一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法
【專利摘要】一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法，其特征在于：包括6種液體好氧菌劑與4種液體厭氧菌劑，液體好氧菌劑由液體產(chǎn)朊假絲酵母菌劑、液體硝酸菌劑、液體細黃鏈霉菌劑、液體枯草芽孢桿菌劑、液體地衣芽孢桿菌劑、液體納豆芽孢桿菌劑組成；液體厭氧菌劑由液體沼澤紅假單胞菌劑、液體雙岐桿菌劑、液體植物乳菌劑、液體嗜酸乳桿菌劑組成。制備方法包括以下步驟：將6種好氧菌培養(yǎng)制成6種液體好氧菌劑；將4種厭氧菌培養(yǎng)制成4種混合的液體厭氧菌劑；將6種液體好氧菌劑注入到液體厭氧菌劑中，得到復(fù)合微生物液體菌劑。本發(fā)明制備的復(fù)合液體微生物菌劑的保存期比一般制劑延長數(shù)倍，具有分解污物、凈化水體、修復(fù)生態(tài)環(huán)境的作用。
【專利說明】
一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及屬于農(nóng)業(yè)微生物、生態(tài)種植和微生物菌劑技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前，我國畜牧業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)濫用抗生素的現(xiàn)象普遍，被超量抗生素污染的水體通過生態(tài)循環(huán)，導(dǎo)致人體細菌耐藥性增大，損害了人體健康。水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中濫用化肥肥水的現(xiàn)象也非常普遍，化肥超量使用加速了水體腐敗發(fā)臭，亞硝酸鹽、氨氮、硫化氫、甲烷等有害物質(zhì)超標(biāo)，養(yǎng)殖的水產(chǎn)品藥化殘留超標(biāo)，品質(zhì)下降，威脅人體健康，也對生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重破壞。
[0003]最近，國家農(nóng)業(yè)部已經(jīng)提出了化肥農(nóng)藥零增長的行動方案。要實現(xiàn)化肥農(nóng)藥零增長的同時又要保證農(nóng)產(chǎn)品增產(chǎn)增收實現(xiàn)供給側(cè)的有效供應(yīng)，就需要能夠有效替代化肥農(nóng)藥的產(chǎn)品。由此能夠替代化肥和減少農(nóng)藥的微生物制劑成為當(dāng)前發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè)的急需，用微生物制劑來改善養(yǎng)殖環(huán)境，改良產(chǎn)品品質(zhì)，實現(xiàn)增產(chǎn)增收，已成為現(xiàn)代養(yǎng)殖的必然趨勢，是發(fā)展綠色可持續(xù)高效生態(tài)農(nóng)業(yè)的必然選擇。
[0004]在飼料中添加微生物有益菌，可以促進動物對飼料的消化吸收，增強免疫力和防病抗病能力，可大幅度減少抗生素用量;在養(yǎng)殖水體中添加微生物有益菌，可分解污染物，解毒，凈化水質(zhì)，增加溶氧，可大幅度減少化肥肥水用量，使生態(tài)水環(huán)境得到修復(fù)和改良。
[0005]近年來各種微生物肥料如雨后春筍般大量涌現(xiàn)，但肥效明顯可以達到或超過化肥的產(chǎn)品卻并不多見，其主要原因:一是微生物菌種單一，解決不了作物生長的諸多問題;二是菌劑保存期短，肥效不明顯，無論是單一菌劑還是復(fù)合菌劑都難以解決液體菌劑腐敗、有效菌死亡、保存期短的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法，該復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法解決了微生物菌劑菌種單一、保存期短以及肥效不明顯的問題。
[0007]為達到上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法的技術(shù)方案是:所述復(fù)合微生物液體菌劑包括6種用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的液體好氧菌劑與4種用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的液體厭氧菌劑，所述液體好氧菌劑與液體厭氧菌劑的質(zhì)量比為3:7?7:3;所述液體好氧菌劑由以下質(zhì)量份的菌劑組成:
液體產(chǎn)朊假絲酵母菌劑I?3質(zhì)量份，
液體硝酸菌劑I?3質(zhì)量份，
液體細黃鏈霉菌劑I質(zhì)量份，
液體枯草芽孢桿菌劑I?2質(zhì)量份，
液體地衣芽孢桿菌劑I?2質(zhì)量份， 液體納豆芽孢桿菌劑I?2質(zhì)量份；
所述液體厭氧菌劑由以下質(zhì)量份的菌劑組成:
液體沼澤紅假單胞菌劑I?2質(zhì)量份，
液體雙岐桿菌劑I?2質(zhì)量份，
液體植物乳菌劑I?5質(zhì)量份，
液體嗜酸乳桿菌劑I?5質(zhì)量份；
其中，每一種液體好氧菌劑中的好養(yǎng)菌含量大于等于2億個/毫升，每一種液體厭氧菌劑中的厭氧菌含量大于等于2億個/毫升。
