一種天冬氨酸?1?叔丁酯衍生物的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種天冬氨酸?1?叔丁酯衍生物的制備方法，屬于多肽合成領(lǐng)域。本發(fā)明提供一種天冬氨酸?1?叔丁酯衍生物的制備方法，包括以下步驟：(1)將天冬氨酸制得天冬氨酸?4?叔丁酯和天冬氨酸?1?叔丁酯混合物；(2)將天冬氨酸?4?叔丁酯和天冬氨酸?1?叔丁酯混合物與過(guò)渡金屬M(fèi)的鹽混合，得到M[Asp(OtBu)]x和M(Asp?OtBu)x的混合物，其中，1≤x≤2；(3)步驟(2)所得混合物再與保護(hù)試劑反應(yīng)，選擇性反應(yīng)得到天冬氨酸?1?叔丁酯的衍生物。本發(fā)明方法步驟短，成本低，生產(chǎn)時(shí)效高，易于工業(yè)化大量生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】
一種天冬氨酸-1 -叔丁酯衍生物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，屬于多肽合成領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物如芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯是多肽合成中常用 的一種基礎(chǔ)原料，用于合成胸腺五肽，胸腺法新肽等多種藥物肽。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中，芴甲氧羰酰天冬氨酸-叔丁酯的制備方法主要為：
[0004] 方法1:是用Z-Asp，通過(guò)DCC或者醋酸酐制備Z-Asp內(nèi)酸酐，在二環(huán)己胺存在下與甲 醇，乙醇，芐醇反應(yīng)，制得Asp的1-位甲酯，乙酯，芐酯;但該方法不能制得1位叔丁酯。
[0005] 方法2,Asp用硫酸催化和苯甲醇制得Asp(OBzl)，再用硫酸催化與異丁稀加成，或 者高氯酸催化與醋酸叔丁酯轉(zhuǎn)酯制得Asp(0Bzl)-0tB U，經(jīng)水解或者氫解制得Asp-OtBu， Asp-〇tBu再與Fmoc-Cl或者Fmoc-〇Su反應(yīng)制得Fmoc-Asp-〇tBu，該方法線路長(zhǎng)，水解時(shí)1位叔 丁酯不穩(wěn)定，收率低;氫解昂貴，成本高。
[0006] 本領(lǐng)域急需一種低成本、簡(jiǎn)單的制備天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的在于提供一種天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，該方法步驟 短，成本低，生產(chǎn)時(shí)效高，易于工業(yè)化大量生產(chǎn)。
[0008] 本發(fā)明的技術(shù)方案：
[0009] 本發(fā)明提供一種天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，包括以下步驟：
[0010] (1)將天冬氨酸(Asp)制得天冬氨酸-4-叔丁酯(Asp(OtBu))和天冬氨酸-1-叔丁酯 (Asp-〇tBu)混合物；
[0011] (2)將天冬氨酸-4-叔丁酯(Asp(OtBu))和天冬氨酸-1-叔丁酯(Asp-OtBu)混合物 與過(guò)渡金屬Μ的鹽混合，得到M[Asp(0tBu)]x和M(Asp-OtBu)^混合物，其中，1彡X彡2;
[0012] (3)步驟(2)所得混合物再與保護(hù)試劑反應(yīng)，選擇性反應(yīng)得到天冬氨酸-1-叔丁酯 的衍生物；
[0013] 所述選擇性反應(yīng)過(guò)程為：
[0014] 調(diào)節(jié)M[ASp(0tBu)]4PM(Asp-0tBu)J^混合物溶液的pH值為8~9,加入保護(hù)試劑， 維持溶液的pH值為8~9反應(yīng)，反應(yīng)7~10小時(shí)，再經(jīng)酸化、萃取、結(jié)晶、過(guò)濾和干燥，得到天冬 氨酸-1-叔丁酯衍生物;其中，保護(hù)試劑與蟣六叩((^81 1)]4圓以叩-(^811)^混合物中氨基的摩 爾比為1~5:10。
