一種專用于海帶綜合利用的復(fù)合酶系及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種專用于海帶綜合利用的復(fù)合酶系及其應(yīng)用，該復(fù)合酶系包括酶A和酶B，其中，所述酶A包括纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、淀粉酶、木聚糖酶、堿性纖維素酶、戊聚糖酶、葡聚糖酶、阿魏酸酯酶中的任意四種或四種以上；所述酶B包括堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶、胃蛋白酶中的一種或任意兩種。本發(fā)明最突出的有益效果采用上述專用復(fù)合酶系能夠從海帶中同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和功能性膳食纖維四種產(chǎn)品，且四種活性成分的提取率均達(dá)到90%（以海帶干重計(jì)）以上，這顯著提高了海帶資源的綜合利用率，極大的增加了海帶加工產(chǎn)業(yè)的產(chǎn)品附加值，提高相關(guān)產(chǎn)品的技術(shù)水平。
【專利說明】
一種專用于海帶綜合利用的復(fù)合酶系及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種專用于海帶綜合利用的復(fù)合酶系及其應(yīng)用，屬于海洋資源深加工技術(shù)領(lǐng)域。【背景技術(shù)】
[0002]海帶是食藥兩用的褐藻類植物，其營(yíng)養(yǎng)很豐富，富含多種對(duì)人體有益的活性成分如碘、甘露醇、海藻酸、褐藻糖膠、膳食纖維、多種維生素以及鈣、鐵等。我國(guó)是海帶的資源與綜合利用大國(guó)，海帶是我國(guó)非常重要的海洋植物資源，是褐藻工業(yè)的主要原料之一，目前已經(jīng)形成了以海藻酸、甘露醇、碘為主要產(chǎn)品的褐藻工業(yè)產(chǎn)品體系。但是由于我國(guó)目前海帶加工業(yè)以粗加工為主，精深加工及合理有效的綜合利用海帶資源的成熟生產(chǎn)工藝路線相對(duì)缺乏的現(xiàn)狀造成海帶的綜合利用率僅在30% (按干物質(zhì)計(jì))左右，還有50%以上的海帶活性成分作為廢棄物未得到充分的利用。不但浪費(fèi)了大量的海帶資源，而且?guī)砹艘幌盗械沫h(huán)境污染問題。
[0003]多年來，國(guó)內(nèi)外特別是我國(guó)對(duì)于海帶的開發(fā)一直是碘、海藻酸和甘露醇的“老三樣”，產(chǎn)業(yè)總體上處于低檔次、低水平、低附加值、低效益的狀態(tài)，產(chǎn)品和企業(yè)市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力較弱。因此開發(fā)提高海帶資源綜合利用率高、產(chǎn)品附加值高、工藝技術(shù)水平高的海帶加工技術(shù)路線是行業(yè)工作者當(dāng)前的首要課題。近年來，隨著生物工程技術(shù)的快速發(fā)展，生物酶制劑工業(yè)應(yīng)用的成熟和其反應(yīng)快速、條件溫和等優(yōu)點(diǎn)，生物酶制劑在海帶加工領(lǐng)域利用的研究和專利逐漸增多。但目前相關(guān)報(bào)道結(jié)果:海帶的多種功能性成分提取率不高，且提取種類少， 多為1?2種，海帶綜合利用率并不突出，例如:申請(qǐng)?zhí)枮?01010292123.9的中國(guó)專利《一種提高海藻酸鈉提取率的復(fù)合酶配方及應(yīng)用》，文獻(xiàn)《用復(fù)合酶酶解提取海帶巖藻聚糖硫酸酯的工藝研究》(作者何云海)等。因此需要能夠高效、多種功能性產(chǎn)品同時(shí)提取的海帶綜合利用專用酶系。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對(duì)目前生物酶制劑在海帶加工領(lǐng)域應(yīng)用效率低、功能性產(chǎn)品提取效果不好、技術(shù)體系不成熟等缺點(diǎn)，本發(fā)明通過大量的研究解決了上述難題，提供了一種可同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維四種功能性產(chǎn)品的高效海帶綜合利用專用復(fù)合酶系。