[0008]上述技術(shù)方案中的有關(guān)內(nèi)容解釋如下:
1、上述方案中，所述微生物液體菌劑還包括微量元素，微量元素的添加量為所述復(fù)合微生物液體菌劑質(zhì)量的0.1-0.2%，所述微量元素選自B、Zn、Mn、Cu、Co中任意一種或至少兩種以上的混合物。
[0009]為達到上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑的制備方法的技術(shù)方案是:所述制備方法包括以下步驟:
第一步，將6種好氧菌分別培養(yǎng)制成6種液體好氧菌劑，
(1)分別配制產(chǎn)朊假絲酵母菌、硝酸菌、納豆芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、枯草芽孢桿菌以及地衣芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基，再分別向6種液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C，120?140r/min，pH值在6.5-7.5條件下進行菌種的一級擴大培養(yǎng)，得到6種一級好氧菌液；
(2)再分別取6種一級好氧菌液向6種所述液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C、120?140r/min條件下進行菌種的二級擴大培養(yǎng)，得到6種二級好氧菌液，其中，每種一級好氧菌液的接種量為其液體好氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的0.9-1.1%;
(3 )再取6種二級好氧菌液向6種所述液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C、120?140r/min條件下進行菌種的三級擴大培養(yǎng)，得到6種液體好氧菌劑，其中，每種二級好氧菌液的接種量為其液體好氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的I?1.5%;
第二步，將4種厭氧菌培養(yǎng)制成混合的液體厭氧菌劑，
(1)分別配制沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌以及雙岐桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基，再分別向4種液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C條件下靜置，進行菌種的一級擴大培養(yǎng)，得到4種一級厭氧菌液；
(2)再分別取4種一級厭氧菌液向4種所述液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C條件下靜置，進行菌種的二級擴大培養(yǎng)，得到4種二級厭氧菌液，其中，每種一級厭氧菌液的接種量為其液體厭氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的0.9-1.1%;
(3)分別取4種二級厭氧菌液向4種所述液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C條件下靜置，進行菌種的三級擴大培養(yǎng)，得到4種三級厭氧菌液，其中，每種二級厭氧菌液的接種量為其液體厭氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的I?1.5%;
(4)按上一個技術(shù)方案的配方比例將所述4種三級厭氧菌液直接混合均勻，得到復(fù)合的所述液體厭氧菌劑；
第三步，將6種液體好氧菌劑按權(quán)利要求1的配方比例緩慢注入到復(fù)合的所述液體厭氧菌劑中并攪拌均勻，靜置，待均質(zhì)穩(wěn)定后，得到所述復(fù)合微生物液體菌劑。
[0010]上述技術(shù)方案中的有關(guān)內(nèi)容解釋如下:
1、上述方案中，在所述第三步中，同時加入微量元素，微量元素的添加量為所述復(fù)合微生物液體菌劑質(zhì)量的0.1~0.2%，所述微量元素選自8、211、111、01、(:0中任意一種或至少兩種以上的混合物。
[0011 ] 2、上述方案中，所述產(chǎn)朊假絲酵母菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸銨0.2%，可溶性淀粉2%，碳酸鈣0.5%，豆油0.5%，無菌水95.7% ；
所述硝酸菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蛋白胨1%，磷酸氫二鉀0.1%，酵母膏0.5%，硫酸鎂0.03%，氯化鈉0.5%，無菌水97.87% ；所述納豆芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖3%，磷酸氫二鉀0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂0.2%，無菌水96.5%;
所述細黃鏈霉菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:可溶性淀粉2%，磷酸氫二鉀0.05%，硝酸鉀0.1%，硫酸鎂0.05%，氯化鈉0.005%，硫酸亞鐵0.001%，無菌水97.794% ；
