七元環(huán)小檗堿類似物及其藥物組合物、制備方法和用圖
【專利摘要】本發(fā)明涉及七元環(huán)小檗堿類似物及其藥學上可接受的鹽，具體地，本發(fā)明的類似物具有式A結(jié)構(gòu)，其中各取代基的定義如說明書中所述；本發(fā)明還提供了式A所示的七元環(huán)小檗堿類似物的制備方法，及其在制備預(yù)防或治療腫瘤或癌癥的藥物中的用途。
【專利說明】
七元環(huán)小檗堿類似物及其藥物組合物、制備方法和用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及藥物化學和藥物治療學領(lǐng)域，具體涉及可作為治療腫瘤的七元環(huán)小檗 堿類似物及其藥物組合物、制備方法和醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 中醫(yī)中藥是我中華民族的瑰寶，因此，開展以活性天然產(chǎn)物為基礎(chǔ)的現(xiàn)代創(chuàng)新藥 物研究是我國新藥研發(fā)工作者應(yīng)該予以高度關(guān)注的研究領(lǐng)域。已經(jīng)廣泛使用的從中草藥中 提取得到的活性天然產(chǎn)物很多，小檗堿是其中之一。小檗堿（Berberine)，屬異喹啉類生物 堿，商品名黃連素，主要用于治療腸道細菌感染，是中藥黃連中的主要活性成分。
[0003]
[0004] 中藥黃連主要包括毛茛科（Ranunculaceae)黃連（Coptis chinensis Franch)、 三角葉黃連（Coptis deltoidea C.Y. cheng et Hsiao)、云連（Coptis teetaw all)的干 燥根莖。除此之外，小檗堿還存在于小檗科、罌粟科、蕓香科、防己科、鼠李科植物中。近年 來研究發(fā)現(xiàn)，小檗堿及其衍生物藥理作用十分豐富，具有抗腫瘤、糖尿病、心血管疾病、高血 壓、炎癥、細菌和病毒感染、腦缺血性損傷、精神疾病、阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease)、 骨質(zhì)疏松等多方面活性，潛在的開發(fā)應(yīng)用前景非常廣闊。
[0005] 惡性腫瘤是危害人類健康的疾病之一，位居各類疾病死亡率的前列。藥理實驗研 究表明，小檗堿對肺癌細胞、胃癌細胞、肝癌細胞、結(jié)腸癌細胞、乳腺癌細胞、宮頸癌細胞、前 列腺癌細胞、黑色素瘤細胞、白血病細胞等均有明顯的生長抑制作用。其抗腫瘤作用機制包 括抑制腫瘤細胞增殖、促進腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤轉(zhuǎn)移、以及誘導腫瘤細胞分化等，相關(guān) 的分子機制非常復雜，涉及的信號通路也很廣泛。因此，小檗堿抗腫瘤活性具有多效應(yīng)、多 靶點的作用特點。
[0006] 已有的藥理研究表明，小檗堿極具開發(fā)成多種抗腫瘤藥物的潛力。但迄今為止，尚 缺乏相關(guān)抗腫瘤新藥上市。仔細比較文獻報道的小檗堿抗腫瘤活性數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，其體內(nèi)外活 性測試時的有效劑量與目前臨床應(yīng)用的抗腫瘤藥物相比，給藥劑量太大。而造成這一問題 的主要原因則是因為小檗堿口服生物利用度低。為了解決這一問題，制劑學家們想出了很 多辦法，比如脂質(zhì)體、環(huán)糊精包合物以及與促吸收劑聯(lián)合給藥等，但都難以從根本上加以解 決。據(jù)推測，小檗堿獨特的結(jié)構(gòu)特征是造成這一問題的關(guān)鍵，其母體可以看作是兩個異喹啉 基本單元組合而成的四個六元環(huán)體系，整個體系處于一個近似平面的狀態(tài)，再加上分子中 擁有極性的C = N+鍵，從而導致該化合物脂溶性和水溶性都很差，進而影響到生物利用度。 因此，對小檗堿的結(jié)構(gòu)進行改造，改善其溶解度和生物利用度并且增強抗腫瘤活性有助于 加快該類化合物從天然活性成分到臨床候選藥物的轉(zhuǎn)變，對于傳統(tǒng)藥物的深度開發(fā)也極具 借鑒意義。
[0007] 為了改善小檗堿的溶解度和生物利用度以及增強藥理活性，國內(nèi)外許多同行對小 檗堿的結(jié)構(gòu)進行了改造研究，取得了一些較好的實驗結(jié)果。這些結(jié)構(gòu)改造研究概括起來大 致可分為以下幾類：小檗堿A、C、D環(huán)上取代基的變化（改造位點多集中于2、3、8、9、12、13 等位置，有單位點集中修飾和多位點同時修飾）；小檗堿C環(huán)的氫化（主要是C環(huán)的二氫化 和四氫化，以及氫化后8、13位的取代）；小檗堿N上的季銨化（主要是C環(huán)氫化后氮上的 不同基團季銨化）；小檗堿四元環(huán)骨架的改變（主要是小檗堿在堿性條件下開環(huán)變成芐基 異喹啉類化合物），絕大多數(shù)研究主要集中在小檗堿的A、C、D環(huán)上。
[0008]
[0009] 近年來，中國科學院上海藥物研究所綜合采用藥物設(shè)計及全合成的辦法首次對小 檗堿的B環(huán)進行了設(shè)計改造，得到一系列結(jié)構(gòu)新穎的小檗堿類似物，明顯地改善了溶解性 和體外抗腫瘤活性。其中，B環(huán)為不飽和七元環(huán)的化合物sm38在10.0 uM濃度時，對大多數(shù) 測試腫瘤細胞（包括結(jié)腸癌和黑色素瘤細胞）的抑制率超過了 50%。
[0010] 迄今為止，本領(lǐng)域尚需研發(fā)更有效和/或更安全的小檗堿類似物，以便用于腫瘤 等疾病的治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明的目的在于提供一種式A所示七元環(huán)小檗堿類似物及其藥學上可接受的 鹽及其制法和應(yīng)用。
[0012] 本發(fā)明的第一方面，提供一種式A所示的七元環(huán)小檗堿類似物、其藥學上可接受 的鹽、其晶型、其水合物、或其溶劑化物、或其前藥，
[0013]
[0014] 式中，
[0015] =代表雙鍵或單鍵，并且NmC 中的兩個不同時為雙鍵，或者 中的兩個不同時為雙鍵；
[0016]
I分別表示5-6元環(huán)，優(yōu)選為芳基或雜芳基，其中所述的雜芳基具有 1-3個N原子；
[0017] 札為位吁
的1-4個（較佳地1-3個或1-2個）相同或不同的取代基，而R 2 為位子
j的1-4個（較佳地1-3個或1-2個）相同或不同的取代基，并且各&和1? 2獨 立地選自下組：氣、羥基、氣基、疏基、烷基、芳基、烷氧基、燒氣基、燒硫基、芳釀基、芳氣基、 芳硫基或鹵素；或者兩個&可與相鄰的碳原子或兩個R2可與相鄰的碳原子共同形成含有
0-3個選自0、S、N的雜原子的5-7元環(huán)（例如，二個&與
或兩個R# 共同形 成吲哚、氮雜吲哚等結(jié)構(gòu)）；
[0018] R3選自下組：氣、氧、硫、羥基、氣基、疏基、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷氧基、燒 氨基、烷硫基、芳醚基、芳氨基、芳硫基、芳烷基、C1-C6醛基或鹵素；
[0019] R4選自下組：氣、氧、硫、羥基、氣基、疏基、烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、烷氧基、燒 氨基、烷硫基、芳醚基、芳氨基、芳硫基、芳烷基、C1-C6醛基或鹵素。
[0020] 在另一優(yōu)選例中，當R4為氫且R3為氫或氧時
環(huán)不為苯環(huán)；或者當R4為氫， r3為氫或氧且當
I環(huán)為苯環(huán)時，私不為氫。
[0021] 在另一優(yōu)選例中，所述的&或R2各自獨立地選自下組：取代或未取代的C1-C6烷 基、取代或未取代的C2-C6鏈炔基、羥基、取代的或未取代的烷氧基、取代或未取代的_(CH 2) (CH2) n-Ra、取代或未取代的-0- (CH2)m-Ra ;其中，Ra為C1-C3烷基、C1-C3烷氧基
或-(CH丄-C〇-Rb，而Rb為羥基、C1-C6烷氧基、 m和n各自為0-3的整 9' 數(shù)；
[0022] 其中，Rc為H、C1-C3烷基或C1-C3鹵代烷基。
[0023] 其中，所述的"取代的"指所述基團中一個或多個H被選自下組的取代基所取代： 鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4鏈炔基、C3-C6環(huán)烷基、芐基、鹵代 芐基、羥基、氨基、胺基。
[0024] 在另一優(yōu)選例中，所述的化為-R 8_馬或-R fCO-Ri。，其中Rs為二價連接基 團，馬選自下組：C1-C8酯基、C1-C8羧基、-0-C1-C6烷基、-0-C2-C6鏈烯基、羥基、
而心。選自下組：H、羥基、
[0025] 其中，Rc為H、C1-C3烷基或C1-C3鹵代烷基。
[0026] 在另一優(yōu)選例中，Rs為選自下組的二價連接基團：_CH 2_、-CH2-CH2-、-CH = CH-。
[0027] 在另一優(yōu)選例中，所述的化合物具有式A1結(jié)構(gòu)：
[0028]
[0029] 其中，代表雙鍵或單鍵，并且中的兩個不同時為雙鍵，或者 中的兩個不同時為雙鍵。
[0030] Q和W各自獨立地代表C或N，且當各自獨立為N時，各自在環(huán)內(nèi)所處的位置和數(shù) 目可變化；其中所述的"當Q或W各自獨立為N時，位置和數(shù)目可變化"是指：Q或W出現(xiàn)在 各自所在環(huán)上的位置不受限定；Q或W的數(shù)目可為1-3,當數(shù)目大于或等于（多）2時，為保 持六元環(huán)體系，相應(yīng)環(huán)上碳原子數(shù)目減少，Q或W可以各自互相成鍵連接在一起或者各自分 散在環(huán)上不同位置；
[0031] Rp R2和R 3各自獨立地代表氣、羥基、氣基、疏基、烷基、芳基、烷氧基、燒氣基、燒硫 基、芳醚基、芳氨基、芳硫基或鹵素；
[0032] R4代表氧、氣、硫、羥基、氣基、疏基、烷基、芳基、烷氧基、燒氣基、燒硫基、芳釀基、 芳氣基、芳硫基或鹵素；
[0033] 并且當&代表氫且R 3代表氫或氧時，W不為碳或者R 2不為氫。
[0034] 在另一優(yōu)選例中，當心代表氫且1?3代表氫或氧時，1?2不為二個甲氧基（即排除以 下情況：R2數(shù)量為2且同時為甲氧基）。
[0035] 在另一優(yōu)選例中，所述的鹵素是指氟、氯、溴或碘。
[0036] 在另一優(yōu)選例中，所述的C1-C6醛基包括-CH0、-CH2-CH0或類似基團。
[0037] 在另一優(yōu)選例中，所述的藥學上可接受的鹽包括與酸根離子形成的鹽；較佳地，所 述的成鹽的酸根離子包括無機酸根離子、有機酸根離子、和/或鹵素離子。
[0038] 在另一優(yōu)選例中，所述的酸根離子選自下組：硝酸根離子、硫酸根離子、磷酸根離 子、甲磺酸根離子、苯磺酸根離子、醋酸根離子、酒石酸根離子、枸櫞酸根離子、馬來酸根離 子、琥珀酸根離子、檸檬酸根離子、水楊酸根離子、甘油酸根離子、抗壞血酸根離子、氟離子、 氯離子、溴離子、碘離子、或其組合。
