一種清洗劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物領(lǐng)域，特別涉及一種清洗劑。本發(fā)明的清洗劑是針對(duì)酶促化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫儀廢液針的清洗劑，主要針對(duì)廢液針上的干涸物質(zhì)和殘留的酶，將堿性氫氧化物和表面活性劑組合使用，增加了蛋白及其它物質(zhì)的溶解度，能將廢液針上的干涸物質(zhì)溶解；而無(wú)機(jī)酸的存在既可以起到中和pH的作用，還可以將廢液針上殘留的酶進(jìn)行滅活處理，防止交叉污染的產(chǎn)生。
【專利說(shuō)明】
一種清洗劑
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及生物領(lǐng)域，特別涉及一種清洗劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀是醫(yī)院臨床應(yīng)用最為頻繁的儀器之一，臨床醫(yī)生常常 依據(jù)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀對(duì)臨床病人體液相應(yīng)生理指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果，來(lái)對(duì)患者疾病做出診 斷?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析為非均相反應(yīng)，有洗滌步驟。目前全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀均采 用廢液針吸走廢液的方式完成洗滌過(guò)程。廢液針被重復(fù)利用，容易導(dǎo)致交叉污染造成測(cè)定 結(jié)果出現(xiàn)差異。因此配套清洗液對(duì)于全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的廢液針的維護(hù)、保證樣 本測(cè)試準(zhǔn)確性具有重要意義。
[0003] 化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)按照發(fā)光方式不同可分為酶促化學(xué)發(fā)光（HRP-Luminol系 統(tǒng)、ALP-AMPH)系統(tǒng)）、直接化學(xué)發(fā)光（異魯米諾、叮啶酯系統(tǒng)）和電致化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)。針對(duì) 不同的系統(tǒng)所采用的清洗液成分也不盡相同。本發(fā)明主要針對(duì)酶促化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)（如HRP 系統(tǒng)、ALP系統(tǒng)）廢液針的維護(hù)。廢液針吸取的廢液的主要成分為人體體液（如血清、血漿 等）和試劑緩沖液。人體體液成分復(fù)雜，含有大量蛋白類物質(zhì)、脂類物質(zhì)等；而試劑緩沖要 中也含有蛋白類物質(zhì)、糖類物質(zhì)等。這些物質(zhì)殘留在廢液針上容易干涸結(jié)塊從而造成交叉 污染。
[0004] CN200710305058. 7公開(kāi)了采用堿金屬氫氧化物作為自動(dòng)生化分析儀用清洗液； 主要是針對(duì)全自動(dòng)生化分析儀的清洗液，從反應(yīng)原理、儀器結(jié)構(gòu)、包括清洗液的使用方法與 全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀完全不同，且該專利的清洗液穩(wěn)定性不好，不利于生產(chǎn)應(yīng)用。
[0005] CN201010584650. 7公開(kāi)采用堿金屬氫氧化物能夠降低金屬氫氧化物的殘留量；
[0006] CN200810103646. 7公開(kāi)采用堿性清洗液和酸性清洗液清洗煙氣-煙氣換熱器換 熱組件的石膏漿或煙塵。但該專利與本技術(shù)領(lǐng)域完全不同。
[0007] CN201280024172. 1公開(kāi)采用堿性清潔劑和酸性清潔劑清晰器皿，減少膜的沉積。
[0008] 目前針對(duì)全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的市售洗滌液大部分為單組分堿性洗滌液， 對(duì)廢液針上的殘留物質(zhì)只有促溶作用，無(wú)法對(duì)殘留的酶進(jìn)行滅活。如果堿性清洗液無(wú)法將 廢液針上的殘留物質(zhì)清洗干凈，殘留的酶將對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成一定的影響。
[0009] 因此，提供一種清洗效果好、穩(wěn)定性好的清洗劑具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 有鑒于此，本發(fā)明提供一種用于全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的清洗劑，該清洗劑 具有清洗效果好，，成本低，穩(wěn)定性好等優(yōu)勢(shì)。
[0011] 為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：
[0012] 本發(fā)明提供了一種清洗劑，包括組分A和組分B，其中，
[0013] 組分A包括：堿金屬氫氧化物和表面活性劑；
[0014] 組分B包括：酸。