[0005]本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
[0006]本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種能同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的海帶綜合利用的專用復(fù)合酶系，該復(fù)合酶系包括酶A和酶B，其中，所述酶A包括纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、淀粉酶、木聚糖酶、堿性纖維素酶、戊聚糖酶、葡聚糖酶、阿魏酸酯酶中的任意四種或四種以上;所述酶B包括堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶、胃蛋白酶中的一種或任意兩種。
[0007]該復(fù)合酶系的酶A和酶B兩個(gè)復(fù)合酶，兩者分步進(jìn)行作用，首先采用復(fù)合酶A進(jìn)行酶解作用然后再用復(fù)合酶B進(jìn)行進(jìn)一步酶解，作用位點(diǎn)、添加量、作用溫度、pH和時(shí)間均不相同。
[0008]優(yōu)選的，使用所述復(fù)合酶系時(shí)，所述酶A和酶B的添加質(zhì)量比例為(2?10):(1?3)。
[0009]優(yōu)選的，所述酶A是由下述重量百分比的成分組成的:纖維素酶:20%?55 % ;半纖維素酶:1〇%?40 % ;果膠酶:0-30 % ;淀粉酶:0?2% ;木聚糖酶:0?20 % ;堿性纖維素酶:0 ?10 % ;戊聚糖酶:0?10 % ;￠-葡聚糖酶:0?5 % ;阿魏酸酯酶:0?2 %，其中所述果膠酶、淀粉酶、木聚糖酶、堿性纖維素酶、戊聚糖酶、￠-葡聚糖酶和阿魏酸酯酶中的重量百分比至少兩個(gè)不為零。海帶產(chǎn)品中的有效成分復(fù)雜，本發(fā)明基于對(duì)海帶中四種有效成分的考慮，為最大程度的減少活性成分降解，優(yōu)選上述配比關(guān)系各酶制劑組成的酶A，使得四種有效物質(zhì)的提取效果較好。
[0010]進(jìn)一步優(yōu)選的，本發(fā)明中所述酶A中組分的酶活性如下:纖維素酶:50萬U/g;半纖維素酶:10萬U/g;果膠酶:30萬U/g;淀粉酶:10000U/g;木聚糖酶:10萬U/g;戊聚糖酶:10萬 U/g; ￠-葡聚糖酶:20萬U/g;堿性纖維素酶:10萬U/g;阿魏酸酯酶:1000U/g。[〇〇11]優(yōu)選的，本發(fā)明中所述酶B中組分的酶活性如下:堿性蛋白酶:50萬U/g;中性蛋白酶:10萬U/g;木瓜蛋白酶:80萬U/g;胰蛋白酶:50萬U/g;酸性蛋白酶:80萬U/g;胃蛋白酶10 萬 U/g〇
[0012]本發(fā)明經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證與分析，選擇合適的酶制劑組成得到本發(fā)明的復(fù)合酶系，并創(chuàng)新性的將復(fù)合生物酶提取技術(shù)應(yīng)用于海帶副產(chǎn)品加工，顯著提高目標(biāo)產(chǎn)品得率，減少活性成分降解，發(fā)現(xiàn)可以最大程度的同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和功能性膳食纖維四種產(chǎn)品。
[0013]本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種上述復(fù)合酶系的制備方法，包括以下步驟:分別將酶A和酶B中的各原料組分按照設(shè)定配比進(jìn)行復(fù)配混合，分別得到酶A和酶B，然后將酶A和酶B進(jìn)行包裝，成為復(fù)合酶系產(chǎn)品。
[0014]本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供所述復(fù)合酶系在同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的海帶綜合利用中的應(yīng)用。
[0015]具體應(yīng)用方法為:首先以海帶或海帶加工廢棄物為原料，采用水提法分離得到固體和含有甘露醇的提取液;然后將所述固體和水混合得到混合溶液，向所述混合溶液加入所述復(fù)合酶系中的酶A進(jìn)行第一次酶解，得到第一次酶解液;再向所述第一次酶解液中加入所述復(fù)合酶系中的酶B進(jìn)行第二次酶解，得到同時(shí)含有褐藻糖膠、海藻酸和海帶膳食纖維的第二次酶解液。
