一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸銨,加入動物蹄甲粉末,動物蹄甲和氨基甲酸銨的重量比為5?18:1,用橡皮塞密封試管,在140?190℃下加熱10?15分鐘,動物蹄甲全部溶解后得到動物蹄甲溶液,降溫,動物蹄甲溶液凝固,粉碎,再加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇。本發(fā)明操作步驟簡單,成本低,耗時短。
【專利說明】
一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于動物蹄甲深加工的技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種簡便提取動物蹄甲多肽的 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 檢索到如下4篇專利文獻(xiàn),專利文獻(xiàn)1(申請?zhí)枮?01110315457.8)記載了一種蹄甲 肽的提取方法,該方法采用健康豬蹄甲為原料,經(jīng)過升溫蒸煮、烘干、粉碎機(jī)粉碎、蹄甲粉配 水、升溫蒸煮、酶解、滅酶、活性炭脫色、膜分離,將得到的濾液經(jīng)干燥后即獲蹄甲肽的技術(shù); 專利文獻(xiàn)2(申請?zhí)?01110084644.X)記載了一種蹄甲多肽的復(fù)合水解制備方法,是將經(jīng)過 干燥和粉碎后的蹄甲原料,在堿溶液中進(jìn)行溫和的部分水解;然后使用蛋白水解酶進(jìn)一步 水解;制得蹄甲多肽產(chǎn)品。其技術(shù)特點(diǎn)在于采用堿液和蛋白水解酶雙重復(fù)合水解方法制備 蹄甲多肽;專利文獻(xiàn)3(申請?zhí)?00910192431.1)記載了一種動物蹄甲提取物的制備方法,具 體的說是一種采用酶解方法制備蹄甲提取物的生產(chǎn)工藝,酶解所得酶解液,結(jié)合噴霧干燥 的方法制備蹄甲多肽提取物,其特征在于將豬、羊或牛的蹄甲洗凈、除雜、酶解后,精制加工 制成多肽提取液,加入生物活性保護(hù)劑后噴霧干燥制成蹄甲提取物干粉的技術(shù);專利文獻(xiàn)4 (申請?zhí)?00910230964.4)記載了一種蹄甲多肽的制備方法,該方法屬于一種藥物的制備方 法,所述的方法是原料處理、提取、濃縮、烘干、粉碎、制得蹄甲多肽的技術(shù)。
[0003] 以上方法從蹄甲中分離(提取)蹄甲肽時,使用酸化劑、還原劑等藥品以及蛋白酶 等生物活性試劑。缺點(diǎn)主要有所需耗材多,成本高;.g.操作時間長,除去試劑殘留需要 較長時間,并且有些成分長時間也很難去除;Γ|)操作過程復(fù)雜,以上蹄甲多肽的分離(提取) 需要復(fù)雜的操作步驟,需要具有較強(qiáng)專業(yè)知識的專業(yè)技術(shù)人員才可完成。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,并提供一種使用熱的氨基甲酸銨溶液來 處理動物蹄甲簡便提取動物蹄甲多肽的方法,它不使用酸化劑、還原劑、表面活性劑和酶等 試劑,操作步驟簡單,成本低,耗時短。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下: 一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸銨,加入動物蹄甲粉末,動物 蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為5-18:1,用橡皮塞密封試管,在140-190°C下加熱10-15 分鐘,動物蹄甲全部溶解后得到動物蹄甲溶液,降溫,動物蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按氨基 甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗沉 淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇。
[0006] 優(yōu)選,動物蹄甲和氨基甲酸銨的重量比為8-13:1。
[0007] 優(yōu)選,在150-170 °C下加熱得到動物蹄甲溶液。
[0008] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:1、據(jù)實驗結(jié)果,熱的氨基甲酸銨溶液溶解動物蹄甲的能力很 強(qiáng),不使用酸化劑、還原劑、表面活性劑等試劑,也可以在短時間內(nèi)充分溶解蹄甲,可以節(jié)省 提取蹄甲多肽的試劑費(fèi)用和不需要復(fù)雜的試劑除去過程;2、只使用熱的氨基甲酸銨溶液就 可以溶解動物蹄甲并可以提取蹄甲多肽,溶解過程很簡單;3、本發(fā)明加熱氨基甲酸銨的方 法沒有特別的要求,油浴加熱,微波爐加熱都可以;4、本發(fā)明從動物蹄甲中分離蹄甲多肽 時,不使用酸化劑、還原劑、表面活性劑和酶等試劑,操作步驟簡單,成本低,耗時短。
[0009]【附圖說明】圖1是本發(fā)明工藝流程圖。
[0010]【具體實施方式】下面結(jié)合附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0011] 實施例1,由圖1可知,一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸 銨,加入驢蹄甲粉末,驢蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為5:1,用橡皮塞密封試管,在140 °C下加熱15分鐘,驢蹄甲全部溶解后得到驢蹄甲溶液,降溫,驢蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按 氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇,蹄甲多肽提取率為 91.21%〇
[0012] 實施例2,由圖1可知,一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸 銨,加入驢蹄甲粉末,驢蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為7 :1,用橡皮塞密封試管,在150 °C下加熱11分鐘,驢蹄甲全部溶解后得到驢蹄甲溶液,降溫,驢蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按 氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇,蹄甲多肽提取率為 91.51%〇
