一種三七果蔬酶及其制備方法
【專利摘要】一種三七果蔬酶的制備方法，屬于保健食品領(lǐng)域，包括以下步驟：制備混合菌液步驟、混料步驟、發(fā)酵步驟和過(guò)濾步驟?；炝喜襟E包括固體曲、果蔬和混合菌液的混合；發(fā)酵步驟包括發(fā)酵材料和糖液的混合、密封、發(fā)酵。該方法操作簡(jiǎn)便、實(shí)用性強(qiáng)，能將三七中的有效成分成功融入到果蔬酶之中。本發(fā)明還涉及一種由上述方法制得的三七果蔬酶，該三七果蔬酶中的三七總皂苷含量高，營(yíng)養(yǎng)豐富，易于消化吸收，可有效提高和發(fā)揮三七的醫(yī)療保健功效。
【專利說(shuō)明】
-種H-t果蔬酶及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及保健食品領(lǐng)域，且特別設(shè)及一種=屯果蔬酶及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] =屯又名田屯，是一種藥用價(jià)值極高的中藥材。=屯含有人參皂巧、=屯皂巧和黃 酬類等數(shù)十種功能性物質(zhì)成分，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明=屯，具有止血、保護(hù)屯、肌細(xì)胞、保護(hù) 腦組織、降血脂、降血糖、抗血栓、增強(qiáng)免疫力、消腫抗炎、抗纖維化、抗腫瘤、抗疲勞、消除氧 自由基抗氧化等作用。
[0003] =屯作為保健品的食用方法最多的是將=屯粉碎成粉狀直接食用，或者再將粉末 制成丸粒再食用，由于=屯所含的有效成分在消化道難于完全的被消化吸收，導(dǎo)致=屯的 藥用保健效果下降，造成極大的浪費(fèi)。
[0004] 果蔬酶是借由發(fā)酵作用，使蔬果分解成較小分子的營(yíng)養(yǎng)素，可直接被人體迅速吸 收、參與調(diào)節(jié)新陳代謝過(guò)程。在現(xiàn)有技術(shù)中，果蔬酶被廣泛作為人體酶的補(bǔ)充劑，應(yīng)用于醫(yī) 療、保健、美容等領(lǐng)域，但是在果蔬酶中引入=屯有效成分的做法還未見(jiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種=屯果蔬酶的制備方法，該方法操作簡(jiǎn)單，效果 穩(wěn)定，能高效地提取=屯中的有效成分并融入到果蔬酶中。
[0006] 本發(fā)明的第二目的在于提供一種=屯果蔬酶，該=屯果蔬酶中=屯有效成分含量 高，易于消化吸收，能有效提高和發(fā)揮=屯的醫(yī)療保健功效。
[0007] 本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題是采用W下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
[000引本發(fā)明提出一種=屯果蔬酶的制備方法，其包括W下步驟：
[0009] 制備混合菌液步驟:將酵母菌液和乳酸菌液按重量比1:0.5~2混合均勻得到混合 菌液；
[0010] 混料步驟:取占第一發(fā)酵材料重量的2~5%的混合菌液接種到第一發(fā)酵材料中并 混合均勻，得到第二發(fā)酵材料；
[0011] 第一發(fā)酵材料為固體曲發(fā)酵材料或者復(fù)合酶發(fā)酵材料；
[0012] 固體曲發(fā)酵材料由黑曲霉固體曲、枯草芽抱桿菌固體曲和果蔬搗碎混勻后得到， 其中按重量計(jì):黑曲霉固體曲：枯草芽抱桿菌固體曲：果蔬=1~3:1:10~30;黑曲霉固體曲 由黑曲霉菌液與=屯粉按重量比1:1~20混合培養(yǎng)得到;枯草芽抱桿菌固體曲由枯草芽抱 桿菌液與=屯粉按重量比1:1~20混合培養(yǎng)得到；
[0013] 復(fù)合酶發(fā)酵材料由果膠酶、纖維素酶和=屯粉混合制成，其中，按=屯粉重量計(jì)使 用果膠酶100~300U/g，纖維素酶10~30U/g，S屯粉與果蔬的重量比為1:10~30;
[0014] 發(fā)酵步驟:將第二發(fā)酵材料與食用糖液混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā) 酵60~120天；
[0015] 過(guò)濾步驟:對(duì)經(jīng)發(fā)酵后的發(fā)酵液進(jìn)行過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)玫?屯果蔬 酶。
[0016] 本發(fā)明提出一種=屯果蔬酶，其采用上述的制備方法制得。