[0039] 在另一優(yōu)選例中，C=C=R4中的兩個、=不同時為雙鍵，且中的 N：^C為單鍵，C-R3為雙鍵；
[0040] C.二^_C_^_R4.中的兩個二.不同時為雙鍵，且N二€m_R3中的N 為雙鍵， 〇=：R3為單鍵；或
[0041] 中的兩個=不同時為雙鍵，且N二C二R〇,中的N=C .為單鍵， C:;r^R3為單鍵。
[0042] 在另一優(yōu)選例中，R3中的兩個=不同時為雙鍵，且C-O-R4中的 C=c為雙鍵，C^Ri為單鍵；
[0043] N = C二R3中的兩個二?不同時為雙鍵，且C二^C:二_^4中的C:=C為單鍵， C二為雙鍵；
[0044] N=^C=^R3中的兩個-_不同時為雙鍵，且C=C二^R4中的C=^C為單鍵， c=r4為單鍵。
[0045] 在另一優(yōu)選例中，N-c-R3中的N=C為單鍵，C=R3為雙鍵；和/或
[0046] R3代表氧、氣、硫、烷基或燒氣基。
[0047] 在另一優(yōu)選例中，C=Cdi.4中的C_=C為雙鍵，為單鍵。
[0048] 在另一優(yōu)選例中，1?4代表羥基、氣基、疏基、烷基、芳基、烷氧基、燒氣基、燒疏基、芳 醚基、芳氨基、芳巰基或鹵素。
[0049] 在另一優(yōu)選例中，&和R 2各自獨立地代表羥基、氣基、疏基、烷基、芳基、烷氧基、燒 氣基、燒疏基、芳釀基、芳氣基、芳疏基或鹵素。
[0050] 在另一優(yōu)選例中，所述的H&R
環(huán)、 環(huán)、W、和/或Q分別為實 施例中所制備的具體化合物中相應(yīng)基團。
[0051 ] 在另一優(yōu)選例中，所述七元環(huán)小檗堿類似物選自下組：
[0052]

[0054] 在另一優(yōu)選例中，所述的化合物由實施例2-18中所制備的各具體的式A化合物。
[0055] 在本發(fā)明的第二方面，提供了一種藥物組合物，它包含治療有效量的一種或多種 本發(fā)明第一方面所述的七元環(huán)小檗堿類似物或其藥學上可接受的鹽以及藥學上可接受的 載體。
[0056] 在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物為注射劑、囊劑、片劑、丸劑、散劑或顆粒劑。
[0057] 在本發(fā)明的第三方面，提供了本發(fā)明第一方面所述的七元環(huán)小檗堿類似物及其藥 學上可接受的鹽的用途，它被用于制備預(yù)防或治療腫瘤或癌癥的藥物。
[0058] 在本發(fā)明的第四方面，提供了一種制備藥物組合物的方法，包括步驟：將藥學上可 接受的載體與本發(fā)明第一方面所述的七元環(huán)小檗堿類似物、或其晶型、藥學上可接受的鹽、 水合物、溶劑合物或前藥進行混合，從而形成藥物組合物。
[0059] 在本發(fā)明的第五方面，提供了一種治療方法，包括步驟：
[0060] 給需要治療的對象施用安全有效量的本發(fā)明第一方面所述的七元環(huán)小檗堿類似 物及其藥學上可接受的鹽。
[0061] 在另一優(yōu)選例中，所述的治療方法用于治療腫瘤。
[0062] 在另一優(yōu)選例中，所述的腫瘤包括：肺癌、胃癌、肝癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌、宮頸癌、 前列腺癌、黑色素瘤、白血病細胞。
[0063] 在本發(fā)明的第六方面，提供了一種體外非治療性地抑制腫瘤細胞的方法，包括步 驟：在本發(fā)明第一方面所述的七元環(huán)小檗堿類似物及其藥學上可接受的鹽存在下，培養(yǎng)腫 瘤細胞，從而抑制所述腫瘤細胞的生長。
[0064] 在另一優(yōu)選例中，所述的腫瘤細胞選自下組：肺癌細胞、胃癌細胞、肝癌細胞、結(jié)直 腸癌細胞、乳腺癌細胞、宮頸癌細胞、前列腺癌細胞、黑色素瘤細胞、白血病細胞。
[0065] 應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文（如實施例）中具 體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【具體實施方式】
[0066] 本申請的發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入地研究，通過對化合物的大量篩選和測試，首次 意外發(fā)現(xiàn)了一類結(jié)構(gòu)新穎且抗腫瘤活性顯著提高的化合物。這類化合物的結(jié)構(gòu)如式A所 示。這些式A化合物的體外抗腫瘤活性具有非常顯著的提高（可提高達約10倍或更多）。 在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。
[0067] 具體地，本發(fā)明對于這類以新的飽和七元環(huán)結(jié)構(gòu)為核心骨架的一系列新穎化合物 進行了活性測試，結(jié)果顯示，這些新合成的化合物在多種腫瘤細胞上表現(xiàn)出了極顯著的抗 腫瘤活性，存在很大的潛在開發(fā)價值。例如，當化合物sm38七元環(huán)的不飽和雙鍵被還原成 飽和單鍵后，所形成的化合物（即實施例1中的化合物2)的體外抗腫瘤活性具有非常顯著 的提高，比化合物sm38(即實施例1中的化合物1)提高達10倍。
[0068] 本發(fā)明的七元環(huán)小檗堿類似物及其藥學上可接受的鹽可抑制多種腫瘤細胞生長， 因此可供開發(fā)成為新的治療多種腫瘤或癌癥的藥物。
[0069] 定義
[0070] 如本文所用，"鹵素"指F、Cl、Br、和I。更佳地，鹵原子選自F、C1和Br。
[0071] 如本文所用，"C1-C6烷基"是指包括1-6個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，例如甲 基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、或類似基團。
[0072] 如本文所用，"C1-C6烷氧基"包括1-6個碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基。例如甲 氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、或類似基團。
[0073] 在本發(fā)明中，以下術(shù)語包括未取代形式以及取代形式：氨基、巰基、烷基、芳基、烷 氧基、燒氣基、燒硫基、芳釀基、芳氣基、芳硫基。
[0074] 在本發(fā)明的優(yōu)選例中，烷基、烷氧基、燒氣基、和燒硫基中的碳原子數(shù)為1_1〇個， 較佳地為1-6個，更佳地為1-3個。
[0075] 在本發(fā)明的優(yōu)選例中，所述的芳基、芳醚基、芳氨基、和芳硫基中的碳原子數(shù)為 6-30個，較佳地為6-20個，更佳地為6-10個。
[0076] 如本文所用，術(shù)語"芳烷基"指C1-C10烷基中的1個或多個H原子被C6-10芳基 取代所形成的基團，代表性的例子包括芐基。
[0077] 此外，在本發(fā)明中，術(shù)語"烷基"包括飽和或不飽和、直鏈、支鏈、環(huán)狀的1-10個碳 原子的全碳烷基或其中的1-3個碳原子被氧、氮、硫等雜原子取代的烷基，以及通過1個或 1個以上碳原子連接的芳烷基。此外，所述的烷基是未取代的或取代的。
[0078] 如本文所用，術(shù)語"芳基"包括稠合或非稠合的芳基，通常含有6-30個碳原子，代 表性的芳基包括苯基、萘基，或含氧、氮、硫等雜原子的芳香基團。
[0079] 活性成分
[0080] 如本文所用，術(shù)語"本發(fā)明化合物"指式A所示的化合物，即七元環(huán)小檗堿類似物。 該術(shù)語還包括及式A化合物的各種晶型形式、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物。
[0081] 在本發(fā)明中，
環(huán)和
I環(huán)可以是飽和的或不飽和的，可以是芳環(huán)或非芳 環(huán)，可以含有或不含有雜原子。
[0082] 在本發(fā)明的某些優(yōu)選例中，代表性的R1或R2基團為下列結(jié)構(gòu)式的相應(yīng)基團（以 R1基團為例）：
[0083]
[0084] 在本發(fā)明某些優(yōu)選例中，代表性的R3或R4基團為下列結(jié)構(gòu)式的相應(yīng)基團（以R3 基團為例）：
[0086] 式中，"0 or S"表示該位置可以是0或S。
[0087] 在本發(fā)明某些優(yōu)選例中，代表性的Q或W基團為下列結(jié)構(gòu)式的相應(yīng)基團（以Q基 團為例）：
[0089] 此外，在本發(fā)明的一些優(yōu)選例（包括上述各結(jié)構(gòu)式）中，R為選自下組基團：
[0091] 此外，在本發(fā)明中，式A或式A1化合物或其藥學上可接受的鹽中，一個或多 個H可以為氘代的，即氘在氘取代位置的氘同位素含量至少是大于天然氘同位素含量 (0. 015 % )，較佳地大于30 %，更佳地大于50 %，更佳地大于75 %，更佳地大于95 %，更佳地 大于99%。
[0092] 在另一優(yōu)選例中，式A化合物至少含有1個氘原子，更佳地2個氘原子，更佳地4 個氘原子，更佳地6個氘原子。
[0093] 如本文所用，術(shù)語"藥學上可接受的鹽"指本發(fā)明化合物與酸或堿所形成的適合用 作藥物的鹽。藥學上可接受的鹽包括無機鹽和有機鹽。一類優(yōu)選的鹽是本發(fā)明化合物與酸 形成的鹽。適合形成鹽的酸包括但并不限于：鹽酸、氫溴酸、氫氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機 酸；甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石 酸、檸檬酸、苦味酸、苯甲酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸等有機酸；以及脯 氨酸、苯丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等氨基酸。
[0094] 另一類優(yōu)選的鹽是本發(fā)明化合物與堿形成的鹽，例如堿金屬鹽（例如鈉鹽或鉀 鹽）、堿土金屬鹽（例如鎂鹽或鈣鹽）、銨鹽（如低級的烷醇銨鹽以及其它藥學上可接受的 胺鹽），例如甲胺鹽、乙胺鹽、丙胺鹽、二甲基胺鹽、三甲基胺鹽、二乙基胺鹽、三乙基胺鹽、叔 丁基胺鹽、乙二胺鹽、羥乙胺鹽、二羥乙胺鹽、三羥乙胺鹽，以及分別由嗎啉、哌嗪、賴氨酸形 成的胺鹽。
[0095] 術(shù)語"溶劑合物"指本發(fā)明化合物與溶劑分子配位形成特定比例的配合物。"水合 物"是指本發(fā)明化合物與水進行配位形成的配合物。
