一組腸菌素?抗生素衍生物及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及通式 I 所示腸菌素?抗生素偶聯(lián)物及其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥，其中取代基R1、R2、R3具有在說明書中給出的含義。本發(fā)明還涉及通式 I 的化合物具有較強(qiáng)抑制革蘭氏陰性菌的活性，有望研發(fā)成為臨床抗菌的有效藥物。
【專利說明】
一組腸菌素-抗生素衍生物及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域：
[0001] 本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，具體來講，涉及一組腸菌素-抗生素偶聯(lián)物及其藥學(xué)上可接 受的異構(gòu)體、鹽或前藥，及它們的制備方法和在抑制革蘭氏陰性菌中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】：
[0002] 近年來，由細(xì)菌耐藥引發(fā)的臨床抗感染治療失敗對人類健康造成極大威脅。2015 年衛(wèi)生部全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測結(jié)果顯示，臨床上常見的非發(fā)酵革蘭氏陰性菌銅綠假單胞菌和 鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類耐藥率部分地區(qū)已分別高達(dá)32.7 %和82.1 %。與革蘭氏陽性菌 不同，革蘭氏陰性菌因具有一層對抗生素易產(chǎn)生屏障作用的脂多糖外膜，常具有更強(qiáng)的耐 藥性。當(dāng)前，抗生素藥物的不合理使用更加劇了其耐藥性的產(chǎn)生，革蘭氏陰性菌耐藥因而也 成為當(dāng)今患者發(fā)病及死亡的重要原因。
[0003] 鐵載體是微生物或植物在缺鐵環(huán)境下合成并分泌的一類對鐵離子(Fe3+)具有超強(qiáng) 特異性螯合能力的小分子有機(jī)化合物（見下列常見鐵載體化學(xué)結(jié)構(gòu)）。能夠?qū)⒉灰孜盏?Fe3+轉(zhuǎn)化為Fe3+_鐵載體復(fù)合物，進(jìn)而通過主動轉(zhuǎn)運(yùn)使外部Fe3+進(jìn)入細(xì)胞。
[0004]
[0005] 人體血清中Fe3+的濃度很低，僅為10-24Μ，細(xì)菌每繁殖一代則需鐵載體從外界獲取 10 5-106個Fe3+ (至少維持胞內(nèi)濃度10-6Μ)。因此，鐵載體轉(zhuǎn)運(yùn)Fe3+這一過程在細(xì)菌感染過程中 發(fā)揮著重要的作用。在革蘭氏陰性菌細(xì)胞外膜通透性逐步降低，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性加劇的形 勢下，Miller在1993年提出了以鐵載體為抗生素載體的"Trojan horse"抗菌藥物研發(fā)策 略。即，用鐵載體將抗生素?cái)y帶進(jìn)入革蘭氏陰性菌中，進(jìn)而發(fā)揮抗菌作用，克服革蘭氏陰性 菌外膜對抗生素的耐藥性。
[0006] 鐵載體-抗生素偶聯(lián)物具有以下特點(diǎn)：1)依靠革蘭氏陰性菌外膜蛋白對鐵載體的 特異性識別轉(zhuǎn)運(yùn)克服傳統(tǒng)抗生素的透膜性障礙，鐵載體-抗生素偶聯(lián)物可自由穿越革蘭氏 陰性菌細(xì)胞屏障；2)因此，抗生素的吸收模式由被動擴(kuò)散轉(zhuǎn)變?yōu)橹鲃愚D(zhuǎn)運(yùn);3)較原型抗生 素相比，偶聯(lián)物抗菌選擇性提高，且選擇性與抗生素的種類呈相關(guān)性。
[0007] 本發(fā)明在參考相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)并合成了一系列新的具可在革蘭氏陰性菌 細(xì)胞內(nèi)部選擇性釋放Linker的腸菌素-抗生素偶聯(lián)物，經(jīng)初步藥理活性測試發(fā)現(xiàn)，該類化合 物具有抑制革蘭氏陰性菌的作用且具有進(jìn)一步的研究價(jià)值。迄今為止，尚未見有所述衍生 物及其在抑制革蘭氏陰性菌和治療感染類疾病的相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】
：
[0008]本發(fā)明提供了通式(I)所示腸菌素-抗生素偶聯(lián)物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體 異構(gòu)體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前藥，其特征在于，所述腸菌素-抗生素偶聯(lián)物由 腸菌素、Linker、抗生素三部分連接組成，
[0010] 式中：
[0011] R!選自：
[0012] 所述Linker片段中η可為0- f. 5的整數(shù)；
[0013] R2 可為：
[0017]本發(fā)明優(yōu)選提供定義如下的通式（I)化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu) 體的混合物以及藥學(xué)上可接受的鹽或前藥，
[0018] 其中：
[0019] 選自
[0020] :所述 Linker 片段中n = 3; r
[0021] R2選自：
[0022]
[0023]
[0024]
[0025] 本發(fā)明通式（I)的化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物以及藥 學(xué)上可接受的鹽或前藥優(yōu)選以下化合物，但所述化合物并不意味著對本發(fā)明的任何限制：
[0026] (2S，5R，6R)-6-( (S)-2-((S)-2-( (S)-6-胺基-2-(4-( (3-(( (3S，7S，11S)_7,11-雙-(2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4， 5-二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺基）己胺)丙胺)-2-(4-羥苯基）乙酰胺基-3,3-二甲基-7-氧 代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸
[0027] (6R，7R)-7-((S)-2-( (S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( (3-(((3S，7S，11S)_7,11-雙-(2,3_二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二 羥苯基)胺基)-4_氧代丁胺基）己胺)丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮 雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛-2-烯-2-羧酸
[0028] (6R，7S)-7-((S)-2-( (S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( (3-(((3S，7S，11S)_7,11-雙-(2,3_二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二 羥苯基）胺基）-4_氧代丁胺基）己胺）丙胺）-2-苯乙酰胺基）-3-氯-8-氧代-1-氮雜雙環(huán)
[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸
[0029] (6R，7R)-7-((S)-2-( (S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( (3-(((3S，7S，11S)_7,11-雙-(2,3_二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二 羥苯基)胺基)-4_氧代丁胺基）己胺)丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜 雙環(huán)[4.2.0 ]辛-2-烯-2-羧酸