[0017] 本發(fā)明實(shí)施例的一種=屯果蔬酶及其制備方法的有益效果是屯含有人參皂 巧、=屯皂巧和黃酬類等數(shù)十種功能性物質(zhì)成分，具有止血、保護(hù)屯、肌細(xì)胞、保護(hù)腦組織、降 血脂、降血糖、抗血栓、增強(qiáng)免疫力、消腫抗炎、抗纖維化、抗腫瘤、抗疲勞、消除氧自由基抗 氧化等作用。傳統(tǒng)的直接食用的方式會(huì)造成=屯藥效的極大浪費(fèi)，本發(fā)明通過(guò)混合菌發(fā)酵 技術(shù)，將=屯與果蔬共同發(fā)酵，該方法操作簡(jiǎn)便，效果穩(wěn)定，得到的=屯果蔬酶含有高濃度 的人參皂巧、=屯皂巧和其他=屯有效成分，營(yíng)養(yǎng)豐富，易于消化吸收，可有效提高和發(fā)揮 =屯的醫(yī)療保健功效。而且該產(chǎn)品不需添加任何食品添加劑、防腐劑就可長(zhǎng)期低溫保存。
【附圖說(shuō)明】
[0018] 為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例中所需要使用的附 圖作簡(jiǎn)單地介紹，應(yīng)當(dāng)理解，W下附圖僅示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例，因此不應(yīng)被看作是對(duì) 范圍的限定，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可W根據(jù)運(yùn) 些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。
[0019] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例6所提供的制備方法的流程圖；
[0020] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例7所提供的制備方法的流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0021] 為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中 的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建 議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可W通過(guò)市售購(gòu)買獲得的常規(guī)產(chǎn) 品。
[0022] 下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例的一種=屯果蔬酶及其制備方法進(jìn)行具體說(shuō)明。
[0023] 本發(fā)明提出一種=屯果蔬酶的制備方法，其包括W下步驟：
[0024] 制備混合菌液步驟:將酵母菌液和乳酸菌液按重量比1:0.5~2混合均勻得到混合 菌液；
[0025] 進(jìn)一步地，酵母菌液由W下步驟制得:將酵母菌接入酵母菌一級(jí)培養(yǎng)基，于25~28 °C下培養(yǎng)20小時(shí)得到第一種子液;將第一種子液加入到酵母菌二級(jí)培養(yǎng)基，第一種子液的 體積為酵母菌二級(jí)培養(yǎng)基的2~4%，于25~28°C，培養(yǎng)20小時(shí)后，每隔4小時(shí)計(jì)數(shù)一次，當(dāng)酵 母菌數(shù)目達(dá)到105CRJ/mL時(shí)，停止培養(yǎng)，得到酵母菌液。具體地，上述乳酸菌為可直接從市面 上購(gòu)得的釀酒酵母菌和魯氏酵母菌中的任一種。
[00%]進(jìn)一步地，乳酸菌液由W下步驟制得:將乳酸菌接入乳酸菌一級(jí)培養(yǎng)基，于36~38 °C下培養(yǎng)20小時(shí)得到第二種子液;將第二種子液加入到乳酸菌二級(jí)培養(yǎng)基，第二種子液的 體積為乳酸菌二級(jí)培養(yǎng)基的2~4%，于36~38°C下培養(yǎng)20小時(shí)后，每隔4小時(shí)計(jì)數(shù)一次，當(dāng) 乳酸菌數(shù)目達(dá)到l〇5C即/mL時(shí)，停止培養(yǎng)，得到乳酸菌液。具體地，上述乳酸菌為可直接從市 面上購(gòu)得的植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、雙歧乳桿菌和嗜酸乳桿菌中的任一種。
[0027]上述一種=屯果蔬酶的制備方法還包括混料步驟:取占第一發(fā)酵材料重量的2~ 5%的混合菌液接種到第一發(fā)酵材料中并混合均勻，得到第二發(fā)酵材料；
[0028] 第一發(fā)酵材料為固體曲發(fā)酵材料或者復(fù)合酶發(fā)酵材料；