[0096] 此外，本發(fā)明化合物還包括式A所示的七元環(huán)小檗堿類化合物的前藥。術(shù)語"前 藥"包括其本身可以是具有生物學活性的或非活性的，當用適當?shù)姆椒ǚ煤?，其在人體內(nèi) 進行代謝或化學反應(yīng)而轉(zhuǎn)變成式A的一類化合物，或式A的一個化合物所組成的鹽或溶液。 所述的前藥包括（但不局限于）所述化合物的羧酸酯、碳酸酯、磷酸酯、硝酸酯、硫酸酯、砜 酯、亞砜酯、氨基化合物、氨基甲酸鹽、偶氮化合物、磷酰胺、葡萄糖苷、醚、乙縮醛等形式。
[0097] 制備方法
[0098] 下面更具體地描述本發(fā)明式A結(jié)構(gòu)化合物的制備方法，但這些具體方法不對本發(fā) 明構(gòu)成任何限制。本發(fā)明化合物還可以任選將在本說明書中描述的或本領(lǐng)域已知的各種合 成方法組合起來而方便地制得，這樣的組合可由本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員容易地進行。
[0099] 通常，在制備流程中，各反應(yīng)通常在惰性溶劑中，在室溫至回流溫度（如0°C~ 80°C，優(yōu)選0°C~50°C )下進行。反應(yīng)時間通常為0. 1小時-60小時，較佳地為0. 5-48小 時。
[0100] 以式II和式III化合物為例，下面的通用制備路線可以用于合成本發(fā)明式A1結(jié) 構(gòu)的化合物：
[0102] 式中，的定義如上所述。
[0103] 具體地，化合物I的七元環(huán)雙鍵被催化氫化（如鈀碳/氫氣或鈀碳/甲酸銨等） 還原得到化合物II，然后再參照與實施例2-18中類似的方法由化合物II得到不同化合物 III。
[0104] 對于化合物I，可用例如中國專利申請?zhí)?01010537594. 1的方法或類似方法進行 制備或購買獲得，例如實施例1中作為原料的化合物1。
[0105] 藥物組合物和施用方法
[0106] 由于本發(fā)明化合物具有優(yōu)異的抗腫瘤活性，因此本發(fā)明化合物及其各種晶型，藥 學上可接受的無機或有機鹽，水合物或溶劑合物，以及含有本發(fā)明化合物為主要活性成分 的藥物組合物可用于治療、預(yù)防以及緩解與腫瘤相關(guān)的疾病。
[0107] 本發(fā)明的藥物組合物包含安全有效量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物或其藥理上可接受 的鹽及藥理上可以接受的賦形劑或載體。其中"安全有效量"指的是：化合物的量足以明顯 改善病情，而不至于產(chǎn)生嚴重的副作用。通常，藥物組合物含有l(wèi)_2000mg本發(fā)明化合物/ 劑，更佳地，含有l(wèi)〇-l〇〇〇mg本發(fā)明化合物/劑。較佳地，所述的"一劑"為一個膠囊或藥片。
[0108] "藥學上可以接受的載體"指的是：一種或多種相容性固體或液體填料或凝膠物 質(zhì)，它們適合于人使用，而且必須有足夠的純度和足夠低的毒性。"相容性"在此指的是組合 物中各組份能和本發(fā)明的化合物以及它們之間相互摻和，而不明顯降低化合物的藥效。藥 學上可以接受的載體部分例子有纖維素及其衍生物（如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素鈉、 纖維素乙酸酯等）、明膠、滑石、固體潤滑劑（如硬脂酸、硬脂酸鎂）、硫酸鈣、植物油（如豆 油、芝麻油、花生油、橄欖油等）、多元醇（如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等）、乳化劑（如 吐溫雜）、潤濕劑（如十二烷基硫酸鈉）、著色劑、調(diào)味劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、防腐劑、無熱原 水等。
[0109] 本發(fā)明化合物或藥物組合物的施用方式?jīng)]有特別限制，代表性的施用方式包括 (但并不限于）：口服、瘤內(nèi)、直腸、腸胃外（靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下）、和局部給藥。
[0110] 用于口服給藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在這些固體劑 型中，活性化合物與至少一種常規(guī)惰性賦形劑（或載體）混合，如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，或 與下述成分混合：(a)填料或增容劑，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b) 粘合劑，例如，羥甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠；（c)保濕 劑，例如，甘油；(d)崩解劑，例如，瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些復合硅 酸鹽、和碳酸鈉；（e)緩溶劑，例如石蠟；（f)吸收加速劑，例如，季胺化合物；(g)潤濕劑，例 如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯；(h)吸附劑，例如，高嶺土；和（i)潤滑劑，例如，滑石、硬脂酸 鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉，或其混合物。膠囊劑、片劑和丸劑中，劑型也 可包含緩沖劑。
[0111] 固體劑型如片劑、糖丸、膠囊劑、丸劑和顆粒劑可采用包衣和殼材制備，如腸衣和 其它本領(lǐng)域公知的材料。它們可包含不透明劑，并且，這種組合物中活性化合物或化合物的 釋放可以延遲的方式在消化道內(nèi)的某一部分中釋放?？刹捎玫陌窠M分的實例是聚合物質(zhì) 和蠟類物質(zhì)。必要時，活性化合物也可與上述賦形劑中的一種或多種形成微膠囊形式。
[0112] 用于口服給藥的液體劑型包括藥學上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿或酊劑。 除了活性化合物外，液體劑型可包含本領(lǐng)域中常規(guī)采用的惰性稀釋劑，如水或其它溶劑，增 溶劑和乳化劑，例知，乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰 胺以及油，特別是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油或這些物質(zhì)的混合物 等。
[0113] 除了這些惰性稀釋劑外，組合物也可包含助劑，如潤濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味 劑、矯味劑和香料。
[0114] 除了活性化合物外，懸浮液可包含懸浮劑，例如，乙氧基化異十八烷醇、聚氧乙烯 山梨醇和脫水山梨醇酯、微晶纖維素、甲醇鋁和瓊脂或這些物質(zhì)的混合物等。
[0115] 用于腸胃外注射的組合物可包含生理上可接受的無菌含水或無水溶液、分散液、 懸浮液或乳液，和用于重新溶解成無菌的可注射溶液或分散液的無菌粉末。適宜的含水和 非水載體、稀釋劑、溶劑或賦形劑包括水、乙醇、多元醇及其適宜的混合物。
[0116] 用于局部給藥的本發(fā)明化合物的劑型包括軟膏劑、散劑、貼劑、噴射劑和吸入劑。 活性成分在無菌條件下與生理上可接受的載體及任何防腐劑、緩沖劑，或必要時可能需要 的推進劑一起混合。
[0117] 本發(fā)明化合物可以單獨給藥，或者與其他藥學上可接受的其他化合物（如抗腫瘤 藥物）聯(lián)合給藥。
[0118] 使用藥物組合物時，是將安全有效量的本發(fā)明化合物適用于需要治療的哺乳動物 (如人），其中施用時劑量為藥學上認為的有效給藥劑量，對于60kg體重的人而言，日給藥 劑量通常為1~2000mg，優(yōu)選50~lOOOmg。當然，具體劑量還應(yīng)考慮給藥途徑、病人健康 狀況等因素，這些都是熟練醫(yī)師技能范圍之內(nèi)的。
[0119] 本發(fā)明的主要優(yōu)點在于：
[0120] (1)本發(fā)明化合物具有優(yōu)異的抑制腫瘤細胞的活性，不僅可在體外顯著抑制腫瘤 細胞，而且優(yōu)選化合物的IC 5。甚至<2nM。
[0121] (2)本發(fā)明化合物具有廣譜的抗腫瘤活性。
[0122] (3)本發(fā)明化合物對于某些腫瘤細胞還具有選擇性的腫瘤細胞抑制活性。
[0123] 下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條 件如 Sambrook 等人，分子克隆：實驗室手冊（New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和 份數(shù)按重量計算。
[0124] 除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意 義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文 中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。
[0125] 實施例1
[0126] 化合物2的制備
[0127]
[0128] 方法一：化合物1 (具體制備參考中國專利申請?zhí)?01010537594. 1的方法）溶于 甲醇，加入催化量的10%鈀碳，通入氫氣，室溫反應(yīng)，至原料反應(yīng)完全。反應(yīng)液硅藻土過濾， 濾液減壓蒸干，得到白色固體2,產(chǎn)率95%。
[0129] 方法二：化合物1 (1. Oeq.)溶于甲醇，加入催化量的10%鈀碳，再加入甲酸銨（10 當量），加熱回流反應(yīng)，至原料反應(yīng)完全。反應(yīng)液硅藻土過濾，濾液減壓蒸干，硅膠柱分離 (PE/EA = 2:1)，得到白色固體2,產(chǎn)率90%。
[0130] 4 NMR (400MHz，CDC13) S 7. 39 - 7. 32 (m，1H)，7. 28 (d，J = 3. 1Hz，1H)，7. 02 (s，1H) ,6. 74 (s, 1H), 6. 40 (s, 1H), 6. 03 (d, J = 1. 4Hz, 2H), 5. 14 - 5. 01 (m, 1H), 4. 04 (s, 3H), 3. 97 ( s, 3H), 3. 24 - 3. 08 (m, 1H), 2. 68 - 2. 51 (m, 2H), 2. 48 - 2. 33 (m, 1H), 1. 97 - 1. 82 (m, 1H). 13C NMR (126MHz, CDC13) S 160. 10, 151. 50, 149. 47, 148. 37, 146. 44, 142. 41，132. 38, 128. 74, 12 2. 24, 119. 47, 118. 90, 109. 18, 108. 30, 105. 57, 101. 37, 61. 65, 56. 90, 41. 60, 30. 00, 28. 77. HRMS (El)計算值 C21H19N05365. 1263 [M]+,測量值 365. 1262.