所述枯草芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.05%，酵母膏0.05%，牛肉膏0.02%，蛋白胨0.05%，碳酸鈣0.025%，氯化鈉 0.02%，硫酸錳 0.001%，無菌水98.784% ；
所述地衣芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.05%，酵母膏0.05%，牛肉膏0.02%，蛋白胨0.05%，碳酸鈣0.025%，氯化鈉 0.02%，硫酸錳 0.001%，無菌水98.784% ；
所述沼澤紅假單胞菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:每I升無菌水里含乙酸鈉3.3g，氯化錢0.6g，硫酸鎂0.5g，酵母膏1.5g;
所述植物乳桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含蔗糖20g，酵母膏25g，磷酸氫二鉀2g;
所述嗜酸乳桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含乙酸鈉5g，檸檬酸銨2g，硫酸鎂0.5g，酵母膏6g，牛肉膏12g，磷酸氫二鉀2g，蛋白胨1g，硫酸猛0.05g ；
所述雙岐桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含乳清粉50g，碳酸鈣2g，酵母膏1g。
[0012]本發(fā)明的設(shè)計特點是:本發(fā)明的復(fù)合微生物液體菌劑是好氧菌群與厭氧菌群復(fù)合而成的微生物液體菌劑，其特點為先分別制備A和B兩類復(fù)合微生物菌劑，A菌劑由6種好氧菌及兼性好氧菌組成，每種好氧菌采用好氧發(fā)酵工藝單獨發(fā)酵。B菌劑由4種厭氧菌及兼性厭氧菌組成，4種厭氧菌每種菌株采用厭氧發(fā)酵的工藝單獨厭氧發(fā)酵，再將4種厭氧菌液直接混合得到B制劑。最后將6種A菌劑分別按比例混入B菌劑中。該特點的好處在于，在好氧發(fā)酵階段對6種菌株單獨培養(yǎng)，可在保證菌種純度和功能性的前提下，促進好氧菌快速增長繁殖。好氧發(fā)酵完成后，當(dāng)6種液體好氧菌劑按比例混入?yún)捬醢l(fā)酵的B菌劑中之后，好氧菌群受到厭氧菌群及弱酸條件的抑制，增長繁殖變得緩慢下來，多數(shù)菌株形成了芽孢，菌株間形成互不拮抗的優(yōu)良共生的環(huán)境條件，在常溫下液體菌劑可以保存較長時間。
[0013]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果:
(I)常規(guī)的微生物菌劑在液態(tài)條件下，菌株數(shù)分鐘至數(shù)小時就繁殖一世代，由于不斷快速繁殖生長，菌株很快就會畸形死亡，菌劑就會變黑發(fā)臭，這種菌劑在稀釋后，多數(shù)菌群已經(jīng)變得畸形乏力，無法發(fā)揮其有效功能，在常溫條件下保存期很短，一般只有數(shù)月。而本發(fā)明的復(fù)合微生物液體菌劑中有效活菌數(shù)多，保存期長，A、B兩種菌劑分別發(fā)酵然后再按比例復(fù)配，復(fù)配后在弱酸性的環(huán)境下，菌群的生長條件受到了抑制，同時養(yǎng)分與代謝能又得到了互補，菌群間形成了依存共生、互不拮抗的優(yōu)良共生環(huán)境。由此，菌群的生長得到抑制，同樣在液態(tài)常溫的條件下，菌群變得緩慢生長，多數(shù)菌株形成芽孢狀態(tài)，菌株活力得到保持并暫時處于休眠狀態(tài)。在常溫條件下，本發(fā)明的復(fù)合微生物液體菌劑保存有效期可以達到I年以上，稀釋后，菌株又能很快恢復(fù)生長并發(fā)揮作用。
[0014](2 )本發(fā)明的復(fù)合微生物液體菌劑中多菌種協(xié)同增效，功能全面。本發(fā)明采用A (即6種好氧菌群)、B(即4種厭氧菌群)兩種菌劑分別發(fā)酵然后再按比例復(fù)配的方法，可以使更多的不同功能菌株復(fù)配共生。施用后不僅能起到分解污染物，凈化水質(zhì)，產(chǎn)生免疫代謝物，抑菌、抗蟲、防病害，使水產(chǎn)品品質(zhì)突出改善，還能為實現(xiàn)水污染的生物治理，改善生態(tài)環(huán)境，創(chuàng)造有利條件。
【具體實施方式】
[0015]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步描述:
實施例1: 一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法所述復(fù)合微生物液體菌劑包括6種用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的液體好氧菌劑與4種用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的液體厭氧菌劑，所述液體好氧菌劑與液體厭氧菌劑的質(zhì)量比為11:14;所述液體好氧菌劑由以下質(zhì)量份的菌劑組成:
液體產(chǎn)朊假絲酵母菌劑2質(zhì)量份，
液體硝酸菌劑2質(zhì)量份，
液體細黃鏈霉菌劑I質(zhì)量份，
液體枯草芽孢桿菌劑2質(zhì)量份，
液體地衣芽孢桿菌劑2質(zhì)量份，
液體納豆芽孢桿菌劑2質(zhì)量份；
所述液體厭氧菌劑由以下質(zhì)量份的菌劑組成:
液體沼澤紅假單胞菌劑2質(zhì)量份，