[0029] 固體曲發(fā)酵材料由黑曲霉固體曲、枯草芽抱桿菌固體曲和果蔬搗碎混勻后得到， 其中按重量計(jì):黑曲霉固體曲：枯草芽抱桿菌固體曲：果蔬=1~3:1:10~30;黑曲霉固體曲 由黑曲霉菌液與=屯粉按重量比1:1~20混合培養(yǎng)得到;枯草芽抱桿菌固體曲由枯草芽抱 桿菌液與=屯粉按重量比1:1~20混合培養(yǎng)得到；
[0030] 進(jìn)一步地，黑曲霉菌液由W下步驟制得:將黑曲霉接入黑曲霉一級(jí)培養(yǎng)基，于25~ 28°C下培養(yǎng)36小時(shí)得到第=種子液;將第=種子液加入到黑曲霉二級(jí)培養(yǎng)基，第=種子液 的重量為黑曲霉二級(jí)培養(yǎng)基的0.5~1.5%，于25~28°C，培養(yǎng)30小時(shí)后，每隔4小時(shí)觀察一 次，當(dāng)黑曲霉菌絲體完全覆蓋黑曲霉二級(jí)培養(yǎng)基時(shí)，停止培養(yǎng)，得到黑曲霉菌液。進(jìn)一步地， 上述黑曲霉可W直接從市面上購(gòu)得。
[0031 ]進(jìn)一步地，枯草芽抱桿菌液由W下步驟制得:將枯草芽抱桿菌接入枯草芽抱桿菌 一級(jí)培養(yǎng)基，于36~38°C下培養(yǎng)36小時(shí)得到第四種子液;將第四種子液加入到枯草芽抱桿 菌二級(jí)培養(yǎng)基，第四種子液的重量為枯草芽抱桿菌二級(jí)培養(yǎng)基的0.5~1.5%，于36~38°C， 培養(yǎng)30小時(shí)后，每隔4小時(shí)觀察一次，當(dāng)枯草芽抱桿菌絲體完全覆蓋枯草芽抱桿菌二級(jí)培養(yǎng) 基時(shí)，停止培養(yǎng)，得到枯草芽抱桿菌液。進(jìn)一步地，上述枯草芽抱桿菌可W直接從市面上購(gòu) 得。
[0032] 復(fù)合酶發(fā)酵材料由果膠酶、纖維素酶和=屯粉混合制成，其中，按=屯粉重量計(jì)使 用果膠酶100~300U/g和纖維素酶10~30U/g，S屯粉與果蔬的重量比為1:10~30。
[0033] 進(jìn)一步地，上述制備方法中所用=屯粉由市售的優(yōu)質(zhì)=屯粉碎成40~100目后制 得，所用的果膠酶和纖維素酶均可從市面上購(gòu)得。
[0034] 進(jìn)一步地，上述制備方法中所用到的所有培養(yǎng)基均根據(jù)各自菌種的常規(guī)培養(yǎng)方式 選取配制，為現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明將不再進(jìn)行寶述。
[0035] 具體地，果蔬包括仙人掌、山藥、批把、梅子、鳳梨、紅龍果、青木瓜、地瓜、馬鈴馨、 芋、南瓜、胡瓜、紅蘿h豆馨、蓮截、小黃瓜、冬瓜、秋葵、青花挪菜、桑權(quán)、芥蘭、嫩莖窩宦、球 莖甘藍(lán)、青椒、菱角、高麗菜、西紅柿、紅鳳菜、甜柿、養(yǎng)麥、胡麻、龍眼、紅甘薦、結(jié)球白菜、角 菜、山芹菜、哈密瓜、巧樣、雜猴桃、梨、楊桃、葡萄、葡萄抽、火龍果、渡蘿蜜、香蕉、蘋(píng)果、奇異 果、草替、酪梨、樓桃、澄子和水蜜桃中的一種或多種。
[0036] 上述一種=屯果蔬酶的制備方法還包括發(fā)酵步驟:將第二發(fā)酵材料與食用糖液加 入到發(fā)酵罐中，混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā)酵60~120天。
[0037] 進(jìn)一步地，上述第二發(fā)酵材料的體積為發(fā)酵罐容積的1/2,混合菌液在與第一發(fā)酵 材料混合前，可W加入適量無(wú)菌水進(jìn)行稀釋。
[0038] 具體地，食用糖液由食用糖兌水后加熱溶解得到的50~80wt%的溶液，其中，食用 糖為紅糖、白糖和冰糖中的至少一種。進(jìn)一步地，第二發(fā)酵材料與食用糖的質(zhì)量比為1:0.2 ~1 D
[0039] 進(jìn)一步地，第二發(fā)酵材料和食用糖還可W按照W下方式裝罐:按照一層發(fā)酵材料 一層紅糖的方式進(jìn)行分層裝罐，層與層之間壓實(shí)，最上面一層（即與空氣接觸的一層)為食 用糖。
[0040] 進(jìn)一步地，裝罐完成后還可W噴灑少量食用醋于罐內(nèi)物料表面，W防止雜菌生長(zhǎng)。
[0041] 進(jìn)一步地，在發(fā)酵過(guò)程中始終做到厭氧、不晃動(dòng)發(fā)酵罐體，務(wù)必杜絕雜菌污染。在 裝罐后開(kāi)始發(fā)酵的4她內(nèi)，密切關(guān)注罐體發(fā)酵情況，若有氣泡產(chǎn)生，提前放氣;若有液體隨氣 泡溢出罐體外，及時(shí)清理干凈。