[0131] 實施例2
[0132] 化合物3a_3d的制備
[0133]
[0134] 3a的制備：化合物2(1. Oeq.)溶于四氯化碳，氮氣保護，加入NBS(氮溴代丁二酰 亞胺，1. 2eq.)，升溫至50°C反應(yīng)5小時，過濾，四氯化碳洗滌，濾液減壓蒸干，硅膠柱分離 (卩￡/^厶=2:1)，得到白色固體33，產(chǎn)率80%。
[0135] :H NMR(400MHz, CDC13) 8 7. 94 - 7. 82 (d, J = 9. 1Hz, 1H), 7. 47 - 7. 38 (d, J =9. 0Hz, 1H), 7. 11 (s, 1H), 6. 76 (s, 1H), 6. 08 (s, 1H), 6. 05 (s, 1H), 5. 17 - 5. 03 (m, 1H) , 4. 03 (s, 3H) , 4. 00 (s, 3H) , 3. 05 - 2. 94 (m, 1H) , 2. 67 - 2. 49 (m, 2H), 2. 39 - 2. 27 (m, 1H)，1. 84 - 1. 72 (m, 1H) ? 13C NMR (126MHz, CDC13) S 159. 09, 152. 24, 149. 23, 148. 72 ,145. 52, 139. 44, 133. 28, 130. 74, 127. 08, 123. 21, 120. 06, 118. 32, 111. 96, 108. 53, 101. 47 ,99. 65, 77. 24, 61. 60, 56. 65, 42. 41, 29. 47, 28. 66. MS (ESI)m/z [M+H]+444. 1.
[0136] 3b的制備：化合物2(1. Oeq.)溶于四氯化碳，氮氣保護，加入NCS(氮氯代丁二酰 亞胺，1. 2eq.)，升溫至80°C反應(yīng)5小時，過濾，四氯化碳洗滌，濾液減壓蒸干，硅膠柱分離 (PE/EA = 2:1)，得到白色固體3b，產(chǎn)率83%。
[0137] 4 NMR (400MHz，CDC13) S 7. 89 - 7. 79 (d，J = 9. 0Hz，1H)，7. 50 - 7. 39 (d，J = 9. 1Hz ,1H), 7. 12 (s, 1H), 6. 77 (s, 1H), 6. 14 - 6. 01 (m, 2H), 5. 13 - 5. 01 (m, 1H), 4. 03 (s, 3H), 4. 00 ( s, 3H), 3. 09 - 2. 93 (m, 1H), 2. 72 - 2. 46 (m, 2H), 2. 43 - 2. 26 (m, 1H), 1. 85 - 1. 75 (m, 1H). 13C NMR (126MHz, CDC13) S 158. 77, 152. 30, 149. 39, 148. 64, 145. 60, 137. 69, 133. 40, 129. 81，12 5. 26, 120. 19, 120. 01，118. 34, 111. 47, 108. 66, 101. 42, 61. 55, 56. 63, 42. 09, 29. 50, 28. 60. HRMS (El)計算值 C21H1SC1N05399. 0874 [M]+,測量值 399. 0882.
[0138] 3c的制備：化合物2(1. Oeq.)溶于四氯化碳，氮氣保護，加入NIS(氮碘代丁二酰 亞胺，1. 2eq.)，升溫至80°C反應(yīng)5小時，過濾，四氯化碳洗滌，濾液減壓蒸干，硅膠柱分離 (PE/EA = 2:1)，得到棕色固體3c，產(chǎn)率30%。
[0139] :H NMR(400MHz, CDC13) 8 7. 86 - 7. 78 (d, J = 9. 0Hz, 1H), 7. 42 - 7. 35 (d, J =9. 1Hz, 1H), 7. 04 (s, 1H), 6. 73 (s, 1H), 6. 07 (s, 1H), 6. 03 (s, 1H), 5. 20 - 5. 10 (m, 1H) , 4. 02 (s, 3H) , 3. 98 (s, 3H) , 3. 05 - 2. 92 (m, 1H) , 2. 65 - 2. 47 (m, 2H), 2. 36 -2. 21 (m, 1H)，1. 82 - 1. 68 (m, 1H) ? 13C NMR(126MHz, CDC13) S 159. 41，152. 00, 148. 84, 145. 3 8, 143. 00, 133. 00, 132. 58, 130. 16, 128. 63, 119. 45, 118. 27, 112. 57, 108. 30, 101. 43, 77. 25, 75. 75, 61. 52, 56. 59, 42. 91, 29. 32. HRMS(EI)計算值 C21H1SIN05491. 0 2 30[M]+,測量值 491. 0229.
[0140] 3d的制備：化合物2 (1. Oeq.)溶于四氯化碳，氮氣保護，加入NFSI (氮氟代雙苯 磺酰胺，1. 2eq.)，升溫至80°C反應(yīng)5小時，過濾，四氯化碳洗滌，濾液減壓蒸干，硅膠柱分離 (?￡/^厶=2:1)，得到白色固體3(：，產(chǎn)率61%。
[0141] 4 MMR(400MHz，DMSO) S 8. 32(s，1H)，7. 39(m，3H), 7. 16(s，1H)，6. 84(s，1H)，6. 0 5 (s, 2H), 4. 13 (s, 1H), 3. 95 (s, 3H), 3. 85 (s, 3H), 2. 96 (s, 2H), 2. 23 - 1. 93 (m, 1H), 1. 66 - 1. 40 (m, 1H). 13C NMR (126MHz, DMSO) 8 160. 20, 156. 45, 149. 20, 148. 12, 146. 07, 133. 37, 128 .25, 120. 53, 116. 13, 110. 57, 110. 36, 101. 73, 79. 64, 61. 37, 56. 58, 30. 07, 25. 79. HRMS(EI) 計算值 C21H1SFN05383. 1169 [M]+,測量值 383. 1172.
[0142] 實施例3
[0143] 化合物4的制備
[0144]
[0145] 化合物3a(l. Oeq.)溶于二氯甲烷，加入10%溶液體積的濃鹽酸，攪拌反應(yīng)2小時， 反應(yīng)液加水稀釋，二氯甲烷萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓 蒸干，得到白色固體4,產(chǎn)率93%。
[0146] 4 MMR(400MHz，CDC13) S 13. 48(s，1H)，7. 52 - 7. 41(m，1H)，7. 41 - 7. 32(m，1H)，7 .12 (s, 1H),6. 75(s, 1H),6. 12 (s, 1H),6. 05(s, 1H),5. 11-4. 94 (m, 1H),4. 01(s, 3H), 3. 12- 2. 96 (m, 1H) ,2.73 - 2. 58 (m, 1H), 2. 59 - 2. 47 (m, 1H), 2. 36 - 2. 18 (m, 1H), 1. 88 -1. 74 (m, 1H). 13C NMR (126MHz, CDC13) S 164. 60, 150. 46, 148. 95, 145. 99, 145. 69, 138. 14, 13 3. 14, 129. 22, 126. 35, 118. 31, 116. 41, 112. 09, 110. 97, 108. 57, 102. 76, 101. 57, 77. 24, 56. 53,41. 90, 29. 34, 28. 55. MS (ESI) m/z [M+H] +430. 2.
[0147] 實施例4
[0148] 化合物5a_5f的制備
[0149]
[0150] 5a的制備：化合物4(1.0eq.)溶于丙酮，加入無水碳酸鉀（2.0eq.)，溴乙酸甲酯 (2. Oeq.)，氮氣保護，升溫至60°C反應(yīng)5小時，反應(yīng)液加水稀釋，過濾，水洗，干燥，得到微黃 白色固體5a，產(chǎn)率77%。
[0151] 4 匪R(400MHz，CDC13) S 7. 93 - 7. 86(d，J = 9. 1Hz，1H)，7. 47 - 7. 35(d，J = 9. 0Hz, 1H), 7. 10 (s, 1H), 6. 75 (s, 1H), 6. 15 - 5. 96 (m, 2H), 5. 13 - 5. 01 (m, 1H), 4. 89 - 4. 68 (m, 2H), 3. 97 (s, 3H), 3. 88 (s, 3H), 3. 08 - 2. 87 (m, 1H), 2. 68 - 2. 45 (m, 2H), 2. 41 - 2. 24(m, 1H), 1. 86 - 1. 70(m, 1H). 13C 匪R(126MHz, CDC13) S 169. 73, 158. 92, 151. 92, 14 8. 76, 146. 45, 145. 54, 139. 63, 133. 26, 130. 65, 126. 98, 123. 95, 120. 05, 118. 22, 111. 9 3. 108. 50, 101. 47, 99. 43, 70. 01，56. 66, 52. 15, 42. 43, 29. 44, 28. 69. HRMS (El)計算值 C23H2QBrN07501. 0423 [M]+,測量值 501. 0408.
[0152] 5b的制備：化合物4(1. Oeq.)溶于DMF(二甲基甲酰胺），冰浴降溫，氮氣保護，加 入氫化鈉（2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)10分鐘，再加入溴乙烷（2. Oeq.)，四丁基碘化銨（0. leq.)， 然后升溫至60°C反應(yīng)5小時，反應(yīng)液加水稀釋，乙酸乙酯萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化 鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離（PE/EA = 1:1)，得到微黃白色固體5b，產(chǎn)率 33%〇
[0153] 4 匪R(400MHz，CDC13) S 7. 89 - 7. 83(d，J = 9. 0Hz，1H)，7. 46 - 7. 37(d，J = 9. 0Hz, 1H), 7. 11 (s, 1H), 6. 75 (s, 1H), 6. 12 - 6. 01 (m, 2H), 5. 14 - 5. 04 (m, 1H), 4. 28 - 4. 10(m,2H),3.98(s,3H),3.05-2.92 (m, lH),2.67-2.47 (m, 2H),2.4〇-2. 27(m, 1H), 1. 84 - 1. 70(m, 1H), 1. 58 - 1. 53(m, 3H). 13C NMR(126MHz, CDC13) S 159. 11，15 2. 49, 148. 63, 145. 51, 139. 39, 133. 27, 130. 83, 127. 18, 122. 98, 120. 27, 118. 49, 111. 96, 1 08. 48, 101. 44, 99. 63, 77. 22, 70. 06, 56. 77, 42. 35, 29. 47, 28. 71, 15. 77. HRMS (El)計算值 C22H2QBrN05457. 0525 [M]+,測量值 457. 0533.