[0015] 其中，組分A的主要作用是溶解殘留在廢液針上的干涸蛋白，組分B的主要作用是 滅活廢液針上殘留的酶。
[0016] 本發(fā)明涉及的清洗液有A、B兩種組分，組分A為堿性清洗液，負(fù)責(zé)溶解廢液針上的 殘留物質(zhì)，當(dāng)組分A無(wú)法將殘留物質(zhì)清洗干凈時(shí)，組分B為酸，會(huì)將干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)的主要物 質(zhì)酶進(jìn)行滅活處理，以保證后續(xù)反應(yīng)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
[0017] 本發(fā)明中的一些實(shí)施方案中，滅活的酶不僅僅限于HRP系統(tǒng)，還包括ALP系統(tǒng)。
[0018] 本發(fā)明中的一些實(shí)施方案中，所述的酶是辣根過(guò)氧化物酶或堿性磷酸酶。
[0019] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述堿金屬氫氧化物為氫氧化鈉或氫氧化鉀。
[0020] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述表面活性劑為非離子表面活性劑。
[0021 ] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述非離子表面活性劑選自脂肪醇與環(huán)氧乙烷的縮 合物、聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯三嵌段共聚物或者聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯中 的一種或兩者以上的混合物。
[0022] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述酸為無(wú)機(jī)酸。
[0023] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述無(wú)機(jī)酸為鹽酸或硝酸。
[0024] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述組分A與所述組分B的質(zhì)量比為（0. 11~ 3) : (0· 3 ~1) 〇
[0025] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所述組分A中，所述堿金屬氫氧化物與所述表面活 性劑的質(zhì)量比為（〇. 1~2) : (0. 1~1)。
[0026] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，清洗劑的劑型為清洗液，所述清洗液包括組分A、組 分B和水，所述組分A和組分B的質(zhì)量之和在所述清洗液中的質(zhì)量百分含量為0. 41 %~ 4%〇
[0027] 在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，清洗劑的劑型為清洗液，所述堿金屬氫氧化物在所 述清洗液中的質(zhì)量百分含量為〇. 1%~2%;所述表面活性劑在所述清洗液中的質(zhì)量百分含 量為0.01%~1% ;所述無(wú)機(jī)酸在所述清洗液中的質(zhì)量百分含量為0.3%~1%。
[0028] 具體的，本發(fā)明提供的清洗劑用于全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的清洗。
[0029] 組分A的主要作用是溶解殘留在廢液針上的干涸蛋白，組分B的主要作用是滅活 廢液針上殘留的酶和中和pH的作用。因此，通過(guò)干涸蛋白溶解效果試驗(yàn)和酶滅活實(shí)驗(yàn)來(lái)模 擬驗(yàn)證清洗效果。
[0030] 干涸蛋白溶解實(shí)驗(yàn)方法：模擬廢液針上干涸蛋白的主要成分，將酪蛋白、BSA用 PBST溶液配制成糊狀溶液，將上述糊狀溶液放置在60°C烘箱，烤干。將烤干后的固體用剪 刀剪成大小一致的小方塊，將小方塊放置在5mL溶液中，每隔一段時(shí)間測(cè)定上清液的0D值 (蛋白溶解會(huì)導(dǎo)致0D值的升高，與溶解蛋白量成正比。），確定蛋白的溶解情況。
[0031] 酶滅活實(shí)驗(yàn)方法：將酶直接連接在羧基磁珠上，取50 μ 1磁珠加入到試管中，用磁 力架吸附磁珠后，棄上清。再加入500 μ 1不同的滅活劑混勻，置于磁力架上，吸附lmin后 棄上清。洗滌3遍后測(cè)定其發(fā)光信號(hào)。
[0032] 本發(fā)明的針對(duì)酶促化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫儀廢液針的清洗劑，主要針 對(duì)廢液針上的干涸物質(zhì)和殘留的酶，將堿性氫氧化物和表面活性劑組合使用，增加了蛋白 及其它物質(zhì)的溶解度，能將廢液針上的干涸物質(zhì)溶解；而無(wú)機(jī)酸的存在既可以起到中和pH 的作用，還可以將廢液針上殘留的酶進(jìn)行滅活處理，防止交叉污染的產(chǎn)生。
[0033] 利用本發(fā)明的清洗液在線測(cè)試過(guò)程中，按照設(shè)置的清洗程序進(jìn)行在線清洗，能夠 去除包括蛋白質(zhì)、脂類物質(zhì)等有機(jī)物，避免這些物質(zhì)在廢液針表面干涸殘留，影響后續(xù)實(shí) 驗(yàn)；清洗后具有良好的臨床項(xiàng)目的批內(nèi)重復(fù)性、低交叉污染等特點(diǎn)，同時(shí)不影響免疫分析儀 的測(cè)試結(jié)果；清洗過(guò)程對(duì)分析儀的液路系統(tǒng)及反應(yīng)均沒(méi)有腐蝕作用；同時(shí)本發(fā)明清洗液所 有組分都可以生物降解，對(duì)環(huán)境沒(méi)有潛在的污染，符合環(huán)保要求。
