丙酸交沙霉素的藥物組合物及其在生物醫(yī)藥中的應用
【專利摘要】本發(fā)明公開了丙酸交沙霉素的藥物組合物及其在生物醫(yī)藥中的應用，本發(fā)明提供的丙酸交沙霉素的藥物組合物中含有丙酸交沙霉素和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，丙酸交沙霉素、化合物(Ⅰ)單獨作用時，對肺氣腫具有治療作用；丙酸交沙霉素和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時，治療效果進一步提高，可以開發(fā)成治療肺氣腫的藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。
【專利說明】
丙酸交沙霉素的藥物組合物及其在生物醫(yī)藥中的應用
技術(shù)領域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，涉及丙酸交沙霉素的新用途，具體涉及丙酸交沙霉素 的藥物組合物及其在生物醫(yī)藥中的應用。
【背景技術(shù)】
[0002] 丙酸交沙霉素適用于化膿性鏈球菌引起的咽炎及扁桃體炎，敏感菌所致的鼻竇 炎、中耳炎、急性支氣管炎及口腔膿腫，肺炎支原體所致的肺炎，敏感細菌引起的皮膚軟組 織感染，也可用于對青霉素、紅霉素耐藥的葡萄球菌感染。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種丙酸交沙霉素的藥物組合物，該藥物組合物中含有丙 酸交沙霉素和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，丙酸交沙霉素和該天然產(chǎn)物可以協(xié)同治療肺氣 腫。
[0004] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0005] 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0006]
[0007] -種丙酸交沙霉素的藥物組合物，包括丙酸交沙霉素、如權(quán)利要求1所述的化合物 (I)和藥學上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0008] 進一步地，藥學上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、 崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體或潤滑劑。
[0009] 進一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0010] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將牽牛子粉碎，用85~95%乙 醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃 取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物用 大孔樹脂除雜，先用35 %乙醇洗脫8個柱體積，再用90 %乙醇洗脫12個柱體積，收集90 %洗 脫液，減壓濃縮得90%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中90%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分 離，依次用體積比為120:1、60:1、30:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d) 步驟(C)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為40:1、30:1和10:1的二氯甲烷-甲 醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體 積百分濃度為85%的甲醇水溶液等度洗脫，收集14~18個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮 得到化合物(I)。
[0011] 進一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)用90%乙醇熱回流提取，合并提取 液。
[0012] 進一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0013]進一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯進行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0014] 上述化合物(I)在制備治療肺氣腫的藥物中的應用。
[0015] 上述丙酸交沙霉素的藥物組合物在制備治療肺氣腫的藥物中的應用。
[0016] 本發(fā)明的優(yōu)點:本發(fā)明提供的丙酸交沙霉素的藥物組合物中含有丙酸交沙霉素和 一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，丙酸交沙霉素、化合物（I)單獨作用時，對肺氣腫具有治療作用； 丙酸交沙霉素和化合物（I)聯(lián)合作用時，治療效果進一步提高，可開發(fā)成治療肺氣腫的藥 物。
【具體實施方式】
[0017] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。
[0018] 實施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0019]分離方法：（a)將牽牛子(2kg)粉碎，用90%乙醇熱回流提取（15LX3次），合并提取 液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用35%乙醇洗脫8個柱體積，再用90%乙醇洗脫 12個柱體積，收集90%洗脫液，減壓濃縮得90%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中90%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為120:1 (11個柱體積）、60:1 (9個柱體積）、30:1 (9 個柱體積)和15:1 (8個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」4個組分；（d)步驟(c)中組分 3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為40:1(6個柱體積）、30:1(8個柱體積)和10:1(6個 柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為85 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集14~18個柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (HPLC歸一化純度大于98% )。