[0154] 5c的制備：化合物4 (1. Oeq.)溶于DMF，冰浴降溫，氮氣保護，加入氫化鈉 (2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)10分鐘，再加入烯丙基溴（2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)5小時。反應(yīng)液加水稀 釋，乙酸乙酯萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分 離（PE/EA = 5:1)，得到白色固體5c，產(chǎn)率54%。
[0155] 4 匪R(400MHz，CDC13) S 7. 93 - 7. 83(d，J = 9. 1Hz，1H)，7. 47 - 7. 38(d，J = 9. 0Hz, 1H), 7. 11 (s, 1H), 6. 75 (s, 1H), 6. 41 - 6. 24 (m, 1H), 6. 14 - 6. 01 (m, 2H), 5. 51 - 5. 39 (d, J = 17. 2Hz, 1H), 5. 32 - 5. 23 (m, 1H) ,5.16- 5. 05 (m, 1H), 4. 75 - 4. 61 (d, J =6. OHz, 2H) , 3. 98 (s, 3H) , 3. 05 - 2. 92 (m, 1H) , 2. 67 - 2. 49 (m, 2H) , 2. 40 -2. 24(m, 1H), 1. 84 - 1. 71(m, 1H). 13C 匪R(126MHz, CDC13) S 159. 05, 152. 39, 148. 70, 14 8. 05, 145. 51，139. 45, 134. 65, 133. 28, 130. 80, 127. 14, 123. 20, 120. 29, 118. 40, 117. 6 6, 111. 95, 108. 50, 101. 45, 99. 58, 75. 21，56. 73, 42. 37, 29. 48, 28. 72. HRMS(El)計算值 C23H20BrN05469. 0525 [M]+，測量值 469. 0506.
[0156] 5d的制備：化合物4 (1. Oeq.)溶于DMF，冰浴降溫，氮氣保護，加入氫化鈉 (2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)10分鐘，再加入異戊烯基溴（2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)5小時。反應(yīng)液加水稀 釋，乙酸乙酯萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分 離（PE/EA = 4:1)，得到白色固體5d，產(chǎn)率50%。
[0157] :H NMR(400MHz, CDC13) 8 7. 91 - 7. 79 (d, J = 9. 0Hz, 1H), 7. 45 - 7. 35 (d, J = 9.3Hz，lH)，7.16-7.06(s，lH)，6.77-6.71(s，lH)，6.13-5.97(m，2H)，5.85-5.72(m, lH),5.18-5.00(m, lH),4.73-4.58 (m, 2H),3.98(s,3H),3.07-2. 93 (m, 1H)，2. 69 - 2. 49 (m, 2H), 2. 41 - 2. 21 (m, 1H)，1. 81 (s, 3H)，1. 78 (s, 3H) ? 13C NMR (126MHz，CDC13) S 159. 05, 152. 56, 148. 66, 148. 37, 145. 49, 139. 39, 137. 68, 133. 28, 13 0. 77, 127. 21, 122. 98, 121. 04, 120. 43, 118. 29, 111. 96, 108. 47, 101. 43, 99. 53, 70. 74, 56. 69, 42. 29, 29. 48, 28. 74, 25. 88, 18. 10. HRMS (El)計算值 C25H24BrN05497. 0838 [M]+,測量值 497. 0840.
[0158] 5e的制備：化合物4 (1. Oeq.)溶于DMF，冰浴降溫，氮氣保護，加入氫化鈉 (2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)10分鐘，再加入二氟芐溴（2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)5小時。反應(yīng)液加水稀 釋，乙酸乙酯萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分 離（PE/EA = 5:1)，得到白色固體5e，產(chǎn)率54%。
[0159] :H NMR(400MHz, CDC13) 8 8. 01 - 7. 83 (m, 1H), 7. 76 - 7. 56 (m, 1H) ,7.53-7.34(m,2H),7.24 - 7.07 (m,2H),6.76(s,lH),6.16-5.97(m,2H),5.21-4. 9 8 (m, 3H) , 3. 97 (s, 3H) , 3. 11 - 2. 9 0 (m, 1H) , 2. 71 - 2. 48 (m, 2H) , 2. 44 -2. 21 (m, 1H), 1.89 - 1.70 (m, 1H).13C NMR (126MHz, CDC13) S 159.01，152.28, 148.76, 147.42 ，145. 55, 139. 59, 133. 26, 130. 78, 127. 07, 124. 50, 123. 69, 120. 37, 118. 22, 117. 79, 116. 82 ，111. 94, 108. 51，101. 48, 99. 54, 74. 19, 56. 61，42. 40, 29. 47, 28. 76. HRMS (El)計算值 C27H20 BrF2N05555. 0493 [M]+,測量值 555. 0491.
[0160] 5f的制備：化合物4 (1. Oeq.)溶于DMF，冰浴降溫，氮氣保護，加入氫化鈉 (2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)10分鐘，再加入1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基）乙烷（2. Oeq.)，四丁基 碘化銨（〇. leq.)，然后升溫至60°C反應(yīng)5小時，反應(yīng)液加水稀釋，乙酸乙酯萃取，分離有機 相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離（PE/EA = 3:1)，得到微黃 白色固體5f，產(chǎn)率19%。
[0161] 4 匪R(400MHz，CDC13) S 7. 92 - 7. 82(d，J = 9. 0Hz，1H)，7. 45 - 7. 36(d，J = 9. 1Hz, 1H), 7. 10 (s, 1H), 6. 75 (s, 1H) ,6.14- 6. 00 (m, 2H) ,5.14- 5. 02 (m, 1H), 4. 37 -4. 26 (t, J = 5. 3Hz, 1H), 4. 07 - 4. 00 (t, J = 5. 3Hz, 2H), 3. 98 (s, 3H), 3. 84 - 3. 76 (dd, J =5. 6, 3. 8Hz, 2H) , 3. 64 - 3. 56 (dd, J = 5.8,3.7Hz,2H),3.41(s,3H),3.07-2. 91 (m, 1H) , 2. 69 - 2. 46 (m, 2H) , 2. 39 - 2. 2 7 (m, 1H) , 1. 84 - 1. 7 2 (m, 1H) . 13C NMR (126MHz, CDC13) S 158. 55, 151. 84, 148. 24, 147. 89, 145. 06, 138. 93, 132. 79, 130. 29, 12 6. 68, 122. 71, 119. 62, 117. 96, 111. 48, 108. 02, 100. 97, 99. 14, 72. 67, 71. 54, 70. 19, 69. 98, 58. 57, 56. 24, 41. 88, 29. 24, 28. 99, 28. 23. HRMS(EI)計算值 C25H26BrN07531. 0893[M]+,測量 值 531. 0895.
[0162] 實施例5
[0163] 化合物6的制備
[0164]
[0165] 化合物5a(l. Oeq.)溶于甲醇，加入氫氧化鈉（4. Oeq.)水溶液，升溫至80°C反應(yīng) 3小時。反應(yīng)液減壓蒸除甲醇，加水稀釋，乙酸乙酯萃取除雜，水相再用稀鹽酸調(diào)PH至3左 右，乙酸乙酯萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，得到微黃 白色固體6,產(chǎn)率98%。
[0166] 4 匪R(400MHz，CDC13) S 8. 00 - 7. 91 (d，J = 9. 1Hz，1H)，7. 56 - 7. 46(d，J = 9. 1Hz, 1H), 7. 10 (s, 1H), 6. 77 (s, 1H), 6. 12 - 6. 02 (m, 2H), 5. 21 - 5. 11 (m, 1H), 5. 02 -4. 7 9 (m, 2H) , 4. 02 (s, 3H) , 3. 16 - 2. 9 9 (m, 1H) , 2. 72 - 2. 6 1 (m, 1H) , 2. 56 -2. 43(m, 1H), 2. 40 - 2. 26(m, 1H), 1. 90 - 1. 75(m, 1H). 13C 匪R(126MHz, CDC13) S 171. 27, 1 60. 32, 150. 62, 149. 10, 146. 99, 145. 72, 139. 53, 133. 24, 130. 64, 126. 36, 123. 80, 118. 9 4, 117. 14, 111. 88, 108. 64, 101. 56, 72. 23, 56. 51, 43. 44, 29. 35, 28. 56. HRMS(El)計算值 C22HlsBrN07487. 0267 [M]+,測量值 487. 0285.
[0167] 實施例6
[0168] 化合物7的制備
[0169]
[0170] 化合物6(1. Oeq.)溶于二氯甲烷，氮氣保護，加入EDCI (1-乙基-(3-二甲基氨基 丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽，1.2eq.)，DIPEA (二異丙基乙基胺，1.2eq.)，H0Bt(l-羥基苯并 三唑，0. leq. )，N_甲基哌嗪（1. 2eq.)，攪拌反應(yīng)10小時。反應(yīng)液加水稀釋，二氯甲烷萃取， 分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離（CH 2Cl2/MeOH = 15:1)，得到白色固體7,產(chǎn)率35%。
[0171] :H NMR(400MHz, CDC13) 8 8. 00 - 7. 85 (d, J = 9. 0Hz, 1H), 7. 48 - 7. 36 (d, J =9. 1Hz, 1H), 7. 09 (s, 1H), 6. 75 (s, 1H), 6. 16 - 5. 96 (d, J = 11. 7Hz, 2H), 5. 12 - 5. 00 (m, 1H), 4. 89 - 4. 67 (m, 2H), 3. 96 (s, 5H), 3. 76 (s, 2H), 3. 06 - 2. 91 (m, 1H), 2. 68 - 2. 45(m, 6H), 2. 38(s, 3H), 2. 32 - 2. 25(m, 1H), 1. 89 - 1. 68(m, 1H). 13C NMR(126MHz, CDC13) 8 167. 05, 158. 84, 152. 03, 148. 76, 147. 11, 145. 55, 139. 54, 133. 23, 130. 65, 127. 01, 1 23. 96, 119. 99, 118. 15, 111. 93, 108. 51, 101. 47, 99. 56, 73. 33, 56. 61, 55. 24, 54. 62, 46-? 01, 45. 28, 42. 41, 41. 74, 29. 44, 28. 7. HRMS(EI)計算值 C27H2SBrN306569. 1161 [M]+,測量值 569. 1135.
[0172] 實施例7
[0173] 化合物8的制備
[0174]
[0175] 化合物6(1. Oeq.)溶于四氫呋喃，氮氣保護，冰浴降溫，加入硼烷四氫呋喃溶液 (2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)4小時。反應(yīng)液加飽和氯化銨水溶液淬滅，乙酸乙酯萃取，分離有機相， 水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離（CH 2Cl2/MeOH = 20:1)，得到 白色固體8,產(chǎn)率60%。
[0176] 4 匪R (400MHz，CDC13) S 7. 96 - 7. 85 (d，J = 9. 0Hz，1H)，7. 50 - 7. 39 (d，J = 9. 1Hz, 1H), 7. 10 (s, 1H), 6. 75 (s, 1H), 6. 15 - 6. 01 (d, J = 12. 2Hz, 2H), 5. 79 (s, 1H), 5. 21 - 5. 04(m, 1H), 4. 42(brs, 2H), 3. 99 (s, 3H), 3. 92 (s, 2H), 3. 09 - 2. 93m, 1H), 2. 69 -2. 5 7 (m, 1H) , 2. 57 - 2. 41 (m, 1H) , 2. 40 - 2. 2 2m, 1H) , 1.90 - 1. 70 (m, 1H) . 13C NMR(101MHz, CDC13) S 159. 61，151. 43, 148. 39, 147. 97, 145. 12, 138. 99, 132. 85, 130. 43, 12 6. 41，122. 57, 118. 63, 118. 17, 111. 47, 108. 10, 101. 05, 100. 06, 61. 10, 56. 07, 42. 42, 28. 98 ，28. 14. HRMS(EI)計算值 C22H2(]BrN06473. 0474[M]+,測量值 473. 0447.
