示化合物，純度99.8 % (HPLC法）。
[0056]實施例8不同固體析出試劑對式3所示化合物的制備收率、質(zhì)量的影響
[0057]按照實施例5的合成方法，選用固體析出溶劑分別為：乙酸乙酯、丙酮、石油醚、異 丙醇，完成4個實驗，得到4個樣品，其收率以及HPLC純度數(shù)據(jù)見下表：
[0059]結(jié)論:將乙酸乙酯用作固體析出試劑，其所得的式3所示化合物的收率、質(zhì)量相對 最佳。
[0060] 實施例9不同固體析出的室溫攪拌時間對式3所示化合物的制備收率、質(zhì)量的影響
[0061] 按照實施例5的合成方法，選用固體析出的室溫攪拌時間分別為9小時、10小時、12 小時、15小時、16小時，完成5個實驗，得到5個樣品，其收率以及HPLC純度數(shù)據(jù)見下表：
[0063] 結(jié)論：當固體析出的室溫攪拌時間為10小時~15小時，其所得的式3所示化合物的 收率、質(zhì)量相對較佳，當固體析出的室溫攪拌時間為12小時，其所得的式3所示化合物的收 率、質(zhì)量相對最佳。
[0064] 在本說明書的描述中，參考術(shù)語"一個實施例"、"一些實施例"、"示例"、"具體示 例"、或"一些示例"等的描述意指結(jié)合該實施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特 點包含于本發(fā)明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不 必須針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點可以在任 一個或多個實施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技 術(shù)人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特征進行結(jié) 合和組合。
[0065] 盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例 性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述 實施例進行變化、修改、替換和變型。
【主權(quán)項】
1. 一種制備式2所示化合物的方法，其特征在于，包括： 使式1所示化合物與二氯二氰基苯醌接觸，以便獲得式2所示化合物，2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述式1所示化合物與二氯二氰基苯醌的 摩爾比為1: (4~6)，優(yōu)選1:5。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，于30°C~50°C下，使所述式1所示化合物與 二氯二氰基苯醌接觸6h~12h。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，進一步包括： (1) 將所述式1所示化合物溶于二氧六環(huán)中，并向所得到的混合物中加入二氯二氰基苯 醌，得到混合溶液； (2) 將所述混合溶液于30 °C~50 °C下反應(yīng)6h~12h，得到反應(yīng)液； (3) 將所述反應(yīng)液過濾，得到的濾液依次經(jīng)水、碳酸氫鈉溶液、飽和氯化鈉溶液洗滌，將 經(jīng)過洗滌的溶液分層，將得到的有機相進行濃縮，得到所述式2所示化合物。5. -種制備式3所示化合物的方法，其特征在于，包括： (a) 利用權(quán)利要求1-4中任一項所述的方法制備式2所示化合物； (b) 在(S)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷存在、氮氣保護條件下，使式2所示化合物與硼烷二甲 硫醚接觸，得到式3所示化合物；6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，在步驟(b)中，所述式2所示化合物、（S)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷和硼烷二甲硫醚的摩爾比為10:1:16。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(b)中，于-10°C~0°C下，使所述式2所 示化合物與硼烷二甲硫醚接觸3h~5h;然后在-5°C~5°C下，使所述式2所示化合物與硼烷 二甲硫醚接觸lh~2h。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(b)進一步包括： (b-Ι)于-10°C~0°C、氮氣保護條件下，將所述式2所示化合物的四氫呋喃溶液的與所 述(S)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷混合，然后向所得到的混合物中加入所述硼烷二甲硫醚的四 氫呋喃溶液，并使所得到的混合物反應(yīng)3h~5h; (b-2)向步驟(b-1)得到的產(chǎn)物中加入甲醇，并將所得到的混合物于-5°C~5°C下反應(yīng) lh ~2h; (b-3)將步驟(b-2)得到的產(chǎn)物進行減壓濃縮，并向所得到的濃縮產(chǎn)物中加入乙酸乙 酯，室溫下攪拌1 Oh~15h，得到所述式3所示化合物。9. 一種曲伏前列素藥物檢測分析方法，其特征在于，包括： 將曲伏前列素溶于蒸餾水，得到供試品溶液； 將式2所示化合物和式3所示化合物溶于蒸餾水，得到對照品溶液，其中，式2所示化合 物是通過權(quán)利要求1-4中任一項所述的方法制備的，所述式3所示化合物是通過權(quán)利要求5-8中任一項所述的方法制備的； 于相同色譜條件下，分別將所述供試品溶液和對照品溶液注入結(jié)合熒光檢測器的高效 液相色譜儀進行檢測，分別得到供試品色譜圖和對照品色譜圖； 基于所述供試品色譜圖和對照品色譜圖獲得所述曲伏前列素藥物中的雜質(zhì)的定性和/ 或定量分析結(jié)果， 其中，所述色譜條件為： 色譜柱為C18-0DS柱， 柱溫為30°C， 流動相A為磷酸鹽緩沖液與乙腈的混合液;流動相B為乙腈， 檢測波長為254nm， 流速為lml/min， 進樣量為20微升； 洗脫方式為梯度洗脫，所述梯度洗脫條件為：10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，按所述曲伏前列素計算，理論塔板數(shù)不低 于1500， 任選地，所述磷酸鹽緩沖液的pH為2.5， 任選地，在流動相A中，所述磷酸鹽緩沖液與所述乙腈的體積比為75:25， 任選地，所述供試品溶液的濃度為0.2mg/mL， 任選地，所述對照品溶液中，所述式2所示化合物的濃度為0.2mg/mL，所述式3所示化合 物的濃度為〇.2mg/mL。
【文檔編號】C07C405/00GK105859603SQ201610218205
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年4月8日
【發(fā)明人】魏威
【申請人】魏威