[0020] 結(jié)構(gòu)確證:冊431-]\^顯示[]\?1]+為111/2 261.1048，結(jié)合核磁特征可得分子式為 C15H16〇4，不飽和度為8。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ppm，CDC13，500MHz): H-1 (2 · 96，s)，H-3a (3.25，d，J=14.2Hz)，H-3b(3.01，d，J=14.2Hz)，H-5(2.78，dd，J=10.4,9.6Hz)，H-6 (3.74，dd，J=10.4,9.0Hz)，H-7(2.89，dddd，J = 9.0,8.2,3.2,2.8Hz)，H-8(4.17，dd，J = 8·3,3·0Ηζ)，H_9a(2.84，qd，J=14.0,3.3Hz)，H_9b(2.28，qt，J=14.0,5.6Hz)，H_13a (6.19，dd，J = 3.2,0.7Hz)，H-13b(6.05，dd，J = 2.8,0.7Hz)，H-14a(5.04，d，J=1.4Hz)，H-14b(5.01，d，J=1.4Hz)，H-15a(5.32，br，d，J = 2.2Hz)，H-15b(5.11，br，d，J = 2.2Hz);核磁 共振碳譜數(shù)據(jù)Sc(ppm，CDCl3,125MHz) :58.7(CH，1-C)，211· 5(C，2-C)，42.4(CH2,3-C)，142.6 (C，4-C)，53.2(CH，5-C)，79.8(CH，6-C)，51.2(CH，7-C)，74.6(CH，8-C)，42.7(CH 2,9-C)， 146.2(C，10-C)，135.4(C，n-C)，169.1(C，12-C)，123.8(CH2，13-C)，117.4(CH 2，14-C)， 113 · 5(CH2，15-C)。IR光譜表明該化合物含有羥基(3600cm-1)，γ -內(nèi)酯（1770cm-1)和亞甲基 基團（1665cnf1)。該化合物的碳譜結(jié)合HSQC譜，顯示出15個碳信號，包括五個亞甲基(三個烯 屬亞甲基），五個次甲基(兩個連氧碳）以及五個季碳(一個酯羰基，一個羰基以及三個烯烴 季碳）</H-/ 13C-NMR和HSQC譜顯示愈創(chuàng)木烷型倍半萜類骨架三個特征環(huán)外雙鍵信號:第一個 特征性雙鍵[SH6.19(lH，dd，J = 3.2,0.7Hz，H-13aWP6.05(lH，dd，J = 2.8,0.7Hz，H-13b);S 。123.8(013)和135.4((：-11)]，愈創(chuàng)木烷七元環(huán)環(huán)外雙鍵[51 15.04(1!1，(1，了=1.4他，!1-14&) 和5.01 (lH，d，J= 1.4Hz，H-14b)Jc117.4(C-14)和146.2(010)]，愈創(chuàng)木烷五元環(huán)環(huán)外雙 鍵[S H5.32(lH，br，d，J = 2.2Hz，H-15aWP5.11(lH，br，d，J = 2.2Hz，H-15b);Sc113.5(C-15) 和142.6(C-4)]。結(jié)合高分辨質(zhì)譜以及核磁數(shù)據(jù)可以推測出該化合物為一個倍半萜類化合 物。進一步的文獻查閱可以發(fā)現(xiàn)，該化合物和已知化合物2a，8a-dihydroxy-laH，5aH，6ffl，7 aH-guai-4(15)，10(14)，ll(13)-trien-6，12- 〇lide具有相似的結(jié)構(gòu)。比較兩者的數(shù)據(jù)可以 發(fā)現(xiàn)，新化合物和已知化合物的區(qū)別在于新化合物中多出了一個酮羰基信號。進一步的 HMBC譜的解析中，Η-1與C-2以及H 2-3與C-2的相關性說明多出來的酮羰基是位于C-2位的。 至此，將該化合物的平面結(jié)構(gòu)解析出來。N0ESY譜中，H-1與H-5，H-5與H-7的相關性說明H-1， H-5和H-7是位于α位的，同時，H-13與H-8，H-8與H-6之間的相關信號說明H-8和H-6都是位于 β位的。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和N0ESY譜，以及文獻關于相關類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該 化合物如下所示，立體構(gòu)型進一步通過ECD試驗確定，理論值與實驗值基本一致。
[0021] 該化合物化學式及碳原子編號如下：
[0022]
[0023] 實施例2:藥理作用
[0024]本實施例使用氣管一次注入彈性蛋白酶750UkgBW制備肺氣腫大鼠模型，觀察藥物 改善動物肺總?cè)萘?TVL)、平均肺泡面積、纖維橫截面積等方面的抗肺氣腫作用。
[0025] 1、材料與方法
[0026] 1.1動物
[0027] 8~10周齡SD大鼠，雌雄各半，體重170~190g。由四川省醫(yī)學科學院實驗動物研究 所提供。實驗動物設施條件:成都中醫(yī)藥大學藥學院動物觀察室。
[0028] 1.2試劑與樣品
[0029]丙酸交沙霉素購自中國藥品生物制品檢定所?；衔铮↖)自制，制備方法見實施例 Ιο
[0030] 1.3儀器
[0031] 用IEICa Q500MC型圖像分析儀(Leica公司，德國）。
[0032] 1.4大鼠分組及模型制備
[0033] 大鼠隨機分5組，每組12只，分別為正常對照組、模型對照組、丙酸交沙霉素組 (80mg · kg-"、化合物（I)組(80mg · kg-"、丙酸交沙霉素與化合物（I)組合物組【40mg · kg一1 丙酸交沙霉素+40mg · kg^1化合物（I)】。正常對照組注入生理鹽水lml，其余組經(jīng)氣管一次注 入彈性蛋白酶750U/kg BW。造模并適應環(huán)境1周后，連續(xù)灌胃給藥7d，正常對照組與模型對 照組大鼠灌胃給予純化水。
[0034] 1.5病理檢查實驗