液體雙岐桿菌劑2質(zhì)量份，
液體植物乳菌劑5質(zhì)量份，
液體嗜酸乳桿菌劑5質(zhì)量份；
其中，每一種液體好氧菌劑中的好養(yǎng)菌含量大于等于2億個/毫升，每一種液體厭氧菌劑中的厭氧菌含量大于等于2億個/毫升。
[0016]所述微生物液體菌劑還包括微量元素，微量元素的添加量為所述復(fù)合微生物液體菌劑質(zhì)量的0.1 %，所述微量元素為B、Zn、Mn三者的混合物。
[0017]所述制備方法包括以下步驟:
第一步，將6種好氧菌分別培養(yǎng)制成6種液體好氧菌劑，
(I)分別配制產(chǎn)朊假絲酵母菌、硝酸菌、納豆芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、枯草芽孢桿菌以及地衣芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基，再分別向6種液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30°C，120r/min，pH值在6.5-7.5條件下進行菌種的一級擴大培養(yǎng)，得到6種一級好氧菌液；
(2)再分別取6種一級好氧菌液向6種所述液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30°C、120r/min條件下進行菌種的二級擴大培養(yǎng)，得到6種二級好氧菌液，其中，每種一級好氧菌液的接種量為其液體好氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的1%;
(3)再取6種二級好氧菌液向6種所述液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30°C、120r/min條件下進行菌種的三級擴大培養(yǎng)，得到6種液體好氧菌劑，其中，每種二級好氧菌液的接種量為其液體好氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的1%;
第二步，將4種厭氧菌培養(yǎng)制成混合的液體厭氧菌劑，
(1)分別配制沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌以及雙岐桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基，再分別向4種液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30 °C條件下靜置，進行菌種的一級擴大培養(yǎng)，得到4種一級厭氧菌液；
(2)再分別取4種一級厭氧菌液向4種所述液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30°C條件下靜置，進行菌種的二級擴大培養(yǎng)，得到4種二級厭氧菌液，其中，每種一級厭氧菌液的接種量為其液體厭氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的1%;
(3)分別取4種二級厭氧菌液向4種所述液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30°C條件下靜置，進行菌種的三級擴大培養(yǎng)，得到4種三級厭氧菌液，其中，每種二級厭氧菌液的接種量為其液體厭氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的1%;
(4)按上述配方比例將所述4種三級厭氧菌液直接混合均勻，得到復(fù)合的所述液體厭氧菌劑；
第三步，將6種液體好氧菌劑按上述配方比例緩慢注入到復(fù)合的所述液體厭氧菌劑中并攪拌均勻，靜置，待均質(zhì)穩(wěn)定后，得到所述復(fù)合微生物液體菌劑。
[0018]在所述第三步中，同時加入微量元素，微量元素的添加量為所述復(fù)合微生物液體菌劑質(zhì)量的0.1 %，所述微量元素為B、Zn、Mn三者的混合物。
[0019]所述產(chǎn)朊假絲酵母菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸銨0.2%，可溶性淀粉2%，碳酸鈣0.5%，豆油0.5%，無菌水 95.7% ；
所述硝酸菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蛋白胨1%，磷酸氫二鉀0.1%，酵母膏0.5%，硫酸鎂0.03%，氯化鈉0.5%，無菌水97.87% ；
所述納豆芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖3%，磷酸氫二鉀0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂0.2%，無菌水96.5%;
所述細黃鏈霉菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:可溶性淀粉2%，磷酸氫二鉀0.05%，硝酸鉀0.1%，硫酸鎂0.05%，氯化鈉0.005%，硫酸亞鐵0.001%，無菌水97.794% ；
所述枯草芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.05%，酵母膏0.05%，牛肉膏0.02%，蛋白胨0.05%，碳酸鈣0.025%，氯化鈉 0.02%，硫酸錳 0.001%，無菌水98.784% ；