[0015] 進(jìn)一步，步驟（1)中，所述將Asp制得Asp(OtBu)和Asp-OtBu混合物的采用下述方法 一:具體步驟為:將Asp與醋酸叔丁酯混合，在高氯酸的催化作用下進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，得到Asp (OtBu)2，Asp(OtBu)和Asp-OtBu的混合物，再經(jīng)中和，調(diào)節(jié)pH 8~9，Asp(OtBu)2分配在醋酸 叔丁酯相，Asp(OtBu)和Asp-OtBu混合物分配到水相，取水相混合物待下一步驟使用;其中， Asp、醋酸叔丁酯與高氯酸的物質(zhì)的量比為1:5~20:1.2~2。
[0016] 所述Asp與醋酸叔丁酯反應(yīng)時(shí)的溫度為15~20°C，反應(yīng)時(shí)間為36~48小時(shí)。
[00?7] 步驟(1)中，所述將Asp制得Asp (OtBu)和Asp-OtBu混合物的采用下述方法二：
[0018] 將天冬氨酸懸浮于二氯甲烷，在無(wú)水對(duì)甲苯磺酸的催化作用下通入異丁烯進(jìn)行加 成反應(yīng)，得到 48。（<^1311)2、48。（(^1311)和48。-(^1311的混合物，調(diào)節(jié)。!1=8~9,48。（(^1311)2分配 在醋酸叔丁酯相，Asp (OtBu)和Asp-OtBu混合物分配到水相，取水相混合物待下一步反應(yīng)； 其中，Asp、異丁稀與無(wú)水對(duì)甲苯磺酸的物質(zhì)的量比為1:3~10:1.2~2;所述Asp與異丁稀反 應(yīng)時(shí)的溫度為-10~-5°C，反應(yīng)時(shí)間為48~72小時(shí)。
[0019] 進(jìn)一步，步驟(3)中，選擇性反應(yīng)后，為了提高天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的純度， 采用二環(huán)己胺進(jìn)行結(jié)晶純化，再脫去二環(huán)己胺得高純度天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物。
[0020] 步驟2中，所述過(guò)渡金屬Μ的鹽選自〇11、？6、〇3、]\111、211、0、附、0(1或取的硫酸鹽、硝酸 鹽或氯化鹽;優(yōu)選為CuS〇4、Cu (Ν〇3) 2、CuCl 2或Cu2 (OH) 2C03;更優(yōu)選為CuS〇4。在本發(fā)明中，所述 過(guò)渡金屬Μ的鹽含結(jié)晶水也可以使用。
[0021 ] 步驟2中，所述Asp (OtBu)和Asp-OtBu混合物與過(guò)渡金屬Μ的鹽按照摩爾比為1~2: 1的比例混合，制得M[Asp(0tBu) ]χ和M(Asp-〇tBu)x混合物。
[0022]其中，步驟3中，所述保護(hù)試劑不特別限定，只要含有能與氨基發(fā)生反應(yīng)的基團(tuán)的 保護(hù)劑都行。
[0023]更優(yōu)選的，所述保護(hù)試劑為芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺(Fmoc-OSu)、芴甲氧羰酰氯 (Fmoc-Cl)，二碳酸二叔丁酯（（Boc)20)、苯甲氧羰酰琥珀酰亞胺(CbzOSu)或苯甲氧羰酰氯。 [0024]當(dāng)保護(hù)試劑為芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺(Fmoc-OSu)或芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl)時(shí)， 所述選擇性反應(yīng)過(guò)程為：
[0025]調(diào)節(jié)M[Asp(0tBu)]x和M(Asp-〇tBu)J^混合物溶液的pH值為8~9,加入保護(hù)試劑， 維持反應(yīng)液的pH值為8~9,反應(yīng)7~10小時(shí)，再經(jīng)酸化、萃取、結(jié)晶，得到芴甲氧羰酰天冬氨 酸-1-叔丁酯;其中，保護(hù)試劑與M[Asp(0tBu)] x，和M(Asp-〇tBu)x混合物中氨基的摩爾比為1 ~5:10〇
[0026]本發(fā)明的有益效果：