[0042] 上述一種=屯果蔬酶的制備方法還包括過(guò)濾步驟:對(duì)經(jīng)發(fā)酵后的發(fā)酵液進(jìn)行過(guò)濾 除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)玫?屯果蔬酶。
[0043] 進(jìn)一步地，上述=屯果蔬酶的制備方法還包括在過(guò)濾步驟之后的濃縮步驟，濃縮 的條件為:真空度>〇.〇9MPa，溫度《45°C。在上述濃縮條件下進(jìn)行低溫真空濃縮，能有效的 保留=屯中的熱敏感成分，提高產(chǎn)品的藥效。
[0044] 進(jìn)一步地，上述=屯果蔬酶的制備方法在濃縮步驟之后還包括向濃縮后的發(fā)酵液 添加輔料的步驟，輔料的質(zhì)量為=屯果蔬酶質(zhì)量的0.1~1%，輔料為發(fā)酵殘?jiān)墓腆w提取 物、低聚果糖或中藥材。具體地，中藥材可W和=屯果蔬酶配合發(fā)揮各自的藥效，優(yōu)選地，中 藥材為當(dāng)歸、天麻、西洋參中的至少一種。
[0045] 進(jìn)一步地，上述固體提取物由W下步驟制得：用乙醇減壓回饋發(fā)酵殘?jiān)玫交仞?液，去除回饋液中的乙醇后得到固體提取物，具體地，上述乙醇為體積分?jǐn)?shù)50~80%的乙醇 溶液，其用量為發(fā)酵殘?jiān)亓康?~8倍。進(jìn)一步地，減壓回饋的條件為:真空度>0.09MPa， 溫度《45°C。優(yōu)選地，在本發(fā)明其他較佳實(shí)施例中，上述固體提取物還可W用乙醇常溫浸提 發(fā)酵殘?jiān)玫健?br>[0046] 本發(fā)明還提出一種=屯果蔬酶，其采用上述的制備方法制得。進(jìn)一步地，其糖度值 不低于45%，=屯總皂巧含量達(dá)到0.5%。
[0047] W下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的一種=屯果蔬酶及其制備方法作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。 [004引實(shí)施例1
[0049] 本實(shí)施例提供的一種S屯果蔬酶，其原料包括:果蔬11kg、黑曲霉固體曲550g、枯 草芽抱桿菌固體曲550g、釀酒酵母菌液150g、植物乳桿菌液lOOg和紅糖7.化g，其中，果蔬由 仙人掌3kg、蘋(píng)果2.化g、雜猴桃2.化g、火龍果1kg、香蕉1kg和鳳梨1kg組成。其制備方法如 下：
[0050] 制備混合菌液步驟:將釀酒酵母菌液150g和植物乳桿菌液lOOg混合均勻得到混合 菌液。
[0051] 混料步驟:選取新鮮果蔬11kg，洗凈后切塊待用。將由黑曲霉固體曲550g和枯草芽 抱桿菌固體曲550g組成的固體曲發(fā)酵材料與上述果蔬搗碎混勻后得到第一發(fā)酵材料，向第 一發(fā)酵材料中加入混合菌液250g，得到第二發(fā)酵材料。
[0052] 所用黑曲霉固體曲由黑曲霉菌液與S屯粉按重量比1:5混合，于25°C下培養(yǎng)10小 時(shí)得到;所用的枯草芽抱桿菌固體曲由枯草芽抱桿菌液與=屯粉按重量比1:15混合，于36 °C下培養(yǎng)20小時(shí)得到。
[0053] 發(fā)酵步驟:將7.化g紅糖溶于熱水配置成50wt%的糖液，將第二發(fā)酵材料與糖液加 入到發(fā)酵罐中攬拌混合，混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā)酵90天。
[0054] 過(guò)濾步驟：過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)?，將過(guò)濾后的發(fā)酵液在真空度為 0.09MPa，溫度為30°C的條件下濃縮，加入質(zhì)量為S屯果蔬酶質(zhì)量的0.1%的低聚果糖作為 輔料，得到=屯果蔬酶。裝瓶，置于低溫下保存。
[0化5] 實(shí)施例2
[0056]本實(shí)施例提供的一種S屯果蔬酶，其原料包括:果蔬10kg、黑曲霉固體曲3kg、枯草 芽抱桿菌固體曲1kg、釀酒酵母菌液250g、保加利亞乳桿菌液450g和紅糖3kg，其中，果蔬由 仙人掌化g、山藥化g、批把化g、梅子1kg、鳳梨1kg、紅龍果化g、青木瓜化g和地瓜化g組成。其 制備方法如下：
[0057]制備混合菌液步驟:將釀酒酵母菌液250g和保加利亞乳桿菌液450g混合均勻得到 混合菌液。
[005引混料步驟:選取新鮮果蔬10kg，洗凈后切塊待用。將由黑曲霉固體曲3kg、枯草芽抱 桿菌固體曲1kg組成的固體曲發(fā)酵材料與上述果蔬搗碎混勻后得到第一發(fā)酵材料，向第一 發(fā)酵材料中加入混合菌液700g，得到第二發(fā)酵材料。所用的黑曲霉固體曲由黑曲霉菌液與 =屯粉按重量比1:1混合，于28°C下培養(yǎng)10小時(shí)得到;所用的枯草芽抱桿菌固體曲由枯草芽 抱桿菌液與=屯粉按重量比1:1混合，于38 °C下培養(yǎng)20小時(shí)得到。