[0030] (6R，7R)-7-(2-(2-(((S)-2-((S)-6-KS-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|(2, 3-二羥基本甲酰胺)-2,6,10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5-二羥 苯基)胺基)-4-氧代丁胺基）己胺)丙胺）甲基)苯基）乙?；?-3-(((1-(羧甲基)-1!1-四唑-5-基)硫）甲基)-8-氧代-5-硫雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛-2-烯-2-羧酸 [0031 ] 7-(4-( (S)-2-( (s)-6-胺基-2-(4-( (3-( ((3S，7S，11S)_7，11-雙（2，3-二羥基本甲 酰胺)-2,6，10_三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺基)己胺)丙?；?哌嗪-1-基)-1_環(huán)丙基-6-氟-4-氧代-1，4-二氫喹啉-3-羧酸
[0032] (2S，5R，6R)-6-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|-(2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯 基)胺基)-4_氧代丁胺基)-5-胍基)丙胺)-2-(4-羥苯基）乙酰胺基)-3,3_二甲基-7-氧代- 4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸
[0033] (6R，7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|-(2,3-:- 基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺 基)-4_氧代丁胺基)-5-胍基)丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)
[4.2.0] 辛烷-2-烯-2-羧酸
[0034] (6R，7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|-(2,3-:- 基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺 基)-4_氧代丁胺基)-5-胍基)丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛 燒 _2_稀-2-羧酸
[0035] (6R，7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|-(2,3-:- 基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺 基)-4_氧代丁胺基)-5-胍基）丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)
[4.2.0] 辛烷-2-烯-2-羧酸
[0036] (6R，7R)-7-(2-(2-(((S)-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|-(2,3-:- 基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲酰基)-4,5_二羥苯基)胺 基)-4_氧代丁胺基)-5-胍基)丙胺）甲基)苯基）乙?；?-3-(((1-(羧甲基)-1Η-四唑-5-基） 硫代）甲基) _8_氧代_5_硫雜-1-氣雜雙環(huán)[4.2.0]辛燒_2_稀_2_駿酸
[0037] 7-(4-((幻-2-((5)-2-(4-((3-(((33,73，113)-7，11-雙-(2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5-二羥苯基)胺基)-4-氧代丁 胺基)-5-胍基)丙?；?哌嗪-1 -基)-1 -環(huán)丙基-6-氟-4-氧代-1，4-二氫喹啉-3-羧酸
[0038] (2S，5R，6R)-6-((S)-2-((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S, 7S，11S) -7，11-雙(2，3-二羥基本甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基） 胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基）丁 胺基）己胺）丙胺）-2-(4-羥苯基）乙酰胺基）-3,3_二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)
[3.2.0] 庚烷-2-羧酸
[0039] (6R，7R)-7-( (S)-2-((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基本甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 酰基)-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙胺) _2_苯乙酰胺基)_3_甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]庚燒-2-稀-2-羧 酸
[0040] (6R，7R)-7-( (S)-2-((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基本甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙胺) _2_苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]庚燒-2-稀-2-羧酸
[0041] (6R，7S)-7-( (S)-2-((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基本甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 酰基)-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]庚烷-2-烯-2-羧酸
[0042] (6R，7R)-7-(2-(2-( ((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基本甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙胺）甲基)苯基）乙酰基)-3-(((1-羧甲基-1H-四唑-5-基)硫代）甲基)-8-氧代-5-硫 雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛烷-2-烯-2-羧酸
[0043] 7-(4-( (S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S，llS)-7,11-雙 (2,3_二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5-二 輕苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基) -1Η_1，2,3_二唑-4-基)丁胺基）己胺)丙胺)哌 嗪-1-基)-1_環(huán)丙基-6-氟-4-氧代-1，4-二氫喹啉-3-羧酸
[0044] (2S，5R，6R)-6-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((3S，7S, 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基本甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?4,5_二羥苯基）胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基）-1Η-1，2,3-三唑-4-基）丁胺 基)-5-胍基）丙胺)-2-(4-羥苯基）乙酰胺基)-3,3_二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)
[3.2.0]庚烷-2-羧酸
[0045] (6R,7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((3S,7S,llS)-7, 11-雙（2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-l，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲酰基)- 4.5- 二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-lH-l，2,3-三唑-4-基）丁胺基)-5-胍 基)丙胺)-2_苯乙酰胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛烷-2-烯-2-羧酸