[0177] 實施例8
[0178] 化合物9的制備
[0179]
[0180] 化合物8(1. Oeq.)溶于二氯甲烷，氮氣保護，加入對甲苯磺酰氯（1.2eq.)， DMAP (二甲氨基吡啶，0. 2eq.)，三乙胺（1. 2eq.)，攪拌反應(yīng)3小時。反應(yīng)液加水稀釋，二氯 甲烷萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離（PE/ EA = 3:1)，得到微黃色油狀物9,產(chǎn)率72%。
[0181] 4 匪R(400MHz，CDC13) S 7. 91 - 7. 86(d，J = 9. 1Hz，1H)，7. 86 - 7. 80(d，J = 7. 9Hz, 2H), 7. 43 - 7. 38 (d, J = 9. 0Hz, 1H), 7. 38 - 7. 31 (d, J = 7. 9Hz, 2H), 7. 10 (s, 1H), 6. 75(s，lH)，6.10-6.02(m，2H),5.08 - 4.94(m，lH)，4.56 - 4.47(t，J = 5.3Hz，2H)，4.42- 4. 33 (t, J = 5. 1Hz, 2H), 3. 96 (s, 3H), 3. 02 - 2. 92 (m, 1H), 2. 66 - 2. 57 (m, 1H) ,2.57-2. 49 (m, 1H), 2. 34 - 2. 20 (m, 1H), 1. 84 - 1. 71 (m, 1H). 13C NMR(101MHz, CDC13) 8 158 .48, 151. 74, 148. 31, 147. 02, 145. 10, 144. 14, 139. 00, 132. 74, 130. 26, 129. 29, 127 .57, 126. 56, 123. 24, 119. 46, 118. 07, 111. 48, 108. 05, 101. 02, 99. 19, 70. 89, 68. 9 9, 56. 28, 41. 94, 28. 98, 28. 20, 21. 20. HRMS(EI)計算值 C29H26BrN0sS 627. 0563[M]+,測量值 627. 0541.
[0182] 實施例9
[0183] 化合物10a-10c的制備
[0184]
[0185] 10a的制備：化合物9(1. Oeq.)溶于四氫呋喃，氮氣保護，加入N-甲基哌嗪 (1. 2eq.)，攪拌反應(yīng)10小時。反應(yīng)液減壓蒸除四氫呋喃，加水稀釋，二氯甲烷萃取，分離有 機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離（CH 2Cl2/MeOH = 20:1)， 得到微黃色固體l〇a，產(chǎn)率30%。
[0186] 4 NMR (400MHz，CDC13) S 7. 98 - 7. 80 (d，J = 9. 0Hz，1H)，7. 52 - 7. 35 (d，J = 9. 1Hz ,1H), 7. 07 (s, 1H), 6. 73 (s, 1H), 6. 19 - 5. 97 (m, 2H), 5. 10 - 4. 96 (m, 1H), 4. 31 (s, 2H), 3. 97 ( s, 3H), 3. 55 - 2. 85 (m, 11H), 2. 82 - 2. 42 (m, 5H), 2. 34 - 2. 19 (m, 1H), L 86 - 1. 69 (m, 1H). 13C 匪R(101MHz, CDC13) S 158. 60, 151. 63, 148. 34, 145. 11，138. 99, 132. 69, 130. 20, 126. 47， 123. 30, 119. 44, 117. 65, 111. 45, 108. 06, 101. 04, 99. 36, 68. 95, 56. 83, 56. 14, 52. 70, 50 ? 14, 43. 71, 41. 99, 28. 94, 28. 21. HRMS(ESI)計算值 C27H31BrN305556. 1442[M+H]+,測量值 556. 1458.
[0187] 10b的制備：化合物9(1. Oeq.)溶于四氫呋喃，氮氣保護，加入二甲胺鹽酸鹽 (1.2eq.)，三乙胺（1.2eq.)，攪拌反應(yīng)10小時。反應(yīng)液減壓蒸除四氫呋喃，加水稀釋，二 氯甲烷萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離 (CH 2Cl2/MeOH = 20:1)，得到微黃色固體10b，產(chǎn)率33%。
[0188] :H NMR(400MHz, CDC13) 8 7. 97 - 7. 87 (d, J = 9. 0Hz, 1H), 7. 48 - 7. 39 (d, J =9. 0Hz, 1H), 7. 07 (s, 1H), 6. 73 (s, 1H), 6. 12 - 5. 97 (m, 2H) , 5. 08 - 4. 94 (dd, J =13. 4, 5. 4Hz, 1H), 4. 63 - 4. 44 (t, J = 4. 0Hz, 2H), 4. 00 (s, 3H), 3. 69 (s, 2H), 3 .14 (s, 6H) , 3. 07 - 2. 93 (m, 1H), 2. 68 - 2. 56 (m, 1H), 2. 57 - 2. 43 (m, 1H) , 2. 31 -2. 21 (m, 1H), 1. 87 - 1. 69(m, 1H). 13C 匪R(101MHz, CDC13) S 158. 72, 151. 43, 148. 44, 14 5. 47, 145. 17, 139. 04, 132. 65, 130. 13, 126. 27, 123. 94, 118. 96, 117. 56, 111. 43, 108. 0 8, 101. 08, 99. 73, 67. 25, 56. 95, 56. 01, 43. 02, 42. 18, 28. 90, 28. 19. HRMS (ESI)計算值 C24H26BrN205501. 1020[M+H]+,測量值 501. 1034.
[0189] 10c的制備：化合物9(1.Oeq.)溶于四氫呋喃，氮氣保護，加入甲胺醇溶液 (1. 2eq.)，攪拌反應(yīng)10小時。反應(yīng)液減壓蒸除四氫呋喃，加水稀釋，二氯甲烷萃取，分離有 機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離（CH 2Cl2/MeOH = 20:1)， 得到微黃色固體l〇c，產(chǎn)率69%。
[0190] :H NMR (400MHz, CDC13) 8 10.57 - 10.21(m, lH),8.0〇-7.89(d,J = 9. 0Hz, 1H), 7. 53 - 7. 42 (d, J = 9. 0Hz, 1H), 7. 09 (s, 1H), 6. 75 (s, 1H), 6. 15 - 5. 99 (d, J =11. 6Hz, 2H), 5. 09 - 4. 96 (m, 1H) , 4. 71 - 4. 52 (m, 2H) , 3. 99 (s, 3H), 3. 42 (s, 2H), 3. 12 - 2. 97 (m, 1H), 2. 88 (s, 3H), 2. 70 - 2. 57 (m, 1H), 2. 56 - 2. 42 (m, 1H), 2. 34 -2. 20(m, 1H), 1. 85 - 1. 77 (m, 1H). 13C NMR(101MHz, CDC13) S 159. 88, 151. 15, 148. 60, 145. 97, 145. 25, 138. 94, 132. 72, 130. 34, 126. 00, 123. 63, 118. 21, 117. 67, 111. 45, 1 08. 14, 101. 13, 68. 94, 55. 94, 49. 17, 42. 82, 33. 14, 28. 88, 28. 13. HRMS (ESI)計算值 C23H24BrN20548 7 . 08 6 3 [M+H]+,測量值 487. 0854.
[0191] 實施例10
[0192] 化合物11的制備
[0193]
[0194] 化合物3a(l. Oeq.)溶于DMF，加入三苯基磷（0? leq.)，無水碳酸鉀（2. Oeq.)，丙稀 酸甲酯（2. Oeq.)，氮氣保護，加入醋酸鈀（0. 05eq.)，升溫至100°C反應(yīng)10小時。反應(yīng)液加 水稀釋，乙酸乙酯萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠 柱分離（PE/EA = 2:1)，得到微黃色固體11，產(chǎn)率78%。
[0195] 4 匪R(400MHz，CDC13) S 7. 78 - 7. 71 (d，J = 9. 1Hz，1H)，7. 65 - 7. 58(d，J = 16. 2Hz, 1H), 7. 40 - 7. 34(d, J = 9. 1Hz, 1H), 6. 81 - 6. 71 (d, J = 3. 2Hz, 2H), 6. 11-5. 97 (m, 3H), 5. 17 - 5. 06 (m, 1H), 4. 04 (s, 3H), 3. 99 (s, 3H), 3. 78 (s, 3H) ,3.08-2. 92 (m, 1H) , 2. 70 - 2. 48 (m, 2H) , 2. 38 - 2. 2 7 (m, 1H) , 1. 90 - 1. 76 (m, 1H) . 13C NMR(126MHz, CDC13) S 167. 23, 159. 11，151. 81，149. 68, 148. 86, 145. 90, 141. 63, 133. 48, 1 30. 13, 125. 69, 122. 68, 120. 23, 120. 05, 118. 28, 111. 64, 109. 93, 108. 77, 101. 46, 77. 19, 6 1. 57, 56. 67, 51. 63, 41. 27, 29. 54, 29. 00. HRMS(EI)計算值 C25H23N07449. 1475[M]+,測量值 449. 1476.
[0196] 實施例11
[0197] 化合物12的制備
[0198]
[0199] 化合物11(1. Oeq.)溶于甲醇，加入催化量的10%鈀碳，再加入甲酸銨（10當量）， 加熱回流反應(yīng)，至原料反應(yīng)完全。反應(yīng)液硅藻土過濾，濾液減壓蒸干，硅膠柱分離（PE/EA = 2:1)，得到白色固體12,產(chǎn)率98%。
[0200] :H NMR(400MHz, CDC13) 8 7. 55 - 7. 45 (m, 1H), 7. 45 - 7. 36 (m, 1H), 6. 83 (s ,1H), 6. 76 (s, 1H) ,6.14- 5. 98 (m, 2H), 5. 12 - 4. 98 (m, 1H), 4. 04 (s, 3H), 3. 98 (s, 3H ),3. 64 (s, 3H) ,3.23- 3. 10 (m, 1H), 3. 04 - 2. 84 (m, 2H) ,2.65 - 2. 56 (m, 1H), 2. 55 - 2. 36 (m, 3H), 2. 36 - 2. 22 (m, 1H), 1. 80 - 1. 72 (m, 1H). 13C NMR(126MHz, CDC13) 8 173 .10, 159. 28, 151. 52, 149. 92, 148. 43, 145. 93, 139. 09, 133. 49, 131. 43, 126. 40, 12 0. 69, 119. 08, 118. 38, 111. 07, 109. 85, 108. 78, 101. 38, 77. 19, 61. 48, 56. 73, 51. 67 ,41. 18, 34. 31, 29. 54, 28. 62, 23. 79. HRMS(EI)計算值 C25H25N07451. 1631 [M]+,測量值 451. 1637.