所述地衣芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.05%，酵母膏0.05%，牛肉膏0.02%，蛋白胨0.05%，碳酸鈣0.025%，氯化鈉 0.02%，硫酸錳 0.001%，無菌水98.784% ；
所述沼澤紅假單胞菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:每I升無菌水里含乙酸鈉3.3g，氯化錢0.6g，硫酸鎂0.5g，酵母膏1.5g;
所述植物乳桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含蔗糖20g，酵母膏25g，磷酸氫二鉀2g;
所述嗜酸乳桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含乙酸鈉5g，檸檬酸銨2g，硫酸鎂0.5g，酵母膏6g，牛肉膏12g，磷酸氫二鉀2g，蛋白胨1g，硫酸猛0.05g ；
所述雙岐桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含乳清粉50g，碳酸鈣2g，酵母膏1g。
[0020]實施例1的復(fù)合微生物液體菌劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的對比實驗:
實驗地:廣西合浦縣西塘鄉(xiāng)蝦塘10畝。
[0021]實施情況:養(yǎng)殖品種為南美白對蝦。從養(yǎng)殖前肥水-放蝦苗-成品蝦出塘全過程，時間6月中旬。實驗設(shè)2個養(yǎng)殖水塘，每個水塘5畝。2個水塘都是多年養(yǎng)殖的舊水塘，鋪有塑料膜并在塘底有壓底泥。
[0022]實驗結(jié)果:實驗設(shè)2個養(yǎng)殖水塘，2個水塘都是多年養(yǎng)殖的舊水塘，鋪有塑料膜并在塘底有壓底泥，平均水深I(lǐng).5 ο其中A水塘施用實施例1的復(fù)合微生物液體菌劑，面積為4畝;B水塘為常規(guī)養(yǎng)殖的對照塘，面積為5畝。B水塘按常規(guī)養(yǎng)殖培肥水質(zhì)，畝施用(水深I(lǐng)米)碳酸氫銨20kg+過磷酸鈣1kg+有機肥1kg，水質(zhì)呈茶褐色后，投放蝦苗6萬尾/畝。為防治蝦病，每周用土霉素、呋喃西林等藥物全塘潑灑I次，并在飼料中混拌土霉素、氯霉素、維生素、免疫多糖、伏碘、大黃等多種藥物。在養(yǎng)殖中后期為凈化底質(zhì)，施用液體光合菌劑3~5kg/畝(水深I(lǐng)米)，每10天I次。A水塘與B水塘同樣按常規(guī)培水肥塘，同樣投放蝦苗。不同之處有3點:一是在投放蝦苗I周后，即開始用在常溫下存放6個月的實施例1的復(fù)合微生物液體菌劑3?5kg/畝(水深I(lǐng)米)，全塘潑灑，每1天I次;二是A水塘防治蝦病的用藥比B水塘減少了一半；三是A水塘沒有使用B水塘用的光合菌劑。養(yǎng)殖過程中A水塘比B水塘水色純正，病害少，當(dāng)對蝦長到商品規(guī)格時，經(jīng)分疏起捕，分次收獲后，最終產(chǎn)量，A塘960斤/畝，B塘720斤/畝，A塘比B塘增加240斤/畝，增產(chǎn)33%。
[0023]實施例2:—種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑及其制備方法
所述復(fù)合微生物液體菌劑包括6種用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的液體好氧菌劑與4種用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的液體厭氧菌劑，所述液體好氧菌劑與液體厭氧菌劑的質(zhì)量比為5:3;所述液體好氧菌劑由以下質(zhì)量份的菌劑組成:
液體產(chǎn)朊假絲酵母菌劑3質(zhì)量份，
液體硝酸菌劑3質(zhì)量份，
液體細黃鏈霉菌劑I質(zhì)量份，
液體枯草芽孢桿菌劑I質(zhì)量份，
液體地衣芽孢桿菌劑I質(zhì)量份，
液體納豆芽孢桿菌劑I質(zhì)量份；
所述液體厭氧菌劑由以下質(zhì)量份的菌劑組成:
液體沼澤紅假單胞菌劑I質(zhì)量份，
液體雙岐桿菌劑I質(zhì)量份， 液體植物乳菌劑2質(zhì)量份，
液體嗜酸乳桿菌劑2質(zhì)量份；
其中，每一種液體好氧菌劑中的好養(yǎng)菌含量大于等于2億個/毫升，每一種液體厭氧菌劑中的厭氧菌含量大于等于2億個/毫升。
[0024]所述微生物液體菌劑還包括微量元素，微量元素的添加量為所述復(fù)合微生物液體菌劑質(zhì)量的0.2%，所述微量元素為Zn、Mn、Cu三者的混合物。
[0025]所述制備方法包括以下步驟:
第一步，將6種好氧菌分別培養(yǎng)制成6種液體好氧菌劑，
(1)分別配制產(chǎn)朊假絲酵母菌、硝酸菌、納豆芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、枯草芽孢桿菌以及地衣芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基，再分別向6種液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在37°C，14(^/!1^11，？田直在6.5~7.5條件下進行菌種的一級擴大培養(yǎng)，得到6種一級好氧菌液；