[0046] (6R,7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((3S,7S,llS)-7, 11-雙（2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-l，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?- 4.5- 二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-lH-l，2,3-三唑-4-基）丁胺基)-5-胍 基)丙胺)_2_苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛燒-2-稀-2-羧酸
[0047] (6R,7S)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((3S,7S,llS)-7, 11-雙（2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-l，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?- 4.5- 二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-lH-l，2,3-三唑-4-基）丁胺基)-5-胍 基)丙胺)-2_苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛烷-2-烯-2-羧酸
[0048] 按照本發(fā)明所屬領(lǐng)域的常規(guī)方法，本發(fā)明通式(I)的腸菌素-抗生素類衍生物可以 與酸生成藥學(xué)上可接受的鹽?？伤幱眉映甥}包括無機(jī)酸和有機(jī)酸加成鹽，與下列酸加成的 鹽特別優(yōu)選的是：鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺 酸、乙酸、丙酸、乳酸、三氟乙酸、馬來酸、檸檬酸、富馬酸、草酸、酒石酸、苯甲酸等。
[0049] 此外，本發(fā)明還包括本發(fā)明衍生物的前藥。本發(fā)明衍生物的前藥是通式(I)的衍生 物，它們自身可能具有較弱的活性甚至沒有活性，但是給藥后，在生理?xiàng)l件下（例如通過代 謝、溶劑分解或另外的方式)被轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的生物活性形式。
[0050] 本發(fā)明提供了所述腸菌素-抗生素偶聯(lián)物的藥理活性實(shí)驗(yàn)，檢測了其對銅綠假單 胞菌(ATCC27853)和大腸桿菌(ATCC25922)的敏感性，結(jié)果表明，所測化合物90%以上的抗 菌活性均較原型抗生素活性強(qiáng)，為進(jìn)一步研發(fā)成為臨床抗菌藥物奠定了良好基礎(chǔ)。
[0051] 以下實(shí)施例進(jìn)一步闡明和舉例說明本發(fā)明化合物及其制備方法，但不以任何方式 限制本發(fā)明的范圍。
[0052]以下合成路線(路線1)提供了本發(fā)明通式（I)衍生物的制備方法，所用原料都是通 過這些示意合成路線中描述的方式、采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法制備或者可商購的。 這些路線中的全部可變因數(shù)如下文的定義或如權(quán)利要求中的定義。
[0053]按照本發(fā)明的式（I)的衍生物，均可按照路線1的方法由相應(yīng)中間體A和相應(yīng)的中 間體B以及相應(yīng)的抗生素通過縮合反應(yīng)制備得到。該路線方法采用匯聚式合成方式，首先由 相應(yīng)中間體A和相應(yīng)中間體B縮合，所得產(chǎn)物進(jìn)一步和抗生素片段縮合，最后經(jīng)相應(yīng)的脫保 護(hù)得到相應(yīng)目標(biāo)化合物。
[0054]
[0055] 相應(yīng)中間體A的合成可經(jīng)與參考文獻(xiàn)(J.Am.Chem.Soc.2012,134,18388-18400)類 似的方法制備得到。
[0056] 相應(yīng)中間體B的合成如路線2所示，其它取代基如權(quán)利要求中所定義：
[0057]
[0058]以上兩條路線中所有取代基辦、1?2、1?3如權(quán)利要求中所定義。
【具體實(shí)施方式】
[0059] 實(shí)施例旨在闡述而不是限制本發(fā)明的范圍?；衔锏暮舜殴舱駳渥V用Bruker ARX-400或者ARX-600測定，質(zhì)譜用Agilent 1100LC/MSD測定;所用試劑均為分析純或化學(xué) 純。
[0060] 實(shí)施例1:(6R，7R)-7-( (S)-2-((s)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( (3-(((3S，7S，llS)-7， 11-雙-(2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺基）-4-氧代丁胺基）己胺）丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫 雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸的制備
[0061]
[0062] 實(shí)施例1
[0063] (6R，7R)-7-((S)-2-( (S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( (3-(((3S，7S，11S)_7,11-雙- (2,3_二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二 羥苯基)胺基)-4_氧代丁胺基）己胺)丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮 雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛-2-烯-2-羧酸
[0064]步驟A中間體(S)-甲基-2-((S)_胺基-6-((芐氧羰基胺基）己胺基））丙酸甲酯的 合成
[0065]
[0066] (S)-甲基-2-((S)_胺基-6-((芐氧羰基胺基)己胺基））丙酸甲酯
[0067] 將（S)-2-胺基-6-(芐氧羰基胺基)正己酸（10.(^，35.67111111〇1)、（5)-甲基-2-胺基 丙酸甲酯（18.4g，178.4mmol)和100mL CH2C12加入250mL茄形瓶中，冰浴下緩慢加入DCC (7 · 4g，35 · 67mmo 1)和DMAP(0 · 44g，3 · 57mmol)，緩慢升至室溫后繼續(xù)室溫反應(yīng)，8h后TLC顯示 原料反應(yīng)完畢，減壓濃縮除去反應(yīng)溶劑，殘留物乙酸乙酯（50X3mL)萃取，有機(jī)相無水硫酸 鈉干燥，濃縮得粗品。粗品經(jīng)flash柱純化乙酸乙酯-正己烷（1:5)得無色油狀目標(biāo)產(chǎn)物 (6.2g,46.7%)〇
[0068] LC-MS(ESI,M+H+)m/z 366.3.
[0069] 步驟B 4-(((9S,12S)-12-甲基-3,10，13-三氧代-1-苯基-2，14-二氧-4，11-二氮 雜十五烷-9-基)胺基)-4-氧代丁酸的制備
[0070]
[0071 ] 4-( ((9S，12S)-12-甲基-3，10，13-三氧代-1-苯基-2，14-二氧-4，11-二氮雜十五 烷-9-基）胺基)-4-氧代丁酸
[0072]冰浴下，將(S)-甲基-2-((S)_胺基-6-((芐氧羰基胺基）己胺基））丙酸甲酯(6.8g， 18.61臟〇1)和丁二酸酐(3.78,37.22_)1)加入含有1'冊(201^)的1001^茄形瓶中，緩慢將反 應(yīng)體系升至室溫，3h后TLC顯示反應(yīng)基本完全，減壓濃縮除去反應(yīng)溶劑，殘留物乙酸乙酯(30 X3mL)萃取，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥，濃縮flash柱純化甲醇-CH2C12(1:8)得無色油狀目標(biāo) 產(chǎn)物(5.3g，61.2%)。
[0073] LC-MS(ESI,M-H+)m/z 464.5.