[0016]優(yōu)選的，所述第二次酶解液中同時(shí)含有褐藻糖膠、海藻酸和海帶膳食纖維，將所述第二次酶解液采用常規(guī)的物理化學(xué)分離手段即可分離出褐藻糖膠、海藻酸和海帶膳食纖維。具體分離出三種物質(zhì)的方法為:將得到的第二次酶解液進(jìn)行固液分離，所得上清液用于分離提取褐藻糖膠和海藻酸，所得固體用于提取海帶膳食纖維。其中，所述上清液采用氯化鈣溶液沉淀法分離得到海藻酸鈣粗品，進(jìn)一步提純得到海藻酸;然后將沉淀分離海藻酸后的上清液進(jìn)行醇沉得到褐藻糖膠粗品，進(jìn)一步提純得到褐藻糖膠。
[0017]優(yōu)選的，所述第一次酶解中，所述酶A的添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1 %?0.5 % (以海帶干重計(jì))，酶解反應(yīng)溫度為50?55 °C，酶解反應(yīng)pH為4.8?5.5，酶解時(shí)間為6?18h。[〇〇18]優(yōu)選的，所述第二次酶解中，所述酶B的添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%?0.15% (以海帶干重計(jì))，酶解反應(yīng)溫度為50?60 °C，酶解反應(yīng)pH為7?8.5或3?4.5，酶解時(shí)間為1?2h。 [〇〇19]經(jīng)過上述優(yōu)化后的工藝條件和參數(shù)，使得四種活性成分的提取率均能達(dá)到90%以上，相比于現(xiàn)有技術(shù)中的其他酶制劑在海帶降解中的應(yīng)用，本發(fā)明采用所述復(fù)合酶系不僅得到的活性成分的種類多，而且各活性成分的提取率也較高。
[0020]本發(fā)明所述的褐藻糖膠又稱褐藻多糖硫酸酯，是一種天然硫酸化多糖，主要成分為a-L-巖藻糖-4-硫酸酯的多聚物，同時(shí)含有少量半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸和蛋白質(zhì)。褐藻糖膠具有多種重要的生理活性，如抑制腫瘤細(xì)胞迀移、誘導(dǎo)白細(xì)胞介素及干擾素產(chǎn)生提高人體免疫力、抗凝血、降血脂、保水及抗氧化等，已成為近十年來國(guó)際上的研究熱點(diǎn)之一。其主要分布在褐藻間組織或基質(zhì)中，在海帶中其含量自基部向尖部及邊緣逐漸升高，約占 1%-4%左右，因此在海帶加工副產(chǎn)品如海帶根尤其是海帶裙邊中含量最高。褐藻糖膠作為目前褐藻中的重要功能性成分，其產(chǎn)品附加值很高。
[0021]本發(fā)明所述的海藻酸(及海藻酸鹽)是一種親水性膠體，具有穩(wěn)定細(xì)胞膜和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的功能，并且以其良好的生物降解性和生物相容性，被廣泛地應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化學(xué)、 紡織、印染、造紙、生物、日用化工等方面。在食品中可以作為穩(wěn)定劑、增稠劑、乳化劑、膠凝劑、粘結(jié)劑以及功能性添加劑使用。目前國(guó)內(nèi)的海藻酸多以海帶為原料，通過酸堿提取法生產(chǎn)，高成本、高耗能、高污染，產(chǎn)品利潤(rùn)率低，市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力較弱。
[0022]本發(fā)明所述的甘露醇作為海帶化工行業(yè)的主要產(chǎn)品之一，主要應(yīng)用于生產(chǎn)無糖食品添加劑、甘露醇注射液和藥品輔助添加劑，尤其近年隨著食品行業(yè)無糖口香糖對(duì)甘露醇需求量快速增加，使得甘露醇市場(chǎng)需求迅速增長(zhǎng)，供不應(yīng)求現(xiàn)象愈發(fā)嚴(yán)重。
[0023]本發(fā)明所述的海藻酸膳食纖維作為海帶加工副產(chǎn)物的重要成分，至今尚未得到合理的開發(fā)，大部分仍然作為廢棄物，隨著廢渣直接排放到自然界中，不但浪費(fèi)了大量的自然資源，而且污染環(huán)境，給海洋漁業(yè)經(jīng)濟(jì)和生態(tài)環(huán)境帶來破壞和影響。[〇〇24]本發(fā)明的有益效果是:
[0025](1)本發(fā)明的專用于海帶綜合利用的復(fù)合酶系具有較強(qiáng)的底物廣譜性、系統(tǒng)性，可以有效處理鮮海帶、干海帶、海帶加工廢棄物等各種類型的海帶底物，實(shí)現(xiàn)了海帶資源的高效綜合利用。
[0026](2)本發(fā)明最突出的有益效果采用上述專用復(fù)合酶系能夠從海帶中同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和功能性膳食纖維四種產(chǎn)品，且四種活性成分的提取率均達(dá)到90% (以海帶干重計(jì))以上，這顯著提高了海帶資源的綜合利用率，極大的增加了海帶加工產(chǎn)業(yè)的產(chǎn)品附加值，提高相關(guān)產(chǎn)品的技術(shù)水平。
[0027](3)本發(fā)明所采用的生物酶均為食品級(jí)，反應(yīng)條件溫和，安全可靠，極大程度降低酸堿的使用量，對(duì)于提高相關(guān)食品安全和環(huán)境保護(hù)有顯著效果。
[0028](4)本發(fā)明的生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單、安全、易于操作和控制，非常適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)， 提高海帶產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。【具體實(shí)施方式】
[0029]下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0030]實(shí)施例1
[0031]一種能同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的海帶綜合利用的專用復(fù)合酶系，包括酶A和酶B，所述酶A是由以下質(zhì)量分?jǐn)?shù)的組分組成:纖維素酶40%，半纖維素酶30%，果膠酶25%，淀粉酶0.5%，木聚糖酶4%，戊聚糖酶0.5% ;所述酶B是由以下質(zhì)量分?jǐn)?shù)的組分組成:堿性蛋白酶80%，木瓜蛋白酶20%。所述酶A中組分的酶活性如下:纖維素酶:50萬U/g;半纖維素酶:10萬U/g;果膠酶:30萬U/g;淀粉酶:10000U/g;木聚糖酶:10萬U/ g;戊聚糖酶:10萬U/g。所述酶B中組分的酶活性如下:堿性蛋白酶:50萬U/g;木瓜蛋白酶:80 萬/g〇[〇〇32]所述復(fù)合酶系的應(yīng)用方法如下:
[0033](1)以鮮海帶為原料，將海帶切割為5?7cm的海帶塊，加入2?3倍體積的水，浸泡1?2h，固液分離，并用總量2?3倍的水洗滌所得固體，所得全部液體用于甘露醇提??；[〇〇34](2)將步驟(1)中所得固體加入5?7倍的水后調(diào)節(jié)pH至4 ? 9，加入復(fù)合酶A0 ? 25 %(按干重計(jì))，53°C酶解10h，所添加復(fù)合酶A的組成為:纖維素酶40%，半纖維素酶30%，果膠酶25%，淀粉酶0.5%，木聚糖酶4%，戊聚糖酶0.5%。[〇〇35](3)將步驟(2)中反應(yīng)完成的酶解pH調(diào)節(jié)至8.2,加入復(fù)合酶B 0.1% (以干重計(jì))，56°C酶解繼續(xù)酶解2h，所添加的復(fù)合酶B的組成為:堿性蛋白酶80%，木瓜蛋白酶20% ;
[0036](4)90°C滅酶活后酶解液通過離心或板框過濾進(jìn)行固液分離，上清用于分離提取褐藻糖膠和海藻酸，所得固渣用于提取海帶膳食纖維；
[0037](5)將步驟(4)中所得上清液用CaCl2溶液沉淀分離海藻酸，離心分離得海藻酸鈣粗品，上清液濃縮后酒精沉淀的褐藻糖膠粗品；[〇〇38](6)通過以上步驟最終以海帶干物質(zhì)計(jì)褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的綜合提取率在91.5%，海帶資源的綜合利用率達(dá)到81.6%。[〇〇39] 實(shí)施例2[〇〇4〇] 一種能同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的海帶綜合利用的專用復(fù)合酶系，包括酶A和酶B，所述酶A是由以下質(zhì)量分?jǐn)?shù)的組分組成:纖維素酶30%，半纖維素酶50%，淀粉酶1 %，木聚糖酶14%葡聚糖酶5% ;所述酶B是由以下質(zhì)量分?jǐn)?shù)的組分組成:堿性蛋白酶70 %，中性蛋白酶30 %。所述酶A中組分的酶活性如下:纖維素酶:50萬U/g; 半纖維素酶:10萬U/g;淀粉酶:10000U/g;木聚糖酶:10萬U/g; ￠-葡聚糖酶:20萬U/g。所述酶 B中組分的酶活性如下:堿性蛋白酶:50萬U/g;中性蛋白酶:10萬U/g。[0041 ]所述復(fù)合酶系的應(yīng)用方法如下:
[0042](1)以干海帶為原料，將海帶切割為2?5cm的海帶塊，加入5?10倍體積的水，浸泡2h，固液分離，并用總量5?10倍的水洗滌所得固體，所得全部液體用于甘露醇提?。籟〇〇43](2)將步驟(1)中所得固體加入5?7倍的水后調(diào)節(jié)pH至5.0，加入復(fù)合酶A 0.45%(按干重計(jì))，53°C酶解12h，所添加復(fù)合酶A的組成為:纖維素酶30%，半纖維素酶50%，淀粉酶1 %，木聚糖酶14 %葡聚糖酶5 % ;[〇〇44](3)將步驟(2)中反應(yīng)完成的酶解pH調(diào)節(jié)至7.8,加入復(fù)合酶B 0.15%(以干重計(jì))，57°C酶解繼續(xù)酶解2h，所添加的復(fù)合酶B的組成為:堿性蛋白酶70 %，中性蛋白酶30 % ;
[0045](4)90°C滅酶活后酶解液通過離心或板框過濾進(jìn)行固液分離，上清用于分離提取褐藻糖膠和海藻酸，所得固渣用于提取海帶膳食纖維；
[0046](5)將步驟(4)中所得上清液用CaCl2溶液沉淀分離海藻酸，離心分離得海藻酸鈣粗品，上清液濃縮后酒精沉淀得褐藻糖膠粗品；[〇〇47](6)通過以上步驟最終以海帶干物質(zhì)計(jì)褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的綜合提取率在92.4%，海帶資源的綜合利用率達(dá)到82.1 %。
[0048]實(shí)施例3
[0049]—種能同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的海帶綜合利用的專用復(fù)合酶系，包括酶A和酶B，所述酶A是由以下質(zhì)量分?jǐn)?shù)的組分組成:纖維素酶25%，纖維素酶45%，果膠酶14.5%，淀粉酶0.5%，木聚糖酶15% ;所述酶B是由以下質(zhì)量分?jǐn)?shù)的組分組成:酸性蛋白酶100 %。所述酶A中組分的酶活性如下:纖維素酶:50萬U/g;半纖維素酶:10萬 1]/^;果膠酶:30萬1]/^;淀粉酶:100001]/^;木聚糖酶:10萬1]/^。所述酶8中組分的酶活性如下:酸性蛋白酶:80萬U/g。
[0050]所述復(fù)合酶系的應(yīng)用方法如下:
[0051](1)以提取碘或甘露醇后的海帶渣為原料，加入5?7倍的水后調(diào)節(jié)pH至4.8,加入復(fù)合酶A 0.15 % (按干重計(jì))，53°C酶解12h，所添加復(fù)合酶A的組成為:纖維素酶25 %，纖維素酶45 %，果膠酶14.5 %，淀粉酶0.5 %，木聚糖酶15 % ;[〇〇52](3)將步驟(2)中反應(yīng)完成的酶解pH調(diào)節(jié)至3.5,加入復(fù)合酶B 0.05%(以干重計(jì))，55°C酶解繼續(xù)酶解2h，所添加的復(fù)合酶B的組成為:酸性蛋白酶100% ;[〇〇53](4)90°C滅酶活后酶解液通過離心或板框過濾進(jìn)行固液分離，上清用于分離提取褐藻糖膠和海藻酸，所得固渣用于提取海帶膳食纖維；[〇〇54](5)將步驟(4)中所得上清液用CaCl2溶液沉淀分離海藻酸，離心分離得海藻酸鈣粗品，上清液濃縮后酒精沉淀的褐藻糖膠粗品；
[0055](6)通過以上步驟最終以海帶干物質(zhì)計(jì)褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的綜合提取率在92.3%，海帶資源的綜合利用率達(dá)到83.2%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種能同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海帶膳食纖維的海帶綜合利用的專用 復(fù)合酶系，其特征是:該復(fù)合酶系包括酶A和酶B，其中，所述酶A包括纖維素酶、半纖維素酶、 果膠酶、淀粉酶、木聚糖酶、堿性纖維素酶、戊聚糖酶、葡聚糖酶、阿魏酸酯酶中的任意四種 或四種以上;所述酶B包括堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶、胃 蛋白酶中的一種或任意兩種。