(2)再分別取6種一級好氧菌液向6種所述液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在37°C、140r/min條件下進行菌種的二級擴大培養(yǎng)，得到6種二級好氧菌液，其中，每種一級好氧菌液的接種量為其液體好氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的1.1%;
(3)再取6種二級好氧菌液向6種所述液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在37°C、140r/min條件下進行菌種的三級擴大培養(yǎng)，得到6種液體好氧菌劑，其中，每種二級好氧菌液的接種量為其液體好氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的I?I.5%;
第二步，將4種厭氧菌培養(yǎng)制成混合的液體厭氧菌劑，
(1)分別配制沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌以及雙岐桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基，再分別向4種液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C條件下靜置，進行菌種的一級擴大培養(yǎng)，得到4種一級厭氧菌液；
(2)再分別取4種一級厭氧菌液向4種所述液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C條件下靜置，進行菌種的二級擴大培養(yǎng)，得到4種二級厭氧菌液，其中，每種一級厭氧菌液的接種量為其液體厭氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的1.1%;
(3)分別取4種二級厭氧菌液向4種所述液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在37°C條件下靜置，進行菌種的三級擴大培養(yǎng)，得到4種三級厭氧菌液，其中，每種二級厭氧菌液的接種量為其液體厭氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的1.5%;
(4)按上述的配方比例將所述4種三級厭氧菌液直接混合均勻，得到復(fù)合的所述液體厭氧菌劑；
第三步，將6種液體好氧菌劑按上述的配方比例緩慢注入到復(fù)合的所述液體厭氧菌劑中并攪拌均勻，靜置，待均質(zhì)穩(wěn)定后，得到所述復(fù)合微生物液體菌劑。
[0026]在所述第三步中，同時加入微量元素，微量元素的添加量為所述復(fù)合微生物液體菌劑質(zhì)量的0.1?0.2%，所述微量元素選自Zn、Mn、Cu三者的混合物。
[0027]所述產(chǎn)朊假絲酵母菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸銨0.2%，可溶性淀粉2%，碳酸鈣0.5%，豆油0.5%，無菌水 95.7% ；
所述硝酸菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蛋白胨1%，磷酸氫二鉀0.1%，酵母膏0.5%，硫酸鎂0.03%，氯化鈉0.5%，無菌水97.87% ； 所述納豆芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖3%，磷酸氫二鉀0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂0.2%，無菌水96.5%;
所述細黃鏈霉菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:可溶性淀粉2%，磷酸氫二鉀0.05%，硝酸鉀0.1%，硫酸鎂0.05%，氯化鈉0.005%，硫酸亞鐵0.001%，無菌水97.794% ；
所述枯草芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.05%，酵母膏0.05%，牛肉膏0.02%，蛋白胨0.05%，碳酸鈣0.025%，氯化鈉 0.02%，硫酸錳 0.001%，無菌水98.784% ；
所述地衣芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.05%，酵母膏0.05%，牛肉膏0.02%，蛋白胨0.05%，碳酸鈣
0.025%，氯化鈉 0.02%，硫酸錳 0.001%，無菌水98.784% ；
所述沼澤紅假單胞菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:每I升無菌水里含乙酸鈉3.3g，氯化錢0.6g，硫酸鎂0.5g，酵母膏1.5g;
所述植物乳桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含蔗糖20g，酵母膏25g，磷酸氫二鉀2g;
所述嗜酸乳桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含乙酸鈉5g，檸檬酸銨2g，硫酸鎂0.5g，酵母膏6g，牛肉膏12g，磷酸氫二鉀2g，蛋白胨1g，硫酸猛0.05g ；
所述雙岐桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含乳清粉50g，碳酸鈣2g，酵母膏1g。
