一種選擇雞抗逆性能的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種選擇雞抗逆性能的方法；包括：提取雞血液DNA；采用兩對引物對進行PCR擴增；第一引物對為SEQ ID NO:1，SEQ ID NO:2；第二引物對為SEQ ID NO:3,SEQ ID NO:4；電泳檢測PCR擴增片段確定具體基因型；選擇性淘汰LALB基因型，保留LALA基因型。本發(fā)明的方法中，LALA基因型的雞孵化率高，成活率高，適應(yīng)環(huán)境能力強。
【專利說明】
-種選擇雞抗逆性能的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明屬于養(yǎng)殖業(yè)技術(shù)領(lǐng)域，設(shè)及雞育種技術(shù)，具體設(shè)及一種選擇雞抗逆性能的 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 雞在遭受氣候變化、營養(yǎng)因子變化和傳染病源侵襲時，雞的健康水平和生產(chǎn)水平 會發(fā)生下降，嚴重時會發(fā)生疾病，甚至死亡。如果雞群環(huán)境不能得到及時調(diào)整，或及時采取 免疫和治療等措施，雞群的死亡率會進一步上升，產(chǎn)蛋率進一步下降。雞的抗逆性能受雞的 生長發(fā)育水平和遺傳控制。近幾年來，雞的成活率水平不斷提高，未發(fā)生重大疾病的雞群72 周齡成活率從10年前的85-90%提高到現(xiàn)在的90-95%。規(guī)模化雞場雞成活率的提高主要有 3方面的貢獻。一方面是規(guī)模化雞場的生產(chǎn)從業(yè)人員的生產(chǎn)經(jīng)驗提高了，第二方面，社會化 分工的貢獻。運包括多個方面，如政府主導的疫控中屯、加強對小群體養(yǎng)戶的免費強制免疫， 疫苗競爭帶來了更好的質(zhì)量，飼料競爭帶來更好的服務(wù)，市場價格大的起伏淘汰了環(huán)境較 差的養(yǎng)戶。第Ξ方面，也是最主要的方面，是由于育種公司在雞配套系選育方面做了大量的 工作。當前育種公司提高雞抗逆性的技術(shù)包括:雞垂直傳播疾病凈化，家系選育和標記輔助 選育。雞垂直傳播疾病凈化主要是凈化雞白頻沙口氏菌和禽白血病，免疫雞毒支原體和雞 滑液囊霉形體，通過10多年持之W恒的努力，提高了雞的免疫保護能力。家系選育主要是通 過利用雞的家系信息，分析雞的死亡和淘汰，估計雞個體和家系的抗逆性能，選擇抗逆性能 好的家系。標記輔助選擇主要是選擇雞的主組織相容復(fù)合體基因，如通過淘汰ev21單倍型， 降低雞白血病的易感性，從而提高雞的抗逆性。
[0003] 溶菌酶是動物植物自有的蛋白質(zhì)，該蛋白質(zhì)能溶解細菌的細胞壁，從而抑制細菌 繁殖，甚至消滅細菌。溶菌酶被廣泛地用于醫(yī)療和食品領(lǐng)域。但利用溶菌酶基因開展雞抗逆 性的選育還沒有報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種選擇雞抗逆性能的方法，通過基因選擇提高雞的抗逆 性能。
[0005] 本發(fā)明的發(fā)明人在研究C型溶菌酶時，在高產(chǎn)蛋雞品系中發(fā)現(xiàn)了40個單核巧酸突 變位點（SNP)和5個缺失插入片段(inde 1 )，構(gòu)成了雞溶菌酶基因的多態(tài)性。高產(chǎn)蛋雞品系經(jīng) 過10多年的選擇W后，形成了巧巾基因型，運2個基因型的基因序列與雞參考基因圖譜的基 因序列有多達100多個位點的差異。在選擇后的雞群基因型中1個基因長度比另一個基因長 4bp，長的基因型命名為LA，短的為LB。發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)LA的解化率和成活率高于LB，而且LA 對LB顯性。檢測第二、第四和第五個插入缺失，檢測溶菌酶基因型。第二個插入缺失片段是 30bp，-4046_-4015delGACAAGTTTATGCATTTTATTACTTCTATT(SEQ ID N0:5)，第四個插入缺失 片段是2345_2365delATAGCACAGGGCTTATGCTGC(SEQ ID N0:6)，第五個插入缺失片段是 2378_2382delTGGA。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過W下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：