[0027] 本發(fā)明提供一種簡(jiǎn)易的芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯的制備方法。該方法步驟 短，成本低，生產(chǎn)時(shí)效高，易于工業(yè)化大量生產(chǎn)。該方法省去常規(guī)生產(chǎn)中的第一步天冬氨酸4 位酯保護(hù)和水解或者氫解脫保護(hù)過(guò)程，選擇性的直接制得1位目標(biāo)產(chǎn)物，省略掉繁瑣的中間 反應(yīng)步驟，是一種更優(yōu)更快、效率高的芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯的制備方法。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 本發(fā)明提供一種天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，包括以下步驟：
[0029] (1)將天冬氨酸(Asp)制得天冬氨酸-4-叔丁酯(Asp(OtBu))和天冬氨酸-1-叔丁酯 (Asp-OtBu)混合物；
[0030] (2)將天冬氨酸-4-叔丁酯(Asp(OtBu))和天冬氨酸-1-叔丁酯(Asp-OtBu)混合物 與過(guò)渡金屬Μ的鹽混合，得到1〇8?((^11)]4圓(48?-(^1^的混合物，其中，1^^彡2 ;
[0031] (3)步驟(2)所得混合物再與保護(hù)試劑反應(yīng)，選擇性反應(yīng)得到天冬氨酸-1-叔丁酯 的衍生物；
[0032] 所述選擇性反應(yīng)過(guò)程為：
[0033]調(diào)節(jié)M[Asp(0tBu)]x和M(Asp-〇tBu)J^混合物溶液的pH值為8~9,加入保護(hù)試劑， 維持反應(yīng)液的pH值為8~9,反應(yīng)7~10小時(shí)，再經(jīng)酸化、萃取、結(jié)晶、過(guò)濾和干燥，得到天冬氨 酸-1-叔丁酯衍生物;其中，保護(hù)試劑與M[Asp(0tBu)] x和M(Asp-〇tBu)dg合物中氨基的摩爾 比為1~5:10。
[0034]加入保護(hù)試劑時(shí)，可以先加入一定量的四氫呋喃等有機(jī)溶劑助溶，使得不溶于水 的保護(hù)試劑能溶解在混合體系中，有利于反應(yīng)得進(jìn)行。
[0035]此處酸化的目的是，經(jīng)過(guò)酸化使得羧基鈉鹽變成游離的羧基，才能更好的溶于萃 取劑，有利于后續(xù)萃取。
[0036] 本發(fā)明中，加入二價(jià)螯合金屬后，Asp，Asp(0tBu)，Asp-〇tBu均可以形成金屬螯合 物，但是Asp-OtBu形成的螯合物穩(wěn)定性差，容易和保護(hù)試劑發(fā)生反應(yīng)，生成目標(biāo)產(chǎn)物;Asp (OtBu)形成的螯合物更穩(wěn)定，與保護(hù)試劑反應(yīng)的量很少，且Fmoc-Asp(OtBu)在后面結(jié)晶過(guò) 程可以除掉;Asp在該反應(yīng)體系下溶解性差，與保護(hù)試劑反應(yīng)的也很少，后面萃取過(guò)程可以 用堿水洗掉;從而通過(guò)選擇性反應(yīng)得到本發(fā)明的目標(biāo)產(chǎn)物；當(dāng)然，這里保護(hù)試劑不宜過(guò)量， 如果保護(hù)試劑過(guò)量，那么前面所有的反應(yīng)都有可能發(fā)生。
[0037] 進(jìn)一步，步驟1中，所述將Asp制得Asp (OtBu)和Asp-OtBu混合物的采用下述方法 一:具體步驟為:將Asp與醋酸叔丁酯混合，在高氯酸的催化作用下進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，得到Asp (OtBu) 2，Asp (OtBu)和Asp-OtBu的混合物，再經(jīng)中和，調(diào)節(jié)pH值為8~9，Asp (OtBu) 2分配在醋 酸叔丁酯相，Asp(OtBu)和Asp-OtBu混合物分配到水相，取水相混合物待下一步驟使用；其 中，Asp、醋酸叔丁酯與高氯酸的物質(zhì)的量比為1:5~20:1.2~2;
[0038] Asp+tert-buty lace tate-Asp( OtBu) 2+Asp( OtBu)+Asp-〇tBu 其合成路線如下：
[0040] 所述Asp與醋酸叔丁酯反應(yīng)時(shí)的溫度為15~20°C，反應(yīng)時(shí)間為36~48小時(shí)。