[0074] 步驟C 中間體(S)_甲基-2-((S)-6-(((芐氧基)羰基)胺基)-2-(4-((3-(( (3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4，5-二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺基)己胺)丙酸甲酯的制備
[0075]
[0076] (S)-甲基-2-( (s)-6-(((芐氧基)羰基)胺基)-2-(4-( (3-(( (3S，7S，11S)_7，11-雙 (2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4，5-二 羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺基)己胺)丙酸甲酯
[0077] 腸菌素衍生物A( 1 · 5g，2 · 19mmol)、4-( ((9S，12S)-12-甲基-3，10，13-三氧代-1-苯 基-2,14-二氧-4,11-二氮雜十五燒-9-基）胺基）-4_氧代丁酸（3. lg，6.57mmol)和8mL CH2C12加入25mL茄形瓶中，冰浴下緩慢加入DCC(0.45g，2. 19mmol)和DMAP(0.03g， 0.22mmol)，緩慢升至室溫后繼續(xù)室溫反應(yīng)，室溫?cái)嚢柽^夜后TLC顯示原料反應(yīng)完畢，減壓濃 縮除去反應(yīng)溶劑，殘留物乙酸乙酯（10X3mL)萃取，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥，濃縮得粗品。粗 品經(jīng)flash柱純化乙酸乙酯-正己烷(1:1)得淡黃色固體目標(biāo)產(chǎn)物（1.8g，72.3% )。
[0078] LC-MS(ESI,M-H+)m/z 1130.9.
[0079] 步驟D (S)_甲基_2_( (S)_6_(((節(jié)氧基)幾基)胺基)-2-(4-( (3-(((3S,7S,llS)-7,11-雙（2,3-二羥基苯甲酰胺）-2,6,10-三氧代-1，5，9_三氧雜環(huán)十二烷-3-基）胺甲酰 基)-4，5-二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺基)己胺)丙酸的制備
[0080]
[0081] (S)-甲基-2-( (s)-6-(((芐氧基)羰基)胺基)-2-(4-( (3-(( (3S，7S，11S)_7，11-雙 (2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4，5-二 羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺基)己胺)丙酸
[0082] 冰浴下將（S)-甲基-2-( (S)-6-(((芐氧基）羰基）胺基）-2-(4-( (3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?4,5_二羥苯基）胺基）-4-氧代丁胺基）己胺）丙酸甲酯（1.0g，0.89mmol)WAl2mL MeOH/CH 2Cl2(V/V= 1:3)中，加畢后向反應(yīng)體系緩慢加入Na0H(0. lg，2.67mmol)，待到NaOH全 部溶解后，將反應(yīng)體系緩慢升至室溫，6h后TLC顯示反應(yīng)完畢，減壓濃縮除去反應(yīng)溶劑，將反 應(yīng)液充分蒸干后加入5mL無水乙醇，過濾出去NaCl和未反應(yīng)的NaOH，過濾后減壓除去乙醇， 用6N HC1調(diào)節(jié)pH值至3左右，乙酸乙酯（10 X 3mL)萃取，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥，濃縮得粗 品，粗品產(chǎn)率(0.73g，73.1%mmol)〇
[0083] LC-MS(ESI,M+H+)m/z 1117.4.
[0084] 步驟E (6R，7R)-7-((9S，12S，15S)-9-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|-(2,3_: 羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基） 胺基）-4_氧代丁胺基）己胺）丙胺)-2-苯乙酰胺基）-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán) [4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸的制備
[0085]
[0086] (61?，71〇-7-((95，125，155)-9-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3-二羥基本 甲酰胺)-2,6，10_三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺基)- 4-氧代丁胺基）己胺）丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0] 辛-2-烯-2-羧酸
[0087] (S)-甲基-2-( (s)-6-(((芐氧基)羰基)胺基)-2-(4-( (3-(( (3S，7S，11S)_7，11-雙 (2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4，5-二 輕苯基)胺基)-4-氧代丁胺基）己胺)丙酸(0.5〖，0.451111]1〇1)、頭孢拉定(0.47〖，1.341]11]1〇1)和 5mL THF加入 10mL茄形瓶中，冰浴下緩慢加入EDC · HCl(0.13g，0.68mmol)、H0Bt(0.45g， 2.19mmol)和DIEA(0.15mL，0.90mmol)，緩慢升至室溫后繼續(xù)室溫反應(yīng)，室溫?cái)嚢柽^夜后TLC 顯示原料反應(yīng)完畢，減壓濃縮除去反應(yīng)溶劑，殘留物乙酸乙酯(5X3mL)萃取，有機(jī)相無水硫 酸鈉干燥，濃縮得粗品。粗品經(jīng)flash柱純化CH 2Cl2-MeOH(3:l)得淡黃色固體目標(biāo)產(chǎn)物 (0.41g,63.1%)〇
[0088] LC-MS(ESI,M-H+)m/z 1445.1.
[0089] 實(shí)施例1的合成
[0090] 將（6R，7R)-7-((9S，12S，15S)-9-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|-(2,3-:-S 本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基）胺 基）-4_氧代丁胺基）己胺）丙胺）-2-苯乙酰胺基）-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán) [4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸(0.2 8,0.15!11111〇1)加入甲醇中，？(1/(：(0.068)和氫氣存在下室溫 40psi反應(yīng)，2.0h后TLC檢測反應(yīng)完畢，減壓濃縮除去反應(yīng)溶劑，殘留物乙酸乙酯(3X3mL)萃 取，有機(jī)相無水硫酸鈉干燥，濃縮得粗品。粗品經(jīng)f lash柱純化CH2Cl2-MeOH( 1:1)得白色固體 化合物 l(〇.12g，60.9%)。
[0091] lHNMR(500MHz，CDCl3)S9.7h9.65(m，2H)，9.22(s，3H)，8.15-8.02(m，2H)，7.69-7.65(m，lH)，7.43(s，lH),7.40-6.95(m，12H),7.11-7.02(m，5H)，7.ll-6.95(m，5H),5.92 (d ,J = 8.2Hz,2H),5.80-5.76(m,3H),5.46(d ,J = 8.6Hz,lH),5.11-5.00(m,3H),4.88-4.52 (m,3H),4.82-3.55(m,7H),4.57-3.51(m,3H),3.87-3.85(m,lH),3.53-3.50(m,lH),2.95-2.83(m,3H),2.74-2.65(m,4H),2.10(s,3H),1.92-1.53(m,2H),1.67-0.54(m,17H).