[0059] 發(fā)酵步驟:將3kg紅糖溶于熱水配置成60wt %的糖液，將第二發(fā)酵材料與糖液加入 到發(fā)酵罐中攬拌混合，混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā)酵120天。
[0060] 過(guò)濾步驟：過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)瑢⑦^(guò)濾后的發(fā)酵液在真空度為 0.12MPa，溫度為40°C的條件下濃縮，加入質(zhì)量為S屯果蔬酶質(zhì)量的0.5%的低聚果糖和 0.2%的天麻作為輔料，得到=屯果蔬酶。裝瓶，置于低溫下保存。
[0061] 實(shí)施例3
[0062] 本實(shí)施例提供的一種S屯果蔬酶，其原料包括:果蔬20kg、黑曲霉固體曲化g、枯草 芽抱桿菌固體曲1kg、釀酒酵母菌液250g、保加利亞乳桿菌液500g和紅糖8kg，其中，果蔬由 馬鈴馨化g、芋化g、南瓜1kg、胡瓜化g、紅蘿h2kg、豆馨1kg、蓮截化g、小黃瓜1kg、冬瓜化g、秋 葵化g、青花挪菜1kg和桑權(quán)化g組成。其制備方法如下：
[0063] 制備混合菌液步驟:將釀酒酵母菌液250g和保加利亞乳桿菌液500g混合均勻得到 混合菌液。
[0064] 混料步驟:選取新鮮果蔬20kg，洗凈后切塊待用。將由黑曲霉固體曲化g、枯草芽抱 桿菌固體曲1kg組成的固體曲發(fā)酵材料與上述果蔬搗碎混勻后得到第一發(fā)酵材料，向第一 發(fā)酵材料中加入混合菌液750g，得到第二發(fā)酵材料。所用的黑曲霉固體曲由黑曲霉菌液與 =屯粉按重量比1:20混合，于25°C下培養(yǎng)20小時(shí)得到;所用的枯草芽抱桿菌固體曲由枯草 芽抱桿菌液與S屯粉按重量比1:20混合，于36 °C下培養(yǎng)15小時(shí)得到。
[0065] 發(fā)酵步驟:將8kg紅糖溶于熱水配置成80wt %的糖液，將第二發(fā)酵材料與糖液加入 到發(fā)酵罐中攬拌混合，混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā)酵60天。
[0066] 過(guò)濾步驟：過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)?，將過(guò)濾后的發(fā)酵液在真空度為 O.lOMPa，溫度為35°C的條件下濃縮，加入質(zhì)量為S屯果蔬酶質(zhì)量的0.2%的低聚果糖和 0.2%的當(dāng)歸作為輔料，得到=屯果蔬酶。裝瓶，置于低溫下保存。
[0067] 實(shí)施例4
[0068] 本實(shí)施例提供的一種S屯果蔬酶，其原料包括:果蔬15kg、黑曲霉固體曲500g、枯 草芽抱桿菌固體曲500g、魯氏酵母菌液500g、雙歧乳桿菌液250g和白糖12kg，其中，果蔬由 芥蘭化g、嫩莖窩宦1kg、球莖甘藍(lán)1kg、青椒2kg、菱角1kg、高麗菜1kg、西紅柿1kg、紅鳳菜 1 kg、甜柿1 kg、養(yǎng)麥1 kg、胡麻1 kg和龍眼化g組成。其制備方法如下：
[0069] 制備混合菌液步驟:將魯氏酵母菌液500g和雙歧乳桿菌液500g混合均勻得到混合 菌液。
[0070] 混料步驟:選取新鮮果蔬15kg，洗凈后切塊待用。將由黑曲霉固體曲500g、枯草芽 抱桿菌固體曲500g組成的固體曲發(fā)酵材料與上述果蔬搗碎混勻后得到第一發(fā)酵材料，向第 一發(fā)酵材料中加入混合菌液750g，得到第二發(fā)酵材料。所用的黑曲霉固體曲由黑曲霉菌液 與=屯粉按重量比1:10混合，于28°C下培養(yǎng)15小時(shí)得到;所用的枯草芽抱桿菌固體曲由枯 草芽抱桿菌液與S屯粉按重量比1:10混合，于38 °C下培養(yǎng)10小時(shí)得到。
[0071] 發(fā)酵步驟:將12kg白糖溶于熱水配置成75wt%的糖液，將第二發(fā)酵材料與糖液加 入到發(fā)酵罐中攬拌混合，混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā)酵90天。
[0072] 過(guò)濾步驟：過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)?，將過(guò)濾后的發(fā)酵液在真空度為 0.101?曰，溫度為30°(：的條件下濃縮，加入質(zhì)量為^屯果蔬酶質(zhì)量的0.2%的西洋參和0.2% 的當(dāng)歸作為輔料，得到=屯果蔬酶。裝瓶，置于低溫下保存。