[0041 ] 步驟1中，所述將Asp制得Asp(OtBu)和Asp-OtBu混合物的采用下述方法二：
[0042]將天冬氨酸懸浮于二氯甲烷，在無(wú)水對(duì)甲苯磺酸的催化作用下通入異丁烯進(jìn)行加 成反應(yīng)，得到 48。（<^1311)2、48。（(^1311)和48。-(^1311的混合物，調(diào)節(jié)。!1=8~9,48。（(^1311)2分配 在醋酸叔丁酯相，Asp (OtBu)和Asp-OtBu混合物分配到水相，取水相混合物待下一步反應(yīng)； 其中，Asp、異丁烯與無(wú)水對(duì)甲苯磺酸的物質(zhì)的量比為1:3~10:1.2~2:
其合成路線如下：
[0045] 所述Asp與異丁烯反應(yīng)時(shí)的溫度為-10~-5°C，反應(yīng)時(shí)間為48~72小時(shí)。
[0046] 步驟2中，所述過(guò)渡金屬Μ的鹽選自〇11、？6、〇3、]\111、211、0、附、0(1或取的硫酸鹽、硝酸 鹽或氯化鹽;優(yōu)選為CuS〇4、Cu (Ν〇3) 2、CuCl 2或CU2 (OH) 2C〇3;更優(yōu)選為CuS〇4。在本發(fā)明中，所述 過(guò)渡金屬Μ的鹽含結(jié)晶水也可以使用。
[0047] 步驟2中，所述Asp(OtBu)和Asp-OtBu混合物與過(guò)渡金屬鹽按照摩爾比為1~2:1的 比例混合，制得M[Asp(0tBu)]x和M(Asp-〇tBu)x混合物。
[0048] 其中，步驟3中，所述保護(hù)試劑不特別限定，只要含有能與氨基發(fā)生反應(yīng)的基團(tuán)保 護(hù)劑
[0049] 優(yōu)選的，所述保護(hù)試劑為芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺（Fmoc-OSu)、芴甲氧羰酰氯 (Fmoc-Cl)，二碳酸二叔丁酯（（Boc) 20)、苯甲氧羰酰琥珀酰亞胺(CbzOSu)或苯甲氧羰酰氯 (CbzCl)。
[0050] 與 Fmoc-〇Su或者 Fmoc-Cl反應(yīng)得到Fmoc-Asp-〇tBu，把 Fmoc-Asp-〇tBu在乙酸乙酯、 石油醚1:2混合體系中，加入等量的二環(huán)己胺得到Fmoc-Asp-OtBu.DCHA，得到的二環(huán)己胺鹽 進(jìn)行結(jié)晶純化，再脫去DCHA，可得到高純的Fmoc-Asp-〇tBu。與（二碳酸二叔丁酯）反應(yīng)制得 Boc-Asp-〇tBu，與CbzOSu (苯甲氧羰酰琥?自酰亞胺)反應(yīng)制得Cbz-Asp-〇tBu。
[0051 ]當(dāng)含F(xiàn)moc基團(tuán)的保護(hù)試劑為荷甲氧羰酰琥?白酰亞胺(Fmoc-〇Su)或荷甲氧碳酰氯 (Fmoc-Cl)時(shí)，所述選擇性反應(yīng)過(guò)程為：
[0052] M[Asp(0tBu)]x和M(Asp-〇tBu)J^混合物，調(diào)節(jié)溶液的pH值為8~9,加入Fmoc基團(tuán) 的保護(hù)試劑，維持反應(yīng)液的pH值為8~9,反應(yīng)7~10小時(shí)，再經(jīng)酸化、萃取、結(jié)晶，得到芴甲氧 羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯;其中，F(xiàn)moc基團(tuán)的保護(hù)試劑與M[Asp(0tBu) ]JPM(Asp-〇tBu)x混合 物中氨基的摩爾比為1~5:10;其合成路線如下： Γ Λ ^ , r, 心 S:THF R:NaCO, 「 A ,、"
[0053] Asp-OtBu+Fmoc-OSu Fmoc-Asp-OiBu - S:THF R:Na：CO.；
[0054] Asp-OtBu+Fmoc C 1 _^ Fmoc-AsjH〇tI3:W。
[0055] 本發(fā)明中的物質(zhì)名稱解釋表如表1所示。
[0056] 表 1
[0058] 本發(fā)明以下實(shí)施例通過(guò)設(shè)置銅鹽中的Cu2+對(duì)Asp(OtBu)螯合，封閉Cu[Asp(0tBu)] x 氨基，選擇性的讓Cu(Asp-〇tBu)x與Fmoc基團(tuán)的保護(hù)試劑反應(yīng)，制得Fmoc-Asp-〇tBu。大大簡(jiǎn) 化了工藝路線，降低了成本，適用于大規(guī)模生產(chǎn);本發(fā)明通過(guò)設(shè)置獨(dú)特的工藝路線，在特有 的工藝條件下制備芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯，收率高，產(chǎn)品質(zhì)量也得到大大提高。