[0092] LC-MS(ESI,M-H+)m/z 1311.4.
[0093] 實(shí)施例 2:(6R，7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-雙-(2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-l，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5-二 羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺基)-5-胍基)丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-1-氮雜雙環(huán) [4 · 2 · 0 ]辛烷-2-烯-2-羧酸的制備
[0094]
[0095] (6R，7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-|-(2,3-:- 基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲酰基)-4,5-二羥苯基)胺 基)-4_氧代丁胺基)-5-胍基)丙胺)-2-苯乙酰胺基)-3-氯-8-氧代-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛 燒 _2_稀-2-羧酸
[0096] 中間體(S)-甲基-2-((S)_胺基-5-胍基戊烷胺基丙酸甲酯的合成
[0097]
[0098] (S)-甲基-2-((S)_胺基-5-胍基戊烷胺基丙酸甲酯
[0099] 按照實(shí)施例1中步驟A的合成方法，將(S)-甲基-2-胺基丙酸甲酯和精氨酸在CH2C12 為溶劑，DCC為縮合劑，DMAP為催化劑的條件下，室溫反應(yīng)1 Oh制備得到。
[0100] LC-MS(ESI,M+H+)m/z 260.3.
[0101] 4-(((S)-5-胍基-1-(((S)-1-甲氧基-1-氧代丙烷-2-基)胺基)-1-氧代戊烷-2-基)胺基)-4-氧代丁酸的制備
[0102]
[0103] 4-(((5)-5-胍基-1-(((5)-1-甲氧基-1-氧代丙烷-2-基)胺基)-1-氧代戊烷-2-基)胺基)-4_氧代丁酸
[0104] 按照實(shí)施例1中步驟B的合成方法，將(S)-甲基-2-( (S)-胺基-5-胍基戊烷胺基丙 酸甲酯和丁二酸酐在THF為溶劑的條件下，室溫反應(yīng)3h制備得到。
[0105] LC-MS(ESI,M+H+)m/z 360.5.
[0106] (S)_ 甲基-2-((3)-2-(4-((3-(((33,73，113)-7，11-雙(2,3-二羥基苯甲酰胺)-2， 6,10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲酰基)-4,5_二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺 基)-5-胍基)丙酸甲酯的制備
[0107]
[0108] (S)-甲基-2-((3)-2-(4-((3-(((33,73，113)-7，11-雙(2,3-二羥基苯甲酰胺)-2， 6.10- 三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲酰基)-4,5_二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺 基)-5_胍基)丙酸甲酯
[0109] 按照實(shí)施例1中步驟C的合成方法，將腸菌素衍生物A和4-(((S)-5-胍基-1-(((S)_ 1-甲氧基-1-氧代丙烷-2-基)胺基)-1-氧代戊烷-2-基)胺基)-4-氧代丁酸在CH 2C12為溶劑， DCC為縮合劑，DMAP為催化劑的條件下，室溫反應(yīng)過夜制備得到。
[0110] LC-MS(ESI,M+H+)m/z 1026.4.
[0111] (s)-甲基-2-((3)-2-(4-((3-(((33,73，113)-7，11-雙(2,3-二羥基苯甲酰胺)-2， 6.10- 三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺 基)-5_胍基)丙酸的制備
[0112]
[0113] (S)-甲基-2-((3)-2-(4-((3-(((33,73，113)-7，11-雙(2,3-二羥基苯甲酰胺)-2， 6.10- 三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺 基)-5_胍基)丙酸
[0114] 按照實(shí)施例1中步驟D的合成方法，將（S)-甲基-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4，5-二羥苯基）胺基）-4-氧代丁胺基)-5-胍基）丙酸甲酯在CH 2C12和MeOH為溶劑， NaOH為堿的條件下，室溫反應(yīng)5h制備得到。
[0115] LC-MS(ESI,M-H+)m/z 1010.5.
[0116] 實(shí)施例2的制備
[0117] 按照實(shí)施例1中步驟E的合成方法，將（S)_甲基-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 酰基)-4,5-二羥苯基)胺基)-4-氧代丁胺基)-5-胍基)丙酸和勞拉頭孢在THF為溶劑，EDC· HCl、H0Bt為催化劑，DIEA為堿的條件下，室溫反應(yīng)過夜制備得到。
[0118] 4^^(50011^,0)(:13)39.33(8,310,9.12-9.03(111,210,7.94-7.71(111,210,7.55-7.52(m,lH),7.44-6.99(m,15H),6.57(s,2H),5.84-5.77(m,4H),5.41(s,1H),5.23-4.98 (m,4H),4.86-4.21(m,9H),4.42-4.40(m,2H),3.37-3.50(m,2H),3.00-2.23(m,6H),1.85-1.74(m,2H),1.63-1.40(m,7H),0.65(s,lH).
[0119] 實(shí)施例3: (6R，7R)-7-(2-(2-(((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-( θα (3S，7S，llS)-7,11-雙 (2,3-二羥基本甲酰胺 )-2,6,10-三氧代-1,5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3_基)胺甲?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基）己胺）丙胺）甲基）苯基）乙?；?-3-(((1-羧甲基-1H-四唑-5-基)硫代）甲基)-8_氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛烷-2-烯-2-羧酸的制備
[0120]
[0121] (6R，7R)-7-(2-(2-( ((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基本甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙胺）甲基)苯基）乙?；?-3-(((1-羧甲基-1H-四唑-5-基)硫代）甲基)-8-氧代-5-硫 雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛烷-2-烯-2-羧酸
[0122] (S)-甲基-2-((S)-6-(((芐氧基)羰基)胺基氯乙氧基） 乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基)己胺基)丙酸甲酯的制備
[0123]
[0124] (S)-甲基-2-((S)-6-(((芐氧基)羰基)胺基氯乙氧基） 乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基）己胺基)丙酸甲酯
[0125] 按照實(shí)施例1中步驟B的合成方法，將(S)_甲基-2-( (S)-胺基-6-((芐氧羰基胺基） 己胺基））丙酸甲酯和4-α_(2-(2-(2-(2-氯乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙氧基)-1Η-1，2,3-三 唑-4-基)丁酸在THF為溶劑的條件下，室溫反應(yīng)4h制備得到。
[0126] LC-MS(ESI,M+Na+)m/z 632.4.