[0073] 實(shí)施例5
[0074] 本實(shí)施例提供的一種S屯果蔬酶，其原料包括:果蔬15kg、黑曲霉固體曲1kg、枯草 芽抱桿菌固體曲500g、魯氏酵母菌液250g、嗜酸乳桿菌液350g和冰糖17kg，其中，果蔬由紅 甘薦2kg、結(jié)球白菜1kg、角菜化g、山芹菜1kg、哈密瓜1kg、巧樣化g、雜猴桃化g、梨1kg、楊桃 1kg、葡萄化g和葡萄抽1kg組成。其制備方法如下：
[0075] 制備混合菌液步驟:將魯氏酵母菌液250g和嗜酸乳桿菌液350g混合均勻得到混合 菌液。
[0076] 混料步驟:選取新鮮果蔬15kg，洗凈后切塊待用。將由黑曲霉固體曲化g、枯草芽抱 桿菌固體曲500g組成的固體曲發(fā)酵材料與上述果蔬搗碎混勻后得到第一發(fā)酵材料，向第一 發(fā)酵材料中加入混合菌液，得到第二發(fā)酵材料。所用的黑曲霉固體曲由黑曲霉菌液與=屯 粉按重量比1:5混合，于26°C下培養(yǎng)15小時(shí)得到;所用的枯草芽抱桿菌固體曲由枯草芽抱桿 菌液與S屯粉按重量比1:10混合，于38°C下培養(yǎng)10小時(shí)得到。
[0077] 發(fā)酵步驟:將17kg冰糖溶于熱水配置成50wt%的糖液，將第二發(fā)酵材料與糖液加 入到發(fā)酵罐中攬拌混合，混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā)酵120天。
[0078] 過(guò)濾步驟：過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)?，將過(guò)濾后的發(fā)酵液在真空度為 O.lOMPa，溫度為30°C的條件下濃縮，加入質(zhì)量為S屯果蔬酶質(zhì)量的0.2%的西洋參作為輔 料得到=屯果蔬酶。裝瓶，置于低溫下保存。
[0079] 實(shí)施例6
[0080] 本實(shí)施例提供的一種S屯果蔬酶，其原料包括:果蔬15kg、黑曲霉固體曲1kg、枯草 芽抱桿菌固體曲1kg、魯氏酵母菌液350g、嗜酸乳桿菌液350g和冰糖10kg，其中，果蔬由火龍 果化g、渡蘿蜜1kg、香蕉化g、蘋(píng)果化g、奇異果1kg、草替化g、酪梨化g、樓桃化g、澄子1kg和水 蜜桃化g組成。按照?qǐng)D1所示的流程圖，其制備方法如下：
[0081] 制備混合菌液步驟:將魯氏酵母菌液350g和嗜酸乳桿菌液350g混合均勻得到混合 菌液。
[0082] 混料步驟:選取新鮮果蔬15kg，洗凈后切塊待用。將由黑曲霉固體曲化g、枯草芽抱 桿菌固體曲1kg組成的固體曲發(fā)酵材料與上述果蔬搗碎混勻后得到第一發(fā)酵材料，向第一 發(fā)酵材料中加入混合菌液，得到第二發(fā)酵材料。所用的黑曲霉固體曲由黑曲霉菌液與=屯 粉按重量比1:5混合，于26°C下培養(yǎng)15小時(shí)得到;所用的枯草芽抱桿菌固體曲由枯草芽抱桿 菌液與S屯粉按重量比1:10混合，于38°C下培養(yǎng)10小時(shí)，得到。
[0083] 發(fā)酵步驟:將10kg冰糖溶于熱水配置成50wt%的糖液，將第二發(fā)酵材料與糖液加 入到發(fā)酵罐中攬拌混合，混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā)酵90天。
[0084] 過(guò)濾步驟：過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)?，將過(guò)濾后的發(fā)酵液在真空度為 O.lOMPa，溫度為30°C的條件下濃縮。將發(fā)酵殘?jiān)墓腆w提取物作為輔料加入到濃縮后的發(fā) 酵液中，得到=屯果蔬酶，上述固體提取物的質(zhì)量為=屯果蔬酶質(zhì)量的0.5%。裝瓶，置于低 溫下保存。
[0085] 實(shí)施例7
[0086] 本實(shí)施例提供的一種S屯果蔬酶，其原料包括：果蔬20kg、S屯粉1kg、果膠酶 (40U/mg)5g、纖維素酶(3抓/mg)0.5g、釀酒酵母菌液250g、保加利亞乳桿菌液500g和紅糖 10kg，其中，果蔬由芥蘭2kg、嫩莖窩宦1kg、球莖甘藍(lán)化g、青椒化g、菱角化g、蘋(píng)果2kg、奇異 果化g、草替化g、酪梨1kg、樓桃化g、澄子1kg和水蜜桃化g組成。按照?qǐng)D2所示的流程圖，其制 備方法如下：
[0087] 制備混合菌液步驟:將魯釀酒酵母菌液250g和保加利亞乳桿菌液500g混合均勻得 到混合菌液。
[0088] 混料步驟:選取新鮮果蔬20kg，洗凈后切塊待用。將由S屯粉1kg、果膠酶(40U/mg) 5g和纖維素酶(3抓/mg)0.5g組成的復(fù)合酶發(fā)酵材料與上述果蔬搗碎混勻后得到第一發(fā)酵 材料，向第一發(fā)酵材料中加入混合菌液，得到第二發(fā)酵材料。