[0013] 實施例3,由圖1可知,一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸 銨,加入豬蹄甲粉末,豬蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為18:1,用橡皮塞密封試管,在190 °C下加熱10分鐘,豬蹄甲全部溶解后得到豬蹄甲溶液,降溫,豬蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按 氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇,蹄甲多肽提取率為 91.17%〇
[0014] 實施例4,由圖1可知,一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸 銨,加入豬蹄甲粉末,豬蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為16:1,用橡皮塞密封試管,在180 °C下加熱10分鐘,豬蹄甲全部溶解后得到豬蹄甲溶液,降溫,豬蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按 氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇,蹄甲多肽提取率為 91.33%〇
[0015] 實施例5,由圖1可知,一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸 銨,加入羊蹄甲粉末,羊蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為8:1,用橡皮塞密封試管,在150 °C下加熱12分鐘,羊蹄甲全部溶解后得到羊蹄甲溶液,降溫,羊蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按 氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇,蹄甲多肽提取率為 93.25%〇
[0016] 實施例6,由圖1可知,一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸 銨,加入羊蹄甲粉末,羊蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為10:1,用橡皮塞密封試管,在160 °C下加熱13分鐘,羊蹄甲全部溶解后得到羊蹄甲溶液,降溫,羊蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按 氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇,蹄甲多肽提取率為 93.68%〇
[0017] 實施例7,由圖1可知,一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸 銨,加入馬蹄甲粉末,馬蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為13:1,用橡皮塞密封試管,在170 °C下加熱13分鐘,馬蹄甲全部溶解后得到馬蹄甲溶液,降溫,馬蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按 氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇,蹄甲多肽提取率為 93.58%〇
[0018] 實施例8,由圖1可知,一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,試管中稱取氨基甲酸 銨,加入馬蹄甲粉末,馬蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為11:1,用橡皮塞密封試管,在165 °C下加熱15分鐘,馬蹄甲全部溶解后得到馬蹄甲溶液,降溫,馬蹄甲溶液凝固,粉碎,然后按 氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,過濾,用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇,蹄甲多肽提取率為 93.79%〇
[0019] 本發(fā)明氨基甲酸銨溶液當(dāng)中溶解蹄甲的機(jī)理如下:以驢蹄甲為例,這些多肽分子 主要是以二硫鍵和氫鍵結(jié)合的,氨基甲酸銨切斷多肽的氫鍵讓多肽變性,即氨基甲酸銨作 為溶媒切斷多肽氫鍵的同時,結(jié)合多肽中自由的氨基和羧基,提高了氨基甲酸銨當(dāng)中的溶 解度。另外,氨基甲酸銨分解產(chǎn)生的氨侵入多肽的結(jié)晶領(lǐng)域,擴(kuò)大了多肽分子間距離,氨基 甲酸銨分子更容易侵入多肽分子當(dāng)中,促進(jìn)多肽的溶解。
【主權(quán)項】
1. 一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,其特征在于采用如下步驟,試管中稱取氨基甲 酸銨,加入動物蹄甲粉末,動物蹄甲和氨基甲酸銨的重量比為5-18:1,用橡皮塞密封試管, 在140-190°C下加熱10-15分鐘,動物蹄甲全部溶解后得到動物蹄甲溶液,降溫,動物蹄甲溶 液凝固,粉碎,再加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出,氨基甲酸銨重量:乙醇體積=1:5,過濾,用乙 醇或蒸餾水清洗沉淀,加熱干燥,得到粉末狀的蹄甲多肽,濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇。2. 如權(quán)利要求1所述的一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,其特征在于:動物蹄甲和氨 基甲酸銨的重量比為8-13:1。3. 如權(quán)利要求1所述的一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法,其特征在于:在150-170°C 下加熱得到動物蹄甲溶液。
【文檔編號】C07K1/36GK105949275SQ201610448651
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月21日
【發(fā)明人】薩如拉, 陳建興
【申請人】赤峰學(xué)院