[0007] 第一方面，本發(fā)明設(shè)及一種選擇雞抗逆性能的方法，所述方法包括如下步驟：
[000引S1、使用通用的技術(shù)步驟提取雞血液DNA;
[0009] S2、w所述雞血液DNA為模板，采用兩個引物對進行PCR擴增；；第一引物對為SEQ ID N0:1，SEQ ID N0:2;第二引物對為沈Q ID N0:3，SEQ ID N0:4;
[0010] S3、電泳檢測PCR擴增片段:如第一引物對PCR擴增片段為153bp，第二引物對PCR擴 增片段為153bp，則為LALA基因型；如如第一引物對PCR擴增片段為183bp，第二引物對PCR擴 增片段為128bp，則為LBLB基因型；如第一引物對PCR擴增片段為153bp，第二引物對PCR擴增 片段為128bp，則為LALB基因型;如如第一引物對PCR擴增片段為183bp，第二引物對PCR擴增 片段為153bp，則為LALB基因型；
[0011 ] S4、淘汰LBLB基因型，選擇性淘汰LALB基因型，保留LALA基因型。
[001^ 優(yōu)選的，如SEQ ID N0:1、SEQ ID脈2所示的第一引物對用于檢測(：型溶菌酶基因 的一個缺失插入片段，該缺失插入片段的序列如SEQ ID N0:5。
[OOU] 優(yōu)選的，如SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:4所示的第二引物對用于檢測C型溶菌酶基因 的兩個缺失插入片段，所述兩個缺失插入片段的序列如SEQ ID N0:6、W及叮GGA"。
[0014] 優(yōu)選的，LA基因的序列如沈Q ID N0:7所示。
[0015] 優(yōu)選的，PCR擴增片段經(jīng)基因測序后的片段的序列如SEQ ID N0:8所示。
[0016] 優(yōu)選的，除了上述插入片段外，LA基因的調(diào)控區(qū)域還具有如SEQ ID NO: 9所示的特 征序列。
[0017] 優(yōu)選的，步驟S4中，選擇性淘汰LALB基因型是視群體大小來進行淘汰，具體為:群 體中，LALA基因型母雞群大于300只時，淘汰LALB基因型母雞;LALA基因型公雞大于80只時， 淘汰LALB基因型公雞。
[0018] 第二方面，本發(fā)明還設(shè)及一種前述的選擇雞抗逆性能的方法在雞育種中的用途。
[0019] 優(yōu)選的，純系留種時，選擇LALA基因型公雞與LALA基因型母雞配種，使后代群體完 全成為LALA基因型。
[0020] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：
[0021] 1、本發(fā)明通過檢測雞溶菌酶基因的基因型，選擇雞溶菌酶基因的抗逆性強的基因 型，從而提高雞的抗逆性能；
[0022] 2、本發(fā)明篩選獲得的具有LALA基因型的雞，解化率高；
[0023] 3、本發(fā)明篩選獲得的具有LALA基因型的雞成活率高；
[0024] 4、本發(fā)明選擇獲得的純LALA基因型雞群體比LBLB基因型群體更能適應(yīng)環(huán)境；
[0025] 5、本發(fā)明選擇獲得的純LALA基因型母雞比LBLB基因型母雞的雞蛋中含有更多的 溶菌酶，即蛋清溶菌酶含量高；
[0026] 6、本發(fā)明篩選獲得的具有LALA基因型的雞的生產(chǎn)性能與LBLB-致。
【具體實施方式】
[0027] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進行詳細說明。W下實施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù)人員 進一步理解本發(fā)明，但不W任何形式限制本發(fā)明。應(yīng)當指出的是，對本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員 來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可W做出若干調(diào)整和改進。運些都屬于本發(fā)明的保 護范圍。
[002引實施例
[0029] 1、設(shè)計2對引物，如下表1所示：