[0089] 發(fā)酵步驟:將10kg紅糖溶于熱水配置成60wt%的糖液，將第二發(fā)酵材料與糖液加 入到發(fā)酵罐中攬拌混合，混合均勻后得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液密封發(fā)酵120天。
[0090] 過(guò)濾步驟：過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)瑢⑦^(guò)濾后的發(fā)酵液在真空度為 O.lOMPa，溫度為30°C的條件下濃縮，得到立屯果蔬酶。裝瓶，置于低溫下保存。
[0091] 將=屯果蔬酶置于低溫下保存，是為了在不添加防腐劑的情況下，延長(zhǎng)=屯果蔬 酶的保存期，通常在1-5°C下保存較佳。
[0092] 實(shí)驗(yàn)例
[0093] 采用實(shí)施例1-7的方法制得的=屯果蔬酶，對(duì)其糖度值和=屯總皂巧含量進(jìn)行測(cè) 試，測(cè)試方法如下：
[0094] 1、S屯果蔬酶的糖度值的測(cè)定：使用旋光儀對(duì)糖度值為0%、20%、40%、60%、 80%、100%的糖液的旋光值進(jìn)行測(cè)定，并W此繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在對(duì)實(shí)施例1-7的=屯果蔬酶 的旋光值進(jìn)行測(cè)定，和標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)后得到糖度值，測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表1;
[00M] 2、=屯果蔬酶中=屯總皂巧含量的測(cè)定:通過(guò)高效液相色譜對(duì)不同濃度的=屯皂 巧標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，確定吸收波長(zhǎng)并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)高效液相色譜對(duì)實(shí)施例1-7的= 屯果蔬酶于波長(zhǎng)544nm處的吸光度進(jìn)行測(cè)定，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出=屯果蔬酶中的=屯總皂 巧含量，測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表1。
[0096]表1 =屯果蔬酶糖度值及=屯總皂巧含量測(cè)試結(jié)果 r00971

L〇〇98」從表1可w看出，本發(fā)明實(shí)施例1-7所提供的=尤果蔬酶，糖度值>45% w上，產(chǎn)品 中=屯總皂巧含量>0.5%。綜上所述，本發(fā)明實(shí)施例的一種=屯果蔬酶，將=屯中的有效 成分成功融入到果蔬酶之中，其=屯總皂巧含量高，營(yíng)養(yǎng)豐富，易于消化吸收。用W制備該 =屯果蔬酶的方法操作簡(jiǎn)便、實(shí)用性強(qiáng)，該制備方法通過(guò)低溫發(fā)酵、低溫真空濃縮和低溫回 饋，有效的保留了 =屯熱敏感成分，可有效提高和發(fā)揮=屯的醫(yī)療保健功效。
[0099] W上所描述的實(shí)施例是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。本發(fā)明的實(shí) 施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本發(fā)明的范圍，而是僅僅表示本發(fā)明的選定實(shí)施 例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的 所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種三七果蔬酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 制備混合菌液步驟:將酵母菌液和乳酸菌液按重量比1:0.5~2混合均勻得到混合菌 液； 混料步驟:取占第一發(fā)酵材料重量的2~5 %的所述混合菌液接種到所述第一發(fā)酵材料 中并混合均勻，得到第二發(fā)酵材料； 所述第一發(fā)酵材料為固體曲發(fā)酵材料或者復(fù)合酶發(fā)酵材料； 所述固體曲發(fā)酵材料由黑曲霉固體曲、枯草芽孢桿菌固體曲和果蔬搗碎混勻后得到， 