[0028]實施例2的復(fù)合微生物液體菌劑在在養(yǎng)豬場處理豬糞尿液中的對比實驗實驗地點:廣西陸川縣三塘養(yǎng)殖場
實施情況:該養(yǎng)殖場商品豬存欄5000頭，其中選定I個豬舍為A豬舍(80頭豬)使用本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑，其它的豬舍為B豬舍作為對照。A豬舍使用實施例2的復(fù)合微生物液體菌劑，使用方法如下:1、在日糧中添加本菌劑1%; 2、在飲用水中添加本菌劑1%; 3、將本菌劑用清水稀釋20倍，在豬身及圈舍內(nèi)外每天噴灑I次;4、每天在糞尿水池中混倒入本菌劑1%。連續(xù)使用I個月后，A豬舍生活環(huán)境比B豬舍有了明顯改善，經(jīng)環(huán)境保護監(jiān)測部門檢測，惡臭濃度下降97.7%，臭氣強度降至2.5級以下，達到國家一級標(biāo)準(zhǔn)。
[0029]上述實施例只為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點，其目的在于讓熟悉此項技術(shù)的人士能夠了解本發(fā)明的內(nèi)容并據(jù)以實施，尤其是本發(fā)明中所述的6種好氧菌和4種厭氧菌各自單獨培養(yǎng)時的培養(yǎng)基配方屬于現(xiàn)有技術(shù)，例如產(chǎn)朊假絲酵母菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方、納豆芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方以及沼澤紅假單胞菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方等，本領(lǐng)域技術(shù)人員可在上述公開的范圍內(nèi)做適當(dāng)變換，并不能以此限制本發(fā)明的保護范圍。凡根據(jù)本發(fā)明精神實質(zhì)所作的等效變化或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑，其特征在于:所述復(fù)合微生物液體菌劑包括6種用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的液體好氧菌劑與4種用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的液體厭氧菌劑，所述液體好氧菌劑與液體厭氧菌劑的質(zhì)量比為3: 7-7: 3;所述液體好氧菌劑由以下質(zhì)量份的菌劑組成: 液體產(chǎn)朊假絲酵母菌劑I?3質(zhì)量份， 液體硝酸菌劑I?3質(zhì)量份， 液體細黃鏈霉菌劑I質(zhì)量份， 液體枯草芽孢桿菌劑I?2質(zhì)量份， 液體地衣芽孢桿菌劑I?2質(zhì)量份， 液體納豆芽孢桿菌劑I?2質(zhì)量份； 所述液體厭氧菌劑由以下質(zhì)量份的菌劑組成: 液體沼澤紅假單胞菌劑I?2質(zhì)量份， 液體雙岐桿菌劑I?2質(zhì)量份， 液體植物乳菌劑I?5質(zhì)量份， 液體嗜酸乳桿菌劑I?5質(zhì)量份； 其中，每一種液體好氧菌劑中的好養(yǎng)菌含量大于等于2億個/毫升，每一種液體厭氧菌劑中的厭氧菌含量大于等于2億個/毫升。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑，其特征在于:所述微生物液體菌劑還包括微量元素，微量元素的添加量為所述復(fù)合微生物液體菌劑質(zhì)量的0.1?.0.2%，所述微量元素選自B、Zn、Mn、Cu、Co中任意一種或至少兩種以上的混合物。3.—種根據(jù)權(quán)利要求1所述的保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑的制備方法，其特征在于:所述制備方法包括以下步驟: 第一步，將6種好氧菌分別培養(yǎng)制成6種液體好氧菌劑， (1)分別配制產(chǎn)朊假絲酵母菌、硝酸菌、納豆芽孢桿菌、細黃鏈霉菌、枯草芽孢桿菌以及地衣芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基，再分別向6種液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C，120?140r/min，pH值在6.5-7.5條件下進行菌種的一級擴大培養(yǎng)，得到6種一級好氧菌液； (2)再分別取6種一級好氧菌液向6種所述液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C、120?140r/min條件下進行菌種的二級擴大培養(yǎng)，得到6種二級好氧菌液，其中，每種一級好氧菌液的接種量為其液體好氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的0.9-1.1%; (3)再取6種二級好氧菌液向6種所述液體好氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C、120?140r/min條件下進行菌種的三級擴大培養(yǎng)，得到6種液體好氧菌劑，其中，每種二級好氧菌液的接種量為其液體好氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的I?1.5%; 