[0201] 實施例12
[0202] 化合物13的制備
[0203]
[0204] 化合物11(1. Oeq.)溶于甲醇，加入氫氧化鈉（4. Oeq.)水溶液，升溫至80°C反應(yīng) 3小時。反應(yīng)液減壓蒸除甲醇，加水稀釋，乙酸乙酯萃取除雜，水相再用稀鹽酸調(diào)PH至3左 右，過濾，水洗，干燥，得到微黃白色固體13,產(chǎn)率69%。
[0205] :H NMR (40 0MHz, CDCl3)87.8〇-7.74(d,J = 9.1Hz,lH),7.74- 7. 66 (m, 1H), 7. 41 - 7. 35 (d, J = 9. 1Hz, 1H), 6. 80 - 6. 73 (m, 2H), 6. 11 - 6. 00 (m, 3H), 5. 22 - 5. 03 (m, 1H), 4. 04 (s, 3H), 3. 99 (s, 3H) ,3.07 - 2. 95 (m, 1H), 2. 69 - 2. 50 (m, 2H), 2. 40 -2. 27 (m, 1H)，1. 90 - 1. 78 (m, 1H) ? 13C NMR(126MHz, CDC13) S 170. 92, 159. 13, 151. 88, 149. 7 0, 149. 00, 145. 95, 143. 80, 142. 31, 133. 55, 129. 89, 125. 49, 121. 56, 120. 11, 118. 34, 111 ? 60, 109. 73, 108. 85, 101. 52, 77. 19, 61. 58, 56. 65, 41. 37, 29. 54, 29. 05. HRMS (El)計算值 C24H21N07435. 1318[M]+,測量值 435. 1292.
[0206] 實施例13
[0207] 化合物14的制備
[0208]
[0209] 化合物12(1. Oeq.)溶于甲醇，加入氫氧化鈉（4. Oeq.)水溶液，升溫至80°C反應(yīng) 3小時。反應(yīng)液減壓蒸除甲醇，加水稀釋，乙酸乙酯萃取除雜，水相再用稀鹽酸調(diào)PH至3左 右，過濾，水洗，干燥，得到白色固體14,產(chǎn)率83%。
[0210] 4 MMR(400MHz，CDC13) S 7. 55 - 7. 44(m，1H)，7. 44 - 7. 36(m，1H)，6. 83(s，1H) ,6. 74 (s, 1H), 6. 11 - 5. 99 (m, 2H), 5. 12 - 4. 98 (m, 1H), 4. 03 (s, 3H), 3. 98 (s, 3H) ,3.25- 3. 11 (m, 1H), 3. 05 - 2. 84 (m, 2H), 2. 65 - 2. 37 (m, 4H), 2. 37 - 2. 20 (m, 1H), 1. 82 - 1. 66(m, 1H). 13C NMR(126MHz, CDC13) S 177. 22, 159. 33, 151. 54, 149. 91，148. 47, 145. 94, 13 9. 18, 133. 54, 131. 33, 126. 29, 120. 62, 119. 00, 118. 44, 110. 98, 109. 78, 108. 81, 101. 40, 61 ? 49, 56. 71, 41. 28, 34. 08, 29. 53, 28. 62, 23. 60. HRMS(EI)計算值 C24H23N0743 7. 147 5[M]+,測 量值 437. 1465.
[0211] 實施例14
[0212] 化合物15的制備
[0213]
[0214] 化合物13(1.0eq.)溶于二氯甲燒，氮氣保護，加入EDCI(1.2eq.)， DIPEA(1. 2eq. )，H0Bt(0. leq. )，N-甲基哌嗪（1. 2eq.)，攪拌反應(yīng)10小時。反應(yīng)液加水稀 釋，二氯甲烷萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分 離（CH 2Cl2/MeOH = 30:1)，得到黃色固體15,產(chǎn)率52%。
[0215] :H NMR(400MHz, CDC1 3) 87. 73-7. 54(m,2H), 7.37- 7. 2 4 (m, 1H) , 6. 73 (s, 2H) , 6. 21 - 5. 86 (m, 3H) , 5. 2 1 - 4. 99 (m, 1H) , 4. 07 - 3. 91 (m, 6H) ,3.87 - 3. 68 (m, 1H) ,3.67 - 3. 48 (m, 1H) ,3.32 - 3. 05 (m, 2H), 3. 04 - 2. 91 (m, 1H), 2. 90 - 2. 68 (m, 1H), 2. 68 - 2. 53 (m, 2H), 2. 54 - 2. 09 (m, 9H), 1. 94 -1. 64(m, 1H). 13C NMR(101MHz, CDC13) S 165. 24, 159. 21，151. 84, 149. 53, 148. 53, 145. 96, 14 0. 07, 138. 26, 133. 35, 130. 78, 126. 71，124. 63, 120. 23, 119. 86, 118. 30, 111. 69, 111. 01，10 8. 46, 101. 40, 77. 30, 61. 54, 56. 66, 45. 83, 41. 17, 29. 60, 28. 79. HRMS (El)計算值 C29H31N3065 17. 2213 [M]+,測量值 517. 2206.
[0216] 實施例15
[0217] 化合物16的制備
[0218]
[0219] 化合物14(1.0eq.)溶于二氯甲燒，氮氣保護，加入EDCI(1.2eq.)， DIPEA(1. 2eq. )，H0Bt(0. leq. )，N-甲基哌嗪（1. 2eq.)，攪拌反應(yīng)10小時。反應(yīng)液加水稀 釋，二氯甲烷萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分 離（〇1 2(：12/^011 = 20:1)，得到微黃白色固體16，產(chǎn)率77%。
[0220] 4 匪R (400MHz，CDC13) S 7. 61 - 7. 48 (d，J = 9. 0Hz，1H)，7. 44 - 7. 35 (d，J = 9. 0Hz, 1H), 6. 84 (s, 1H), 6. 74 (s, 1H), 6. 14 - 5. 92 (m, 2H), 5. 12 - 4. 95 (m, 1H), 4. 01 (s, 3H), 3. 96 (s, 3H), 3. 71 - 3. 50 (m, 2H), 3. 29 - 3. 15 (m, 2H), 3. 15 - 3. 06 (m, 1H), 3. 03 -2. 83 (m, 2H), 2. 64 - 2. 52 (m, 1H) ,2.52- 2. 41 (m, 2H), 2. 40 - 2. 33 (m, 2H) ,2.33-2. 19(m, 7H), 1. 82 - 1. 63(m, 1H). 13C NMR(101MHz, CDC13) S 170. 36, 159. 22, 151. 55, 149. 81 ,148. 43, 145. 99, 138. 74, 133. 39, 131. 41, 126. 51, 120. 64, 119. 32, 118. 42, 111. 66, 110. 02 ,108. 75, 101. 44, 77. 28, 76. 87, 61. 47, 56. 69, 54. 91, 54. 47, 45. 82, 45. 05, 41. 17, 33. 60, 29 ? 58, 28. 61, 24. 24. HRMS(EI)計算值 C29H33N306519. 2369[M]+,測量值 519. 2370.
[0221] 實施例16
[0222] 化合物17的制備
[0223]
[0224] N，N-二甲基甲酰胺溶液，氮氣保護，冰浴降溫，加入三氯氧磷（10.0 eq.)，攪拌反 應(yīng)2小時，加入化合物2 (1. Oeq.)的DMF溶液，攪拌反應(yīng)10小時。反應(yīng)液加水稀釋，10%氫 氧化鈉溶液調(diào)PH至堿性，水稀釋，過濾，固體水洗，干燥，得到黃色固體產(chǎn)物17,產(chǎn)率95%。
[0225] 4匪尺（40冊1^，〇0(：13)5 9.62(8，11〇,9.11-9.00((1，了 = 9.2他，11〇,7.49-7.37(d，J = 9.2Hz，1H)，6.88 (s，lH)，6.83 (s，lH)，6.09 (s，2H)，5. 11-5.00 (dd，J = 13. 3, 5. 9Hz, 1H), 4. 02 (s, 3H), 4. 00 (s, 3H), 3. 15 - 2. 99 (td, J = 13. 2, 4. 9Hz, 1H), 2. 79 - 2. 57 (m, 2H) , 2. 51 - 2. 37 (dt, J = 1 3. 2, 6. 4Hz, 1H) , 2. 03 - 1. 89 (11, J = 12. 6, 6. 2Hz, 1H). 13C NMR(101MHz, CDC13) S 190. 63, 165. 17, 153. 38, 149. 77, 145. 80, 145. 5 7, 133. 67, 125. 84, 121. 93, 118. 61, 114. 67, 113. 47, 112. 61, 110. 31, 108. 79, 101. 53, 76. 53 ,55. 97, 40. 57, 29. 00. HRMS(EI)計算值 C22H19N06393. 1212[M]+,測量值 393. 1220.
[0226] 實施例17
[0227] 化合物18的制備
[0228]
[0229] 化合物17(1. Oeq.)溶于乙醇，冰浴降溫，加入硼氫化鈉（2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)5小 時。反應(yīng)液加少量稀鹽酸淬滅，減壓蒸干甲醇，水稀釋，過濾，稀鹽酸洗，水洗，干燥，得到黃 色固體18,產(chǎn)率78%。
[0230] 4 匪R (400MHz，CDC13) S 7. 81 - 7. 70 (d，J = 9. 0Hz，1H)，7. 45 - 7. 34 (d，J = 9. 0Hz, 1H), 7. 13 (s, 1H), 6. 75 (s, 1H), 6. 05 (s, 2H), 5. 12 - 4. 96 (m, 1H), 4. 90 - 4. 77 (d, J = 11. 8Hz, 1H), 4. 55 - 4. 41 (d, J = 11. 8Hz, 1H), 4. 02 (s, 3H), 3. 97 (s, 3H) ,3.05 - 2. 87 (td, J =13. 1, 4. 8Hz, 1H), 2. 67 - 2. 56 (m, 1H), 2. 56 - 2. 43 (td, J = 12. 9, 7. 2Hz, 1H), 2. 41 - 2. 24 (dt, J = 13. 3, 6. 7Hz, 1H)，1. 83 - 1. 75 (m, 1H) ? 13C NMR (126MHz, CDC13) S 150. 96, 134. 8 1, 121. 20, 120. 07, 111. 77, 110. 17, 102. 84, 78. 71, 78. 46, 78. 20, 62. 92, 61. 34, 58. 17, 42. 9 3. 31. 12, 30. 17. HRMS(EI)計算值 C22H21N06395. 1369[M]+,測量值 395. 1377.