[0035]最后一次給藥的第2天，大鼠麻醉后脫臼處死，開胸游離氣管，取出肺臟，在25cm H20壓力下經(jīng)氣管以10%中性福爾馬林液灌注肺臟至體積不再增大時，以排水法測肺總?cè)?量(TVL)。右下肺最大縱切面取材，HE染色，圖像分析測平均肺泡面積。
[0036] 1.6膈肌纖維型態(tài)觀察實驗
[0037]最后一次給藥的第2天，取肋膈區(qū)膈肌纖維橫斷面切片，厚ΙΟμπι，堿性ATP酶染色。 用IEICaQ500MC型圖像分析儀對快顫搐(FT)纖維、慢顫搐(ST)纖維橫斷面積定量測定。 [0038] 1.7統(tǒng)計學方法
[0039]實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)土標準差(X土s)表示，應用SPSS18.0版統(tǒng)計軟件進行單因素方差 分析和t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
[0040] 2、實驗結(jié)果
[0041 ] 2.1對肺氣腫模型大鼠肺總?cè)萘俊⑵骄闻菝娣e的影響
[0042]與正常對照組比，模型對照組肺總?cè)萘?、平均肺泡面積明顯增大(P<0.01);與模 型對照組比，丙酸交沙霉素與化合物（I)組合物組總?cè)萘俊⑵骄闻菝娣e顯著減?。≒< 〇.〇1);與模型對照組比，丙酸交沙霉素組、化合物（I)組總?cè)萘?、平均肺泡面積減?。≒< 0.05)。試驗結(jié)果見表1。
[0043] 2.2對肺氣腫模型大鼠膈肌纖維橫截面積的影響
[0044]與正常對照組比，模型對照組大鼠的FT明顯降低、ST明顯升高(P<0.01)。與模型 對照組比，丙酸交沙霉素與化合物（I)組合物組FT明顯升高、ST明顯降低(P<0.01);與模型 對照組比較，丙酸交沙霉素組、化合物（I)組FT升高、ST降低(P<0.05)。見表1。
[0045]表1對肺氣腫模型大鼠肺總?cè)萘俊⑵骄闻菝娣e和膈肌纖維橫截面積的影響
[0046]
[0047] 彈性蛋白酶導致大鼠肺氣腫模型的解剖、生理特點與人類肺氣腫改變一致，是觀 察肺氣腫時呼吸肌改變的理想模型。本實驗觀察到肺氣腫組與對照組動物體重、膈重均無 顯著性差異，可排除營養(yǎng)因素的影響，肺氣腫組ST纖維橫截面積顯著增大，F(xiàn)T纖維無顯著改 變。ST纖維富含肌紅蛋白、腺粒體及氧化酶，ATP主要來源于氧化磷酸化過程，收縮時間長， 不易疲勞。肺氣腫膈肌ST纖維橫截面積顯著增大，是肺氣腫膈肌抗疲勞能力增強的物質(zhì)基 礎?？烧J為是膈肌負載加重的代償性變化。呼吸肌能量供應是影響呼吸肌收縮力的重要因 素，coro慢性病程中，由于氣道阻力增加和肺過度充氣，呼吸肌做功明顯增加，能量物質(zhì)消 耗，肌肉蛋白分解供能，致使體重下降，膈肌萎縮是其肌力下降的一個主要原因。
[0048] 結(jié)果表明，丙酸交沙霉素、化合物（I)單獨作用時，對肺氣腫具有治療作用;丙酸交 沙霉素和化合物(I)聯(lián)合作用時，治療效果進一步提高，可以開發(fā)成治療肺氣腫的藥物。
[0049] 上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護 范圍。本領域的普通技術(shù)人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和保護范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，2. -種丙酸交沙霉素的藥物組合物，其特征在于:包括丙酸交沙霉素、如權(quán)利要求1所 述的化合物(I)和藥學上可W接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的丙酸交沙霉素的藥物組合物，其特征在于:藥學上可W接受的 載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附 載體或潤滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的丙酸交沙霉素的藥物組合物，其特征在于：所述劑型包括片 劑、膠囊劑、日服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注 射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含W下操作步驟：（a)將牽 牛子粉碎，用85~95%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸乙 醋和水飽和的正下醇萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b) 步驟(a)中正下醇取物用大孔樹脂除雜，先用35%乙醇洗脫8個柱體積，再用90%乙醇洗脫 12個柱體積，收集90%洗脫液，減壓濃縮得90%乙醇洗脫濃縮物；（C)步驟(b)中90%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為120:1、60:1、30:1和15:1的二氯甲燒-甲醇梯度 洗脫得到4個組分；（d)步驟(C)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為40:1、30:1 和10:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為85 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集14~18個柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)用90%乙醇熱回 流提取，合并提取液。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為DlOl型 大孔吸附樹脂。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)中用二氯甲燒代 替乙酸乙醋進行萃取，得到二氯甲燒萃取物。9. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療肺氣腫的藥物中的應用。10. 權(quán)利要求2~4任一所述的丙酸交沙霉素的藥物組合物在制備治療肺氣腫的藥物中 的應用。
【文檔編號】C07D307/77GK105906593SQ201610335395
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年5月15日
【發(fā)明人】劉雨
【申請人】劉雨