2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合酶系，其特征是:所述酶A是由下述重量百分比的成分組成 的:纖維素酶:20%?55%;半纖維素酶:10%?40%;果膠酶:0-30%;淀粉酶:0~2%;木聚糖酶:0? 20%;堿性纖維素酶:0?10%;戊聚糖酶:0?10%; ￠-葡聚糖酶:0~5%;阿魏酸酯酶:0~2%，其中所 述果膠酶、淀粉酶、木聚糖酶、堿性纖維素酶、戊聚糖酶、￠-葡聚糖酶和阿魏酸酯酶中的重量 百分比至少兩個(gè)不為零。3.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合酶系，其特征是:所述酶A中組分的酶活性如下:纖維素酶: 50萬U/g;半纖維素酶:10萬U/g;果膠酶:30萬U/g;淀粉酶:10000U/g;木聚糖酶:10萬U/g;戊 聚糖酶:10萬U/g; ￠-葡聚糖酶:20萬U/g;堿性纖維素酶:10萬U/g;阿魏酸酯酶:1000U/g。4.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合酶系，其特征是:所述酶B中組分的酶活性如下:堿性蛋白 酶:50萬U/g;中性蛋白酶:10萬U/g;木瓜蛋白酶:80萬U/g;胰蛋白酶:50萬U/g;酸性蛋白酶: 80萬U/g;胃蛋白酶10萬U/g。5.權(quán)利要求1?4中任一項(xiàng)所述的專用復(fù)合酶系的制備方法，其特征是，包括以下步驟: 分別將酶A和酶B中的各原料組分按照設(shè)定配比進(jìn)行復(fù)配混合，分別得到酶A和酶B，然后將 酶A和酶B進(jìn)行包裝，成為復(fù)合酶系產(chǎn)品。6.權(quán)利要求1?4中任一項(xiàng)所述的專用復(fù)合酶在同時(shí)提取褐藻糖膠、海藻酸、甘露醇和海 帶膳食纖維的海帶綜合利用中應(yīng)用。7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征是:首先以海帶或海帶加工廢棄物為原料，采用水 提法分離得到固體和含有甘露醇的提取液;然后將所述固體和水混合得到混合溶液，向所 述混合溶液加入所述復(fù)合酶系中的酶A進(jìn)行第一次酶解，得到第一次酶解液;再向所述第一 次酶解液中加入所述復(fù)合酶系中的酶B進(jìn)行第二次酶解，得到同時(shí)含有褐藻糖膠、海藻酸和 海帶膳食纖維的第二次酶解液。8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征是:在所述第二次酶解液中分離褐藻糖膠、海藻酸 和海帶膳食纖維的方法為:將得到的第二次酶解液進(jìn)行固液分離，所得上清液用于分離提 取褐藻糖膠和海藻酸，所得固體用于提取海帶膳食纖維;其中，所述上清液采用氯化鈣溶液 沉淀法分離得到海藻酸鈣粗品，進(jìn)一步提純得到海藻酸;然后將提取海藻酸的上清液進(jìn)行 醇沉得到褐藻糖膠粗品，進(jìn)一步提純得到褐藻糖膠。9.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征是:所述第一次酶解中，所述酶A的添加量為海帶干 重的0.1%~0.5%，酶解反應(yīng)溫度為50?55 °C，酶解反應(yīng)pH為4.8?5.5，酶解時(shí)間為6?18h。10.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征是:所述第二次酶解中，所述酶B的添加量為海帶 干重的0.05%~0.15%，酶解反應(yīng)溫度為50?60°C，酶解反應(yīng)pH為7?8.5或3~4.5，酶解時(shí)間為1? 2h〇
【文檔編號(hào)】A23L33/21GK106011112SQ201610344742
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年5月20日
【發(fā)明人】董學(xué)前, 趙林, 張永剛, 王偉, 楊曉雪, 張艷敏, 吉武科, 劉建軍
【申請(qǐng)人】山東省食品發(fā)酵工業(yè)研究設(shè)計(jì)院