【具體實(shí)施方式】
[0034] 本發(fā)明公開(kāi)了一種清洗劑，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參 數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的， 它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過(guò)較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān) 人員明顯能在不脫離本
【發(fā)明內(nèi)容】
、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng) 變更與組合，來(lái)實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。
[0035] 本發(fā)明提供的清洗劑中所用組分均可由市場(chǎng)購(gòu)得。
[0036] 下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明：
[0037] 實(shí)施例1 :
[0038] 以水為溶劑，按如下重量百分比濃度比例配制清洗液：
[0039] 清洗液 A:NaOH 0. 4%
[0040] TritonX-100 0. 1%
[0041] 清洗液 B:HCL 0. 365%
[0042] 用邁克公司IS1200全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定上述清洗液清洗性能，主要 測(cè)定干涸物質(zhì)溶解情況及酶的滅活情況。
[0043] 模擬廢液針上干涸蛋白的主要成分，將酪蛋白、BSA用PBST溶液配制成糊狀溶液， 將上述糊狀溶液放置在60°C烘箱，烤干。將烤干后的固體用剪刀剪成大小一致的小方塊，將 小方塊放置在5mL溶液中，每隔一段時(shí)間測(cè)定上清液的0D值（蛋白溶解會(huì)使溶液變渾，0D 值升高），確定蛋白的溶解情況。結(jié)果見(jiàn)表1。
[0044] 表1蛋白溶解情況
[0045]
[0046] 結(jié)果表明，實(shí)施例1制備的清洗液溶解蛋白效果明顯優(yōu)于對(duì)照（TBST洗液）及市 售的多酶清洗液。
[0047] 模擬廢液針上殘留的HRP和ALP，用實(shí)施例1制備的清洗液進(jìn)行滅活實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn) 表2。
[0048] 表2實(shí)施例1制備的清洗液對(duì)酶的滅活效果
[0049]
[0050] 結(jié)果表明，市售清洗液對(duì)酶沒(méi)有滅活作用，而實(shí)施例1制備的清洗液能顯著降低 發(fā)光信號(hào)，達(dá)到滅活酶的目的。避免殘留的酶對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的影響。
[0051] 將實(shí)施例1配制的清洗劑放置到邁克IS1200全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上按設(shè) 定程序進(jìn)行清洗效果驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。具體驗(yàn)證方法如下：先測(cè)定一組HCG高值樣本，分別用普通 請(qǐng)洗液（TBST)和本發(fā)明實(shí)施例1制備的清洗劑清洗，然后再測(cè)定校準(zhǔn)品零點(diǎn)信號(hào)和已知低 值樣本濃度。結(jié)果見(jiàn)表3。
[0052] 表3特殊清洗液清洗效果驗(yàn)證
[0053]
[0054] 結(jié)果表明，本發(fā)明實(shí)施例1制備的清洗劑能顯著（P < 0. 05)降低高值樣本對(duì)后續(xù) 樣本測(cè)定的影響，并且不影響免疫分析儀的測(cè)定結(jié)果。同時(shí)對(duì)批內(nèi)重復(fù)性進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表 明批內(nèi)精密度CV〈5%。
[0055] 將特殊清洗液A、B室溫放置1年后，對(duì)比新配置的特殊清洗液A、B的洗滌效果。 干涸蛋白溶解效果測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2,酶滅活效果測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。
[0056] 表4干涸蛋白溶解效果測(cè)定結(jié)果
[0057]
[0058] 表5酶滅活效果測(cè)定結(jié)果
[0059]
[0060] 結(jié)果表明，實(shí)施例1制備的清洗液室溫放置1年后，蛋白溶解效果和酶滅活效果與 新配制的溶液相比沒(méi)有明顯差異（P > 〇. 05)，穩(wěn)定性好。
[0061] 實(shí)施例2:
[0062] 組分 A :
[0063] 用天平稱取氫氧化鈉 lg置于1000ml燒杯中，加入水500-700mL使完全溶解，再慢 慢加入Triton-X1000 . lmL，攪拌使其充分溶解，最后用量筒加水定容至1L，即得到體積為 1L的特殊清洗液A。
[0064] 組分 B :