[0231] 實施例18
[0232] 化合物19a_19b的制備
[0233]
[0234] 19a的制備：化合物18 (1. Oeq.)溶于DMF，冰浴降溫，氮氣保護，加入氫化鈉 (2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)10分鐘，再加入碘甲烷（2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)5小時。反應(yīng)液加水淬滅， 乙酸乙酯萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分離 (PE/EA = 1:1)，得到微黃白色固體19a，產(chǎn)率38%。
[0235] 4 匪R (400MHz，CDC13) S 7. 63 - 7. 56 (d，J = 8. 9Hz，1H)，7. 45 - 7. 38 (d，J = 9. 0Hz, 1H), 7. 08 (s, 1H), 6. 76 (s, 1H), 6. 13 - 5. 99 (m, 2H), 5. 10 - 4. 98 (m, 1H), 4. 51 - 4. 42 (m, 1H), 4. 23 - 4. 11 (m, 1H), 4. 01 (s, 3H), 3. 97 (s, 3H), 3. 40 (s, 3H) ,3.07- 2. 92 (m, 1H) , 2. 68 - 2. 46 (m, 2H) , 2. 44 - 2. 28 (m, 1H) , 1. 90 - 1. 7 5 (m, 1H) . 13C NMR (126MHz，CDC13) S 159. 78, 151. 59, 149. 47, 148. 60, 145. 84, 142. 14, 133. 43, 132. 27, 12 6. 16, 120. 18, 119. 86, 118. 80, 110. 40, 109. 63, 108. 68, 101. 39, 69. 57, 61. 53, 57. 84, 56. 83 ,41. 61, 29. 72, 28. 81. HRMS(EI)計算值 C23H23N06409. 1525[M]+,測量值 409. 1533.
[0236] 19b的制備：化合物18 (1. Oeq.)溶于DMF，冰浴降溫，氮氣保護，加入氫化鈉 (2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)10分鐘，再加入異戊烯基溴（2. Oeq.)，攪拌反應(yīng)5小時。反應(yīng)液加水淬 滅，乙酸乙酯萃取，分離有機相，水洗，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，硅膠柱分 離（PE/EA = 3:1)，得到微黃色固體19b，產(chǎn)率22%。
[0237] 4 匪R (400MHz，CDC13) S 7. 69 - 7. 58 (d，J = 8. 9Hz，1H)，7. 47 - 7. 36 (d，J = 8. 9Hz, 1H), 7. 16 (s, 1H), 6. 76 (s, 1H), 6. 17 - 5. 98 (m, 2H), 5. 52 - 5. 40 (m, 1H), 5. 12 - 4. 98 (m, 1H), 4. 58 - 4. 42 (d, J = 10. 4Hz, 1H), 4. 27 - 4. 16 (d, J = 10. 6Hz, 1H), 4. 12 - 3. 91 (m, 8H), 3. 06 - 2. 92 (m, 1H), 2. 70 - 2. 46 (m, 2H), 2. 43 - 2. 27 (m, 1H) ,1.87-1. 78(m, 1H), 1. 77(s, 3H), 1. 73(s, 3H). 13C NMR(101MHz, CDC13) S 159. 35, 151. 10, 149. 01，1 48. 10, 145. 31, 141. 57, 137. 50, 132. 89, 132. 00, 125. 78, 120. 26, 119. 64, 118. 37, 110. 14, 1 09. 35, 108. 16, 100. 90, 76. 78, 66. 47, 66. 09, 61. 08, 56. 40, 41. 15, 29. 28, 28. 34, 25. 33, 17. 56.HRMS(EI)計算值 C27H29N06463. 1995[M]+,測量值 463. 1999.
[0238] 實驗例19
[0239] 本發(fā)明化合物對腫瘤細胞的活性影響。
[0240] 實驗方法：
[0241] 采用8株常規(guī)的或常用的腫瘤細胞：肝癌細胞2株（BEL-7402, SMMC-7721);胃 癌細胞2株（SGC-7901，MKN-45);肺癌細胞2株（A549, SPC-A4);結(jié)腸癌細胞2株（HT29， SW-620)，分別加入化合物處理72h，用磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B，SRB)法檢測化合 物的增殖生長抑制作用及其程度。
[0242] 實驗結(jié)果：
[0243] 1、部分化合物的腫瘤細胞抑制活性（IC5。，yM)
[0244]
[0245]

[0246] 活性實驗1測試了本發(fā)明部分化合物對肺癌細胞株（SPC-A4)和結(jié)腸癌細胞株 (SW-620)的抑制活性，說明本發(fā)明化合物具有較強抑瘤活性，不僅優(yōu)于天然產(chǎn)物小檗堿 (Berberine)，部分化合物的活性甚至優(yōu)于陽性對照藥依托泊苷（VP-16)。
[0247] 2、本發(fā)明化合物的腫瘤細胞抑制活性（5 y M濃度抑制率％ )
[0248] 本發(fā)明實施例1-18中所制備的式A化合物，在5yM濃度下，對于BEL-7402、 SMMC-7721、SPC-A4等多種腫瘤細胞表現(xiàn)出明顯的抑制率％，抑制率大多為50 % -90 %。
[0249] 以化合物2為例，其對一些常見腫瘤細胞株的抑制活性列于下表：
[0251] 結(jié)果表明，化合物2對肝癌細胞2株（BEL-7402, SMMC-7721);胃癌細胞2株 (SGC-7901，MKN-45);肺癌細胞 2 株（A549, SPC-A4);結(jié)腸癌細胞 2 株（HT29, SW-620)有優(yōu) 良的腫瘤抑制活性。
[0252] 上述實施例說明，本發(fā)明的化合物對各種腫瘤細胞有不同程度的抑制活性，證明 本發(fā)明的化合物有潛在的抗腫瘤活性。
[0253] 在本發(fā)明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻被單獨 引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可 以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范 圍。
【主權(quán)項】
1. 一種式A所示的屯元環(huán)小築堿類似物、其藥學上可接受的鹽，其晶型、其水合物、其 溶劑化物、或其前藥，式中，^代表雙鍵或單鍵，并且N二中的兩個^不同時為雙鍵，或者 \^不同時為雙鍵； 樂別表示5-6元芳基或雜芳基，其中所述的雜芳基具有1-3個N原子；勺1-4個相同或不同的取代基，而Rz為但 3 1-4個相同或不 同的取代基，并且各Rl和Rz獨立地選自下組：氨、徑基、氨基、曼IL3S、奶<35、乃-基、烷氧基、燒氨 基、燒硫基、芳酸基、芳氨基、芳硫基或面素；或者兩個Ri可與相鄰的碳原子或兩個Rz可與相 鄰的碳原子共同形成含有0-3個選自0、S、N的雜原子的5-7元環(huán)； R3選自下組：氨、氧、硫、徑基、氨基、琉基、烷基、鏈締基、鏈烘基、芳基、烷氧基、燒氨基、 燒硫基、芳酸基、芳氨基、芳硫基、芳烷基、C1-C6醒基或面素； Ra選自下組：氨、氧、硫、徑基、氨基、琉基、烷基、鏈締基、鏈烘基、芳基、烷氧基、燒氨基、 燒硫基、芳酸基、芳氨基、芳硫基、芳烷基、C1-C6醒基或面素。2. 如權(quán)利要求1所述的屯元環(huán)小築堿類似物及其藥學上可接受的鹽，其特征在于，所 述的化合物具有式Al結(jié)構(gòu)：其中，代表雙鍵或單鍵，并且民3中的兩個^不同時為雙鍵，或者 廠二_:C^R4中的兩個^不同時為雙鍵； Q和W各自獨立地代表C或N，且當各自獨立為N時，各自在環(huán)內(nèi)所處的位置和數(shù)目可 變化；其中所述的"當Q或W各自獨立為N時，位置和數(shù)目可變化"是指：Q或W出現(xiàn)在各自 所在環(huán)上的位置不受限定；Q或W的數(shù)目可為1-3,當數(shù)目大于或等于（>)2時，為保持六 元環(huán)體系，相應(yīng)環(huán)上碳原子數(shù)目減少，Q或W可W各自互相成鍵連接在一起或者各自分散在 環(huán)上不同位置； Ri, Rz和R 3各自獨立地代表氨、徑基、氨基、琉基、烷基、芳基、烷氧基、燒氨基、燒硫基、 芳酸基、芳氨基、芳硫基或面素； Ra代表氧、氮、硫、徑基、氨基、琉基、烷基、芳基、烷氧基、燒氨基、燒硫基、芳酸基、芳氨 基、芳硫基或面素； 并且當Ra代表氨且R 3代表氨或氧時，W不為碳或者R 2不為氨。3. 如權(quán)利要求1所述的屯元環(huán)小築堿類似物及其藥學上可接受的鹽，其特征在于，所 述的藥學上可接受的鹽包括與酸根離子形成的鹽； 較佳地，所述的成鹽的酸根離子包括無機酸根離子、有機酸根離子、和/或面素離子。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的屯元環(huán)小築堿類似物或其藥學上可接受的鹽，其特征在于， N-C-'-.-及-3中的為單鍵，C-.民3為雙鍵;和/或 尺3代表氧、氮、硫、烷基或燒氨基。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的屯元環(huán)小築堿類似物或其藥學上可接受的鹽，其特征在于， C^C口拉中的為雙鍵，氏二述4為單鍵。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的屯元環(huán)小築堿類似物或其藥學上可接受的鹽，其特征在于，R4 代表徑基、氨基、琉基、烷基、芳基、烷氧基、燒氨基、燒琉基、芳酸基、芳氨基、芳琉基或面素； 和/或 Ri和R 2各自獨立地代表徑基、氨基、琉基、烷基、芳基、烷氧基、燒氨基、燒琉基、芳酸基、 芳氨基、芳琉基或面素。7. 根據(jù)權(quán)利要求1~6中任一所述的屯元環(huán)小築堿類似物及其藥學上可接受的鹽，其 中，所述屯元環(huán)小築堿類似物選自下組：8. -種藥物組合物，其特征在于，包含治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1~7所述的 屯元環(huán)小築堿類似物或其藥學上可接受的鹽W及藥學上可接受的載體。9. 根據(jù)權(quán)利要求1~7中任一所述的屯元環(huán)小築堿類似物及其藥學上可接受的鹽在制 備預(yù)防或治療腫瘤或癌癥的藥物中的用途。10. -種制備藥物組合物的方法，其特征在于，包括步驟：將藥學上可接受的載體與權(quán) 利要求1中所述的屯元環(huán)小築堿類似物、或其晶型、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物 進行混合，從而形成藥物組合物。
【文檔編號】A61P35/02GK105985349SQ201510096563
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年3月4日
【發(fā)明人】朱維良, 繆澤鴻, 李波, 宋姍姍, 徐志建, 張勇, 蔡婷婷, 陳凱先
【申請人】中國科學院上海藥物研究所