[0030] 表 1
[0031]
[0032]
[0033] 2、采用通用的DNA提取技術(shù)和PCR檢測技術(shù)，提取雞的血液DNA，運用設(shè)計好的DNA 引物序列，使用已知LALA和LBLB的雞DNA做參照，檢測序列1和序列2的片段（即C型溶菌酶基 因中的3個插入缺失片段）。
[0034] 3、確定個體的C型溶菌酶基因的基因型。具體為：電泳檢測PCR擴增片段，2個基因 的片段如下表2,根據(jù)片段的大小，確定屬于LA或LB基因型；
[0035] 表 2
[0036]
[0037] 在本發(fā)明中，LA基因的序列如SEQ ID N0:7所示;上述PCR擴增片段經(jīng)基
[0038] 因測序后的片段的序列如SEQ ID N0:8所示。除了上述插入片段外，LA基因的
[0039] 調(diào)控區(qū)域還具有如SEQ ID NO:9所示的特征序列。
[0040] 獲得的LALA、LALB和LBLB基因型雞的生產(chǎn)性能如下表3:
[0041] 表3巧巾基因型的生產(chǎn)性能
[0042]
[0043]
[0044] 4、如發(fā)現(xiàn)群體中有LBLB基因型，淘汰該基因型；如群體中存在LALA基因型，保留 LALA基因型。對于LALB基因型，視群體大小進行淘汰，具體為:LALA群大于300只母雞時，淘 汰LALB母雞;LALA公雞大于80只時，可淘汰LALB公雞。
[0045] 5、純系留種時，選擇LALA公雞與LALA母雞配種，使后代群體完全成為LALA基因型。
【主權(quán)項】
1. 一種選擇雞抗逆性能的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟： 51、 提取雞血液DNA; 52、 以所述雞血液DNA為模板，采用兩對引物對進行PCR擴增;第一引物對如SEQ ID NO: 1，SEQIDN0:2所示；第二引物對如SEQIDN0:3，SEQIDN0:4所示； 53、 電泳檢測PCR擴增片段:如第一引物對PCR擴增片段為153bp，第二引物對PCR擴增片 段為153bp，則為LALA基因型；如如第一引物對PCR擴增片段為183bp，第二引物對PCR擴增片 段為128bp，則為LBLB基因型；如第一引物對PCR擴增片段為153bp，第二引物對PCR擴增片段 為128bp，則為LALB基因型;如如第一引物對PCR擴增片段為183bp，第二引物對PCR擴增片段 為153bp，則為LALB基因型； 54、 淘汰LBLB基因型，選擇性淘汰LALB基因型，保留LALA基因型。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇雞抗逆性能的方法，其特征在于，如SEQ ID NO: 1、SEQ ID N0:2所示的第一引物對用于檢測C型溶菌酶基因的一個缺失插入片段，該缺失插入片段的 序列如SEQ ID N0:5。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇雞抗逆性能的方法，其特征在于，如SEQ ID N0:3、SEQ ID NO: 4所示的第二引物對用于檢測C型溶菌酶基因的兩個缺失插入片段，所述兩個缺失插入 片段的序列如SEQ ID N0:6、以及"TGGA"。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇雞抗逆性能的方法，其特征在于，步驟S4中，選擇性淘汰 LALB基因型是視群體大小來進行淘汰，具體為:群體中，LALA基因型母雞群大于300只時，淘 汰LALB基因型母雞;LALA基因型公雞大于80只時，淘汰LALB基因型公雞。5. -種如權(quán)利要求1所述的選擇雞抗逆性能的方法在雞育種中的用途。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，純系留種時，選擇LALA基因型公雞與LALA 基因型母雞配種，使后代群體完全成為LALA基因型。
【文檔編號】A01K67/027GK106011232SQ201610312462
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月12日
【發(fā)明人】嚴華祥, 楊長鎖, 姚峻峰, 徐志剛, 李紅, 王家豪
【申請人】上海市農(nóng)業(yè)科學院