[0065] 用量筒量取700-900mL水，在緩慢加入6. 9mL濃度為37%的濃鹽酸，然后定容至 1L，即得到體積為1L的特殊清洗液B。
[0066] 實(shí)施例3 :
[0067] 組分 A :
[0068] 用天平稱取氫氧化鈉4g置于1000ml燒杯中，加入水500-700mL使完全溶解，再慢 慢加入Triton-XIOOlmL，攪拌使其充分溶解，最后用量筒加水定容至1L，即得到體積為1L 的特殊清洗液A。
[0069] 組分 B :
[0070] 用量筒量取700-900mL水，在緩慢加入9mL濃度為37%的濃鹽酸，然后定容至1L， 即得到體積為1L的特殊清洗液B。
[0071] 實(shí)施例4:
[0072] 組分 A :
[0073] 用天平稱取氫氧化鈉20g置于1000ml燒杯中，加入水500-700mL使完全溶解，再 慢慢加入Triton-XIOOlOmL，攪拌使其充分溶解，最后用量筒加水定容至1L，即得到體積為 1L的特殊清洗液A。
[0074] 組分 B :
[0075] 用量筒量取700-900mL水，在緩慢加入22. 8mL濃度為37%的濃鹽酸，然后定容至 1L，即得到體積為1L的特殊清洗液B。
[0076] 實(shí)施例5 :
[0077] 將實(shí)施例2至4制備的清洗劑進(jìn)行模擬清洗效果實(shí)驗(yàn)。即干涸蛋白溶解實(shí)驗(yàn)、酶 滅活實(shí)驗(yàn)和上機(jī)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表6、表7、表8 :
[0078] 表6干涸蛋白溶解效果測(cè)定結(jié)果
[0079]
[0080] 結(jié)果表明，實(shí)施例2、3、4提供的清洗液均能溶解蛋白，溶解效果差異不明顯。
[0081] 表7酶滅活效果測(cè)定結(jié)果
[0082]
[0083] 結(jié)果表明，實(shí)施例2、3、4配方中的清洗液均能滅活辣根過(guò)氧化物酶，滅活效果差 異不明顯。
[0084] 表8特殊清洗液清洗效果驗(yàn)證
[0085]
[0086] 結(jié)果表明，實(shí)施例2、3、4的清洗液均能達(dá)到顯著（P < 0. 05)清洗效果，且不影響 免疫分析儀的測(cè)定結(jié)果。同時(shí)對(duì)批內(nèi)重復(fù)性進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明三種配方的批內(nèi)精密度 CV〈5%〇
[0087] 以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng) 視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種清洗劑，其特征在于，包括組分A和組分B，其中， 組分A包括：堿金屬氫氧化物和表面活性劑； 組分B包括：酸。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的清洗劑，其特征在于，所述堿金屬氫氧化物為氫氧化鈉或氫 氧化鉀。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的清洗劑，其特征在于，所述表面活性劑為非離子表面活性 劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的清洗劑，其特征在于，所述非離子表面活性劑選自 脂肪醇與環(huán)氧乙烷的縮合物、聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯三嵌段共聚物或者聚氧乙烯 脫水山梨醇脂肪酸酯中的一種或兩者以上的混合物。5. 根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的清洗劑，其特征在于，所述酸為無(wú)機(jī)酸。6. 根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的清洗劑，其特征在于，所述無(wú)機(jī)酸為鹽酸或硝酸。7. 根據(jù)權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的清洗劑，其特征在于，所述組分A與所述組分B的 質(zhì)量比為（〇. 11~3) :(0.3~1)。8. 根據(jù)權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所述的清洗劑，其特征在于，所述組分A中，所述堿金屬 氫氧化物與所述表面活性劑的質(zhì)量比為（〇. 1~2) : (0. 01~1)。9. 根據(jù)權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)所述的清洗劑，其特征在于，其劑型為清洗液，所述清洗 液包括組分A、組分B和水，所述組分A和組分B的質(zhì)量之和在所述清洗液中的質(zhì)量百分含 量為0.41%~4%。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的清洗劑，其特征在于，所述堿金屬氫氧化物在所述清洗液 中的質(zhì)量百分含量為〇. 1%~2% ;所述表面活性劑在所述清洗液中的質(zhì)量百分含量為 0.01%~1% ;所述無(wú)機(jī)酸在所述清洗液中的質(zhì)量百分含量為0.3%~1%。
【文檔編號(hào)】C11D10/02GK105985871SQ201510070800
【公開(kāi)日】2016年10月5日
【申請(qǐng)日】2015年2月10日
【發(fā)明人】張凌燕, 吳國(guó)平, 王曉濤, 包德泉
【申請(qǐng)人】四川邁克生物科技股份有限公司