[0059] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】做進(jìn)一步的描述，并不因此將本發(fā)明限 制在所述的實(shí)施例范圍之中。
[0060] 實(shí)施例1芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯的制備
[0061] 具體包括以下步驟：
[0062] (1)將天冬氨酸(Asp)制得天冬氨酸-5-叔丁酯(Asp(OtBu))和天冬氨酸-1-叔丁酯 (Asp-〇tBu)混合物：在2000mL三口瓶中加入581g醋酸叔丁酯和133g天冬氨酸，攪拌，滴加 100mL高氯酸，在20°C下反應(yīng)48小時(shí)，降溫至0°C，再加入600mL水，用Na2C03中和至pH=8~9， 分液，再用100mL 1 % Na2C03水溶液洗三次，合并水相，用石油醚200ml萃取三次；
[0063] (2)步驟（1)得到的水相轉(zhuǎn)入2L三口瓶，再加入187.5g CuS〇4 · 5H20,攪拌，用碳酸 鈉調(diào)節(jié)pH為8~9。加入四氫呋喃100ml，加入Fmoc-0Su33.7g，維持pH為8~9，反應(yīng)8小時(shí)，制 得粗產(chǎn)品芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯;再將該粗品用HC1酸化，用300ml乙酸乙酯萃取， 水洗，硫酸鈉干燥，過(guò)濾，加入500ml石油醚(調(diào)節(jié)溶劑極性，降低產(chǎn)品在溶劑中的溶解度）， 滴加二環(huán)己胺(二環(huán)己胺的量與相應(yīng)的酸等摩爾量)結(jié)晶，過(guò)濾得到Fmoc-Asp-OtBu · DCHA; Fmoc-Asp-〇tBu · DCHA加入300ml乙酸乙酯中，用檸檬酸水溶液水洗脫去二環(huán)己胺，經(jīng)水洗， 干燥，濃縮結(jié)晶，過(guò)濾，烘干，制得33g芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯。
[0064]通過(guò)HPLC對(duì)產(chǎn)品芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯進(jìn)行分析，芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯的純度為99.11 %，旋光度為-22.7(C=1，in DMF)，熔點(diǎn)為104.6~106.5,異構(gòu)體 含量為0.16%。
[0065]實(shí)施例2芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯的制備 [0066]具體包括以下步驟：
[0067] (1)將天冬氨酸(Asp)制得天冬氨酸-5-叔丁酯(Asp(OtBu))和天冬氨酸-1-叔丁酯 (Asp-OtBu)混合物:在3000mL三口瓶中加入1162g醋酸叔丁酯和133g天冬氨酸，攪拌，滴加 130mL高氯酸，在15°C下反應(yīng)30小時(shí)，降溫至0°C，再加入600mL水，用Na2C03中和至pH=8~9， 分液，再用100mL 1 % Na2C03水溶液洗三次，合并水相，石油醚200ml萃取三次；
[0068] (2)步驟（1)得到的水相轉(zhuǎn)入2L三口瓶，再加入93.75g CuS〇4 · 5H20,攪拌，用碳酸 鈉調(diào)節(jié)pH為8~9。加入四氫呋喃100ml，F(xiàn)moc-〇Su 67.4g，維持pH為8~9,反應(yīng)8小時(shí)，制得粗 產(chǎn)品芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯;再將該粗品用HC1酸化，用600ml乙酸乙酯萃取，水洗， 硫酸鈉干燥，過(guò)濾，加入l〇〇〇ml石油醚，滴加等量二環(huán)己胺結(jié)晶，過(guò)濾得到？!11 〇(34叩-OtBu. DCHAJmoc-Asp-OtBu. DCHA加入600ml乙酸乙酯中，用梓檬酸水溶液水洗脫去二環(huán)己 胺，經(jīng)水洗，干燥，濃縮結(jié)晶，過(guò)濾，烘干，制得61g芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯。