其中按重量計(jì):所述黑曲霉固體曲：所述枯草芽孢桿菌固體曲：所述果蔬=1~3:1:10~30; 所述黑曲霉固體曲由黑曲霉菌液與三七粉按重量比1:1~20混合培養(yǎng)得到；所述枯草芽孢 桿菌固體曲由枯草芽孢桿菌液與三七粉按重量比1:1~20混合培養(yǎng)得到； 所述復(fù)合酶發(fā)酵材料由果膠酶、纖維素酶和三七粉混合制成，其中，按三七粉重量計(jì)使 用果膠酶100~300U/g，纖維素酶10~30U/g，三七粉與果蔬的重量比為1:10~30; 發(fā)酵步驟:將所述第二發(fā)酵材料與食用糖液混合均勻后得到發(fā)酵液，將所述發(fā)酵液密 封發(fā)酵60~120天； 過(guò)濾步驟:對(duì)經(jīng)發(fā)酵后的所述發(fā)酵液進(jìn)行過(guò)濾除去發(fā)酵液中的發(fā)酵殘?jiān)玫饺吖? 酶。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，還包括在所述過(guò)濾步驟之后的濃縮步 驟，所述濃縮的條件為:真空度彡0. 〇9MPa，溫度<45 °C。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，還包括在所述濃縮步驟之后的向濃縮 后的所述發(fā)酵液添加輔料的步驟，所述輔料的質(zhì)量為所述三七果蔬酶質(zhì)量的0.1~1%，所 述輔料為所述發(fā)酵殘?jiān)墓腆w提取物、低聚果糖和中藥材中的至少一種。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述固體提取物由以下步驟制得：用 乙醇減壓回餾所述發(fā)酵殘?jiān)⒌玫交仞s液，去除所述回餾液中的乙醇后得到所述固體提取 物，所述減壓回餾的條件為:真空度多〇. 〇9MPa，溫度<45 °C。5. 根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述酵母菌液由以下步驟 制得:將酵母菌接入酵母菌一級(jí)培養(yǎng)基，培養(yǎng)得到第一種子液;將所述第一種子液加入到酵 母菌二級(jí)培養(yǎng)基，所述第一種子液的體積為所述酵母菌二級(jí)培養(yǎng)基的2~4%，培養(yǎng)得到所 述酵母菌液； 所述乳酸菌液由以下步驟制得:將乳酸菌接入乳酸菌一級(jí)培養(yǎng)基，培養(yǎng)得到第二種子 液;將所述第二種子液加入到乳酸菌二級(jí)培養(yǎng)基，所述第二種子液的體積為所述乳酸菌二 級(jí)培養(yǎng)基的2~4%，培養(yǎng)得到所述乳酸菌液。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述酵母菌為釀酒酵母菌和魯氏酵母 菌中的任一種;所述乳酸菌為植物乳桿菌、保加利亞乳桿菌、雙歧乳桿菌和嗜酸乳桿菌中的 任一種。7. 根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述黑曲霉菌液由以下步 驟制得:將黑曲霉接入黑曲霉一級(jí)培養(yǎng)基，培養(yǎng)得到第三種子液;將所述第三種子液加入到 黑曲霉二級(jí)培養(yǎng)基，所述第三種子液的重量為所述黑曲霉二級(jí)培養(yǎng)基的0.5~1.5 %，培養(yǎng) 得到所述黑曲霉菌液； 所述枯草芽孢桿菌液由以下步驟制得：將枯草芽孢桿菌接入枯草芽孢桿菌一級(jí)培養(yǎng) 基，培養(yǎng)得到第四種子液;將所述第四種子液加入到枯草芽孢桿菌二級(jí)培養(yǎng)基，所述第四種 子液的重量為所述枯草芽孢桿菌二級(jí)培養(yǎng)基的0.5~1.5%，培養(yǎng)得到所述枯草芽孢桿菌 液。8. 根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述酵母菌液和所述乳酸 菌液中的細(xì)菌數(shù)目大于105CFU/mL。9. 根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述食用糖液中食用糖的 含量為50~80wt%，所述第二發(fā)酵材料與所述食用糖的質(zhì)量比為1:0.2~1。10. -種三七果蔬酶，其特征在于，采用權(quán)利要求1~9任一項(xiàng)所述的方法制得。
【文檔編號(hào)】C12R1/865GK106047825SQ201610510392
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月30日
【發(fā)明人】蘇劍鋒, 王訓(xùn)斌, 包珍, 張良, 肖勇生
【申請(qǐng)人】蘇劍鋒