[0127] (S)-甲基-2-( (S)-6-(((芐氧基）羰基）胺基）-2-(4-(1-(2-(2-( (3-(( (3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙酸甲酯的制備
[0128]
[0129] (S)-甲基-2-( (S)-6-(((芐氧基）羰基）胺基）-2-(4-(l-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙酸甲酯
[0130] 按照實(shí)施例1中步驟C的合成方法，將腸菌素衍生物A和(S)-甲基-2-((S)-6_(((芐 氧基)幾基)胺基)_2_(4_( 1-(2-( 2-(2-( 2-氯乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基，2，3_二 唑-4-基)丁胺基)己胺基)丙酸甲酯在CH2C1 2為溶劑，DCC為縮合劑，DMAP為催化劑的條件下， 室溫反應(yīng)過夜制備得到。
[0131] LC-MS(ESI,M+H+)m/z 1257.2.
[0132] (S)-甲基-2-( (S)-6-(((芐氧基）羰基）胺基）-2-(4-(1-(2-(2-( (3-(( (3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙酸的制備
[0133]
[0134] (S)-甲基-2-( (S)-6-(((芐氧基）羰基）胺基）-2-(4-(l-(2-(2-( (3-(( (3S，7S， 11S)_7，11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)-2，6，10-三氧代-1，5，9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲 ?；?-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基） 己胺)丙酸
[0135] 按照實(shí)施例1中步驟D的合成方法，將（S)-甲基-2-((S)-6_(((芐氧基）羰基）胺 基)-2-(4-( 1-(2-(2-( (3-(((3S，7S，llS)_7,11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)_2，6，10-二氧 代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?4,5_二羥苯基）胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧 基）乙基)-1H-1，2，3-三唑-4-基）丁胺基）己胺）丙酸甲酯在CH 2C12和MeOH為溶劑，NaOH為堿 的條件下，室溫反應(yīng)5h制備得到。
[0136] LC-MS(ESI,M-H+)m/z 1241.5.
[0137] (6R,7R)-7-(2-(2-((9S,12S)-9-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((3S,7S,llS)-7,11-雙(2,3-二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-l，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5-二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-lH-l，2,3-三唑-4-基)丁胺基)-12-甲基-3，10，13-三氧代-1-苯基-2-氧-4，11，14-三氮雜十五烷-15-基）乙酰基）-3-( ((1-(羧甲 基)-1H-四唑-5-基)硫代）甲基)-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛烷-2-烯-2-羧酸的 制備
[0139] (6R,7R)-7-(2-(2-((9S,12S)-9-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((3S,7S,llS)-7,11- 雙(2,3_二羥基本甲酰胺)-2,6，10-三氧代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?-4,5-二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-三唑-4-基)丁胺基)-12-甲基-3，10，13-三氧代-1-苯基-2-氧-4，11，14-三氮雜十五烷-15-基）乙?；?3-( ((1-(羧甲 基)-1H-四唑-5-基)硫代）甲基)-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛烷-2-烯-2-羧酸
[0140] 按照實(shí)施例1中步驟E的合成方法，將（S)-甲基-2-((S)-6-(((芐氧基）羰基）胺 基)-2-(4-( 1-(2-(2-( (3-(((3S，7S，llS)_7,11-雙(2，3-二羥基苯甲酰胺)_2，6，10-二氧 代-1，5,9-三氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲?；?4,5_二羥苯基）胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧 基）乙基）-1Η-1，2,3-三唑-4-基）丁胺基）己胺）丙酸和頭孢雷特在THF為溶劑，EDC · HC1、 HOBt為催化劑，DIEA為堿的條件下，室溫反應(yīng)過夜制備得到。
[0141] LC-MS(ESI,M-H+)m/z 1727.1.
[0142] 實(shí)施例3的制備
[0143] 按照實(shí)施例丨中步驟 F 的合成方法d^(6R，7R)-7-(2-(2-((9S，12S)-9-(4-(l-(2-(2-(2-(2-( (3-(( (3S，7S，11S)_7,11-雙(2，3_ 二羥基本甲酰胺)-2,6,10-三氧代-1，5，9_ 三 氧雜環(huán)十二烷-3-基)胺甲酰基)-4,5_二羥苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1!1-1，2，3-三唑-4-基)丁胺基)-12-甲基-3，10，13-三氧代-1-苯基-2-氧-4，11，14-三氮雜十五 烷-15-基）乙?；?-3-( ((1-(羧甲基)-1Η-四唑-5-基)硫代）甲基)-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜 雙環(huán)[4.2.0]辛烷-2-烯-2-羧酸在以THF為溶劑，Pd/C為催化劑，40?以的!1 2壓力下，室溫反 應(yīng)2.5h制備得到。
[0144] 4 NMR(500MHz，CDC13)S9.33(s，3H)，9·11(s，lH),8.15-8·12(ι?，1H),7.70-7.63 (m，2H)，7.50-7.22(m，6H)，7.08-6.99(m，4H)，6.50-6.41(m，4H)，6.20-6.18(m，lH)，5.70-5·33(m，6H)，5.92-4.75(m，13H),4.67-4.59(m，3H)，4.55-4.46(m，3H),4.28-4.14(m，3H)， 3.75-3.47(m,17H),2.65-2.39(m,6H),l.94-1.79(m,4H),l.56-1.53(m,2H),l.40-1.38(m, 3H), 1.31-1.27(m,2H),1.05(s,2H).