[0069]通過(guò)HPLC對(duì)產(chǎn)品芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯進(jìn)行分析，芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯的純度為99.62%，旋光度為-22.8(C=1，in DMF)，熔點(diǎn)為106.2~109.5,異構(gòu)體 含量為0.15%。
[0070] 實(shí)施例3芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯的制備
[0071] 具體包括以下步驟：
[0072] (1)將天冬氨酸(Asp)制得天冬氨酸-5-叔丁酯(Asp(OtBu))和天冬氨酸-1-叔丁酯 (Asp-OtBu)混合物：在3000mL三口瓶中加入二氯甲烷2L，和133g天冬氨酸，攪拌，加入200g 無(wú)水對(duì)甲苯磺酸，維持-10~-5攝氏度，通入異丁稀168g，反應(yīng)48小時(shí)，再加入600mL水，用 Na2C03中和至pH=8~9，分液，再用100mL 1 % Na2C03水溶液洗三次，合并水相，石油醚200ml 萃取二次；
[0073] (2)步驟（1)得到的水相轉(zhuǎn)入2L三口瓶，再加入120g CuS〇4 · 5H20,攪拌，用碳酸鈉 調(diào)節(jié)pH為8~9，加入四氫呋喃100ml，F(xiàn)moc-〇Su，50 · 5g維持pH為8~9，反應(yīng)8小時(shí)，制得粗產(chǎn) 品芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯;再將該粗品用HC1酸化，用450ml乙酸乙酯萃取，水洗，硫 酸鈉干燥，過(guò)濾，加入800ml石油醚，滴加等量二環(huán)己胺結(jié)晶，過(guò)濾得到？!11 〇^叩-OtBu. DCHAJmoc-Asp-OtBu. DCHA加入450ml乙酸乙酯中，用檸檬酸水溶液水洗脫去二環(huán)己 胺，經(jīng)水洗，干燥，濃縮結(jié)晶，過(guò)濾，烘干，制得46.6g芴甲氧羰酰天冬氨酸-1 -叔丁酯。
[0074]通過(guò)HPLC對(duì)產(chǎn)品芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯進(jìn)行分析，芴甲氧羰酰天冬氨酸-1-叔丁酯的純度為98.64%，旋光度為-22.9(C=1，in DMF)，熔點(diǎn)為103.4~107.8,異構(gòu)體 含量為0.17%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 將天冬氨酸制得天冬氨酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯混合物； (2) 將天冬氨酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯混合物與過(guò)渡金屬Μ的鹽混合，得到Μ [Asp(OtBu) ]χ和M(Asp-〇tBu)x的混合物，其中，Κχ<2; (3) 步驟（2)所得混合物再與保護(hù)試劑選擇性反應(yīng)，再經(jīng)酸化、萃取、結(jié)晶得到天冬氨 酸-1-叔丁酯的衍生物； 所述選擇性反應(yīng)為：調(diào)節(jié)M[Asp(0tBu) iUPMUsp-OtlkOJ^混合物溶液的pH值為8~9， 加入保護(hù)試劑，維持溶液的p Η值為8~9反應(yīng)，反應(yīng)7~10小時(shí)；其中，保護(hù)試劑與Μ [ A s p (OtBu)]x和M(Asp-〇tBu)x混合物中氨基的摩爾比為1~5:10。