第二步，將4種厭氧菌培養(yǎng)制成混合的液體厭氧菌劑， (1)分別配制沼澤紅假單胞菌、植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌以及雙岐桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基，再分別向4種液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C條件下靜置，進行菌種的一級擴大培養(yǎng)，得到4種一級厭氧菌液； (2)再分別取4種一級厭氧菌液向4種所述液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C條件下靜置，進行菌種的二級擴大培養(yǎng)，得到4種二級厭氧菌液，其中，每種一級厭氧菌液的接種量為其液體厭氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的0.9-1.1%; (3)分別取4種二級厭氧菌液向4種所述液體厭氧菌培養(yǎng)基中接種各自對應(yīng)的菌種，在30?37°C條件下靜置，進行菌種的三級擴大培養(yǎng)，得到4種三級厭氧菌液，其中，每種二級厭氧菌液的接種量為其液體厭氧菌培養(yǎng)基質(zhì)量的I?1.5%; (4)按權(quán)利要求1的配方比例將所述4種三級厭氧菌液直接混合均勻，得到復(fù)合的所述液體厭氧菌劑； 第三步，將6種液體好氧菌劑按權(quán)利要求1的配方比例緩慢注入到復(fù)合的所述液體厭氧菌劑中并攪拌均勻，靜置，待均質(zhì)穩(wěn)定后，得到所述復(fù)合微生物液體菌劑。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑的制備方法，其特征在于:在所述第三步中，同時加入微量元素，微量元素的添加量為所述復(fù)合微生物液體菌劑質(zhì)量的0.1~0.2%，所述微量元素選自8、211、111、(:11、(:0中任意一種或至少兩種以上的混合物。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種保質(zhì)期長的復(fù)合微生物液體菌劑的制備方法，其特征在于:所述產(chǎn)朊假絲酵母菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸銨0.2%，可溶性淀粉2%，碳酸鈣0.5%，豆油0.5%，無菌水9 5.7%; 所述硝酸菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蛋白胨1%，磷酸氫二鉀0.1%，酵母膏0.5%，硫酸鎂0.03%，氯化鈉0.5%，無菌水97.87% ； 所述納豆芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖3%，磷酸氫二鉀0.1%，磷酸二氫鉀0.2%，硫酸鎂0.2%，無菌水96.5%; 所述細黃鏈霉菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:可溶性淀粉2%，磷酸氫二鉀0.05%，硝酸鉀0.1%，硫酸鎂0.05%，氯化鈉0.005%，硫酸亞鐵0.001%，無菌水97.794% ； 所述枯草芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.05%，酵母膏0.05%，牛肉膏0.02%，蛋白胨0.05%，碳酸鈣.0.025%，氯化鈉 0.02%，硫酸錳 0.001%，無菌水98.784% ； 所述地衣芽孢桿菌的液體好氧菌培養(yǎng)基配方按照各組分所占的質(zhì)量百分含量由以下組分組成:蔗糖1%，磷酸氫二鉀0.05%，酵母膏0.05%，牛肉膏0.02%，蛋白胨0.05%，碳酸鈣.0.025%，氯化鈉 0.02%，硫酸錳 0.001%，無菌水98.784% ； 所述沼澤紅假單胞菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:每I升無菌水里含乙酸鈉3.3g，氯化錢0.6g，硫酸鎂0.5g，酵母膏1.5g; 所述植物乳桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含蔗糖20g，酵母膏25g，磷酸氫二鉀2g; 所述嗜酸乳桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含乙酸鈉5g，檸檬酸銨2g，硫酸鎂0.5g，酵母膏6g，牛肉膏12g，磷酸氫二鉀2g，蛋白胨1g，硫酸猛0.05g ； 所述雙岐桿菌的液體厭氧菌培養(yǎng)基配方為:在每I升無菌水里含乳清粉50g，碳酸鈣2g，酵母膏1g。
【文檔編號】C12R1/72GK106047770SQ201610639970
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年8月8日 公開號201610639970.5, CN 106047770 A, CN 106047770A, CN 201610639970, CN-A-106047770, CN106047770 A, CN106047770A, CN201610639970, CN201610639970.5
【發(fā)明人】劉 文, 韓莉華, 劉海龍
【申請人】江蘇春語生物科技有限公司