[0145] 除以上實(shí)施例所列化合物外，通過與所述實(shí)施例類似的方法，還制備得到其它一 系列相關(guān)化合物(見表一）。
[0146] 表一：
[0147]
[0148]
[0149]
[0150]
[0151]
[0152]
[0153] 體外抗菌活性
[0154] 對按照本發(fā)明的上式（I)的腸菌素-抗生素偶聯(lián)物進(jìn)行了體外抑制大腸桿菌 ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853活性篩選。
[0155] 本發(fā)明中所述化合物采用文獻(xiàn)(J · Am· Chem· Soc ·，2012，134(24)，9898-9901)報(bào)道 的瓊脂擴(kuò)散法進(jìn)行化合物初步抗菌敏感性活性測試。陽性對照為頭孢勞拉、頭孢雷特、頭孢 拉定、環(huán)丙沙星、勞拉頭孢和阿莫西林。使用0.5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)的菌液濃度，化合物及陽性對 照均配置成O.lmM進(jìn)行抗菌敏感性測試，制備好的菌液應(yīng)在15min內(nèi)接種完畢。接種完畢后， 置35°C孵育24h后讀取結(jié)果，用游標(biāo)卡尺量取抑菌圈直徑，對化合物的抗菌活性進(jìn)行初步活 性評價(jià)，抗菌敏感性測試中，用抑菌圈直徑表示藥物對相應(yīng)細(xì)菌的敏感性大小，抑菌圈越 大，藥物越敏感，效果越好，反之則不敏感，效果不好。
[0156]初步抗菌敏感性結(jié)果顯示(表二）：所合成化合物中，90%以上的腸菌素-抗生素偶 聯(lián)物抗菌活性均較原型抗生素對待測細(xì)菌的敏感性提高。因此通式I的化合物具有良好的 研發(fā)前景。
[0157]表二化合物1-24對銅綠假單胞菌和大腸桿菌的敏感性(mm)測試
[0158]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種腸菌素-抗生素偶聯(lián)物，其特征在于，所述腸菌素-抗生素偶聯(lián)物由腸菌素、 Linker、抗生素 Ξ部分連接而成，其結(jié)構(gòu)如式I所示：式中： Ri選自：所述Linker片段中η可為0-5的整數(shù)； 化可為：V 〇2. 如權(quán)利要求1所述的化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物W及藥 學(xué)上可接受的鹽或前藥， 其中： Ri選自所述Linker片段中η = 3; 化選自：Rs選自：3.如權(quán)利要求1、2或3所述通式I的化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混 合物W及藥學(xué)上可接受的鹽或前藥，它們包括： (25,5尺，61〇-6-((5)-2-((5)-2-((5)-6-胺基-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2， 3-二徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑 苯基)胺基)-4-氧代下胺基）己胺)丙胺)-2-(4-?苯基）乙酷胺基-3,3-二甲基-7-氧代-4- 硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚燒-2-簇酸 (6尺，71〇-7-((5)-2-((5)-2-((5)-6-胺基-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3- 二徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯 基)胺基)-4-氧代下胺基）己胺）丙胺)-2-苯乙酷胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙 環(huán)[4.2.0]辛-2-締-2-簇酸 (6尺，75)-7-((5)-2-((5)-2-((5)-6-胺基-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3- 二徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯 基)胺基)-4-氧代下胺基）己胺)丙胺)-2-苯乙酷胺基)-3-氯-8-氧代-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0] 辛-2-締-2-簇酸 (6尺，71〇-7-((5)-2-((5)-2-((5)-6-胺基-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3- 二徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯 基)胺基)-4-氧代下胺基）己胺）丙胺)-2-苯乙酷胺基)-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán) [4.2.0]辛-2-締-2-簇酸 (6尺，71〇-7-(2-(2-(((5)-2-((5)-6-胺基-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙（2,3-二 徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯基） 胺基)-4-氧代下胺基化胺）丙胺）甲基)苯基）乙酷基)-3-( ((1-(簇甲基)-lH-四挫-5-基） 硫）甲基)-8-氧代-5-硫雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛-2-締-2-簇酸 7-(4-( (S)-2-( (S)-6-胺基-2-(4-( (3-(((3S,7S,llS)-7,11-雙（2,3-二徑基本甲酯 胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯基)胺基)-4-氧 代下胺基)己胺)丙酷基)贓嗦-1-基)-1-環(huán)丙基-6-氣-4-氧代-1,4-二氨哇嘟-3-簇酸 (25,5尺，61〇-6-((5)-2-((5)-2-((5)-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3-二徑 基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯基)胺 基)-4-氧代下胺基)-5-脈基）丙胺)-2-(4-?苯基）乙酷胺基)-3,3-二甲基-7-氧代-4-硫 雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚燒-2-簇酸 (6R，7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-2-(4-((3-(((3S，7S，llS)-7，ll-雙-(2,3-二徑基本 甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯基)胺基)- 4-氧代下胺基）-5-脈基）丙胺）-2-苯乙酷胺基）-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán) [4.2.0] 辛燒-2-締-2-簇酸 (6尺，71〇-7-((5)-2-((5)-2-((5)-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3-二徑基本 甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯基)胺基)- 4-氧代下胺基)-5-脈基)丙胺)-2-苯乙酷胺基)-3-氯-8-氧代-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛燒-2- 締-2-簇酸 (6尺，71〇-7-((5)-2-((5)-2-((5)-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3-二徑基本 甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯基)胺基)- 4-氧代下胺基)-5-脈基)丙胺)-2-苯乙酷胺基)-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0] 辛燒-2-締-2-簇酸 (6尺，71〇-7-(2-(2-(((5)-2-((5)-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3-二徑基本 甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯基)胺基)- 4-氧代下胺基)-5-脈基）丙胺）甲基）苯基）乙酷基）-3-(((1-(簇甲基)-lH-四挫-5-基）硫 代）甲基)-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛燒-2-締-2-簇酸 7-(4-((5)-2-((5)-2-(4-((3-(((35,75，115)-7，11-雙-(2,3-二徑基本甲酯胺)-2,6， 10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑苯基)胺基)-4-氧代下胺 基)-5-脈基)丙酷基)贓嗦-1-基)-1-環(huán)丙基-6-氣-4-氧代-1,4-二氨哇嘟-3-簇酸 (2S，5R，6R)-6-( (S)-2-((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 1 lS)-7，11-雙(2，3-二徑基本甲酯胺)-2，6，10-Ξ氧代-1，5，9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲 酷基)-4,5-二徑苯基）胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-Ξ挫-4-基）下胺 基）己胺）丙胺）-2-(4-?