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于，步驟（1) 中，所述將天冬氨酸制得天冬酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯混合物的采用下述方法 將天冬氨酸與醋酸叔丁酯混合，在高氯酸的催化作用下進(jìn)行轉(zhuǎn)酯反應(yīng)，得到天冬氨酸 雙叔丁酯，天冬氨酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯的混合物，再經(jīng)中和，調(diào)節(jié)pH 8~9,天 冬氨酸雙叔丁酯分配在醋酸叔丁酯相，天冬氨酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯混合物分 配到水相，取水相混合物待下一步驟使用；其中，天冬氨酸、醋酸叔丁酯與高氯酸的物質(zhì)的 量比為1:5~20:1.2~2。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于，所述天冬 氨酸與醋酸叔丁酯反應(yīng)時(shí)的溫度為15~20°C，反應(yīng)時(shí)間為36~48小時(shí)。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于，步驟（1) 中，所述將天冬氨酸制得天冬氨酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯混合物采用下述方法 將天冬氨酸懸浮于二氯甲烷，在無(wú)水對(duì)甲苯磺酸的催化作用下通入異丁烯進(jìn)行加成反 應(yīng)，得到天冬氨酸雙叔丁酯，天冬氨酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯的混合物，調(diào)節(jié)pH為 8~9,天冬氨酸雙叔丁酯分配在醋酸叔丁酯相，冬氨酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯混 合物分配到水相，取水相混合物待下一步反應(yīng);其中，天冬氨酸、異丁烯與無(wú)水對(duì)甲苯磺酸 的物質(zhì)的量比為1:3~10:1.2~2;所述天冬氨酸與異丁烯反應(yīng)時(shí)的溫度為-10~-5°C，反應(yīng) 時(shí)間為48~72小時(shí)。5. 根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于， 步驟(3)中，選擇性反應(yīng)后，采用二環(huán)己胺進(jìn)行結(jié)晶純化，再脫去二環(huán)己胺得高純度天冬氨 酸-1-叔丁酯衍生物。6. 根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于， 步驟(2)中，所述過(guò)渡金屬Μ的鹽選自〇11、？6、〇3、]\111、211、0、附、0(1或取的硫酸鹽、硝酸鹽或氯 化鹽。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于，所述過(guò)渡 金屬Μ的鹽為CuS〇4、Cu (Ν〇3) 2、CuCl 2或Cu2 (OH) 2C03;優(yōu)選為CuS〇4。8. 根據(jù)權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于， 步驟(2)中，所述天冬氨酸-4-叔丁酯和天冬氨酸-1-叔丁酯混合物與過(guò)渡金屬Μ的鹽按照摩 爾比為1~2:1的比例混合，制得M[Asp(0tBu)] x和M(Asp-〇tBu)x混合物。9.根據(jù)權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述天冬氨酸-1-叔丁酯衍生物的制備方法，其特征在于， 步驟(3)中，所述保護(hù)試劑為芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺、芴甲氧羰酰氯，二碳酸二叔丁酯、苯甲 氧羰酰琥珀酰亞胺或苯甲氧羰酰氯。
【文檔編號(hào)】C07C271/22GK106045883SQ201610369639
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年5月27日
【發(fā)明人】付若彬, 鄭征, 彭章勤, 仲良
【申請(qǐng)人】成都鄭源生化科技有限公司