苯基）乙酷胺基）-3,3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán) [3.2.0] 庚燒-2-簇酸 (6R，7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 1 lS)-7，11-雙(2，3-二徑基本甲酯胺)-2，6，10-Ξ氧代-1，5，9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲 酷基)-4,5-二徑苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-Ξ挫-4-基)下胺基） 己胺)丙胺)-2-苯乙酷胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]庚燒-2-締-2-簇 酸 (6R，7R)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 1 lS)-7，11-雙(2，3-二徑基本甲酯胺)-2，6，10-Ξ氧代-1，5，9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲 酷基)-4,5-二徑苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-Ξ挫-4-基)下胺基） 己胺)丙胺)-2-苯乙酷胺基)-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]庚燒-2-締-2-簇酸 (6R，7S)-7-((S)-2-((S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 1 lS)-7，11-雙(2，3-二徑基本甲酯胺)-2，6，10-Ξ氧代-1，5，9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲 酷基)-4,5-二徑苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-Ξ挫-4-基)下胺基） 己胺)丙胺)-2-苯乙酷胺基)-3-氯-8-氧代-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]庚燒-2-締-2-簇酸 (6R，7R)-7-(2-(2-(( (S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-( 1-(2-(2-(2-(2-( (3-(((3S，7S， 1 lS)-7，11-雙(2，3-二徑基本甲酯胺)-2，6，10-Ξ氧代-1，5，9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲 酷基)-4,5-二徑苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-Ξ挫-4-基)下胺基） 己胺)丙胺）甲基)苯基）乙酷基)-3-(((1-簇甲基-1H-四挫-5-基)硫代）甲基)-8-氧代-5-硫 雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛燒-2-締-2-簇酸 7-(4-( (S)-2-((S)-6-胺基-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-( (3-(( (3S，7S，llS)-7,11-雙（2， 3-二徑基本甲酯胺)-2,6，10-立氧代-1，5,9-立氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5-二徑 苯基）胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基）-1Η-1，2,3-Ξ挫-4-基）下胺基）己胺）丙胺）贓 嗦-1-基)-1-環(huán)丙基-6-氣-4-氧代-1,4-二氨哇嘟-3-簇酸 (2S,5R,6R)-6-((8)-2-((8)-2-((8)-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((3S,7S,118)-7, 11-雙(2,3-二徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-l，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)- 4,5-二?苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-lH-l，2,3-Ξ挫-4-基）下胺基)-5-脈 基）丙胺)-2-(4-?苯基）乙酷胺基）-3,3-二甲基-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚 燒-2-簇酸 (6R,7R)-7-((8)-2-((8)-2-((8)-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((38,78,118)-7,11- 雙(2,3-二徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-l，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5- 二?苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-lH-l，2,3-Ξ挫-4-基)下胺基)-5-脈基)丙 胺)-2-苯乙酷胺基)-3-甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛燒-2-締-2-簇酸 (6R,7R)-7-((8)-2-((8)-2-((8)-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((38,78,118)-7,11- 雙(2,3-二徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-l，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5- 二?苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-lH-l，2,3-Ξ挫-4-基)下胺基)-5-脈基)丙 胺)-2-苯乙酷胺基)-3-氯-8-氧代-5-硫雜-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛燒-2-締-2-簇酸 (6R,78)-7-((8)-2-((8)-2-((8)-2-(4-(1-(2-(2-(2-(2-((3-(((38,78,118)-7,11- 雙(2,3-二徑基本甲酯胺)-2,6，10-Ξ氧代-1，5,9-Ξ氧雜環(huán)十二燒-3-基)胺甲酯基)-4,5- 二徑苯基)胺基）乙氧基）乙氧基）乙氧基）乙基)-1Η-1，2,3-Ξ挫-4-基)下胺基)-5-脈基)丙 胺)-2-苯乙酷胺基)-3-氯-8-氧代-1 -氮雜雙環(huán)[4.2.0 ]辛燒-2-締-2-簇酸。4. 權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)的化合物及其異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物 W及藥學(xué)上可接受的鹽或前藥在制備抗革蘭氏陰性菌藥物中的應(yīng)用。 5. W所述具有在細(xì)菌內(nèi)部選擇性釋放特異性Linker的腸菌素-抗生素偶聯(lián)物及其異構(gòu) 體、體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物W及藥學(xué)上可接受的鹽或前藥為有效成份與藥學(xué)上可 接收的一種或多種載體組成的藥物組合物。6. 權(quán)利要求5所述組合物在制備抗革蘭氏陰性菌藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】C07K5/02GK106084068SQ201610430821
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月16日
【發(fā)明人】楊志衡, 張曉堅(jiān), 田鑫, 張基, 薛文華, 程偉彥, 魏靜瑤
【申請人】鄭州大學(xué)第附屬醫(yī)院, 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院